Name: visualization of the embryonic nervous system in whole-mount drosophila embryos
Uploaded: 2010-12-11T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Visualization of the Embryonic Nervous System in Whole-mount Drosophila Embryos at JoVE.com

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<html> 1. Preparazione dei reagenti <ol><li> Preparare il tampone PEMFA utilizzando tubi 100mm, 2mM EGTA, e 1 mM MgSO 4. Regolare il pH del tampone a 7,0. Il buffer è PEMFA filtro sterilizzato e conservato a 4 ° C. </li><li> Preparare PBT con l&#39;aggiunta di 1 ml di Triton X-100 a 100 ml 1x PBS (tampone fosfato) (pH 7,0). Conservare a 4 ° C. </li><li> Preparare 5% BSA (albumina di siero bovino) con 0,01% NaAcide in 1x PBS (pH 7,0). </li><li> Preparare la soluzione salina con NaCl 0,7% e 0,03% Triton X-1...

<ol>
	<li>Bodmer, R., Barbel, S., Sheperd, S., Jack, J. W., Jan, L. Y., Jan, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transformation+of+sensory+organs+by+mutations+of+the+cut+locus+of+D.+melanogaster.">Transformation of sensory organs by mutations of the cut locus of D. melanogaster.</a> Cell. 51, 293-307 (1987).</li><li>Bodmer, R., Carretto, R., Jan, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurogenesis+of+the+peripheral+nervous+system+in+Drosophila+embryos:+DNA+replication+patterns+and+cell+lineages.">Neurogenesis of the peripheral nervous system in Drosophila embryos: DNA replication patterns and cell lineages.</a> Neuron. 3, 21-32 (1989).</li><li>Campos-Ortega, J. A., Hartenstein, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Embryonic Development of Drosophila melanogaster. , (1985).</li><li>Carroll, S. B., Scott, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Localization+of+the+fushi+tarazu+protein+during+Drosophila+embryogenesis.">Localization of the fushi tarazu protein during Drosophila embryogenesis.</a> Cell. 43, 47-57 (1985).</li><li>Dambly-Chaudi&#232;re, C., Ghysen, A., Jan, Y. N., Jan, L. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+connections+between+imaginal+discs+in+Drosophila.">Muscle connections between imaginal discs in Drosophila.</a> Developmental Biology. 113, 288-294 (1986).</li></ol>

L&#39;embrione Drosophila è un potente sistema per indagare i cambiamenti molecolari e cellulari durante lo sviluppo neuronale. In questo protocollo abbiamo dimostrato come preparare gli embrioni montare tutto per immunoistochimica. Abbiamo adattato questo protocollo dal protocollo descritto a Carroll e Scott, 1985. Questo protocollo può essere adattato anche a test altri anticorpi neuronali, ma l&#39;ottimizzazione degli anticorpi dovrebbe essere fatto. Inoltre, difetti di sviluppo embrionale del SNP e del S...

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<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>37% formaldehyde</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>BP531-25</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>CSP</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Developmental Studies Hybridoma Bank</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HRP-FITC</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Jackson ImmunoResearch Laboratories</td>
<td>323-095-021</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Alexa Fluor 568 Goat Anti-Mouse IgG</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>A-11004</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vectashield Mounting Medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Vector Laboratories, Inc.</td>
<td>H-1000</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

visualization of the embryonic nervous system in whole-mount drosophila embryos

L&#39;embrione Drosophila è un sistema modello interessante per studiare le basi cellulari e molecolari dello sviluppo neuronale. Qui si descrive la procedura per la visualizzazione del sistema nervoso embrionale Drosophila utilizzando anticorpi alle proteine ​​neuronali. Dal momento che l&#39;intero sistema nervoso periferico embrionale e nervoso centrale sono ben caratterizzati a livello delle singole cellule (Dambly-Chaudière et al, 1986;.. Bodmer et al, 1987;. Bodmer et al, 1989), eventuali aberrazioni di questi sistemi possono essere facilmente identificati utilizzando anticorpi per diverse proteine ​​neuronali. Gli embrioni di sviluppo sono raccolti in certi orari per garantire che gli embrioni sono in fase di sviluppo per la corretta visualizzazione. Dopo la raccolta, gli strati esterni dell&#39;embrione, la membrana corion e la busta vitellina che circonda l&#39;embrione, vengono rimosse prima fissazione. Gli embrioni vengono poi incubate con anticorpi neuronali ed è visualizzato mediante fluorescente anticorpi secondari. Gli embrioni in fasi 12-17 sono visualizzate per accedere al sistema nervoso embrionale. Nella fase 12 il germe SNC band inizia dalla fase di accorciamento e 15, il modello definitivo della commessura è stato raggiunto. Dal palco 17 i contratti SNC e del SNP è completamente sviluppato (Campos-Ortega et al. 1985). Così i cambiamenti nel modello del SNP e del SNC possono essere facilmente osservati durante questi stadi di sviluppo.

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Visualization of the Embryonic Nervous System in Whole-mount Drosophila Embryos

Descriviamo la procedura per preparare in scena<em&gt; Drosophila</em&gt; Embrioni per la visualizzazione del sistema nervoso embrionale durante l&#39;embriogenesi.

Visualizzazione del sistema nervoso embrionale in Whole-mount Drosophila Embrioni

The Drosophila embryo is an attractive model system for investigating the cellular and molecular basis of neuronal development. Here we describe the ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Visualization of the Embryonic Nervous System in Whole-mount Drosophila Embryos

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