Name: organotypic collagen i assay: a malleable platform to assess cell behaviour in a 3-dimensional context
Uploaded: 2011-10-13T12:00:00
Duration: 10 min 45 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Organotypic Collagen I Assay: A Malleable Platform to Assess Cell Behaviour in a 3-Dimensional Context at JoVE.com

1. Etablering av fibroblastkulturer från huden explantat <ol><li> 4 mm stansbiopsier förvärvats från human underarm placeras i MEM kompletterat 100 enheter / ml penicillin, 100 pg / ml streptomycin och 0,25 pg / ml Fungizone. </li><li> Trimma alla subkutana fettet och finhacka biopsin i små bitar genom att gunga ett nummer 24 skalpellblad mot botten av petriskålen. </li><li> Placera vävnad uppslamning i en 25 cm 2 vävnadsodlingskolv med primära medier fibroblasttillväxtfaktorer (MEM kompletterat med 10% FCS, 100 enheter / ml penicillin, 100 pg / ml streptomycin och 25 ug / ml Fungizone) tillsattes tills ytan av kolven är täckt men flytande djup är otillräcklig för vävnad att flyta. </li><li> Efter 3 dagars inkubation vid 37 ° C i en fuktad atmosfär av 5% CO 2, tillsätt 3 ml primära medium fibroblasttillväxtfaktorer. </li><li> Efter ytterligare 3 dagar medier inkubation förändring med färska primära medium fibroblasttillväxtfaktorer, eller om celÄr nästan sammanflytande de kan delas 01:04 i nya medier. (Fungizone kan utelämnas från denna punkt och framåt). </li></ol> 2. Steg I - Beredning av kollagen I från skolästfiskar Obs: Protokoll för cirka 12-14 ungdomar (färska eller frysta) skolästfiskar <ol><li> Förbered råttsvans genom tvättning i 70% etanol och avlägsna senor enligt följande: </li><li> Avlägsna huden från råttsvans genom skärning i mitten av svansen från topp till botten med en skalpell och pealing längs svansen. </li><li> Loss sena från kärnan av den proximala regionen av svansen. </li><li> Avlägsna sena mot den distala regionen av svansen undvika höljet med tandade tång. </li><li> Extrakt 1 g senor / 250 ml 0,5 M ättiksyra genom omröring vid 4 ° C under 48 timmar. </li><li> Centrifugera extraktet (7.500 x g) under 30 minuter och kassera pelleten. </li><li> Tillsätt en motsvarande volym av 10% (vikt / volym) NaCl till supernatanten, och omrör under 30-60 min. </li><li&gt; Centrifug (10.000 x g) under 30 minuter, kasta supernatanten, och åter upplösa fällningen i 0,25 M ättiksyra vid ~ förhållande av 1:1 genom omrörning under 24 h vid 4 ° C. </li><li> Dialysera kollagenlösningen mot 6-8 byten av 6L ~ 17,5 mM ättiksyra (1 ml isättika per liter kallt vatten, förändring 2 x dagligen). </li><li> Centrifugera dialyseras kollagen vid 30.000 xg under 1,5 timmar. </li><li> Avlägsna supernatanten och placera i steril kolv. </li><li> Justera kollagen I koncentrationen till ~ 2 mg / ml med användning av 0,5 mM ättiksyra vid 4 ° C. </li></ol> 3. Steg II - Ställa in 3D-matris med inbäddade fibroblaster (möjligt att ingå avtal om 8 dagar). <ol><li> Montera blandningen med kall reagens vid 4 ° C i en pre-kyld flaska. Håll kollagen I på is. </li><li> För en T75 kolv av konfluenta primära fibroblaster (~ cell nummer 1 x 10 6) Användning: <ul><li> 25 ml råttsvanskollagen (ca konc 2mg/ml) </li><li> 3 ml 10xMINNE </li><li> 0,22 M NaOH: först, tillsätt 2 ml, sedan droppvis under omröring, tills kollagenet blir orange, </li><li> men inte rosa (oftast upp till 3 ml). Ungefärlig p H = 7,2. </li><li> Obs: Det är viktigt att säkerställa att mediet / gelén förblir neutralt eller svagt surt eftersom fibroblaster inte kommer att krympa gelén om de utsätts för även lätt alkaliska betingelser. </li></ul></li><li> Trypsinise fibroblasterna, snurra vid 400 xg under 5 minuter och avlägsna supernatanten. </li><li> Under 5 min snurra ovan: Förbered 12 x 35 rätter mm plast - normalt uppnår 12 rätter från en flaska av fibroblaster / kollagen mix. </li><li> Återsuspendera fibroblaster i 3 ml FCS och omedelbart lägga till kollagen mixen och rör om. </li><li> Platta ca 2,5 ml av kollagen / fibroblast-per skål så snabbt som möjligt. Försök att undvika bubblor och kollagen inställning. </li><li> Låt kollagen inställd vid 37 ° C i en fuktad atmosfär av 5% CO 2 i luft under 10 minuter. </li><li> Lägg 1 ml av fibroblast växere medium (DMEM + 10% FCS). </li><li> Lossa kollagen / fibroblast-matris från sidorna av skålen med hjälp av en pipett. </li><li> Nästa dag: Lägg 1 ml av media fibroblasttillväxtfaktorer (DMEM + 10% FCS). </li><li> Ändra media varannan dag. Tillåt kollagen / fibroblast matris kontrakt för cirka 8 dagar, tills de passar in i en 24-väl maträtt (kontraktion från ~ 3,5 cm till 1,5 cm i diameter, se figur 1). </li></ol> Anmärkning: kollagen koncentrationen bör justeras för att passa tillämpningen. Ju mer späda kollagenlösningen, desto snabbare kommer det att läggas ut på entreprenad av fibroblaster. Små skillnader i kontraktion kurs kommer att upplevas med olika satser av kollagen i samma koncentration. På samma sätt kommer olika fibroblastkulturer ihop kollagen geler i olika takt, och ju fler fibroblaster närvarande, desto snabbare av kontraktion. Kollagen koncentration och fibroblast densitet kan därför med justerat för att modifiera graden av kontraktion,och den slutliga densiteten för kollagengel. 4. Steg II - Plating celler av intresse ovanpå matrisen Obs: Sterilisera alla pincett och utrustning med etanol före användning. <ol><li> Med hjälp av trubbiga pincett försiktigt flytta kontrakterade matris till 24-väl maträtt. Se till att det inte lägga sig. </li><li> Bered suspension av celler av intresse vid ungefär 4 x 10 4 / ml och plattan 1ml (efter trypsinising, snurra celler att bli av trypsin) ovanpå matrisen. Faktiskt antal som behövs celler varierar beroende på cell som används typ. Cellmedium bör normalt tillväxtmedium för cellerna av intresse. </li><li> Tillåt celler växa till konfluens på toppen av matrisen, cirka 3-5 dagar. </li></ol> 5. Steg III - Överföra matrisen till ett galler för invasion (ungefär 0-21 dagar) <ol><li> Skär av rostfritt stål galler för att skapa ett stativ och autoklav före användning (se figur 2). </li><li> Placera steril nätet i6 cm skål, tillsätt odlingsmedia till en nivå ovanför gallret (ca 10,5 ml). Placera matris på gallret och försiktigt aspirera media så botten av matrisen är i kontakt med media men inte nedsänkt. Detta kallas luft / vätske gränsytan, vilket skapar en gradient som främjar invasionen. Byt medium var två dagar (se figur 2). </li><li> Levande cell kan kontextuella avbildning med fluorescerande celler avbildas i detta skede eller tidigare. Den kontrakterade eller fibrillära kollagen I kan avbildas med hjälp andra harmoniska generationen (SHG, se figur 3). Att använda multi-foton-excitation kombinerad med brett fält detektering finner vi att SHG kan avbildas minst 100 um i matrisen, medan celler som uttrycker GFP cytoplasmisk kan avbildas minst 200 um djup. </li></ol> Obs: När det gäller kvantifiering av invasion, definierar den dag då matricies placeras på gallren Dag 0. Placering på galler genererar en gradient av cellodlingsmedia som främjar invasion int<html> o matrisen. Prover kan avbildas under nästa 1 till 21 dagar (eller längre) för att bedöma biologiska processer såsom invasion, proliferation, överlevnad eller differentiering (se referenslista). 6. Steg IV - Fixering <ol><li> Tillsätt 5 ml av 4% PFA i en Falcon-rör. </li><li> Överför matrisen på en plan yta. Skär matrisen i halv med en ny ren skalpell (som du kommer att fläcka tvärsnittet), lyft matrisen med skalpell och överföring till 4% PFA, fixa över natten. </li><li> Organotypiska matriser är nu redo att färga med antikropp / fläck val (se figur 3). </li></ol> 7. Representativa resultat: <img alt="Figur 1" src="/files/ftp_upload/3089/3089fig1.jpg" /> Figur 1 Exempel på fibroblastliknande kontrakterade kollagen I. Blandning av fibroblast och råttsvanskollagen loss från petriskålen och får ihop över 6-8 dagar. Figur 2 &quot;src =&quot; / files/ftp_upload/3089/3089fig2.jpg &quot;/&gt; Figur 2 organotypisk analys progression. A schematiskt organotypisk inrättats och progression. B, Exempel på kollagen / fibroblast-matris ovanpå rostfritt stål, steril rutnät för att skapa luft / vätske-gränsytan. <img alt="Figur 3" src="/files/ftp_upload/3089/3089fig3.jpg" /> Figur 3 Tillämpningar av organotypisk analys. A, B icke-invasiva och invasiva pankreas duktal adenokarcinom (PDAC) celler invaderar över tiden med organotypisk matris. C levande hudekvivalent visar en skiktad epidermis på en fibroblast-kontrakterad kollagen dermal komponent. D invaderande C8161 melanomceller in i en fibroblast -kontrakterade kollagen dermal ekvivalent. E invasiva PDAC celler (grön) interagerar och invadera med fibroblaster (röd) inom organotypisk matrisen. F </strong&gt;, visualiseras invasiva PDAC celler (grön) interagerar med en förnedrande omgivande extracellulär matrix (lila) med multiphoton-baserad andra harmoniska generationen.

