Name: visualization of the embryonic nervous system in whole-mount drosophila embryos
Uploaded: 2010-12-11T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Visualization of the Embryonic Nervous System in Whole-mount Drosophila Embryos at JoVE.com

SG поддерживается за счет средств из государственного университета Нью-Йорка в Буффало и от Джона Р. Oishei Foundation.

<html> 1. Подготовка реагентов <ol><li> Подготовка буфера PEMFA использованием 100mM Трубы, 2мм EGTA и 1 мМ MgSO 4. Отрегулируйте рН буфера до 7,0. Буфера PEMFA является фильтр стерилизуют и хранят при 4 ° C. </li><li> Подготовка PBT, добавляя 1 мл Тритон Х-100 до 100 мл 1x PBS (фосфатно-солевым буфером) (рН 7,0). Хранить п?...

<ol>
	<li>Bodmer, R., Barbel, S., Sheperd, S., Jack, J. W., Jan, L. Y., Jan, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transformation+of+sensory+organs+by+mutations+of+the+cut+locus+of+D.+melanogaster.">Transformation of sensory organs by mutations of the cut locus of D. melanogaster.</a> Cell. 51, 293-307 (1987).</li><li>Bodmer, R., Carretto, R., Jan, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurogenesis+of+the+peripheral+nervous+system+in+Drosophila+embryos:+DNA+replication+patterns+and+cell+lineages.">Neurogenesis of the peripheral nervous system in Drosophila embryos: DNA replication patterns and cell lineages.</a> Neuron. 3, 21-32 (1989).</li><li>Campos-Ortega, J. A., Hartenstein, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Embryonic Development of Drosophila melanogaster. , (1985).</li><li>Carroll, S. B., Scott, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Localization+of+the+fushi+tarazu+protein+during+Drosophila+embryogenesis.">Localization of the fushi tarazu protein during Drosophila embryogenesis.</a> Cell. 43, 47-57 (1985).</li><li>Dambly-Chaudi&#232;re, C., Ghysen, A., Jan, Y. N., Jan, L. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+connections+between+imaginal+discs+in+Drosophila.">Muscle connections between imaginal discs in Drosophila.</a> Developmental Biology. 113, 288-294 (1986).</li></ol>

Эмбриона дрозофилы это мощная система для исследования клеточных и молекулярных изменений во время развития нейронов. В этом протоколе мы продемонстрировали, как подготовить целых зародышей крепление для иммуногистохимии. Мы адаптировали данный протокол от протокол, описанный ...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>37% formaldehyde</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>BP531-25</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>CSP</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Developmental Studies Hybridoma Bank</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HRP-FITC</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Jackson ImmunoResearch Laboratories</td>
<td>323-095-021</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Alexa Fluor 568 Goat Anti-Mouse IgG</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>A-11004</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vectashield Mounting Medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Vector Laboratories, Inc.</td>
<td>H-1000</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

visualization of the embryonic nervous system in whole-mount drosophila embryos

Эмбриона дрозофилы является привлекательной моделью системы для исследования клеточных и молекулярных основ нейронных развития. Здесь мы опишем процедуру визуализации дрозофилы эмбриональной нервной системы с помощью антител к нейронов белки. Поскольку вся эмбриональных периферической нервной и центральной нервной системы хорошо характеризуется на уровне отдельных клеток (Dambly-Chaudière и др., 1986;.. Бодмер и др., 1987;. Бодмер и др., 1989), любые аберрации эти системы могут легко идентифицировать с помощью антител к различным нейронов белки. Развивающихся эмбрионов собираются в определенное время для того, чтобы эмбрионы в надлежащем стадиях развития для визуализации. После сбора, внешние слои эмбриона, мембраны хориона и конверт желточной, которая окружает эмбрион, удаляются перед фиксацией. Эмбрионы затем инкубировали с антителами нейронов и визуализировать использованием флуоресцентно меченых вторичных антител. Эмбрионы на стадии 12-17 визуализируются для доступа к эмбриональной нервной системы. На этапе 12 группы ЦНС зародыш начинает сокращение и этап 15 окончательные структуры спайка была достигнута. По стадия 17 ЦНС контрактов и ПНС полностью разработан (Кампос-Ортеги и соавт. 1985). Таким образом, изменения в структуре ПНС и ЦНС легко можно наблюдать во время этих стадиях развития.

