Name: organotypic collagen i assay: a malleable platform to assess cell behaviour in a 3-dimensional context
Uploaded: 2011-10-13T12:00:00
Duration: 10 min 45 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Organotypic Collagen I Assay: A Malleable Platform to Assess Cell Behaviour in a 3-Dimensional Context at JoVE.com

1. Cilt eksplantlarından fibroblast kültürlerinin oluşturulması <ol><li> 100 ünite / ml penisilin, 100 ug / ml streptomisin, ve 0.25 ug / ml Fungizone takviye insan önkol elde edilen 4 mm punch biyopsi MEM yerleştirilir. </li><li> Herhangi bir deri altı yağ Trim ve ince petri dibine bir dizi 24 Bistüri sallanan tarafından küçük parçalar halinde biyopsi doğrayın. </li><li> Şişenin yüzeyi kadar birincil fibroblast büyüme ortamı (MEM% 10 FCS, 100 ünite / ml penisilin, 100 ug / ml streptomisin, ve 25 ug / ml Fungizone ile desteklenmiş) ile 25 cm2 doku kültürü şişesi içinde yer doku bulamaç eklendi kapalı ama sıvı derinliği doku float için yetersizdir. </li><li> % 5 CO2 nemlendirilmiş bir atmosfer içinde 37 3 gün inkübasyondan ° C ardından, birincil fibroblast büyüme ortamı olarak 3 ml eklenir. </li><li> Taze primer fibroblast büyüme ortamı ile başka bir 3 gün inkübasyon değişimi medya takiben veya cel eğerls onlar taze ortama 01:04 bölünebileceği neredeyse konfluent vardır. (Fungizone Bu noktadan itibaren ihmal edilebilir). </li></ol> 2. Evre I - sıçan kuyrukları gelen kollajen I hazırlanması Not: Yaklaşık 12-14 ergen (taze veya dondurulmuş) sıçan kuyrukları için protokol <ol><li> % 70 etanol içinde yıkanarak sıçan kuyruğu hazırlayın ve aşağıdaki gibi tendonlar kaldırın: </li><li> Ile yukarıdan aşağıya doğru kuyruk ortasında dilimleme sıçan kuyruk deri çıkarın bir neşter ve kuyruk uzunluğu boyunca pealing. </li><li> Kuyruk proksimal bölgenin çekirdek tendonu ayırın. </li><li> Dişli forseps kullanarak kılıfı kaçınarak kuyruk distal bölgeye yönelik tendonu çıkarın. </li><li> 48 saat için 4 ° C sıcaklıkta karıştırıldı, tendonun 1 g / L 0.5 M asetik asit, 250 ml çıkarın. </li><li> 30 dakika ekstraktı (7,500 xg) santrifüjleyin ve pelet atın. </li><li> Süpernatant% 10 eşit bir hacim (ağırlık / hacim) NaCl ekleyin ve 30-60 dakika için karıştırın. </li><li 30 dakika için&gt; Santrifüj (10,000 xg), süpernatanın atmak ve 4 C&#39;de 24 saat karıştırıldı ~ 1:1 oranında, 0.25 M asetik asit içinde yeniden çözülür çökelti ° C. </li><li> 6L 6-8 değişikliklere karşı kolajen çözeltisi ~ 17.5 mM asetik asit (soğuk su litre başına 1 ml glasiyel asetik asit, değişim 2 x günlük) Dialyze. </li><li> 1.5 saat için 30.000 xg&#39;de diyaliz kollajen santrifüjleyin. </li><li> Steril şişeye süpernatant ve yer çıkarın. </li><li> ~ 2 mg / ml arasında bir konsantrasyonda 4, 0.5 mM asetik asit kullanılarak ° C&#39;ye ayarlayın kolajen </li></ol> 3. Evre II - gömülü fibroblastlar (8 gün için sözleşme için izin) ile 3D matris kurma. <ol><li> Önceden soğutulmuş bir şişe 4&#39;te Soğuk reaktifler kullanarak ° C karışımı birleştirin. Buz üzerinde kollajen I tutun. </li><li> Konfluent birincil fibroblastlar biri T75 şişesi için (~ hücre sayısı 1 x 10 6) kullanımı: <ul><li> 25 ml fare kuyruk kolajeni (yaklaşık kons 2mg/ml) </li><li> 10x 3 miMEM </li><li> 0.22 M NaOH: Birincisi, 2ml, kollajen turuncu yanana kadar düşmesi-bilge iken, karıştırarak ekleyin </li><li> fakat pembe (genellikle en fazla 3 ml) eklenmiştir. Yaklaşık p H = 7.2. </li><li> Not: Hatta hafif alkali koşullara maruz kalırsa fibroblastlar jel sözleşme olmayacak gibi orta / jel nötral veya hafif asidik kalmasını sağlamak için önemlidir. </li></ul></li><li> , Fibroblastlar Trypsinise 5 dakika boyunca 400 xg&#39;de spin ve süpernatant kaldırmak. </li><li> 5 dakika