<ol>
	<li>Yamada, K. M., Cukierman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+tissue+morphogenesis+and+cancer+in+3D.">Modeling tissue morphogenesis and cancer in 3D.</a> Cell. 130, 601-610 (2007).</li><li>Edward, M., Gillan, C., Micha, D., Tammi, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumour+regulation+of+fibroblast+hyaluronan+expression:+a+mechanism+to+facilitate+tumour+growth+and+invasion.">Tumour regulation of fibroblast hyaluronan expression: a mechanism to facilitate tumour growth and invasion.</a> Carcinogenesis. 26, 1215-1223 (2005).</li><li>Patsialou, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Invasion+of+human+breast+cancer+cells+in+vivo+requires+both+paracrine+and+autocrine+loops+involving+the+colony-stimulating+factor-1+receptor.">Invasion of human breast cancer cells in vivo requires both paracrine and autocrine loops involving the colony-stimulating factor-1 receptor.</a> Cancer Res. 69, 9498-9506 (2009).</li><li>Serrels, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+study+of+E-cadherin+and+membrane+dynamics+in+living+animals:+implications+for+disease+modeling+and+drug+development.">Real-time study of E-cadherin and membrane dynamics in living animals: implications for disease modeling and drug development.</a> Cancer Res. 69, 2714-2719 (2009).</li><li>Timpson, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+Regulation+of+RhoA+Activity+during+Pancreatic+Cancer+Cell+Invasion+Driven+by+Mutant+p53.">Spatial Regulation of RhoA Activity during Pancreatic Cancer Cell Invasion Driven by Mutant p53.</a> Cancer Res. 71, 747-757 (2011).</li><li>Edward, M., Quinn, J. A., Pasonen-Seppanen, S. M., McCann, B. A., Tammi, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=4-Methylumbelliferone+inhibits+tumour+cell+growth+and+the+activation+of+stromal+hyaluronan+synthesis+by+melanoma+cell-derived+factors.">4-Methylumbelliferone inhibits tumour cell growth and the activation of stromal hyaluronan synthesis by melanoma cell-derived factors.</a> Br. J. Dermatol. 162, 1224-1232 (2010).</li><li>Fusenig, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+and+differentiation+characteristics+of+transformed+keratinocytes+from+mouse+and+human+skin+in+vitro+and+in+vivo.">Growth and differentiation characteristics of transformed keratinocytes from mouse and human skin in vitro and in vivo.</a> J. Invest. Dermatol. 81, 168s-175s (1983).</li><li>Nystrom, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+quantitative+method+to+analyse+tumour+cell+invasion+in+organotypic+culture.">Development of a quantitative method to analyse tumour cell invasion in organotypic culture.</a> J. Pathol. 205, 468-475 (2005).</li><li>Sabeh, F., Shimizu-Hirota, R., Weiss, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protease-dependent+versus+-independent+cancer+cell+invasion+programs:+three-dimensional+amoeboid+movement+revisited.">Protease-dependent versus -independent cancer cell invasion programs: three-dimensional amoeboid movement revisited.</a> J. Cell. Biol. 185, 11-19 (2009).</li><li>Amjad, S. B., Carachi, R., Edward, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Keratinocyte+regulation+of+TGF-beta+and+connective+tissue+growth+factor+expression:+a+role+in+suppression+of+scar+tissue+formation.">Keratinocyte regulation of TGF-beta and connective tissue growth factor expression: a role in suppression of scar tissue formation.</a> Wound Repair Regen. 15, 748-755 (2007).</li><li>Gaggioli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibroblast-led+collective+invasion+of+carcinoma+cells+with+differing+roles+for+RhoGTPases+in+leading+and+following+cells.">Fibroblast-led collective invasion of carcinoma cells with differing roles for RhoGTPases in leading and following cells.</a> Nat. Cell. Biol. 9, 1392-1400 (2007).</li></ol>

