Name: in vivo visualization of synaptic vesicles within drosophila larval segmental axons
Uploaded: 2010-10-15T16:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In vivo Visualization of Synaptic Vesicles Within Drosophila Larval Segmental Axons at JoVE.com

SG는 버팔로의 뉴욕 주립 대학에서와 존 R. Oishei 재단 기금에 의해 지원됩니다. MK는 UB의 CURCA하여 학생 연구 수상에 의해 지원되었다.

1. 시약의 준비 <ol><li> 7.2 및 필터 소독 128 MM NaCl, 1mM EGTA, 4 MM MgCl 2, KCl 2mM, 5mM HEPES, 1000 ML, PH 36 MM의 자당 다음 화합물을 추가하여 해부 버퍼 준비를 준비합니다. </li></ol> 2. 해부를위한 준비 <ol><li> Siligard 큐브 : 겔은 약 인치 와이드, 1 인치 길이 높이 약 1cm로 잘라입니다. 겔 큐브는 절개 중에 유리 슬라이드에 배치됩니다. 큐브는 두 번 이상 사용할 수 있습니다. </li><li> ?...

<ol>
	<li>Brand, A. H., Perrimon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+gene+expression+as+a+means+of+altering+cell+fates+and+generating+dominant+phenotypes.">Targeted gene expression as a means of altering cell fates and generating dominant phenotypes.</a> Development. 118, 401-415 (1993).</li><li>Hurd, D. D., Saxton, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kinesin+mutations+cause+motor+neuron+disease+phenotypes+by+disrupting+fast+axonal+transport+in+Drosophila.">Kinesin mutations cause motor neuron disease phenotypes by disrupting fast axonal transport in Drosophila.</a> Genetics. 144, 1075-1085 (1996).</li><li>Gunawardena, S., Her, L. S., Brusch, R. G., Laymon, R. A., Niesman, I. R., Gordesky-Gold, B., Sintasath, L., Bonini, N. M., Goldstein, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+axonal+transport+by+loss+of+huntingtin+or+expression+of+pathogenic+polyQ+proteins+in+Drosophila.">Disruption of axonal transport by loss of huntingtin or expression of pathogenic polyQ proteins in Drosophila.</a> Neuron. 40, 25-40 (2003).</li></ol>

Drosophila 애벌레 segmental 신경 사이 시냅스 소포 수송의 생체내 이미징에서 axonal 교통의 메커니즘을 연구를위한 강력한 도구입니다. 우리는 이전 반복의 확장은 소포 수송 3 역학에 미치는 영향 명료하게하다 확대 polyQ 반복을 표현 애벌레 신경 내에 전송 역학을 평가하기 위해이 프로토콜을 사용하고 있습니다. 이 프로토콜을 사용하는 것은 소포 운동의 속도는 kymograph에 비디...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
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		<div>
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		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>1 Pair Micro Dissection Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Scientific </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Spring scissors &#x2013; 6mm blade. 0.125 mm tip diameter</td>
</tr>
<tr>
<td>2 Pair Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fischer Scientific</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisherbrand Dissecting Micro-Adson serrated tip forceps</td>
</tr>
<tr>
<td>Box of Dissection Pins</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Scientific </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Minutien Pins 0.1mm diameter</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

in vivo visualization of synaptic vesicles within drosophila larval segmental axons

axonal 수송의 메커니즘을 Elucidating하면 장거리 수송의 결함은 다른 신경 질환에 미치는 영향에 대해 결정에서 매우 중요하다고 표시했습니다. 이 필수 과정에서 결함의 연결 기능 및 개발에 해로운 영향을 미칠 수 있습니다. 우리는을 폭로하기 위해 설계되었습니다 해부 프로토콜을 개발했습니다<em&gt; Drosophila</em실시간 axonal 교통을 보려면&gt; 애벌레 segmental 신경. 우리는 허드와 애벌레 segmental 신경의 immunolocalizatin 사용 색스턴 (1996)에 의해 출판 하나에서 라이브 영상이 프로​​토콜을 적응있다. 주의 해부 적절한 버퍼 조건 해부 애벌레의 수명을 최대화를 위해 중요하다. 제대로 완료되면, 해부 유충이 생리 조건 하에서 2~3시간에 대한 강력한 소포 ​​전송을 보여주었다. 우리는 UAS - GAL4 방법을 사용<sup&gt; 1</sup&gt; 표현하는 GFP - 태그의 연결을 다른 GAL4 드라이버를 사용하여 애벌레 segmental 신경에서 하나의 축삭 또는 여러 axons 이내 APP 또는 synaptotagmin의 vesicles 있습니다. 기타 찬란 태그 마커 예를 들어 mitochrondria (MitoTracker) 또는 lysosomes (LysoTracker)는 또한보기 전에 애벌레에 적용할 수 있습니다. GFP - 소포 운동과 입자의 움직임은 별도의 파장을 사용하여 동시에 볼 수 있습니다.

