Name: evaluation of nanoparticle uptake in tumors in real time using intravital imaging
Uploaded: 2011-06-21T13:00:00
Duration: 8 min 4 s
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इस अध्ययन # CCSRI 700537 अनुदान और CIHR # JDL और NIH / NCI अनुदान # CA120711-01A1-Z CA120711-01A1 84535 अनुदान द्वारा समर्थित किया गया. सभी प्रयोगों नियमों और संस्थागत पशु की देखभाल के दिशा निर्देशों के अनुसार में प्रदर्शन किया गया और कैलिफोर्निया के सैन डिएगो, पशु की देखभाल के विश्वविद्यालय में समिति का प्रयोग करें और वेस्टर्न ओंटारियो विश्वविद्यालय में प्रयोग.

1. ट्यूमर के एवियन भ्रूण सीएएम में टीका <ol><li> तैयार खोल कम निषेचित चिकन भ्रूण के रूप में 8 वर्णित है . </li><li> भ्रूण विकास के 9 दिन, एक सूक्ष्म सुई लगानेवाला इकट्ठा 1 एमएल सिरिंज पर एक 18 गेज सुई जुड़ा का उपयोग. Tygon टयूबिंग (1 / 32 &quot;भीतरी व्यास, 3 / 32&quot; बाहरी व्यास, 1 / 32 &quot;दीवार मोटाई) की एक 5-6 इंच टुकड़ा कट और ध्यान से टयूबिंग में सुई की बेवल सम्मिलित टयूबिंग की लगभग 4-5 इंच चाहिए सुई की नोक से (चित्रा 1a) का विस्तार. </li><li> सिरिंज और सेल निलंबन के साथ टयूबिंग भरें. फिर, टयूबिंग की समाप्ति पर एक microinjection गिलास सुई डालने और ध्यान से किसी भी हवाई बुलबुले को दूर. </li><li> दिन 10,000-100,000 सीएएम (चित्रा -1 सी) के भीतर एक सांस के रूप में कैंसर की कोशिकाओं के साथ एक प्रकाशक के साथ एक विच्छेदन गुंजाइश के तहत 9 भ्रूण (चित्रा 1b) इंजेक्षन. धीरे धीरे कोशिकाओं इंजेक्षन और ध्यान से यह सुनिश्चित करें कि कोशिकाओं के लिए सही जगह में सुई सीएएम के भीतर एक दृश्य सांस फार्म. कक्ष कि सीएएम सतह पर ड्रिप Kimwipe या अन्य applicator का उपयोग कर साफ किया जा सकता है. </li><li> Humidified इनक्यूबेटर भ्रूण 38 ° C पर 60% आर्द्रता पर लौटें और ट्यूमर बढ़ने और vascularize (7 दिनों) की अनुमति. </li></ol> 2. नैनोकणों की तैयारी <ol><li> चिकन भ्रूण में इंजेक्शन के लिए fluorescently लेबल CPMV नैनोकणों तैयार, वायरल नैनोकणों (Pbs, 7.4 पीएच में 8 के रूप में संश्लेषित है, का उपयोग अपकेंद्रित्र और एक मिनट के लिए किसी भी हटायें से पहले अच्छी तरह से 100 / μg मिलीलीटर भंवर मिश्रण का एक एकाग्रता के लिए पतला समुच्चय Sonication. conjugates और एकत्रीकरण की डिग्री के आधार पर उपयोगी हो सकता है fluorescently लेबल CPMVs के स्टॉक में कम से कम 1 वर्ष के लिए स्थिर रहे हैं जब 4 में संग्रहीत. शेयरों सी के अंधेरे में एक जोड़ी डाल द्वारा समय - समय पर जाँच करें. एक गिलास स्लाइड पर चला जाता है और ° प्रतिदीप्ति के लिए जाँच ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी (मंदिर) भी अगर कणों संयुग्मन बाद बरकरार रह निर्धारित करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. </li><li> संक्षेप में, वायरल नैनोकणों के एक माइक्रोग्राम (2 μl के अंतिम मात्रा में) तांबे लेपित ग्रिड के लिए जोड़ा जा सकता है. अगला, 2% इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप (फिलिप्स 410 EM) में 1 मिनट के लिए uranyl एसीटेट की एक समान मात्रा में जोड़ें. </li></ol> 3. Fluorescently लेबल वायरल नैनोकणों के अंतःशिरा इंजेक्शन <ol><li> 16 दिवस पर, सूक्ष्म सुई लगानेवाला इकट्ठा के