Vi har inget att lämna ut.

Här presenterar vi en metod för framställning av en 3-dimensionell matris lämplig för studier av invasiv cellmigration 6-8. Matrisen består av 1 kollagen typ fibriller, som lagts över en period av flera dagar genom primära humana epidermala fibroblaster. Kollagenet framställs genom syraextraktion, inte enzymatisk digerering, vilket bevarar reaktivitet vid poly-peptid ändar och främjar tvärbindning av kollagenfibriller till större aggregat vid neutralisering av buffertbetingelser 9. Detta resulterar i en rekonstituerad gel som mer nära efterliknar egenskaperna hos kollagen in vivo och har viktiga konsekvenser för de invasiva egenskaperna hos celler odlade i gelerna. Det spelar ingen roll om färska eller frysta utgångsmaterial används, men användningen av unga skolästfiskar är viktigt eftersom kollagen tvärbindning är mer labilt i yngre djur. Kollagen I från yngre djur är därför lättare att extrahera och åter utgör wed högre trohet. Kollagenmatrisen kan fixeras och färgas med antikroppar riktade mot antingen invasiva tumörceller eller stromaceller fibroblaster 2,10 och är mycket användbar för att testa effektiviteten av läkemedel som kan inhibera invasion 5,6. Även detta protokoll föreslår användningen av primära humana hudfibroblaster, är det möjligt att använda primära fibroblaster från andra vävnadstyper, beroende på vilken typ av vävnad som undersöks. Det är också möjligt att fastställa kulturerna med odödliggjorda fibroblaster, inklusive celler som har transfekterats stabilt med fluorescerande proteinkonjugat. På detta sätt både stromala och tumörceller kan märkas att visualisera cell-cell-interaktioner under invasion 11.

