Name: isolating stem cells from soft musculoskeletal tissues
Uploaded: 2010-07-05T17:00:00
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저자는 현재 영화 &#39;씨 카일 홀덴 및 슬라이드 편집 그들의 도움 씨 조나단 루카스에 대한 세포 격리 그들의 기술 도움을 양 Haiying 팬 씨와 이안 Bellayr의 크게 감사하고 있습니다. DRS : 지난 년 동안 수정된 preplate 기술의 개발에 관여했습니다 사람의 다음과 같은 목록에 많은 감사드립니다. Burhan Gharaibeh, BaoHong 카오, Deasy 브리짓, 토마스 R. 페인, Aiping 루, Hairong 펭, 히데키 오시마, 보 Zeng, Xiaodong 뮤, Kimimasa 도비타, 론 Jankowski, Makato Ikezawa. 우리는 제임스 H. 커밍, 라이언 Pruchnic, 요셉 Feduska, 레베카 C. Schugar, Haiying 팬과 제시카 Tebbets의 기술 지원에 감사하고 있습니다. 저자는 또한 근육질 영양 장애 협회 (MDA), 국립 보건원 (NIH), 국방부 (DOD), UPMC의 피츠버그의 아동 병원의학과이 작품에 대한 재정 지원을 인정하고 싶습니다 정형 외과 외과, 그리고 피츠버그 대학.

일반적으로 전체 수정 preplate 절차는 준비 1-2 일, 기술적인 절차를 수행하기 1 주, immunocytochemistry와 세포 식별로부터 2-3 일 및 줄기 세포 인구 확장의 추가 2~3주이 필요합니다. 줄기 세포 배양에 필요한 장비는 벤치 - 최고 원심 분리기, CO 2 배양기, 층류 조직 문화 후드와 형광과 디지털 카메라가 장착된 거꾸로 현미경을 포함하는 다른 세포 배양 시스템의 비슷합니다. 분리된 줄기 세포는 ?...

<ol>
	<li>Gharaibeh, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+a+slowly+adhering+cell+fraction+containing+stem+cells+from+murine+skeletal+muscle+by+the+preplate+technique.">Isolation of a slowly adhering cell fraction containing stem cells from murine skeletal muscle by the preplate technique.</a> Nat Protoc. 3, 1501-1509 (2008).</li><li>Qu-Petersen, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+novel+population+of+muscle+stem+cells+in+mice:+potential+for+muscle+regeneration.">Identification of a novel population of muscle stem cells in mice: potential for muscle regeneration.</a> J Cell Biol. 157, 851-864 (2002).</li><li>Li, Y. &. a. m. p. ;. a. m. p., Huard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differentiation+of+muscle-derived+cells+into+myofibroblasts+in+injured+skeletal+muscle.">Differentiation of muscle-derived cells into myofibroblasts in injured skeletal muscle.</a> Am J Pathol. 161, 895-907 (2002).</li><li>Watt, D. J., Lambert, K., Morgan, J. E., Partridge, T. A. &. a. m. p. ;. a. m. p., Sloper, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incorporation+of+donor+muscle+precursor+cells+into+an+area+of+muscle+regeneration+in+the+host+mouse.">Incorporation of donor muscle precursor cells into an area of muscle regeneration in the host mouse.</a> J Neurol Sci. 57, 319-331 (1982).</li><li>Lu, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+myogenic+progenitor+populations+from+Pax7-deficient+skeletal+muscle+based+on+adhesion+characteristics.">Isolation of myogenic progenitor populations from Pax7-deficient skeletal muscle based on adhesion characteristics.</a> Gene Ther. 15, 1116-1125 (2008).</li><li>Lee, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clonal+isolation+of+muscle-derived+cells+capable+of+enhancing+muscle+regeneration+and+bone+healing.">Clonal isolation of muscle-derived cells capable of enhancing muscle regeneration and bone healing.</a> J Cell Biol. 150, 1085-1100 (2000).</li><li>Cao, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+receptors+in+the+maturation-dependent+adenoviral+transduction+of+myofibers.">The role of receptors in the maturation-dependent adenoviral transduction of myofibers.</a> Gene Ther. 8, 627-637 (2001).</li><li>Cao, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+stem+cells+differentiate+into+haematopoietic+lineages+but+retain+myogenic+potential.">Muscle stem cells differentiate into haematopoietic lineages but retain myogenic potential.</a> Nat Cell Biol. 5, 640-646 (2003).</li><li>Huard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regenerative+medicine+based+on+muscle+stem+cells.">Regenerative medicine based on muscle stem cells.</a> J Musculoskelet Neuronal Interact. 8, (2008).</li><li>Gates, C. B., Karthikeyan, T., Fu, F. &. a. m. p. ;. a. m. p., Huard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regenerative+medicine+for+the+musculoskeletal+system+based+on+muscle-derived+stem+cells.">Regenerative medicine for the musculoskeletal system based on muscle-derived stem cells.</a> J Am Acad Orthop Surg. 16, 68-76 (2008).</li></ol>

그것은 일부 성인 조직이 여러 개의 줄기 세포가 포함되어있다는 사실을 인정했습니다. 연구의 지난 몇 년 동안, 줄기 세포는 골격근과 힘줄을 포함한 부드러운 musculoskeletal 조직에서 발견되었습니다. 성공적으로 힘줄과 골격 근육에서 성인 줄기 세포를 분리하기 위해 실험실에서 사용되었습니다 수정된 preplate 기술로 알려진이 현재의 프로토콜은 세부 절차를. 세포 위에서 설명한 수정된 preplate ...