रूप में ऊपर वर्णित है. सिरिंज में टयूबिंग (&gt; 200 μL) के माध्यम से वायरल nanoparticle की वांछित मात्रा ड्रा. ध्यान से किसी भी हवाई बुलबुले को दूर. टयूबिंग की समाप्ति पर microinjection गिलास सुई डालें. सुनिश्चित करें कि सुई के रूप में लंबे समय है और संभव के रूप में पतला (2a चित्रा). यदि सुई भी कुंद है, यह बाह्य त्वक स्तर के माध्यम से छेद करने में सक्षम नहीं हो सकता है और पोत घुसना करने के लिए असफल हो जायेगी. यदि सुई भी तेज है, टिप जब ऊतक मर्मज्ञ टूट जाएगी. </li><li> नसों के ट्यूमर असर वांछित साइट से बाहर का भ्रूण में 1 मिलीग्राम / एमएल fluorescein dextran (मेगावाट +७०,००० दा, Invitrogen) के 100 μl इंजेक्षन कल्पना हो सकता है (चित्रा 3 डी). सीएएम नस के सफल cannulation इंजेक्शन प्रवाह के मार्ग में रक्त के समाशोधन (चित्रा 2b) के द्वारा स्पष्ट है. इंजेक्शन के बाद संवहनी रिसाव 1 घंटे का आकलन करें. </li><li> नसों संवहनी वांछित साइट से बाहर का रिसाव के साथ ट्यूमर युक्त भ्रूण में 1 मिलीग्राम / CPMV Alexa Fluor 647 (647 CPMV वायुसेना) या PEGylated CPMV Alexa Fluor 647 (647 CPMV PEG वायुसेना) के मिलीलीटर समाधान के 50 μl इंजेक्षन visualized किया. </li><li> छवि तुरंत ट्यूमर और इंजेक्शन के बाद हर घंटे एक Zeiss परीक्षक Z1 ईमानदार Yokogawa कताई डिस्क, हमामात्सू ImagEM 9100-12 EM-सीसीडी कैमरा के साथ लगे माइक्रोस्कोप का उपयोग. </li></ol> 4. रियल समय intravital इमेजिंग <ol><li> भ्रूण इमेजिंग यूनिट इकट्ठा करने के लिए, भ्रूण इमेजिंग यूनिट का ढक्कन के underside पर इमेजिंग बंदरगाह की परिधि के चारों ओर एक वैक्यूम तेल की एक पतली परत लागू होते हैं, और बंदरगाह पर एक 18 मिमी कांच coverslip फिट. </li><li> ऐसी है कि coverslip इमेजिंग के लिए इच्छित क्षेत्र को कवर किया जाएगा भ्रूण स्थिति. धीरे धीरे ढक्कन कम जब तक coverslip भ्रूण के साथ संपर्क करता है, और तो यह जगह में पकड़ इकाई (चित्रा 2c) पर ढक्कन पेंच. </li><li> 37 डिग्री सेल्सियस पकवान युक्त भ्रूण के बाहर भ्रूण इमेजिंग यूनिट में गर्म पानी जोड़ें, और फिर 37 के लिए अंदर पर्यावरण equilibrated चैम्बर ° सी. के साथ एक ईमानदार confocal खुर्दबीन के मंच पर पूरी यूनिट जगह </li><li> स्थिति इमेजिंग स्पिनिंग डिस्क confocal प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी (चित्रा 2e) के तहत भ्रूण युक्त इकाई. इमेजिंग यूनिट भ्रूण जगह में पकड़ और देखने के क्षेत्र तय जबकि छवियाँ कैप्चरिंग रखने, दोनों के तीन आयामी जेड के ढेर और समय चूक छवियों के लिए कब्जा किया जा के लिए अनुमति देता है. हम अधिग्रहण और तीन आयामी समय चूक Perkin एल्मर (पूर्व कामचलाऊ व्यवस्था) Volocity सॉफ्टवेयर पैकेज (चित्र 3a) छवियों का उपयोग कर विश्लेषण. ट्यूमर का एक तीन आयामी ढेर उच्च संकल्प और आसपास के detaile कल्पना vasculature मोलघ विशिष्ट समय बिंदुओं पर संरचनात्मक विश्लेषण. नियमित समय बिंदुओं पर तीन आयामी ढेर मोल ट्यूमर vasculature में विस्तृत संरचनात्मक परिवर्तन नक्शा. छवि ट्यूमर इंजेक्शन के बाद हर घंटे. </li><li> मतलब Alexa (वायुसेना) ट्यूमर या stroma (गैर ट्यूमर क्षेत्र) Volocity रूप में उपयोग कर छवि quantitation सॉफ्टवेयर (Perkin एल्मर) में चयनित क्षेत्रों के भीतर 647 संकेत Fluor गणना द्वारा वायरल नैनोकणों के