Name: organotypic collagen i assay: a malleable platform to assess cell behaviour in a 3-dimensional context
Uploaded: 2011-10-13T12:00:00
Duration: 10 min 45 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Organotypic Collagen I Assay: A Malleable Platform to Assess Cell Behaviour in a 3-Dimensional Context at JoVE.com

1. Oprichting van fibroblast culturen van de huid explantaten <ol><li> 4 mm stansbiopsieën verkregen uit menselijk onderarm worden in MEM aangevuld 100 eenheden / ml penicilline, 100 ug / ml streptomycine en 0,25 ug / ml Fungizone. </li><li> Trim alle spek en fijn de biopsie in kleine stukjes snijden door tuimelen een aantal 24 scalpelmes tegen de bodem van de petrischaal. </li><li> Plaats weefsel slurry in een 25 cm2 weefselkweekfles met primaire fibroblast groei media (MEM aangevuld met 10% FCS, 100 units / ml penicilline, 100 ug / ml streptomycine en 25 ug / ml Fungizone) toegevoegd totdat het oppervlak van cuvet bedekt maar vloeibaar diepte onvoldoende is voor weefsel te zweven. </li><li> Na 3 dagen incubatie bij 37 ° C in een bevochtigde atmosfeer van 5% CO2, 3 ml primair fibroblast groei media. </li><li> Na nog eens 3 dagen incubatie veranderingsmedia met verse primaire fibroblast growth media of cells zijn bijna confluent zij 01:04 worden gesplitst in nieuwe media. (Fungizone kan worden weggelaten vanaf dit punt). </li></ol> 2. Fase I - Voorbereiding van collageen I van rat staart Opmerking: Protocol voor ongeveer 12-14 adolescent (vers of bevroren) rat staarten <ol><li> Bereid rattenstaart door wassen in 70% ethanol en verwijder pezen als volgt: </li><li> Verwijder het vel van rattenstaart door het snijden in het midden van de staart van boven naar beneden met een scalpel en pellen langs de lengte van de staart. </li><li> Maak pees uit de kern van het proximale gebied van de staart. </li><li> Verwijder pees naar het distale gebied van de staart vermijden mantel met getande forceps. </li><li> Extract 1 g van pees / 250 ml 0,5 M azijnzuur door roeren bij 4 ° C gedurende 48 uur. </li><li> Centrifugeer het extract (7.500 xg) gedurende 30 minuten en gooi de pellet. </li><li> Voeg een gelijk volume van 10% (w / v) NaCl aan de supernatant en roer gedurende 30-60 minuten. </li><li&gt; Centrifuge (10.000 xg) gedurende 30 minuten, verwijder het supernatant en opnieuw oplossen van het precipitaat in 0,25 M azijnzuur bij ~ verhouding 1:1 door roeren gedurende 24 uur bij 4 ° C. </li><li> Dialyseer de collageenoplossing tegen veranderingen van 6-8 6L ~ 17,5 mM azijnzuur (1 ml ijsazijn per liter koud water, change 2 x daags). </li><li> Centrifugeer gedialyseerd collageen bij 30.000 xg gedurende 1,5 uur. </li><li> Verwijder supernatant en plaats in steriele kolf. </li><li> Stel de collageen I ~ concentratie 2 mg / ml met 0,5 mM azijnzuur bij 4 ° C. </li></ol> 3. Fase II - Het opzetten van de 3D-matrix met ingebouwde fibroblasten (laten contracteren voor 8 dagen). <ol><li> Monteer het mengsel met koud reagentia bij 4 ° C in een vooraf gekoelde fles. Houd collageen I op ijs. </li><li> Voor een T75 fles van confluente primaire fibroblasten (~ aantal cellen 1 x 10 6) gebruik: <ul><li> 25 ml rattenstaart collageen (ca. conc 2mg/ml) </li><li> 3 ml 10xMEM </li><li> 0,22 M NaOH: ten eerste, voeg 2 ml, dan druppelsgewijs onder roeren, totdat het collageen wordt oranje, </li><li> maar niet roze (meestal maximaal 3 ml). Geschatte p H = 7,2. </li><li> Opmerking: Het is belangrijk dat de medium / gel blijft neutraal of enigszins zure fibroblasten niet samentrekken de gel bij blootstelling zelfs licht alkalische omstandigheden. </li></ul></li><li> Trypsinise de fibroblasten, draaien op 400 xg gedurende 5 minuten en verwijder supernatant. </li><li> Gedurende 5 minuten laten draaien boven: Bereid 12 x 35 mm plastic schaaltjes - normaal 12 gerechten bereiken van een fles van fibroblasten / collageen mix. </li><li> Resuspendeer fibroblasten in 3 ml FCS en onmiddellijk toe te voegen aan het collageen mix en roer. </li><li> Plaat ongeveer 2,5 ml van collageen / fibroblast per schaal zo snel mogelijk. Proberen bellen en collageen omgeving voorkomen. </li><li> Laat de collageen bij 37 ° C in een bevochtigde atmosfeer van 5% CO2 in lucht gedurende 10 minuten. </li><li> Voeg 1 ml fibroblast groeith media (DMEM + 10% FCS). </li><li> Maak de collageen / fibroblast matrix van de wanden van de capsule met een pipet. </li><li> Volgende dag: Voeg 1 ml fibroblast groei media (DMEM + 10% FCS). </li><li> Wijzig media om de andere dag. Toestaan ​​collageen / fibroblast matrix contract ongeveer 8 dagen, totdat ze passen in een 24-wells schaal (Contractie