Name: a gradient-generating microfluidic device for cell biology
Uploaded: 2007-08-30T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Gradient-generating Microfluidic Device for Cell Biology at JoVE.com

<p class="jove_title"> A. mikrofabrikation av gradient-genererande mikroflödessystem enhet </p><ol><li> Den Si wafer behandlas med reaktivt syre plasma (5 min på 30W, Harrick Scientific, NY). </li><li> Negativ fotoresist (SU-8 50, Microchem, MA) är spin-belagd vid 1000 rpm i 1 minut på en Si wafer. </li><li> Skivan är mjuk bakas vid 65 ° C i 10 min och därefter vid 95 ° C i 30 minuter på en värmeplatta. </li><li> Skivan utsätts för UV-ljus (200W) i 3 min genom en öppenhet mask med en minsta karaktäristisk storlek som 30 ìm. </li>...

<ol>
	<li>Jeon, N. L., Baskaran, H., Dertinger, S. K. W., Whitesides, G. M., Van de Water, L., Toner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+chemotaxis+in+linear+and+complex+gradients+of+interleukin-8+formed+in+a+microfabricated+device.">Neutrophil chemotaxis in linear and complex gradients of interleukin-8 formed in a microfabricated device.</a> <em style='font-style: italic'>Nat. Biotechnol</em>. <b>20</b>, 826-830 (2002).</li><li>Lin, F., Nguyen, C. M., Wang, S. J., Saadi, W., Gross, S. P., Jeon, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effective+neutrophil+chemotaxis+is+strongly+influenced+by+mean+IL-8+concentration.">Effective neutrophil chemotaxis is strongly influenced by mean IL-8 concentration.</a> <em style='font-style: italic'>Biochem. Biophys. Res. Commun</em>. <b>319</b>, 576-581 (2004).</li><li>Chung, B. G., Flanagan, L. A., Rhee, S. W., Schwartz, P. H., Lee, A. P., Monuki, E. S., Jeon, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+neural+stem+cell+growth+and+differentiation+in+a+gradient-generating+microfluidic+device.">Human neural stem cell growth and differentiation in a gradient-generating microfluidic device.</a> <em style='font-style: italic'>Lab Chip</em>. <b>5</b>, 401-406 (2005).</li><li>Saadi, W., Wang, S. J., Lin, F., Jeon, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+parallel-gradient+microfluidic+chamber+for+quantitative+analysis+of+breast+cancer+cell+chemotaxis.">A parallel-gradient microfluidic chamber for quantitative analysis of breast cancer cell chemotaxis.</a> <em style='font-style: italic'>Biomed. Microdevices</em>. <b>8</b>, 109-118 (2007).</li><li>Chung, B. G., Park, J. W., Hu, J. S., Huang, C., Monuki, E. S., Jeon, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+hybrid+microfluidic-vacuum+device+for+interfacing+with+conventional+cell+culture+platform.">A hybrid microfluidic-vacuum device for interfacing with conventional cell culture platform.</a> <em style='font-style: italic'>BMC Biotechnol</em>. <b>7</b>, (2007).</li></ol>

<p> Celler som utsätts för en stabil koncentrationsgradienter av fonden i en mikroflödessystem enhet migrerade mot högre koncentrationer. Den riktade orientering cell migration, kemotaxi index motilitet migrera celler undersöktes för cell tracking analys. Därför kunde denna gradient-genererande mikroflödessystem plattform vara användbart för att studera cancer metastaser, embryogenes och Axon vägledning. </p>

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Dextran-FITC</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma Aldrich</td>
<td>FD10S </td>
<td>Fluorescein isothiocyanate (FITC) conjugated-dextran (10kD)</td>
</tr>
<tr>
<td>hr-EGF</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>13247-051 </td>
<td>human recombinant Epidermal growth factor </td>
</tr>
<tr>
<td>PDMS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>K.R. Anderson Co. Inc.</td>
<td>2065622  </td>
<td>Poly(dimethylsiloxane) (PDMS), Dow Corning Sylgard 184 (8.6 lb)</td>
</tr>
<tr>
<td>Negative photoresist </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Microchem</td>
<td>SU-8 50</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Si wafer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>silicone wafer, 4 inch</td>
</tr>
<tr>
<td>Petri dishes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Polyethylene tubing </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Becton Dickinon</td>
<td>PE 20</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fibronectin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>NIH 3T3 </td>
<td>cell-line</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>fibroblast cells</td>
</tr>
<tr>
<td>Inverted microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Nikon </td>
<td>TE 2000</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>
		