तेज quantitate. stroma अनुपात करने के लिए ट्यूमर stroma के संकेत मतलब वायुसेना 647 से अधिक ट्यूमर में मतलब वायुसेना 647 संकेत विभाजित करके गणना की थी. एक ट्यूमर stroma / 1 से उच्च अनुपात बताता है कि nanoparticle ट्यूमर द्वारा किया जा रहा है. </li></ol> 5. प्रतिनिधि परिणाम: उदाहरण यहाँ वर्णित में, हम HT-29 बृहदान्त्र कैंसर की कोशिकाओं को इंजेक्शन दिन 9 चिकन भ्रूण (चित्रा 1b) के सीएएम के भीतर आकार में लगभग 1mm सांस में फार्म. टीकाकरण के बाद, भ्रूण एक humidified इनक्यूबेटर में 7 दिनों के लिए सुसंस्कृत थे करने के लिए पर्याप्त ट्यूमर के विकास और vascularization (चित्रा -1 सी) की अनुमति. भ्रूण के साथ एक कम आणविक भार dextran नसों इंजेक्शन ट्यूमर vascularization की पुष्टि, और ट्यूमर Zeiss AxioExaminer Z1 ईमानदार माइक्रोस्कोप (चित्रा 2d) के तहत कल्पना थे. 647 CPMV वायुसेना या CPMV - खूंटी वायुसेना 647 नैनोकणों की नसों में प्रशासन के बाद (चित्र 3a और ख), उच्च संकल्प वास्तविक समय confocal इमेजिंग (चित्रा 2e) से पता चला है कि दोनों CPMV और CPMV - खूंटी नैनोकणों तेजी से पूरे vasculature लेबल, लेकिन ट्यूमर द्वारा CPMV - खूंटी के तेज 12 घंटे (चित्र 3a) के बाद लगभग 3 बार CPMV की तुलना में अधिक था. नैनोकणों के रिश्तेदार ट्यूमर तेज छवि विश्लेषण सॉफ्टवेयर (Perkin एल्मर से Volocity) का उपयोग करके निर्धारित किया गया था. हित के क्षेत्र के भीतर और बाहर ट्यूमर चयन किया गया था (stromal डिब्बे में) और प्रत्येक का मतलब प्रतिदीप्ति तीव्रता निर्धारित किया गया था. डेटा ट्यूमर / stroma अनुपात के रूप में व्यक्त किया है. <img src="/files/ftp_upload/2808/2808fig1.jpg" alt="चित्रा 1"/> चित्रा 1 ट्यूमर के एक एवियन भ्रूण के सीएएम में Microinjection. (क) microinjection तंत्र घटकों से इकट्ठा किया है के रूप में संकेत दिया. (ख) 9 दिन में एवियन भ्रूण ट्यूमर के साथ inoculated जब सीएएम पूरी सतह को कवर करने के लिए फैल गया है के लिए तैयार हैं. (ग) 16 दिन में, ट्यूमर हो गए हैं के लिए होगा व्यास में 1 सेमी (डैश्ड लाइन) और नैनोकणों के साथ इंजेक्शन के लिए तैयार है. <img src="/files/ftp_upload/2808/2808fig2.jpg" alt="चित्रा 2"/> चित्रा 2 Nanoparticle इंजेक्शन और intravital इमेजिंग. विच्छेदन दिखा खुर्दबीन के नीचे इंजेक्शन (क) (समाशोधन द्वारा देखा microinjector सीएएम नस में इंजेक्शन और (ख) microinjector सुई नस में डाला (तीर द्वारा संकेत) और रक्त प्रवाह में इंजेक्शन नैनोकणों के लिए तैयार है सुई की नोक खून की). (ग) इमेजिंग यूनिट सीधे सीएएम के साथ interfaced coverslip के साथ एवियन भ्रूण युक्त. (घ) nanoparticle इंजेक्शन से पहले, ट्यूमर vascularization fluorescein dextran के इंजेक्शन के बाद intravital इमेजिंग का उपयोग करने के लिए मूल्यांकन किया है. (ङ) इमेजिंग यूनिट तापमान विनियमित बाड़े सेट के भीतर एक ईमानदार confocal खुर्दबीन के मंच पर 37 डिग्री सेल्सियस के लिए तैनात भ्रूण युक्त <img src="/files/ftp_upload/2808/2808fig3.jpg" alt="चित्रा 3"/> चित्रा 3 मानव ट्यूमर में nanoparticle तेज intravital दृश्य. ट्यूमर (क) CPMV AF647 और (ख) CPMV खूंटी AF647 के इंजेक्शन के बाद 7 घंटे कल्पना कर रहे हैं. घ) एवियन भ्रूण से ट्यूमर के बाद के विश्लेषण के लिए छांटना.