boyunca üzerinde sıkma: 12 x 35 mm plastik tabaklar hazırlayın - normal fibroblastlar / kollajen karışımı bir şişeye 12 yemekleri ulaşmak. </li><li> 3 ml FCS fibroblastların yeniden askıya ve hemen kollajen karışıma ekleyin ve karıştırın. </li><li> Levha yaklaşık 2,5 ml tabak başına kollajen / fibroblast mümkün olduğunca çabuk. Kabarcıklar ve kollajen ayarını önlemek için deneyin. </li><li> Kollajen 10 dakika için hava içinde% 5 CO2 nemlendirilmiş bir atmosfer içinde 37 ° C &#39;de geçsin. </li><li> Fibroblast 1ml büyümeye ekleTh ortamı (DMEM +% 10 FCS). </li><li> Bir pipet kullanarak yemeğin taraftan kollajen / fibroblast matriks ayırın. </li><li> Ertesi gün: fibroblast büyüme ortamı (DMEM +% 10 FCS) 1ml ekleyin. </li><li> Her gün medya değiştirin. Onlar 24-iyi çanak uyum kadar, yaklaşık 8 gün boyunca sözleşme kollajen / fibroblast matriks İzin (çapı 1.5 cm ~ 3.5 cm Daralma, Şekil 1&#39;e bakınız). </li></ol> Not: kolajen konsantrasyon uygulamasına uyacak şekilde ayarlanması gerekmektedir. Daha fazla kollajen çözüm sulandırmak, daha hızlı fibroblastlar yaptırılacaktır. Daralma oranı küçük farklılıklar, aynı konsantrasyonda kollajen farklı seri ile yaşanacaktır. Benzer şekilde, farklı fibroblast kültürleri farklı oranlarda kollajen jeller daralacağını, daha fibroblastlar sunmak, daha hızlı daralma oranı. Kollajen konsantrasyon ve fibroblast yoğunluğu dolayısıyla tarafından, daralma oranı değiştirmek için ayarlanabilir olabilirkollajen jel ve nihai yoğunluk. 4. Evre II - matris üstüne faiz Kaplama hücreleri Not: Kullanmadan önce etanol ile tüm forseps ve ekipmanları sterilize edin. <ol><li> Künt forseps kullanarak, hafifçe 24-iyi çanak sözleşmeli matris taşıyın. Bunu kat değil emin olun. </li><li> Matris üstüne yaklaşık 4 x 10 4 / ml ve plaka 1ml (tripsin kurtulmak trypsinising, spin hücreler sonra) ilgi hücrelerinin süspansiyonu hazırlayın. Ihtiyaç duyulan hücre tam sayısı kullanılan hücre tipine bağlı olarak değişebilir. Hücre ortamı ilgi hücrelerin normal büyüme ortamı olmalıdır. </li><li> Hücrelerin matrisin üst, yaklaşık 3-5 gün izdiham büyümeye izin verin. </li></ol> 5. Evre III - işgali için bir ızgara (yaklaşık 0-21 gün) matris aktarılması <ol><li> Bir tripod oluşturmak ve (Bakınız Şekil 2) kullanmadan önce otoklav paslanmaz çelik ızgaralar kesin. </li><li> Steril ızgara yerleştirin6 cm çanak, ızgara üzerinde bir seviyede (yaklaşık 10.5ml) büyüme ortamı ekleyin. Yer ızgara üzerinde matris ve matris alt ortam maddesi ile temas halinde olduğu, ancak daldırılmayan kadar yavaşça ortam aspire. Bu istila teşvik eden bir eğim oluşturur hava / sıvı arayüz olarak adlandırılır. Her orta iki gün (Bakınız Şekil 2) değiştirin. </li><li> Canlı hücre floresan hücreleri kullanarak içeriksel görüntüleme bu aşamada veya daha erken de görüntülenebilir. Sözleşmeli veya fibriler kollajen ben ikinci harmonik üretimi (SHG, Şekil 3&#39;e bakınız) kullanılarak görüntülenebilir. Biz sitoplazmik GFP ifade hücreleri en az 200 mikron derin imaged olabilir oysa SHG, matriks içine en az 100 mikron yansıması bulabilirsiniz geniş alan algılama ile birlikte çoklu foton uyarma kullanma. </li></ol> Not: istilası ölçümü ile ilgili olarak, Matris ızgara üzerine edildiği gün 0. Gün tanımlar. Izgaraların üzerine Yerleştirme işgali int teşvik hücre kültürü ortamı bir degrade üretir<html> matris o. Örnekleri sonraki 1 üzerinde yansıması olabilir - 21 gün (veya daha uzun) gibi invazyon, çoğalma, hayatta kalma ya da farklılaşma (referans listesine bakınız) gibi biyolojik süreçleri değerlendirmek için. 6. Evre IV - Fiksasyon <ol><li> Falcon bir tüp içinde% 4 PFA 5 ml ilave edilir. </li><li> Bir düz yüzey üzerine matris aktarın. Taze temiz neşter (Eğer