<table border="1"><tbody><tr><th> Namnet av reagenset </th><th> Företag </th><th> Katalognummer </th><th> Kommentarer (tillval) </th></tr><tr><td> 10x MEM </td><td> Gibco </td><td> 21.430 </td><td> - </td></tr><tr><td> NaOH </td><td> Sigma </td><td> 367.176-500G </td><td> Förbered 0,22 M lager i vatten </td></tr><tr><td> FCS </td><td> PAA Laboratories </td><td> A15-101 </td><td> - </td></tr><tr><td> 35 mm skålar </td><td> Falcon </td><td> 353.001 </td><td> För steg 3,4 </td></tr><tr><td> 60 mm skålar </td><td> Falcon </td><td> 353.004 </td><td> För steg 5,2 </td></tr><tr><td> Spring pincett trubbig </td><td> Samco </td><td> E003/02 </td><td> Tandad, inte jämn </td></tr><tr><td> 16% paraformaldehyd </td><td> Elektronmikroskopi Tjänster </td><td> 15.710 </td><td> Späd till 4% i PBS före användning </td></tr><tr><td> Skärmar för CD-1, storlek 40 mesh </td><td> Sigma </td><td> S07707-5EA </td><td> Rostfria galler, 5 per förpackning </td></tr><tr><td> Dialysrör </td><td> Medicell International </td><td> 7607 2295 </td><td> 12 till 14 kD </td></tr><tr><td> PBS </td><td> Oxoid </td><td> BR0014G </td><td> - </td></tr><tr><td> Ättiksyra </td><td> Sigma </td><td> 242.853 </td><td> - </td></tr><tr><td> 24 brunnsskål </td><td> Falcon </td><td> 353.047 </td><td> För steg 4,1 </td></tr><tr><td> Fungizon </td><td> In Vitrogen </td><td> 15290018 </td><td> - </td></tr></tbody></table>

organotypic collagen i assay: a malleable platform to assess cell behaviour in a 3-dimensional context

Cellmigration är grundläggande för många aspekter av biologin, inklusive utveckling, sårläkning, de cellulära svaren i immunsystemet, och metastas av tumörceller. Migration har studerats på täckglas för att göra cellulära dynamik mottagliga för utredning av ljusmikroskop. Emellertid har det blivit klart att många aspekter av cellmigration beror på egenskaperna hos den lokala miljön inklusive dess elasticitet, proteinkomposition, och porstorlek, som inte troget representeras av styva tvådimensionella substrat, såsom glas och plast 1. Vidare, har växelverkan med andra celltyper, inklusive stromala fibroblaster 2 och immunceller 3, visats spela en kritisk roll för att främja invasionen av cancerceller. Utredning på molekylär nivå har alltmer visat att molekyldynamik, inklusive svar på läkemedelsbehandling, av identiska celler signifikant jämfört <em&gt; In vitro och in vivo 4. Idealt skulle det vara bäst att studera cellmigration i sitt naturligt förekommande sammanhang i levande organismer, men detta är inte alltid möjligt. Mellanliggande vävnadsodlingsplattor system, såsom cellhärlett matris, Matrigel, organotypisk kultur (beskrivs här) explantat vävnad, organoids och xenografter, är därför viktiga experimentella mellanprodukter. Dessa system ungefärliga vissa aspekter av en in vivo miljö men är mer mottagliga för experimentell manipulering såsom användning av stabilt transfekterade cellinjer, läkemedel regimer behandling, långsiktiga och hög upplösning. Sådana mellanliggande system är särskilt användbara som bevis skäl att validera sonder och etablera parametrar som krävs för att bilden dynamiska svaret av celler och fluorescerande reportrar innan företaget avbildning in vivo 5. Som sådana, kan de tjäna en viktig roll för att minska behovet av experiment på living djur.