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ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.

एवियन भ्रूण के chorioallantoic झिल्ली (सीएएम) संवहनी गतिशीलता और मानव ट्यूमर की फार्माकोकाइनेटिक्स का आकलन करने के लिए एक उपयोगी मॉडल है. और सीएएम की संरचना की स्थिति उच्च गुणवत्ता छवि अधिग्रहण की अनुमति देता है और आक्रामक शल्यचिकित्सा की प्रक्रियाओं के बिना कैंसर xenografts के कई प्रकार के accommodates है. इसके अलावा, कैंसर ट्यूमर xenografts chorioallantoic vascularized 7 दिनों के भीतर बन झिल्ली में प्रत्यारोपित, एक तेजी से, कम खर्चीला और अर्द्ध उच्च throughput ट्यूमर ऊतकों में नैनोकणों के संचय का आकलन करने का मतलब की पेशकश की. चूंकि कैंसर खोल कम चिकन भ्रूण के सीएएम में प्रत्यारोपित xenografts एक ईमानदार epifluorescence या confocal खुर्दबीन, प्रासंगिक और लौकिक ट्यूमर vasculature में nanoparticle तेज के बारे में जानकारी की उच्च संकल्प प्रकाशिकी के लिए सुलभ हैं आसानी से प्राप्त किया जा सकता है. इस मॉडल में कैंसर xenografts सीएएम भर laterally बढ़ने, ट्यूमर है कि बड़े होते हैं, जबकि गहराई में कम से कम 200 मीटर की शेष में जिसके परिणामस्वरूप करते हैं. इस intravital इमेजिंग के लिए उन्हें अच्छी तरह से अनुकूल विशेष रूप से करता है क्योंकि मानक epifluorescence सूक्ष्मदर्शी प्रभावी ढंग से पूरा ट्यूमर जन घुसना कर सकते हैं. इसके विपरीत, माउस के भीतर या तो सतही या orthotopic साइटों में प्रत्यारोपित ट्यूमर तीन आयामों में पैदा, यह मुश्किल सही गैर इनवेसिव तकनीक द्वारा इन ट्यूमर के भीतर गहरे नैनोकणों स्थानीयकरण करने के लिए बना. हम इस मॉडल का उपयोग किया है क्वांटम डॉट्स, liposomes, और लोहे के आक्साइड मानव ट्यूमर xenografts की एक संख्या में नैनोकणों के तेज का आकलन करने के लिए, इस मॉडल के लिए क्षमता पर प्रकाश डाला nanoparticle योगों का एक व्यापक रेंज के vivo विश्लेषण के लिए उपयुक्त हो.

