Name: in vivo visualization of synaptic vesicles within drosophila larval segmental axons
Uploaded: 2010-10-15T16:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In vivo Visualization of Synaptic Vesicles Within Drosophila Larval Segmental Axons at JoVE.com

एसजी से भैंस पर न्यूयॉर्क के राज्य विश्वविद्यालय और जॉन आर Oishei फाउंडेशन से धन के द्वारा समर्थित है. एम यूबी पर एक छात्र CURCA द्वारा अनुसंधान पुरस्कार द्वारा समर्थित किया गया था.

1. अभिकर्मकों की तैयारी <ol><li> विच्छेदन बफर तैयारी 7.2 फिल्टर और बाँझ 128 मिमी NaCl, 1mm EGTA, 4 मिमी 2 MgCl, 2mm KCl, 5mm HEPES, और 1000 एमएल पीएच, में 36 मिमी Sucrose: निम्नलिखित यौगिकों को जोड़कर तैयार करें . </li></ol> 2. विच्छेदन के लिए तै?...

<ol>
	<li>Brand, A. H., Perrimon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+gene+expression+as+a+means+of+altering+cell+fates+and+generating+dominant+phenotypes.">Targeted gene expression as a means of altering cell fates and generating dominant phenotypes.</a> Development. 118, 401-415 (1993).</li><li>Hurd, D. D., Saxton, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kinesin+mutations+cause+motor+neuron+disease+phenotypes+by+disrupting+fast+axonal+transport+in+Drosophila.">Kinesin mutations cause motor neuron disease phenotypes by disrupting fast axonal transport in Drosophila.</a> Genetics. 144, 1075-1085 (1996).</li><li>Gunawardena, S., Her, L. S., Brusch, R. G., Laymon, R. A., Niesman, I. R., Gordesky-Gold, B., Sintasath, L., Bonini, N. M., Goldstein, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+axonal+transport+by+loss+of+huntingtin+or+expression+of+pathogenic+polyQ+proteins+in+Drosophila.">Disruption of axonal transport by loss of huntingtin or expression of pathogenic polyQ proteins in Drosophila.</a> Neuron. 40, 25-40 (2003).</li></ol>

ड्रोसोफिला लार्वा कमानी नसों के भीतर synaptic पुटिका परिवहन के vivo इमेजिंग में axonal परिवहन तंत्र के अध्ययन के लिए एक शक्तिशाली उपकरण है . हम पहले इस प्रोटोकॉल का उपयोग किया है लार्वा विस्तार polyQ दोहरात...

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<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>1 Pair Micro Dissection Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Scientific </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Spring scissors &#x2013; 6mm blade. 0.125 mm tip diameter</td>
</tr>
<tr>
<td>2 Pair Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fischer Scientific</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisherbrand Dissecting Micro-Adson serrated tip forceps</td>
</tr>
<tr>
<td>Box of Dissection Pins</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Scientific </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Minutien Pins 0.1mm diameter</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

in vivo visualization of synaptic vesicles within drosophila larval segmental axons

Axonal परिवहन के तंत्र elucidating निर्धारण कैसे लंबी दूरी की परिवहन में दोष अलग स्नायविक रोगों को प्रभावित करने में बहुत महत्वपूर्ण हो दिखाया गया है. यह आवश्यक प्रक्रिया में दोष neuronal कामकाज और विकास पर हानिकारक प्रभाव हो सकता है. हम एक विच्छेदन प्रोटोकॉल को बेनकाब करने के लिए डिज़ाइन किया गया है विकसित किया है<em&gt; ड्रोसोफिला</em&gt; लार्वा कमानी axonal परिवहन के लिए वास्तविक समय में देखने नसों. हम हर्ड और Saxton (1996) लार्वा कमानी नसों के immunolocalizatin के लिए प्रयोग किया जाता द्वारा प्रकाशित एक से रहते इमेजिंग के लिए इस प्रोटोकॉल के अनुकूल है. सावधानी से विच्छेदन और उचित बफर शर्तों dissected लार्वा के जीवन को अधिकतम करने के लिए महत्वपूर्ण हैं. जब ठीक से किया, dissected लार्वा शारीरिक शर्तों के तहत 2-3 घंटे के लिए मजबूत पुटिका परिवहन दिखाया गया है. हम विधि यूएएस GAL4 का उपयोग करें<sup&gt; 1</sup&gt; व्यक्त करने के लिए GFP-टैग के भीतर अलग neuronal GAL4 ड्राइवरों का उपयोग करके एक एकल या लार्वा कमानी नसों में अक्षतंतु कई axons एपीपी या synaptotagmin vesicles. अन्य मार्करों fluorescently टैग, उदाहरण के लिए (MitoTracker) mitochrondria या lysosomes (LysoTracker), यह भी देखने से पहले लार्वा को लागू किया जा सकता है. GFP पुटिका आंदोलन और कण आंदोलन एक साथ अलग तरंगदैर्य का उपयोग कर देखा जा सकता है है.