Watch this Scientific Journal Video about Organotypic Collagen I Assay: A Malleable Platform to Assess Cell Behaviour in a 3-Dimensional Context at JoVE.com

Organotypic Collagen I Assay: A Malleable Platform to Assess Cell Behaviour in a 3-Dimensional Context

Ett förfarande beskrivs för framställning av en 3-dimensionell matris bestående av kollagen typ I och primära humana fibroblaster. Denna organotypisk gel fungerar som en användbar substrat för att bedöma invasiv cellmigration eftersom det härmar grundläggande funktionerna i vävnad stroma och är mottaglig för många former av mikroskopi.

Organotypisk Kollagen I Analys: en formbar plattform att bedöma Cell Beteende i en 3-dimensionell sammanhang

Cell migration is fundamental to many aspects of biology, including development, wound healing, the cellular responses of the immune system, and ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

A Method for Ovarian Follicle Encapsulation and Culture in a Proteolytically Degradable 3 Dimensional System

En metod för äggblåsa Inkapsling och kultur i ett Proteolytically Nedbrytbara 3 dimensionellt system

The ovarian follicle is the functional unit of the ovary that secretes sex hormones and supports oocyte maturation. In vitro  follicle techniques provide ...

Creating Two-Dimensional Patterned Substrates for Protein and Cell Confinement

Att skapa två-dimensionell Mönstrad substrat för Protein och Cell inneslutning

Microcontact printing provides a rapid, highly reproducible method for the creation of well-defined patterned substrates.1  While microcontact printing ...

Cultivation of Human Neural Progenitor Cells in a 3-dimensional Self-assembling Peptide Hydrogel

Odling av mänskliga neurala stamceller i en 3-dimensionell självorganiserande Peptide Hydrogel

The  influence of 3-dimensional (3D) scaffolds on growth, proliferation and finally  neuronal differentiation is of great interest in order to find new ...

Self-reporting Scaffolds for 3-Dimensional Cell Culture

Självrapporterings Ställningar för 3-dimensionell cellodling

Culturing cells in 3D on appropriate scaffolds is thought to better mimic the in vivo microenvironment and increase cell-cell interactions. The resulting ...

An Improved Method for the Preparation of Type I Collagen From Skin

En förbättrad metod för framställning av typ I kollagen från huden

Soluble type 1 collagen (COL1) is used extensively as an adhesive substrate for cell cultures and as a cellular scaffold for regenerative applications. ...

Analysis of Cell Migration within a Three-dimensional Collagen Matrix

Analys av Cell Migration inom en tredimensionell kollagenmatris

The ability to migrate is a hallmark of various cell types and plays a crucial role in several physiological processes, including&#160;embryonic ...

Planar Gradient Diffusion System to Investigate Chemotaxis in a 3D Collagen Matrix

Planar Gradient Diffusion System för att undersöka Chemotaxis i en 3D kollagenmatris

The importance of cell migration can be seen through the development of human life. When cells migrate, they generate forces and transfer these forces to ...

Minced Tissue in Compressed Collagen: A Cell-containing Biotransplant for Single-staged Reconstructive Repair

Malet Tissue i Compressed Kollagen: en cell som innehåller BioTransplant för enkel iscensatt rekonstruktiv Repair

Conventional techniques for cell expansion and transplantation of autologous cells for tissue engineering purposes can take place in specially equipped ...

Recombinant Collagen I Peptide Microcarriers for Cell Expansion and Their Potential Use As Cell Delivery System in a Bioreactor Model

Rekombinant kollagen jag peptid Microcarriers för Cell Expansion och deras potentiella användning som Cell leverans System i en bioreaktor modell

Tissue engineering is a promising field, focused on developing solutions for the increasing demand on tissues and organs regarding transplantation ...

A Novel Tenorrhaphy Suture Technique with Tissue Engineered Collagen Graft to Repair Large Tendon Defects

En ny tenorrhaphy sutur teknik med vävnadskonstruerad kollagen graft för att reparera stora sena defekter

Surgical management of large tendon defects with tendon grafts is challenging, as there are a finite number of sites where donors can be readily ...