a gradient-generating microfluidic device for cell biology

<p class="jove_content">Tillverkning och drift av en gradient genererande mikroflödessystem enhet för att studera cellulära beteende beskrivs. En mikroflödessystem plattform är en möjliggörande experimentell verktyg, eftersom det kan exakt manipulera vätska strömmar, möjliggöra hög genomströmning experiment, och genererar stabila lösliga koncentrationsgradienter. Jämfört med konventionella lutning generatorer, poly (dimetylsiloxan) (PDMS)-baserade mikroflödessystem enheter kan generera stabila koncentrationsgradienter av tillväxtfaktorer med väldefinierade profiler. Här utvecklade vi enkel gradient-genererande mikroflödessystem enheter med tre olika vikar. Tre mikrokanaler kombineras till en mikrokanalplatta att generera koncentrationsgradienter. Stabiliteten och formen på gradienter tillväxtfaktor bekräftades av fluorescein isothyiocyanate (FITC)-dextran med en molekylvikt liknar epidermal tillväxtfaktor (EGF). Med hjälp av denna mikroflödessystem enhet, visade vi att fibroblaster exponeras för koncentrationsgradienter av EGF migrerat mot högre koncentrationer. Den riktade orientering cell migration och motilitet i migrerar cellerna var kvantitativt bedömts av cellen spårning analys. Således kan denna gradient-genererande mikroflödessystem enheten vara användbart för att studera och analysera beteendet hos vandrande celler.</p>

Watch this Scientific Journal Video about A Gradient-generating Microfluidic Device for Cell Biology at JoVE.com

A Gradient-generating Microfluidic Device for Cell Biology

<p class="jove_content">Vi beskriver ett protokoll för mikrofabrikationslaboratorier av gradient-genererande mikroflödessystem enhet som kan generera tid och övertoningar i väldefinierade mikromiljö. I detta förhållningssätt kan gradient-genererande mikroflödessystem enheten användas för att studera riktad cell migration, embryogenes, sårläkning och cancer metastaser.</p>

En gradient som genererar mikroflödessystem enhet för cellbiologi

 The fabrication and operation of a gradient-generating microfluidic device for studying cellular behavior is described.  A microfluidic platform is an ...

Research

JoVE Journal

Biology

Fabrication of a Microfluidic Device for the Compartmentalization of Neuron Soma and Axons

Tillverkning av en mikroflödessystem enhet för uppdelning av Neuron Soma och Axoner

In this video, we demonstrate the technique of soft lithography with polydimethyl siloxane (PDMS) which we use to fabricate a microfluidic device for ...

A Microfluidic Device with Groove Patterns for Studying Cellular Behavior

En mikroflödessystem enhet med Groove Mönster till Studera Cellular Behavior

We describe a microfluidic device with microgrooved patterns for studying cellular behavior.  This microfluidic platform consists of a top fluidic channel ...

Brain Slice Stimulation Using a Microfluidic Network and Standard Perfusion Chamber

Brain Skiva Stimulering med hjälp av en Mikroflödessystem nätverk och Standard perfusion avdelningen

We have demonstrated the fabrication of a two-level microfluidic device that can be easily integrated with existing electrophysiology setups. The ...

Preparing E18 Cortical Rat Neurons for Compartmentalization in a Microfluidic Device

Förbereda E18 kortikala Råtta Nervceller för uppdelning i en mikroflödessystem enhet

In this video, we demonstrate the preparation of E18 cortical rat neurons. E18 cortical rat neurons are obtained from E18 fetal rat cortex previously ...

Micro-scale Engineering for Cell Biology

Micro-skala Engineering för cellbiologi

Cell Capture Using a Microfluidic Device

Cell ta med en mikroflödessystem enhet

Non-plasma Bonding of PDMS for Inexpensive Fabrication of Microfluidic Devices

Icke-plasma Limning av PDMS för billig Tillverkning av mikroflödessystem enheter

In this video, we demonstrate how to use the neuron microfluidic device without plasma bonding.  In some cases it may be desirable to reversibly bond ...

Assessing Neural Stem Cell Motility Using an Agarose Gel-based Microfluidic Device

Bedöma Neurala Motility Stem Cell Använda en agarosgel-baserade mikroflödessystem enhet

While microfluidic technology is reaching a new level of maturity for macromolecular assays, cell-based assays are still at an infant stage1. This is ...

Microcontact Printing of Proteins for Cell Biology

Microcontact utskrift av proteiner för cellbiologi

The ability to pattern proteins and other biomolecules onto substrates is important for capturing the spatial complexity of the extracellular environment. ...

The Microfluidic Probe: Operation and Use for Localized Surface Processing

Den mikroflödessystem Probe: Drift och användning för lokaliserad ytbehandling

Microfluidic devices allow assays to be performed using minute amounts of sample and have recently been used to control the microenvironment of cells. ...