<table border="1"><tbody><tr><th> अभिकर्मक नाम / उपकरण </th><th> कंपनी </th><th> सूचीपत्र संख्या </th><th> टिप्पणियाँ </th></tr><tr><td> निषेचित लेग्गोर्न अंडे </td><td> `फ्रे हैचरी, सेंट याकूब </td><td> N / A </td><td></td></tr><tr><td> Dremel रोटरी उपकरण </td><td> Dremel </td><td></td><td> किसी भी मॉडल में इस्तेमाल किया जा </td></tr><tr><td> Dremel cutoff पहियों नहीं. 36 </td><td> Dremel </td><td> 409 </td><td></td></tr><tr><td> खिलाड़ी हैचर </td><td> बेरी हिल </td><td> 1550HA </td><td></td></tr><tr><td> खिलाड़ी इनक्यूबेटर </td><td> बेरी हिल </td><td> 1502EA </td><td></td></tr><tr><td> इथेनॉल </td><td></td><td></td><td> 70% (खंड खंड /) </td></tr><tr><td> Polystyrene नौकाओं वजन </td><td> VWR </td><td> 12577-01 </td><td></td></tr><tr><td> स्क्वायर पेट्री डिश </td><td> Simport, VWR </td><td> 25378-115 </td><td></td></tr><tr><td> Rubbermaid रबर कंटेनर के ढक्कन के साथ </td><td> Guillevin </td><td> RH3-228-00-BLU </td><td> छेद पक्षों में drilled </td></tr><tr><td> कार्यक्षेत्र विंदुक डांड़ी </td><td> डेविड Kopf उपकरण </td><td> 720 मॉडल </td><td> सेटिंग्स: 16.3 (हीटर) और 2.3 (solenoid) </td></tr><tr><td> सोडियम borosilicate ग्लास केशिका ट्यूब </td><td> Sutter साधन </td><td> BF100-58-10 </td><td> (आयुध डिपो, 1.0 मिमी, आईडी 0.58 मिमी, 10 सेमी लंबाई) </td></tr><tr><td> 1X Dulbecco संशोधित ईगल मध्यम (DMEM) </td><td> Invitrogen </td><td> 11995073 </td><td></td></tr><tr><td> है Dulbecco </td><td> Invitrogen </td><td> 14190250 </td><td> 7.4 पीएच </td></tr><tr><td> फास्फेट buffered (डी पीबीएस) खारा (1X), तरल </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Trypsin, EDTA 4Na के साथ 0.05% (1X), तरल </td><td> Invitrogen </td><td> 25300054 </td><td></td></tr><tr><td> भ्रूण गोजातीय सीरम </td><td> Invitrogen </td><td> 12483-020 </td><td> निष्क्रिय हीट </td></tr><tr><td> Hemocytometer </td><td> Hausser वैज्ञानिक, VWR </td><td> 15170-090 </td><td></td></tr><tr><td> अपकेंद्रित्र </td><td> Eppendorf मॉडल 5810R </td><td> 5811 000.010 </td><td></td></tr><tr><td> ठीक - बिंदु संदंश </td><td> VWR </td><td> 25607-856 </td><td></td></tr><tr><td> Tygon टयूबिंग 3603 आर </td><td> VWR </td><td> 63009-983 </td><td> 50 फीट (1/32-inch भीतरी व्यास, 3/32-inch बाहरी व्यास, 1/32-inch दीवार मोटाई </td></tr><tr><td> 18 गेज सुई इंजेक्शन के लिए चमड़े के नीचे सुई </td><td> BD </td><td> 305195 </td><td> 100 के बॉक्स </td></tr><tr><td> इंजेक्शन के लिए 1 मिलीलीटर सीरिंज </td><td> BD </td><td> 309602 </td><td> 100 के बॉक्स </td></tr><tr><td> फाइबर ऑप्टिक माइक्रोस्कोप प्रकाशक </td><td> Amscope </td><td> HL250-AY </td><td> 150W </td></tr><tr><td> kimwipes </td><td> VWR </td><td> 10805-905 </td><td></td></tr><tr><td> वी. unguiculata बीज (कैलिफोर्निया कोई 5 काले आंख) </td><td> Burpee </td><td> 51771A </td><td></td></tr><tr><td> आंतरिक विकास की रोशनी </td><td> SUNLITE, माली आपूर्ति </td><td></td><td></td></tr><tr><td> मिथाइल - PEO4 एनएचएस एस्टर </td><td> बींधना </td><td> PI22341 </td><td></td></tr><tr><td> MPEG-एनएचएस, खूंटी succinimidyl एस्टर, 2000 मेगावाट </td><td> NANOCS </td><td> PEG1-0002 </td><td></td></tr><tr><td> एलेक्सा Fluor 647 carboxylic एसिड (succinimidyl एस्टर) </td><td> Invitrogen </td><td> A20006 </td><td></td></tr><tr><td> ओरेगन ग्रीन 488 succinimidyl एस्टर * 6-isomer * </td><td> Invitrogen </td><td> हे 6149 </td><td></td></tr><tr><td> डाइमिथाइल sulfoxide (DMSO) </td><td> सिग्मा </td><td> D8418 </td><td></td></tr><tr><td> Dibasic monohydrogen फॉस्फेट </td><td> सिग्मा </td><td> 379980 </td><td> K2HPO4 (phopshate बफर के लिए) </td></tr><tr><td> तनहा नींव का dihydrogen फॉस्फेट </td><td></td><td> P5655 </td><td> KH2PO4 (phopshate बफर के लिए) </td></tr><tr><td> Superose 6 स्तंभ आकार अपवर्जन </td><td> जीई स्वास्थ्य जीवन विज्ञान </td><td> 17-0673-01 </td><td></td></tr><tr><td> ÄKTA एक्सप्लोरर chromatograph 100 </td><td> जीई Amersham Pharmacia </td><td> WS-AKTA100 </td><td></td></tr><tr><td> ÄKTA उच्च प्रवाह किट </td><td> जीई स्वास्थ्य जीवन विज्ञान </td><td> 18-1154-85 </td><td></td></tr><tr><td> Sucrose </td><td> सिग्मा </td><td> S0389 </td><td></td></tr><tr><td> Ultracentrifuge </tघ&gt; <td> Beckman </td><td></td><td></td></tr><tr><td> दप 28 तिवारी रोटर </td><td> Beckman </td><td> 342204 </td><td> घुमाओ बाल्टी </td></tr><tr><td> 50.2 तिवारी रोटर </td><td> Beckman </td><td> 337901 </td><td> निश्चित कोण </td></tr><tr><td> Amicon - अल्ट्रा 15 केन्द्रापसारक फ़िल्टर इकाइयों </td><td> Millipore </td><td> UFC910008 </td><td> 100 केडीए काट </td></tr><tr><td> ग्रेडियेंट पूर्व </td><td> Biorad </td><td></td><td></td></tr><tr><td> dextran, fluorescein, 70,000 मेगावाट, anionic </td><td> Invitrogen </td><td> D1823 </td><td></td></tr><tr><td> स्पिनिंग डिस्क confocal प्रतिदीप्ति खुर्दबीन </td><td> कोरम; Yokogawa 10 CSU, Yokogawa </td><td> N / A </td><td></td></tr><tr><td> व्यापक क्षेत्र Epifluorescence खुर्दबीन </td><td> कोरम; Zeiss Axio परीक्षक, Zeiss </td><td> N / A </td><td></td></tr><tr><td> हमामात्सू 9100-12 कैमरा EM-सीसीडी ImagEM </td><td> कोरम; हमामात्सू </td><td> N / A </td><td></td></tr><tr><td> तापमान खुर्दबीन के लिए बाड़े इकाई </td><td> प्रेसिजन प्लास्टिक </td><td> N / A </td><td></td></tr><tr><td> वैक्यूम तेल </td><td> VWR </td><td> 59344-055 </td><td></td></tr><tr><td> परिपत्र गिलास नहीं coverslips है. 1 (18 मिमी) </td><td> VWR </td><td> 16004-300 </td><td></td></tr><tr><td> Volocity सॉफ्टवेयर </td><td> Perkin एल्मर </td><td></td><td></td></tr><tr><td> चिकी भ्रूण बाड़े </td><td></td><td> कस्टम गढ़े </td><td></td></tr><tr><td> नाजुक कैंची </td><td> VWR </td><td> 25608-203 </td><td></td></tr><tr><td> Formalin </td><td> Bioshop </td><td> FOR201.500 </td><td> Fumehood में प्रयोग </td></tr><tr><td> इष्टतम काटना </td><td> फिशर, ऊतक टेक </td><td> 1437365 </td><td></td></tr><tr><td> तापमान (अक्टूबर) </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> प्लास्टिक molds </td><td> मछुआ </td><td> 22-038217 </td><td></td></tr><tr><td> VWR VistaVision HistoBond चिपकने वाला स्लाइड्स </td><td> VWR </td><td> 16004-406 </td><td></td></tr><tr><td> DAPI के साथ सोने का लम्बा </td><td> Invitrogen </td><td> P36931 </td><td></td></tr><tr><td> Cryostat के लिए प्रयोज्य ब्लेड </td><td> मछुआ </td><td> 12-634-2 </td><td></td></tr><tr><td> Cryostat </td><td> Leica मुख्यमंत्री 3050 </td><td> 14047033518 </td><td></td></tr></table>

