Name: isolation of drosophila melanogaster testes
Uploaded: 2011-05-13T13:00:00
Duration: 3 min 13 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Drosophila melanogaster Testes at JoVE.com

המחברים מודים ואסיה Vagin מציגה את הטכניקה הזו למעבדה שלנו.

<ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך מיקרוסקופ זכוכית שקופית עם רקע שחור: חותכים נייר לבן 20 # לגודל זהה שקופיות מיקרוסקופ. צבע אחד בצד של שחור שקופיות בגודל הנייר באמצעות סמן קבע (למשל, לנוכל). החל דבק לבן (של אלמר) לצד שחור לדבוק הנייר לשקופית. השקופית ניתן לעשות שימוש חוזר. שימוש ¾ &quot;הקלטת תווית (Fisherbrand), לאבטח את השקופית מיקרוסקופ, זכוכית בצד למעלה, אל משטח CO 2 לטוס כדי לתקן את זה במקום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איסוף 0-3 הישן יום זבובים זכרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן דלי קרח, פוספט שנאגרו מלוחים (PBS), מחטים לנתח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטשטש 50-100 זבובים באמצעות זרם של CO 2 ולהעביר אותם מבקבוק או בקבוקון לרפד את לטוס ליד המגלשה מיקרוסקופ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פיפטה ~ 50 μl קר כקרח PBS לירידה באמצע שקופיות מיקרוסקופ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעדינות להרים זבוב זכר עם הניתוחים מחט לטבול את איזמל המנתחים לתוך PBS, מגע עדין הצד הגחוני (כלומר, ליד הכנפיים) של הזבוב עם מחט ולמקם אותו לתוך ירידה של PBS. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקום אחד המחט על לטוס באמצע, בין החזה ועל הבטן, דוחף בחוזקה כלפי מטה. מניחים את המחט אחרים בין השישית (A6) והשביעית (A7) קטעים בטן (הפסים השני והשלישי מלמטה); למשוך את הבטן מן החזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להקניט את האשכים מלבד איברים אחרים, במיוחד במעיים. במיוחד מוטנטים לבן, האשכים והבטן נראים דומים. ההבדלים העיקריים הם כי האשכים תמיד באים בזוגות; אשך אחד יש דפוס ספירלה והוא לבן בצבעו יותר במעיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחסן את האשכים ב קר כקרח PBS בצינור microcentrifuge פוליפרופילן. </li></ol> נציג תוצאות: <img src="/files/ftp_upload/2641/2641fig1.jpg" alt="איור 1" /> באיור 1. להציג הגבי של מערכת הרבייה של הגבר, החל flybase.org/reports/FBim0000074.html. Flybase ייחוס:... &quot;אחרי 38 איור בעמוד 508 של מילר (1950) ע &#39;מילר אנטומיה היסטולוגיה פנימיים של Imago של תסיסנית melanogaster ב מ Demerec, עורך, ביולוגיה של תסיסנית, פרק 6, עמודים 420 - 534. Cold Spring Harbor Laboratory לחץ, מהדורת פקסימיליה, 1994. זכויות יוצרים 1994 על ידי Cold Spring Harbor Laboratory לחץ. השימוש נעשה ברשות סוג של Cold Spring Harbor Laboratory (CSHL) לעיתונות. ראה <a href="http://www.cshlpress.com">http://www.cshlpress.com</a> &quot;.

<ol>
	<li>Singh, S. R., Hou, S. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistological+Techniques+for+Studying+the+Drosophila+Male+Germline+Stem+Cell.">Immunohistological Techniques for Studying the Drosophila Male Germline Stem Cell.</a> Methods Mol Biol. 450, 45-59 (2008).</li></ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

אנו מספקים פרוטוקול לבודד את האשכים של הזכר הבוגר תסיסנית melanogaster. בגלל הטכניקה דורשת תיאום two אחד ידיים, מיומנות באה רק עם תרגול.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Dissecting needle</td>
<td>Tool</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>S17346</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Micro Slides, Plain </td>
<td>Tool</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>12-553</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Microscope Light</td>
<td>Tool</td>
<td>Schott-Fostec</td>
<td>KO-1500</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>CO2 pad</td>
<td>Tool</td>
<td>Genesee Scientific</td>
<td>59-172</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Benchtop Flowbuddy Complete System</td>
<td>Tool</td>
<td>Genesee Scientific</td>
<td>59-122WCU</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Bubble Humidifier</td>
<td>Tool</td>
<td>Salter Labs</td>
<td>7100</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ball filler needle</td>
<td>Tool</td>
<td>Genesee Scientific</td>
<td>54-119</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>&frac34;&#x201D; Label Tape</td>
<td>Supply</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>15-901-5B</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