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In vivo Visualization of Synaptic Vesicles Within Drosophila Larval Segmental Axons

इस प्रोटोकॉल का जीना विच्छेदन चर्चा<em&gt; ड्रोसोफिला</em&gt; इमेजिंग GFP microtubule पटरियों पर टैग axonal vesicles के आंदोलन के प्रयोजन के लिए लार्वा.

ड्रोसोफिला लारवल कमानी axons के भीतर Synaptic vesicles के vivo विज़ुअलाइज़ेशन

Elucidating the mechanisms of axonal transport has shown to be very important in determining how defects in long distance transport affect different ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

In vivo Visualization of Synaptic Vesicles Within Drosophila Larval Segmental Axons

Visualization of Larval Segmental Nerves in 3rd Instar Drosophila Larval Preparations

Visualization of Larval Segmental Nerves in 3rd Instar Drosophila Larval Preparations

3 में लारवल कमानी नसों के विज़ुअलाइज़ेशन तीसरी Instar ड्रोसोफिला लारवल तैयारी

Drosophila melanogaster is emerging as a powerful model system for studying the development and function of the nervous system, particularly because of ...

Morphological Analysis of Drosophila Larval Peripheral Sensory Neuron Dendrites and Axons Using Genetic Mosaics

Morphological Analysis of Drosophila Larval Peripheral Sensory Neuron Dendrites and Axons Using Genetic Mosaics

के morphological विश्लेषण ड्रोसोफिला लारवल परिधीय संवेदी न्यूरॉन Dendrites और axons जेनेटिक मोज़ाइक का उपयोग

Nervous system development requires the correct specification of neuron position and identity, followed by accurate neuron class-specific dendritic ...

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

में Proprioceptors का विज़ुअलाइज़ेशन<em&gt; ड्रोसोफिला</em&gt; लार्वा और pupae

Proprioception is the ability to sense the motion, or position, of body parts by responding to stimuli arising within the body. In fruitflies and other ...

Functional Analysis of the Larval Feeding Circuit in Drosophila

Functional Analysis of the Larval Feeding Circuit in Drosophila

में लारवल दूध पिलाने सर्किट का कार्य विश्लेषण ड्रोसोफिला</i

The serotonergic  feeding circuit in Drosophila  melanogaster larvae can be used to investigate neuronal substrates of  critical importance during the ...

Laser Nanosurgery of Cerebellar Axons In Vivo

Laser Nanosurgery of Cerebellar Axons In Vivo

अनुमस्तिष्क axons की लेजर nanosurgery<em&gt; में Vivo</em

Only a few neuronal populations in the central nervous system (CNS) of adult mammals show local regrowth upon dissection of their axon. In order to ...

Live Imaging of Drosophila Larval Neuroblasts

Live Imaging of Drosophila Larval Neuroblasts

के रहते इमेजिंग<em&gt; ड्रोसोफिला</em&gt; लारवल neuroblasts

Stem cells divide asymmetrically to generate two progeny cells with unequal fate potential: a self-renewing stem cell and a differentiating cell. Given ...

Culturing In Vivo-like Murine Astrocytes Using the Fast, Simple, and Inexpensive AWESAM Protocol

Culturing In Vivo-like Murine Astrocytes Using the Fast, Simple, and Inexpensive AWESAM Protocol

तेज, सरल, और सस्ती AWESAM प्रोटोकॉल का उपयोग कर Vivo-like Murine Astrocytes मेंसंवर्धन

The AWESAM (a low-cost easy stellate astrocyte method) protocol entails a fast, simple, and inexpensive way to generate large quantities of in vivo-like ...

Focal Macropatch Recordings of Synaptic Currents from the Drosophila Larval Neuromuscular Junction

Focal Macropatch Recordings of Synaptic Currents from the Drosophila Larval Neuromuscular Junction

Drosophila लार्वा Neuromuscular जंक्शन से Synaptic धाराओं की फोकल Macropatch रिकॉर्डिंग

Drosophila neuromuscular junction (NMJ) is an excellent model system to study glutamatergic synaptic transmission. We describe the technique of focal ...

Combining Optogenetics with Artificial microRNAs to Characterize the Effects of Gene Knockdown on Presynaptic Function within Intact Neuronal Circuits

कृत्रिम microRNAs के साथ Optogenetics का मेल करने के लिए बरकरार न्यूरॉन सर्किट के भीतर Presynaptic समारोह पर जीन पछाड़ना के प्रभाव की विशेषता

The purpose of this protocol is to characterize the effect of gene knockdown on presynaptic function within intact neuronal circuits. We describe a ...

In Vivo Optical Calcium Imaging of Learning-Induced Synaptic Plasticity in Drosophila melanogaster

In Vivo Optical Calcium Imaging of Learning-Induced Synaptic Plasticity in Drosophila melanogaster

विवो ऑप्टिकल कैल्शियम इमेजिंग में लर्निंग-प्रेरित सिंपटिक प्लास्टिकिटी में ड्रोसोफिला मेलेनोगैस्टर

Decades of research in many model organisms have led to the current concept of synaptic plasticity underlying learning and memory formation. ...