van ~ 3,5 cm tot 1,5 cm in diameter, zie figuur 1). </li></ol> Opmerking: De concentratie collageen moet worden aangepast aan de toepassing. Hoe meer Verdun de collageen-oplossing, hoe sneller het zal worden gecontracteerd door de fibroblasten. Kleine verschillen in krimp percentage wordt ervaren met verschillende batches van collageen bij dezelfde concentratie. Ook verschillende fibroblastculturen de collageen gels met verschillende snelheden samentrekken en meer fibroblasten presenteren, hoe sneller de snelheid van contractie. Concentratie en fibroblast collageen dichtheid kan derhalve aangepast aan de snelheid van contractie wijzigenen de uiteindelijke dichtheid van de collageen gel. 4. Fase II - Plating cellen plaats bovenop de matrix Let op: Steriliseer alle tangen en apparatuur met ethanol voor gebruik. <ol><li> Met behulp van stompe tang, beweeg gecontracteerde matrix 24-well schotel. Zorg ervoor dat dit niet het geval vouwen. </li><li> Bereid suspensie van cellen plaats bij ongeveer 4 x 10 4 / ml en 1 ml plaat (na trypsinising, spin cellen te ontdoen van trypsine) bovenop de matrix. Werkelijke aantal benodigde cellen afhankelijk van de gebruikte celtype. Celmedium moet normaal kweekmedium voor de cellen van belang. </li><li> Toestaan ​​cellen tot confluentie groeien bovenop de matrix, ongeveer 3-5 dagen. </li></ol> 5. Fase III - Overdracht van de matrix om een ​​rooster voor een invasie (ongeveer 0 tot 21 dagen) <ol><li> Snijd roestvrij stalen roosters op een statief te maken en voor autoclaaf te gebruiken (zie figuur 2). </li><li> Plaats steriele net in6 cm schaaltje, voeg groeimedia tot boven het rooster (circa 10.5ml). Plaats matrix op het net en Zuig media zodat de onderkant van de matrix in contact met media, maar niet ondergedompeld. Dit wordt aangeduid als de lucht / vloeistof interface, die een verloop dat invasie bevordert creëert. Vervang medium om de twee dagen (zie figuur 2). </li><li> Levende cellen kunnen contextuele beeldvorming met fluorescerende cellen worden afgebeeld in dit stadium of eerder. De gecontracteerde of collagenen I kunnen worden afgebeeld met behulp van tweede harmonische generatie (SHG, zie figuur 3). Multi-fotonexcitatie gecombineerd met breedveld detectie we dat SHG kan ten minste 100 urn worden afgebeeld in de matrix, terwijl cellen die GFP cytoplasmatische kan worden afgebeeld ten minste 200 um diep. </li></ol> Opmerking: Met betrekking tot de kwantificering van invasie, de dag waarop matricies worden geplaatst op de roosters definieert dag 0. Plaatsing op roosters genereert een helling van celcultuur media die invasie int bevordert<html> o de matrix. Monsters kunnen worden afgebeeld op de volgende 1 - 21 dagen (of langer) om biologische processen zoals invasie, proliferatie, overleving of differentiatie (zie referentielijst) beoordelen. 6. Fase IV - Fixatie <ol><li> 5 ml van 4% PFA in een Falcon buis. </li><li> Breng de matrix op een vlakke ondergrond. Snijd de matrix in de helft met een frisse schone scalpel (zoals u zult de doorsnede zich vlekken), tilt u de matrix met scalpel en transfer naar 4% PFA, fix &#39;s nachts. </li><li> Organotypische matrices zijn nu klaar om vlek met antilichaam / naar keuze vlek (zie figuur 3). </li></ol> 7. Representatieve resultaten: <img alt="Figuur 1" src="/files/ftp_upload/3089/3089fig1.jpg" /> Figuur 1 Voorbeeld van fibroblast-gecontracteerde collageen I. Mengsel van fibroblast en rattenstaart collageen los van de petrischaal en mogen contracteren meer dan 6-8 dagen. Figuur 2 &quot;src =&quot; / files/ftp_upload/3089/3089fig2.jpg &quot;/&gt; Figuur 2 Organotypische assay progressie. Een schematische opzet van organotypische en progressie. B, Voorbeeld van collageen / fibroblast matrix bovenop roestvrij staal, steriel raster lucht / vloeistof interface. <img alt="Figuur 3" src="/files/ftp_upload/3089/3089fig3.jpg" /> Figuur 3 Toepassingen van organotypische assay. A, B niet-invasieve en invasieve pancreas ductaal adenocarcinoom (PDAC) cellen binnen te vallen na verloop van tijd met organotypische matrix. C, levende huid gelijk met een gestratificeerde epidermis op een fibroblast-gecontracteerde collagene dermale component. D, binnendringende C8161 melanoomcellen zijn om een fibroblast -gecontracteerd collagene dermale equivalent. E, invasieve PDAC cellen (groen) interactie en binnenvallen met fibroblasten (rood) binnen de organotypische matrix. F </strong&gt;, invasieve PDAC cellen (groen) interactie met een vernederende omringende extracellulaire matrix (paars) gevisualiseerd met behulp van multifoton op basis van tweede harmonische generatie.