evaluation of nanoparticle uptake in tumors in real time using intravital imaging

अल्ट्रासाउंड, एमआरआई, पीईटी और सीटी के रूप में ट्यूमर इमेजिंग, के लिए वर्तमान प्रौद्योगिकियों ट्यूमर में nanoparticle तेज सूक्ष्म 1,2,3 स्तर पर मूल्यांकन के लिए उच्च संकल्प छवियों उपज करने में असमर्थ हैं, एक उपयुक्त xenograft मॉडल की उपयोगिता पर प्रकाश डाला जो में विस्तृत तेज विश्लेषण प्रदर्शन. यहाँ, हम उच्च संकल्प intravital इमेजिंग का उपयोग करने के लिए एक संशोधित, खोल कम चिकन भ्रूण मॉडल में मानव ट्यूमर xenografts में nanoparticle तेज का मूल्यांकन. चिकन भ्रूण मॉडल में vivo विश्लेषण में विशेष रूप से इन के लिए अच्छी तरह से अनुकूल है क्योंकि यह मानव ट्यूमर के विकास का समर्थन करता है, अपेक्षाकृत सस्ती है और आवश्यकता नहीं है 4,5 anesthetization या सर्जरी नहीं है . ट्यूमर कोशिकाओं 7 दिनों के भीतर पूरी तरह से vascularized xenografts फार्म जब chorioallantoic (सीएएम) झिल्ली 6 में प्रत्यारोपित. परिणामस्वरूप ट्यूमर गैर इनवेसिव वास्तविक समय, उच्च संकल्प इमेजिंग कि या तो मेजबान या ट्यूमर सिस्टम पर थोड़ा प्रभाव के साथ 72 घंटे के लिए बनाए रखा जा सकता द्वारा कल्पना हैं. आकार और योगों प्रशासित ट्यूमर को बाहर का की एक विस्तृत श्रृंखला के साथ नैनोकणों कल्पना और वे खून के माध्यम से प्रवाह के रूप में मात्रा निर्धारित किया जा सकता है, टपकाया ट्यूमर वाहिका से extravasate, और ट्यूमर साइट पर जमा. हम यहाँ लोबियाम्लान मोज़ेक) वायरस (CPMV लगभग अवरक्त फ्लोरोसेंट रंजक और / या polyethylene glycol (खूंटी) पॉलिमर 7, 8, 9,10,11 के साथ सजाया से व्युत्पन्न नैनोकणों के विश्लेषण का वर्णन. नसों में प्रशासन पर, इन वायरल नैनोकणों तेजी से endothelial कोशिकाओं द्वारा भली भाँति रहे हैं, दोनों बाहर vasculature की वैश्विक लेबलिंग और ट्यूमर 7,12 के भीतर जिसके परिणामस्वरूप. वायरल नैनोकणों के PEGylation अपने आधे जीवन प्लाज्मा बढ़ जाती है, रक्त परिसंचरण में अपने समय फैली हुई है, और अंततः बढ़ाया पारगम्यता और प्रतिधारण (EPR) 7 प्रभाव, 10,11 के माध्यम से ट्यूमर में अपनी संचय बढ़ाता है. दर और एक ट्यूमर में नैनोकणों के संचय के हद समय पर मापा जाता है छवि विश्लेषण सॉफ्टवेयर का उपयोग कर. इस तकनीक में एक विधि दोनों कल्पना और मानव ट्यूमर में nanoparticle गतिशीलता यों प्रदान करता है.

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Evaluation of Nanoparticle Uptake in Tumors in Real Time Using Intravital Imaging

हम एक उपन्यास मानव xenografted एक एवियन भ्रूण मॉडल में गतिशील, वास्तविक समय intravital इमेजिंग का उपयोग ट्यूमर के vasculature में nanoparticle स्थानीयकरण यों दृष्टिकोण प्रस्तुत करते हैं.

रीयल टाइम में ट्यूमर में Nanoparticle तेज intravital इमेजिंग का प्रयोग का मूल्यांकन

Current technologies for tumor imaging, such as ultrasound, MRI, PET and CT, are unable to yield high-resolution images for the assessment of nanoparticle ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Multispectral Real-time Fluorescence Imaging for Intraoperative Detection of the Sentinel Lymph Node in Gynecologic Oncology

Multispectral gynecologic कैंसर विज्ञान में प्रहरी लिम्फ नोड के Intraoperative पता लगाने के लिए वास्तविक समय प्रतिदीप्ति इमेजिंग

The prognosis in virtually all solid tumors depends on the presence or absence of lymph node metastases.1-3 Surgical treatment most often combines radical ...