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In vivo Visualization of Synaptic Vesicles Within Drosophila Larval Segmental Axons

이 프로토콜은의 라이브 절개를 설명<em&gt; Drosophila</em영상의 목적은 미세 소관 트랙에 GFP 태그 axonal vesicles의 움직임에 대해&gt; 애벌레.

Drosophila 애벌레 Segmental Axons 이내 시냅틱 Vesicles의 생체내 시각화에

Elucidating the mechanisms of axonal transport has shown to be very important in determining how defects in long distance transport affect different ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

In vivo Visualization of Synaptic Vesicles Within Drosophila Larval Segmental Axons

Visualization of Larval Segmental Nerves in 3rd Instar Drosophila Larval Preparations

Visualization of Larval Segmental Nerves in 3rd Instar Drosophila Larval Preparations

3 애벌레 Segmental 신경의 시각화 차 Instar Drosophila 애벌레 준비

Drosophila melanogaster is emerging as a powerful model system for studying the development and function of the nervous system, particularly because of ...

연구

신경과학

Morphological Analysis of Drosophila Larval Peripheral Sensory Neuron Dendrites and Axons Using Genetic Mosaics

Morphological Analysis of Drosophila Larval Peripheral Sensory Neuron Dendrites and Axons Using Genetic Mosaics

의 형태학의 분석 Drosophila</em유전 모자이크 사용하기> 애벌레 주변 감각 신경 세포의 Dendrites 및 Axons

Nervous system development requires the correct specification of neuron position and identity, followed by accurate neuron class-specific dendritic ...

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

의 Proprioceptors의 시각화<em&gt; Drosophila</em&gt; 애벌레와 Pupae

Proprioception is the ability to sense the motion, or position, of body parts by responding to stimuli arising within the body. In fruitflies and other ...

Functional Analysis of the Larval Feeding Circuit in Drosophila

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의 애벌레 먹이 회로의 기능적 분석 초파리</i

The serotonergic  feeding circuit in Drosophila  melanogaster larvae can be used to investigate neuronal substrates of  critical importance during the ...

Laser Nanosurgery of Cerebellar Axons In Vivo

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소뇌 축삭의 레이저 Nanosurgery<em&gt; 생체</em

Only a few neuronal populations in the central nervous system (CNS) of adult mammals show local regrowth upon dissection of their axon. In order to ...

Live Imaging of Drosophila Larval Neuroblasts

Live Imaging of Drosophila Larval Neuroblasts

의 라이브 영상<em&gt; 초파리</em&gt; 애벌레 Neuroblasts

Stem cells divide asymmetrically to generate two progeny cells with unequal fate potential: a self-renewing stem cell and a differentiating cell. Given ...

Culturing In Vivo-like Murine Astrocytes Using the Fast, Simple, and Inexpensive AWESAM Protocol

Culturing In Vivo-like Murine Astrocytes Using the Fast, Simple, and Inexpensive AWESAM Protocol

Vivo에서경작-Murine 이다 빠르고, 간단 하 고 저렴 한 AWESAM 프로토콜을 사용 하 여 같은

The AWESAM (a low-cost easy stellate astrocyte method) protocol entails a fast, simple, and inexpensive way to generate large quantities of in vivo-like ...

Focal Macropatch Recordings of Synaptic Currents from the Drosophila Larval Neuromuscular Junction

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초파리 애벌레 신경 근육 학 교차로에서 시 냅 스 전류의 초점 Macropatch 녹음

Drosophila neuromuscular junction (NMJ) is an excellent model system to study glutamatergic synaptic transmission. We describe the technique of focal ...

Combining Optogenetics with Artificial microRNAs to Characterize the Effects of Gene Knockdown on Presynaptic Function within Intact Neuronal Circuits

연 접 기능 그대로 신경 회로 내에 유전자 최저 효과 특성 인공 microRNAs Optogenetics 결합

The purpose of this protocol is to characterize the effect of gene knockdown on presynaptic function within intact neuronal circuits. We describe a ...

In Vivo Optical Calcium Imaging of Learning-Induced Synaptic Plasticity in Drosophila melanogaster

In Vivo Optical Calcium Imaging of Learning-Induced Synaptic Plasticity in Drosophila melanogaster

초파리 멜라노가스터에서 학습 유발 시냅스 가소성의 생체 내 광학 칼슘 이미징

Decades of research in many model organisms have led to the current concept of synaptic plasticity underlying learning and memory formation. ...