Name: human t lymphocyte isolation, culture and analysis of migration in vitro
Uploaded: 2010-06-01T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Human T Lymphocyte Isolation, Culture and Analysis of Migration In Vitro at JoVE.com

इस परियोजना के स्वास्थ्य अनुदान HL087088 (एम के) के राष्ट्रीय संस्थानों और HL18208 (एम के) द्वारा समर्थित किया गया था.

1. मानव टी lymphocytes के अलगाव <ol><li> एक स्वस्थ दाता से मानव रक्त से प्राप्त करते हैं. रक्त अगले कदम के लिए आगे बढ़ने से पहले कमरे के तापमान (~ 30 मिनट) शांत करने के लिए अनुमति दें. </li><li> धीरे से एक 8 एमएल polystyrene दौर नीचे ट्यू?...

<ol>
	<li>Hyun, Y. M., Chung, H. L., McGrath, J. L., Waugh, R. E., Kim, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activated+integrin+VLA-4+localizes+to+the+lamellipodia+and+mediates+t+cell+migration+on+VCAM-1.">Activated integrin VLA-4 localizes to the lamellipodia and mediates t cell migration on VCAM-1.</a> J Immunol. 183, 359-369 (2009).</li><li>Morin, N. A., Oakes, P. W., Hyun, Y. M., Lee, D., Chin, Y. E., King, M. R., Springer, T. A., Shimaoka, M., Tang, J. X., Reichner, J. S., Kim, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonmuscle+myosin+heavy+chain+IIA+mediates+integrin+LFA-1+de-adhesion+during+T+lymphocyte+migration.">Nonmuscle myosin heavy chain IIA mediates integrin LFA-1 de-adhesion during T lymphocyte migration.</a> The Journal of experimental medicine. 205, 195-205 (2008).</li><li>Hyun, Y. M., Lefort, C. T., Kim, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leukocyte+integrins+and+their+ligand+interactions.">Leukocyte integrins and their ligand interactions.</a> Immunologic research. , (2009).</li></ol>

इस प्रयोग में, हम प्राथमिक मानव टी lymphocytes की गतिशीलता का विश्लेषण करने के लिए एक सरल प्रणाली पर विवरण प्रदान करते हैं इन विट्रो प्रवास assays में विभिन्न प्रकार की कोशिकाओं की हरकत में शामिल कई अणु और र...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>RPMI 1640</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>11875</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Thermo Scientific</td>
<td>SH300070.03</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Penicillin-Streptomycin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>15140</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>1-Step Polymorphs</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Accurate Chemical</td>
<td>AN221725</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PHA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Remel/Fisher Scientific</td>
<td>R30852801</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Rec. human IL-2</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>R&amp;D Systems</td>
<td>202-IL</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Rec. human IL-15</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>R&amp;D Systems</td>
<td>247-IL</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Protein G</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma Aldrich</td>
<td>19459</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Rec. human ICAM-1/Fc</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>R&amp;D Systems</td>
<td>720-IC</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Rec. human SDF-1</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>R&amp;D Systems</td>
<td>350-NS</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

human t lymphocyte isolation, culture and analysis of migration in vitro

टी lymphocytes के प्रवास कोशिका की सतह integrins के अन्य कोशिकाओं पर या बाह्य मैट्रिक्स प्रोटीन के साथ व्यक्त ligands के साथ चिपकने वाला बातचीत शामिल है. सटीक integrins spatiotemporal एक कम आत्मीयता राज्य से सेल के अग्रणी धार पर एक उच्च आत्मीयता राज्य के लिए सक्रियण टी लिम्फोसाइट प्रवास के लिए महत्वपूर्ण है<sup&gt; 1</sup&gt;. इसी तरह, सेल अनुगामी किनारे का त्याग, या uropod लगातार integrin निर्भर टी लिम्फोसाइट गतिशीलता को बनाए रखने में एक आवश्यक कदम है<sup2&gt;</sup&gt;. एक साधन के रूप में autoimmune या भड़काऊ रोगों लक्ष्य integrins करने के लिए कई चिकित्सकीय दृष्टिकोण अत्यधिक और leukocytes की भर्ती प्रवास को रोकना<sup&gt; 3</sup&gt;. आणविक घटनाओं है कि मानव टी लिम्फोसाइट प्रवास को विनियमित का अध्ययन करने के लिए, हम एक का उपयोग किया है<em&gt; इन विट्रो में</em&gt; सिस्टम के लिए दो आयामी है कि वातावरण है कि एक टी लिम्फोसाइट vasculature से भर्ती के दौरान मुठभेड़ों mimics एक सब्सट्रेट पर सेल प्रवास का विश्लेषण. टी lymphocytes पहले मानव दाताओं से अलग कर रहे हैं और कर रहे हैं तो उत्तेजित और सात से दस दिनों के लिए सभ्य. परख के दौरान, टी lymphocytes का पालन करें और कहनेवाला आसंजन अणु - 1 (ICAM-1), integrin LFA-1 के लिए एक ligand, और stromal सेल व्युत्पन्न कारक 1 (एसडीएफ -1) के साथ लेपित सब्सट्रेट पर विस्थापित करने के लिए अनुमति दी जाती है. हमारे आंकड़े बताते हैं कि टी lymphocytes ~ 15 सुक्ष्ममापी / मिनट की एक प्रवासी वेग प्रदर्शन. टी लिम्फोसाइट प्रवास integrin नाकाबंदी से हिचकते जा सकता है<sup&gt; 1</sup&gt; या सेलुलर actomyosin मशीनरी के inhibitors है कि सेल प्रवास को नियंत्रित<sup2&gt;</sup&gt;.