<ol>
	<li>Yamada, K. M., Cukierman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+tissue+morphogenesis+and+cancer+in+3D.">Modeling tissue morphogenesis and cancer in 3D.</a> Cell. 130, 601-610 (2007).</li><li>Edward, M., Gillan, C., Micha, D., Tammi, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumour+regulation+of+fibroblast+hyaluronan+expression:+a+mechanism+to+facilitate+tumour+growth+and+invasion.">Tumour regulation of fibroblast hyaluronan expression: a mechanism to facilitate tumour growth and invasion.</a> Carcinogenesis. 26, 1215-1223 (2005).</li><li>Patsialou, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Invasion+of+human+breast+cancer+cells+in+vivo+requires+both+paracrine+and+autocrine+loops+involving+the+colony-stimulating+factor-1+receptor.">Invasion of human breast cancer cells in vivo requires both paracrine and autocrine loops involving the colony-stimulating factor-1 receptor.</a> Cancer Res. 69, 9498-9506 (2009).</li><li>Serrels, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+study+of+E-cadherin+and+membrane+dynamics+in+living+animals:+implications+for+disease+modeling+and+drug+development.">Real-time study of E-cadherin and membrane dynamics in living animals: implications for disease modeling and drug development.</a> Cancer Res. 69, 2714-2719 (2009).</li><li>Timpson, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+Regulation+of+RhoA+Activity+during+Pancreatic+Cancer+Cell+Invasion+Driven+by+Mutant+p53.">Spatial Regulation of RhoA Activity during Pancreatic Cancer Cell Invasion Driven by Mutant p53.</a> Cancer Res. 71, 747-757 (2011).</li><li>Edward, M., Quinn, J. A., Pasonen-Seppanen, S. M., McCann, B. A., Tammi, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=4-Methylumbelliferone+inhibits+tumour+cell+growth+and+the+activation+of+stromal+hyaluronan+synthesis+by+melanoma+cell-derived+factors.">4-Methylumbelliferone inhibits tumour cell growth and the activation of stromal hyaluronan synthesis by melanoma cell-derived factors.</a> Br. J. Dermatol. 162, 1224-1232 (2010).</li><li>Fusenig, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+and+differentiation+characteristics+of+transformed+keratinocytes+from+mouse+and+human+skin+in+vitro+and+in+vivo.">Growth and differentiation characteristics of transformed keratinocytes from mouse and human skin in vitro and in vivo.</a> J. Invest. Dermatol. 81, 168s-175s (1983).</li><li>Nystrom, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+quantitative+method+to+analyse+tumour+cell+invasion+in+organotypic+culture.">Development of a quantitative method to analyse tumour cell invasion in organotypic culture.</a> J. Pathol. 205, 468-475 (2005).</li><li>Sabeh, F., Shimizu-Hirota, R., Weiss, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protease-dependent+versus+-independent+cancer+cell+invasion+programs:+three-dimensional+amoeboid+movement+revisited.">Protease-dependent versus -independent cancer cell invasion programs: three-dimensional amoeboid movement revisited.</a> J. Cell. Biol. 185, 11-19 (2009).</li><li>Amjad, S. B., Carachi, R., Edward, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Keratinocyte+regulation+of+TGF-beta+and+connective+tissue+growth+factor+expression:+a+role+in+suppression+of+scar+tissue+formation.">Keratinocyte regulation of TGF-beta and connective tissue growth factor expression: a role in suppression of scar tissue formation.</a> Wound Repair Regen. 15, 748-755 (2007).</li><li>Gaggioli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibroblast-led+collective+invasion+of+carcinoma+cells+with+differing+roles+for+RhoGTPases+in+leading+and+following+cells.">Fibroblast-led collective invasion of carcinoma cells with differing roles for RhoGTPases in leading and following cells.</a> Nat. Cell. Biol. 9, 1392-1400 (2007).</li></ol>