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		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>DMEM</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>#11995-073</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>#10437-028</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Heat-inactivated horse serum</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>#26050-088</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Chick embryo extract</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Accurate Chemical</td>
<td>#CE650T-10</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>100U ml penicillin/streptomycin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>#15140-122</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dulbecco&#x2019;s PBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>#14190-250</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Hank&#x2019;s Buffered Salt Solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>#24020-117</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Collagenase type XI 0.2%(wt/vol)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>#C7657</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dispase2.4U ml</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>#17105-041</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Trypsin-EDTA0.5%(wt/vol) (10x;5g liter trypsin (1:250)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>#15400-054</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Collagen for coating flask : Type I collagen derived from calf skin 0.1 g liter</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>#C-9791</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>DMSO</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>#D-2650</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

isolating stem cells from soft musculoskeletal tissues

성인 줄기 세포는 긴 재생 의료에서​​ 응용 프로그램에 관해서 논의했습니다. 성인 줄기 세포는 여러 혈통이 세포 분화 및 자기 갱신 능력을 받아야하기 때문에 그들의 인상적인 기능으로 부상하고 병에 걸린 조직을 치료에 대한 흥분의 큰 거래를 생성합니다. 가장 중요한 것은, 이러한 자질은 autologous 세포 이식 요법에 사용하기 위해 그들이 유리 만들었습니다. 현재 프로토콜은 musculoskeletal 시스템, 예를 들어, 힘줄 및 근육의 부드러운 조직 1의 수정된 preplate 기술에 독자를 소개합니다<sup&gt; 일</sup&gt; 매체와 콜라겐 코팅 flasks에 배치 효소 dissociated 후. 중간 나머지 부동 세포로 구성되어 있습니다 뜨는은, 순차적으로 새로운 flasks 매일 전송됩니다. 줄기 세포는 일반적으로 (시리얼 전송 또는 preplates) 5-7일 소요되는 flasks을 준수하기 위해 느린 있습니다. 이 방법을 사용하여, 성인의 줄기 세포가이 조직에있는 쉽게 상당히 비침습 절차를 통해 수확 수 있습니다.

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Isolating Stem Cells from Soft Musculoskeletal Tissues

플라스크에 세포의 준수 속도에 따라 musculoskeletal 부드러운 조직에서 분리 성인 줄기 세포.

소프트 Musculoskeletal 조직에서 줄기 세포를 분리

Adult stem cells have long been discussed in regards to their application in regenerative medicine. Adult stem cells have generated a great deal of ...

Research

JoVE Journal

Biology

Derivation of Hematopoietic Stem Cells from Murine Embryonic Stem Cells

Murine 배아 줄기 세포로부터 조혈 줄기 세포의 유도

A stem cell is defined as a cell with the capacity to both self-renew and generate multiple differentiated progeny.  Embryonic stem cells (ESC) are ...

연구

생물학

Isolation and Analysis of Hematopoietic Stem Cells from the Placenta

태반에서 조혈 줄기 세포의 분리 및 분석

Hematopoietic stem cells (HSCs) have the ability to self-renew and generate all cell types of the blood lineages throughout the lifetime of an individual. ...

Chromatin Immunoprecipitation from Human Embryonic Stem Cells

인간 배아 줄기 세포에서 염색질의 Immunoprecipitation

The functional and structural complexity of the myriad of cells in metazoan organisms arises from a small number of stem cells. Stem cells are ...

Derivation of Mouse Trophoblast Stem Cells from Blastocysts

Blastocysts에서 마우스 Trophoblast의 줄기 세포의 유도

Specification of the trophectoderm is one of the earliest differentiation events of mammalian development. The trophoblast lineage derived from the ...

Isolation of Stem Cells from Human Pancreatic Cancer Xenografts

인간 췌장암의 Xenografts에서 줄기 세포의 분리

Cancer stem cells (CSCs) have been identified in a growing number of malignancies and are functionally defined by their ability to undergo self-renewal ...

Isolation of Retinal Stem Cells from the Mouse Eye

마우스 아이의 망막 줄기 세포의 분리

The adult mouse retinal stem cell (RSC) is a rare quiescent cell found within the ciliary epithelium (CE) of the mammalian eye1,2,3. The CE is made up of ...

Selecting and Isolating Colonies of Human Induced Pluripotent Stem Cells Reprogrammed from Adult Fibroblasts

인간 유도 Pluripotent 줄기 세포의 선택 및 분리 식민지는 성인 섬유아 세포에서 다시 프로그램

Herein we present a protocol of reprogramming human adult fibroblasts into human induced pluripotent stem cells (hiPSC) using retroviral vectors encoding ...

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

유도 만능의 줄기 세포에서 파생 마우스의 생성

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

Isolating Primary Melanocyte-like Cells from the Mouse Heart

마우스의 심장에서 차 멜라닌 세포와 같은 세포를 분리

We identified a novel population of melanocyte-like cells (also known as cardiac melanocytes) in the hearts of mice and humans that contribute to atrial ...

Induction and Analysis of Epithelial to Mesenchymal Transition

간엽 전환을 유도하고 상피의 분석

Epithelial  to mesenchymal transition (EMT) is essential for proper morphogenesis during  development. Misregulation of this  process has been implicated ...