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Human T Lymphocyte Isolation, Culture and Analysis of Migration In Vitro

टी लिम्फोसाइट प्रवास lymphoid अंगों, vasculature से बाहर निकलने के लिए घर वापस आना के दौरान होता है, और परिधि के ऊतकों में प्रवेश. यहाँ, हम एक प्रोटोकॉल है कि टी लिम्फोसाइट प्रवास विश्लेषण के लिए इस्तेमाल किया जा सकता का वर्णन<em&gt; इन विट्रो में</em&gt;.

मानव टी लिम्फोसाइट अलगाव, और प्रवासन की संस्कृति विश्लेषण इन विट्रो में</em

The migration of T lymphocytes involves the adhesive interaction of cell surface integrins with ligands expressed on other cells or with extracellular ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Human T Lymphocyte Isolation, Culture and Analysis of Migration In Vitro

piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells

piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells

प्राथमिक मानव टी कोशिकाओं की piggyBac Transposon सिस्टम संशोधन

The piggyBac transposon system is naturally active, originally derived from the cabbage looper moth1,2. This non-viral system is plasmid based, most ...

Lymphocyte Isolation from Human Skin for Phenotypic Analysis and Ex Vivo Cell Culture

Lymphocyte Isolation from Human Skin for Phenotypic Analysis and Ex Vivo Cell Culture

प्ररूपी विश्लेषण और के लिए मानव त्वचा से लिम्फोसाइट अलगाव<em&gt; पूर्व विवो</em&gt; सेल संस्कृति

Human skin has an important barrier function and contains various immune cells that contribute to tissue homeostasis and protection from pathogens. As the ...

Mouse Na&#239;ve CD4+ T Cell Isolation and In vitro Differentiation into T Cell Subsets

Mouse NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve CD4+ T Cell Isolation and In vitro Differentiation into T Cell Subsets

माउस भोले सीडी 4<sup&gt; +</sup&gt; टी सेल अलगाव और<em&gt; इन विट्रो</em&gt; टी सेल सबसेट में भेदभाव

Antigen inexperienced (na&#239;ve) CD4+ T cells undergo expansion and differentiation to effector subsets at the time of T cell receptor (TCR) recognition ...

Imaging CD4 T Cell Interstitial Migration in the Inflamed Dermis

सूजन डर्मिस में इमेजिंग सीडी 4 टी सेल बीचवाला प्रवासन

The ability of CD4 T cells to carry out effector functions is dependent upon the rapid and efficient migration of these cells in inflamed peripheral ...

Flow Cytometric Analysis of Natural Killer Cell Lytic Activity in Human Whole Blood

मानव पूरे रक्त में प्राकृतिक हत्यारा सेल Lytic गतिविधि का प्रवाह cytometric विश्लेषण

NK cell cytotoxicity is a widely used measure to determine the effect of outside intervention on NK cell function. However, the accuracy and ...

Isolation and Flow Cytometric Analysis of Human Endocervical Gamma Delta T Cells

मानव endocervical गामा डेल्टा टी कोशिकाओं के अलगाव और प्रवाह cytometric विश्लेषण

The female reproductive tract (FRT) mucosal immune system serves as the first line of defense. Better knowledge of the genital mucosa is therefore ...

Analysis of Lymphocyte Extravasation Using an In Vitro Model of the Human Blood-brain Barrier

Analysis of Lymphocyte Extravasation Using an In Vitro Model of the Human Blood-brain Barrier

लिम्फोसाइट परिस्त्राव के विश्लेषण से एक का उपयोग करना<em&gt; इन विट्रो</em&gt; मानव रक्त मस्तिष्क बाधा के मॉडल

Lymphocyte extravasation into the central nervous system (CNS) is critical for immune surveillance. Disease-related alterations of lymphocyte ...

Quantifying Human Monocyte Chemotaxis In Vitro and Murine Lymphocyte Trafficking In Vivo

Quantifying Human Monocyte Chemotaxis In Vitro and Murine Lymphocyte Trafficking In Vivo

बढ़ाता मानव Monocyte Chemotaxis इन विट्रो और Murine लिम्फोसाइट ्े में Vivo

Chemotaxis is migration along a specific chemical gradient1. Chemokines are chemotactic cytokines that promote cellular trafficking with anatomic and ...

Isolation and In Vitro Culture of Murine and Human Alveolar Macrophages

Isolation and In Vitro Culture of Murine and Human Alveolar Macrophages

अलगाव और इन विट्रो संस्कृति Murine और मानव वायुकोशीय मैक्रोफेज

Alveolar macrophages are terminally differentiated, lung-resident macrophages of prenatal origin. Alveolar macrophages are unique in their long life and ...

Analysis of Shear Flow-induced Migration of Murine Marginal Zone B Cells In Vitro

Murine सीमांत क्षेत्र बी कोशिकाओं के कतरनी प्रवाह प्रेरित प्रवासन का विश्लेषण इन विट्रो में

Marginal zone B cells (MZBs) are a population of B cells that reside in the mouse splenic marginal zones that envelop follicles. To reach the follicles, ...