We hebben niets te onthullen.

Hier wordt een werkwijze voor productie van een 3-dimensionale matrix geschikt voor studies van invasieve celmigratie 6-8. De matrix bestaat uit collageen type 1 fibrillen, die gesloten gedurende verscheidene dagen door primaire humane epidermale fibroblasten. Het collageen wordt bereid door zure extractie, niet enzymatische digestie, die reactiviteit behoudt de poly-peptide uiteinden en bevordert verknoping van collageenvezels in grotere aggregaten na neutralisatie van bufferomstandigheden 9. Dit resulteert in een gereconstitueerd gel die de eigenschappen van collageen beter nabootst in vivo en heeft grote gevolgen voor de invasieve eigenschappen van cellen gekweekt in de gels. Het maakt niet uit of vers of bevroren uitgangsmateriaal wordt gebruikt, maar het gebruik van adolescente ratten staart is belangrijk, omdat collageen cross-linking is meer labiel bij jongere dieren. Collageen I van jongere dieren is dan ook makkelijker uit te pakken naar, en re-vormt wet een hogere geluidskwaliteit. Het collageen matrix kan worden gefixeerd en gekleurd met antilichamen gericht tegen invasieve tumorcellen of stromale fibroblasten 2,10 en zijn zeer nuttig voor het testen van de werkzaamheid van geneesmiddelen die invasie 5,6 kunnen staan. Hoewel dit protocol stelt het gebruik van primaire menselijke huidfibroblasten, is het mogelijk om primaire fibroblasten uit andere weefseltypen, afhankelijk van het type weefsel dat wordt onderzocht. Het is ook mogelijk na te gaan kweken met geïmmortaliseerde fibroblasten, inclusief cellen die stabiel zijn getransfecteerd met fluorescerend eiwit conjugaten. Op deze wijze zowel stromale cellen en tumorcellen kunnen gelabeld cel-cel interacties visualiseren tijdens invasie 11.