MicroRNA Detection in Prostate Tumors by Quantitative Real-time PCR (qPCR)

MicroRNA Detection in Prostate Tumors by Quantitative Real-time PCR qPCR

MicroRNA प्रोस्टेट ट्यूमर में मात्रात्मक वास्तविक समय पीसीआर (qPCR) द्वारा जांच

MicroRNAs (miRNAs) are single-stranded, 18&#x2013;24 nucleotide long, non-coding RNA molecules. They are involved in virtually every cellular process ...

Real-time Digital Imaging of Leukocyte-endothelial Interaction in Ischemia-reperfusion Injury (IRI) of the Rat Cremaster Muscle

Real-time Digital Imaging of Leukocyte-endothelial Interaction in Ischemia-reperfusion Injury IRI of the Rat Cremaster Muscle

Ischemia-reperfusion की चोट में ल्युकोसैट - endothelial सहभागिता के वास्तविक समय डिजिटल चूहा cremaster स्नायु की इमेजिंग (IRI)

Ischemia-reperfusion injury (IRI) has been implicated in a large array of pathological conditions such as cerebral stroke, myocardial infarction, ...

Movement Retraining using Real-time Feedback of Performance

आंदोलन प्रदर्शन का वास्तविक समय प्रतिक्रिया का उपयोग पुनर्प्रशिक्षण

Any modification of movement - especially movement patterns that have been honed over a number of years - requires re-organization of the neuromuscular ...

In Vivo Optical Imaging of Brain Tumors and Arthritis Using Fluorescent SapC-DOPS Nanovesicles

In Vivo Optical Imaging of Brain Tumors and Arthritis Using Fluorescent SapC-DOPS Nanovesicles

फ्लोरिसेंट SapC-DOPS nanovesicles का उपयोग कर मस्तिष्क ट्यूमर और गठिया के vivo ऑप्टिकल इमेजिंग में

We describe a multi-angle rotational optical imaging (MAROI) system for in vivo monitoring of physiopathological processes labeled with a fluorescent ...

Chemotherapy-induced Vascular Toxicity - Real-time In vivo Imaging of Vessel Impairment

Chemotherapy-induced Vascular Toxicity - Real-time In vivo Imaging of Vessel Impairment

कीमोथेरेपी प्रेरित संवहनी विषाक्तता - वास्तविक समय<em&gt; Vivo</em&gt; पोत हानि की इमेजिंग

Certain classes of chemotherapies may exert acute vascular changes that may progress into long-term conditions that may predispose the patient to an ...

Real-time Cytotoxicity Assays in Human Whole Blood

मानव पूरे रक्त में वास्तविक समय cytotoxicity Assays

A live cell-based whole blood cytotoxicity assay (WCA) that allows access to temporal information of the overall cell cytotoxicity is developed with ...

Real-time X-ray Imaging of Lung Fluid Volumes in Neonatal Mouse Lung

नवजात माउस फेफड़ों में फेफड़े द्रव वॉल्यूम की वास्तविक समय एक्स-रे इमेजिंग

At birth, the lung undergoes a profound phenotypic switch from secretion to absorption, which allows for adaptation to breathing independently. Promoting ...

Evaluation of Lung Metastasis in Mouse Mammary Tumor Models by Quantitative Real-time PCR

मात्रात्मक वास्तविक समय पीसीआर द्वारा माउस स्तन ट्यूमर मॉडल में फेफड़ों मेटास्टेसिस का मूल्यांकन

Metastatic disease is the spread of malignant tumor cells from the primary cancer site to a distant organ and is the primary cause of cancer associated ...

Extended Time-lapse Intravital Imaging of Real-time Multicellular Dynamics in the Tumor Microenvironment

ट्यूमर microenvironment में वास्तविक समय बहुकोशिकीय गतिशीलता की विस्तारित समय व्यतीत हो जाने के intravital इमेजिंग

In the tumor microenvironment, host stromal cells interact with tumor cells to promote tumor progression, angiogenesis, tumor cell dissemination and ...