isolation of drosophila melanogaster testes

האשכים של תסיסנית melanogaster לספק מודל חשוב ללימוד תחזוקה בתאי גזע והתמיינות, המיוזה, וכן סומה-germline אינטראקציות. האשכים הם מבודדים בדרך כלל 0-3 ימים לאחר eclosion ממקרה גלמי מן הזכרים הבוגרים. האשכים של wild-type זבובים נבדלים בקלות ברקמות אחרות, כי הם צהובים, אבל האשכים של זבובים מוטנטים לבן, רקע גנטי משותף ניסויי מעבדה דומים בצורת וגם צבע במעיים לעוף. ביצוע לנתיחה בשקופית מיקרוסקופ זכוכית עם רקע שחור עושה זיהוי האשכים הרבה יותר קל. האשכים יוסרו מן הזבובים באמצעות מחטים לנתח. לעומת פרוטוקולים להשתמש במלקחיים לנתיחה האשכים, השיטה שלנו היא הרבה יותר מהר, מה שמאפשר לאדם מיומן לנתח האשכים 200-300 wild-type זבובים לשעה, מניב 400-600 האשכים. האשכים של זבובים לבן או מוטציות כי להקטין את גודל האשכים קשה יותר לנתח ובדרך כלל תשואה 200-400 האשכים לשעה.

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Drosophila melanogaster Testes at JoVE.com

Isolation of Drosophila melanogaster Testes

תסיסנית האשכים melanogaster ניתן במהירות וביעילות מבודדים מן הזכרים הבוגרים באמצעות מחטים לנתח. בעזרת תרגול, ניתן לבודד בקלות בתוך יום או יומיים סכום של האשכים מספיק לניתוח DNA או RNA על ידי רצף תפוקה גבוהה יותר או מסורתי או בשיטות הביולוגיה המולקולרית של חלבון עבור מבחני נוגדנים או אנזים מבוססות.

בידוד תסיסנית melanogaster האשכים

The testes of Drosophila melanogaster provide an important model for the study of stem cell maintenance and differentiation, meiosis, and soma-germline ...

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation of Drosophila melanogaster Testes

Dissection of Larval CNS in Drosophila Melanogaster

Dissection של מערכת העצבים המרכזית הזחל ב תסיסנית melanogaster

The central nervous system (CNS) of Drosophila larvae is complex and poorly understood.  One way to investigate the CNS is to use immunohistochemistry to ...

High-Resolution Video Tracking of Locomotion in Adult Drosophila Melanogaster

וידאו ברזולוציה גבוהה של מעקב אחר תנועה של מבוגרים תסיסנית melanogaster

Flies provide an important model for studying complex behavior due to the plethora of genetic tools available to researchers in this field.  Studying ...

Live Imaging Of Drosophila melanogaster Embryonic Hemocyte Migrations

Live Imaging Of Drosophila melanogaster Embryonic Hemocyte Migrations

הדמיה חיה של תסיסנית melanogaster Hemocyte נדידות עובריים

Many studies address cell migration using in vitro methods, whereas the physiologically relevant environment is that of the organism itself. Here we ...

Dissection of Oenocytes from Adult Drosophila melanogaster

Dissection of Oenocytes from Adult Drosophila melanogaster

Dissection של Oenocytes מן למבוגרים תסיסנית melanogaster</em

In Drosophila melanogaster, as in other insects, a waxy layer on the outer surface of the cuticle, composed primarily of hydrocarbon compounds, provides ...

Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster

Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster

מדידה של תוחלת חיים ב<em&gt; דרוזופילה melanogaster</em

Aging is a phenomenon that results in steady physiological deterioration in nearly all organisms in which it has been examined, leading to reduced ...

Cytological Analysis of Spermatogenesis: Live and Fixed Preparations of Drosophila Testes

Cytological Analysis of Spermatogenesis: Live and Fixed Preparations of Drosophila Testes

ניתוח ציטולוגית של תאי זרע: הכנות בשידור חי והקבועות של<em&gt; דרוזופילה</em&gt; אשכים

Drosophila melanogaster is a powerful model system that has been widely used to elucidate a variety of biological processes. For example, studies of both ...

Imaging Through the Pupal Case of Drosophila melanogaster

Imaging Through the Pupal Case of Drosophila melanogaster

הדמיה באמצעות המקרה גלמי של<em&gt; Melanogaster דרוזופילה</em

The longstanding use of Drosophila as a model for cell and developmental biology has yielded an array of tools. Together, these techniques have enabled ...

Dissection and Immunostaining of Imaginal Discs from Drosophila melanogaster

Dissection and Immunostaining of Imaginal Discs from Drosophila melanogaster

נתיחה וImmunostaining של דמותי דיסקים מ<em&gt; Melanogaster דרוזופילה</em

A significant portion of post-embryonic development in the fruit fly, Drosophila melanogaster, takes place within a set of sac-like structures called ...

Enhanced Northern Blot Detection of Small RNA Species in Drosophila Melanogaster

Enhanced Northern Blot Detection of Small RNA Species in Drosophila Melanogaster

Enhanced צפון כתם איתור של RNA קטן מינים ב<em&gt; תסיסנית</em

The last decades have witnessed the explosion of scientific interest around gene expression control mechanisms at the RNA level. This branch of molecular ...

Maintenance of a Drosophila melanogaster Population Cage

Maintenance of a Drosophila melanogaster Population Cage

תחזוקה של<em&gt; תסיסנית</em&gt; אוכלוסיית קייג

Large quantities of DNA, RNA, proteins and other cellular components are often required for biochemistry and molecular biology experiments. The short life ...