<table border="1"><tbody><tr><th> Naam van het reagens </th><th> Vennootschap </th><th> Catalogusnummer </th><th> Opmerkingen (optioneel) </th></tr><tr><td> 10x MEM </td><td> Gibco </td><td> 21430 </td><td> - </td></tr><tr><td> NaOH </td><td> Sigma </td><td> 367176-500G </td><td> Bereid 0,22 M voorraad in water </td></tr><tr><td> FCS </td><td> PAA Laboratories </td><td> A15-101 </td><td> - </td></tr><tr><td> 35 mm schalen </td><td> Valk </td><td> 353001 </td><td> Voor stap 3.4 </td></tr><tr><td> 60 mm schalen </td><td> Valk </td><td> 353004 </td><td> Voor stap 5.2 </td></tr><tr><td> Spring pincet stompe </td><td> Samco </td><td> E003/02 </td><td> Getande, niet glad </td></tr><tr><td> 16% paraformaldehyde </td><td> Electron Microscopy Services </td><td> 15710 </td><td> Verdun tot 4% in PBS voorafgaand aan gebruik </td></tr><tr><td> Schermen voor cd-1, maat 40 mesh </td><td> Sigma </td><td> S07707-5EA </td><td> Roestvrij stalen roosters, 5 per pak </td></tr><tr><td> Dialysebuis </td><td> Medicell International </td><td> 7607 2295 </td><td> 12 tot 14 kD </td></tr><tr><td> PBS </td><td> Oxoid </td><td> BR0014G </td><td> - </td></tr><tr><td> Azijnzuur </td><td> Sigma </td><td> 242853 </td><td> - </td></tr><tr><td> 24 goed gerecht </td><td> Valk </td><td> 353047 </td><td> Voor stap 4.1 </td></tr><tr><td> Fungizone </td><td> In Vitrogen </td><td> 15290018 </td><td> - </td></tr></tbody></table>

organotypic collagen i assay: a malleable platform to assess cell behaviour in a 3-dimensional context

Celmigratie fundamenteel is voor vele aspecten van de biologie, zoals ontwikkeling, wondgenezing, de cellulaire responsen van het immuunsysteem, en metastase van tumorcellen. Migratie onderzocht op dekglaasjes om cellulaire dynamica vatbaar voor onderzoek maken met lichtmicroscopie. Echter duidelijk geworden dat vele aspecten van celmigratie afhankelijk van de beschikbaarheid van de lokale omgeving zoals de elasticiteit, eiwitsamenstelling en poriëngrootteverdeling, niet nauwgezet worden vertegenwoordigd door stijve tweedimensionale substraten zoals glas en plastic 1. Verder heeft interactie met andere celtypen, waaronder stromale fibroblasten 2 en immuuncellen 3, is aangetoond dat een cruciale rol spelen in de invasie van kankercellen. Onderzoek op moleculair niveau steeds meer aanwijzingen dat moleculaire dynamica, inclusief respons op geneesmiddelen behandeling van identieke cellen significant verschillend in vergelijking <em&gt; In vitro en in vivo 4. Idealiter zou het best om celmigratie bestuderen in de natuurlijke context in levende organismen, maar dit is niet altijd mogelijk. Intermediate weefselkweeksystemen, zoals cel afgeleide matrix, matrigel, organotypische kweek (hier beschreven) weefselexplantaten, organoids en xenografts, zijn daarom belangrijk experimentele tussenproducten. Deze systemen bij benadering bepaalde aspecten van een in vivo omgeving, maar zijn meer ontvankelijk voor experimentele manipulatie zoals het gebruik van stabiel getransfecteerde cellijnen, medicamenteuze behandeling regimes, op lange termijn en hoge-resolutie beeldvorming. Deze tussenproducten zijn vooral bruikbaar als probes om testterreinen valideren en stellen parameters die voor beeld de dynamische respons van cellen en fluorescente reporters voor onderneming imaging in vivo 5. Als zodanig kunnen zij een belangrijke rol dienen in minder noodzakelijk experimenten living dieren.