Watch this Scientific Journal Video about Visualization of the Embryonic Nervous System in Whole-mount Drosophila Embryos at JoVE.com

Visualization of the Embryonic Nervous System in Whole-mount Drosophila Embryos

Мы описываем процедуру подготовки постановке<em&gt; Drosophila</em&gt; Эмбрионов для визуализации эмбриональной нервной системы в процессе эмбриогенеза.

Визуализация Эмбриональные нервной системы в целом монтажа Drosophila Эмбрионы

The Drosophila embryo is an attractive model system for investigating the cellular and molecular basis of neuronal development. Here we describe the ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Visualization of the Embryonic Nervous System in Whole-mount Drosophila Embryos

Whole Mount Preparation of the Adult Drosophila Ventral Nerve Cord for Giant Fiber Dye Injection

Whole Mount Preparation of the Adult Drosophila Ventral Nerve Cord for Giant Fiber Dye Injection

Всего Подготовка горе взрослых Drosophila Брюшной нервной для инъекций Гигантские Dye Волоконно

To analyze the axonal and dendritic morphology of neurons, it is essential to obtain accurate labeling of neuronal structures. Preparing well labeled ...

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

Визуализация проприорецепторов в<em&gt; Drosophila</em&gt; Личинки и куколки

Proprioception is the ability to sense the motion, or position, of body parts by responding to stimuli arising within the body. In fruitflies and other ...

Labeling of Single Cells in the Central Nervous System of Drosophila melanogaster

Labeling of Single Cells in the Central Nervous System of Drosophila melanogaster

Маркировка отдельных клеток в центральной нервной системе<em&gt; Дрозофилы</em

In this  article we describe how to individually label neurons in the embryonic CNS of Drosophila melanogaster by juxtacellular injection of the ...

An Injury Paradigm to Investigate Central Nervous System Repair in Drosophila

An Injury Paradigm to Investigate Central Nervous System Repair in Drosophila

Травма Paradigm по расследованию центральной нервной системы в ремонт<em&gt; Drosophila</em

An experimental method has been developed to investigate the cellular responses to central nervous system (CNS) injury using the fruit-fly Drosophila. ...

Direct Intraventricular Delivery of Drugs to the Rodent Central Nervous System

Прямая Внутрижелудочковая поставке лекарственных препаратов грызунов центральной нервной системы

Due to an inability to cross the blood brain barrier, certain drugs need to be directly delivered into the central nervous system (CNS). Our lab focuses ...

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

Всего Гора иммунного обонятельных рецепторов нейронов в<em&gt; Дрозофилы</em&gt; Антенны

Odorant molecules bind to their target receptors in a precise and coordinated manner. Each receptor recognizes a specific signal and relays this ...

In vivo Optogenetic Stimulation of the Rodent Central Nervous System

In vivo Optogenetic Stimulation of the Rodent Central Nervous System

В естественных условиях Optogenetic возбуждение нервной системы грызунов Центральной

The ability to probe defined neural circuits in awake, freely-moving animals with cell-type specificity, spatial precision, and high temporal resolution ...

Whole Mount Labeling of Cilia in the Main Olfactory System of Mice

Всего горе Маркировка ресничек в Главном обонятельной системе мышей

The mouse olfactory system comprises 6-10 million olfactory sensory neurons in the epithelium lining the nasal cavity. Olfactory neurons extend a single ...

In Situ Ca2+ Imaging of the Enteric Nervous System

In Situ Ca2+ Imaging of the Enteric Nervous System

В Ситу Ca 2+ изображений нервной системы кишечной

Reflex behaviors of the intestine are controlled by the enteric nervous system (ENS). The ENS is an integrative network of neurons and glia in two ...

A Simple One-step Dissection Protocol for Whole-mount Preparation of Adult Drosophila Brains

A Simple One-step Dissection Protocol for Whole-mount Preparation of Adult Drosophila Brains

Простой Одношаговый Вскрытие Протокол целом монтажа подготовки взрослых<em&gt; Drosophila</em&gt; Мозги

There is an increasing interest in using Drosophila to model human brain degenerative diseases, map neuronal circuitries in adult brains, and study the ...