Watch this Scientific Journal Video about Organotypic Collagen I Assay: A Malleable Platform to Assess Cell Behaviour in a 3-Dimensional Context at JoVE.com

Organotypic Collagen I Assay: A Malleable Platform to Assess Cell Behaviour in a 3-Dimensional Context

Een methode wordt beschreven voor de bereiding van een 3-dimensionale matrix van collageen type I en primaire humane fibroblasten. Deze organotypische gel dient als nuttige substraat invasieve celmigratie beoordelen omdat het bootst basiskenmerken van weefsel stroma en vatbaar is voor vele vormen van microscopie.

Organotypische Collageen I Assay: een Smeedbaar Platform to Cell Gedrag beoordelen in een 3-dimensionale Context

Cell migration is fundamental to many aspects of biology, including development, wound healing, the cellular responses of the immune system, and ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

A Method for Ovarian Follicle Encapsulation and Culture in a Proteolytically Degradable 3 Dimensional System

Een methode voor ovariële follikel Encapsulation en cultuur in een proteolytisch Afbreekbare 3 dimensionale systeem

The ovarian follicle is the functional unit of the ovary that secretes sex hormones and supports oocyte maturation. In vitro  follicle techniques provide ...

Creating Two-Dimensional Patterned Substrates for Protein and Cell Confinement

Het creëren van twee-dimensionale Patterned Substraten voor eiwit en Cell opsluiting

Microcontact printing provides a rapid, highly reproducible method for the creation of well-defined patterned substrates.1  While microcontact printing ...

Cultivation of Human Neural Progenitor Cells in a 3-dimensional Self-assembling Peptide Hydrogel

Teelt van menselijke neurale progenitorcellen in een 3-dimensionale Zelf-assemblage Peptide Hydrogel

The  influence of 3-dimensional (3D) scaffolds on growth, proliferation and finally  neuronal differentiation is of great interest in order to find new ...

Self-reporting Scaffolds for 3-Dimensional Cell Culture

Zelfrapportage Stellingen voor 3-dimensionale Cultuur van de Cel

Culturing cells in 3D on appropriate scaffolds is thought to better mimic the in vivo microenvironment and increase cell-cell interactions. The resulting ...

An Improved Method for the Preparation of Type I Collagen From Skin

Een verbeterde werkwijze voor de bereiding van type I collageen van de huid

Soluble type 1 collagen (COL1) is used extensively as an adhesive substrate for cell cultures and as a cellular scaffold for regenerative applications. ...

Analysis of Cell Migration within a Three-dimensional Collagen Matrix

Analyse van cel-migratie binnen Driedimensionale Collagen Matrix

The ability to migrate is a hallmark of various cell types and plays a crucial role in several physiological processes, including&#160;embryonic ...

Planar Gradient Diffusion System to Investigate Chemotaxis in a 3D Collagen Matrix

Planar Gradient Diffusion System Chemotaxis onderzoeken in een 3D collageenmatrix

The importance of cell migration can be seen through the development of human life. When cells migrate, they generate forces and transfer these forces to ...

Minced Tissue in Compressed Collagen: A Cell-containing Biotransplant for Single-staged Reconstructive Repair

Gehakt Tissue in Compressed Collageen: A-cel met Biotransplant voor Single-geënsceneerde Reconstructieve Repair

Conventional techniques for cell expansion and transplantation of autologous cells for tissue engineering purposes can take place in specially equipped ...

Recombinant Collagen I Peptide Microcarriers for Cell Expansion and Their Potential Use As Cell Delivery System in a Bioreactor Model

Recombinante collageen ik Peptide Microcarriers voor cel expansie en hun mogelijke toepassing als cel levering systeem in een Bioreactor Model

Tissue engineering is a promising field, focused on developing solutions for the increasing demand on tissues and organs regarding transplantation ...

A Novel Tenorrhaphy Suture Technique with Tissue Engineered Collagen Graft to Repair Large Tendon Defects

Een nieuwe tenorrfaphy hechttechniek met weefselmanipulatie collageentransplantaat om grote peesdefecten te repareren

Surgical management of large tendon defects with tendon grafts is challenging, as there are a finite number of sites where donors can be readily ...