kesit boyama olacak gibi) ile yarıda matris Kes, gece boyunca düzeltmek, neşter ve% 4 PFA transferi ile matris kaldırın. </li><li> Organotipik matrisler artık antikor ile leke / (Bakınız Şekil 3) seçim leke hazırız. </li></ol> 7. Temsilcisi sonuçları: <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/3089/3089fig1.jpg" /> Şekil fibroblast ve petri kopuk ve 6-8 gün içinde sözleşme izin sıçan kuyruk kollajen fibroblast sözleşmeli kollajen I. Karışım 1 Örnek. Şekil 2 &quot;src =&quot; / files/ftp_upload/3089/3089fig2.jpg &quot;/&gt; 2 Organotipik tahlil ilerlemesi Şekil. Organotipik kurulum ve progresyon A, şematik. B, paslanmaz çelik, hava / sıvı arayüzü oluşturmak için steril ızgara üstüne kollajen / fibroblast matris örneği. <img alt="Şekil 3" src="/files/ftp_upload/3089/3089fig3.jpg" /> Organotipik assay 3 Uygulamalar Şekil. A, B non-invaziv ve invaziv pankreatik duktal adenokarsinom (PDAC) hücreleri organotipik matris ile zamanla istila eder. C, fibroblast sözleşmeli kollajenöz dermal bileşeni katmanlı epidermis gösteren derisi eşdeğeri yaşıyor. D, C8161 melanom hücrelerinin işgalci bir fibroblast için kollajenöz Dermal eşdeğer. E organotipik matriks içinde etkileşim ve fibroblast (kırmızı) ile işgalci invaziv PDAC hücreler (yeşil)-daralmıştır. F </strong&gt;, ekstrasellüler matriks (mor) çevreleyen aşağılayıcı etkileşim invaziv PDAC hücreler (yeşil) multiphoton tabanlı ikinci harmonik üretimi kullanarak görüntülendi.

<ol>
	<li>Yamada, K. M., Cukierman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+tissue+morphogenesis+and+cancer+in+3D.">Modeling tissue morphogenesis and cancer in 3D.</a> Cell. 130, 601-610 (2007).</li><li>Edward, M., Gillan, C., Micha, D., Tammi, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumour+regulation+of+fibroblast+hyaluronan+expression:+a+mechanism+to+facilitate+tumour+growth+and+invasion.">Tumour regulation of fibroblast hyaluronan expression: a mechanism to facilitate tumour growth and invasion.</a> Carcinogenesis. 26, 1215-1223 (2005).</li><li>Patsialou, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Invasion+of+human+breast+cancer+cells+in+vivo+requires+both+paracrine+and+autocrine+loops+involving+the+colony-stimulating+factor-1+receptor.">Invasion of human breast cancer cells in vivo requires both paracrine and autocrine loops involving the colony-stimulating factor-1 receptor.</a> Cancer Res. 69, 9498-9506 (2009).</li><li>Serrels, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+study+of+E-cadherin+and+membrane+dynamics+in+living+animals:+implications+for+disease+modeling+and+drug+development.">Real-time study of E-cadherin and membrane dynamics in living animals: implications for disease modeling and drug development.</a> Cancer Res. 69, 2714-2719 (2009).</li><li>Timpson, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+Regulation+of+RhoA+Activity+during+Pancreatic+Cancer+Cell+Invasion+Driven+by+Mutant+p53.">Spatial Regulation of RhoA Activity during Pancreatic Cancer Cell Invasion Driven by Mutant p53.</a> Cancer Res. 71, 747-757 (2011).</li><li>Edward, M., Quinn, J. A., Pasonen-Seppanen, S. M., McCann, B. A., Tammi, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=4-Methylumbelliferone+inhibits+tumour+cell+growth+and+the+activation+of+stromal+hyaluronan+synthesis+by+melanoma+cell-derived+factors.">4-Methylumbelliferone inhibits tumour cell growth and the activation of stromal hyaluronan synthesis by melanoma cell-derived factors.</a> Br. J. Dermatol. 162, 1224-1232 (2010).</li><li>Fusenig, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+and+differentiation+characteristics+of+transformed+keratinocytes+from+mouse+and+human+skin+in+vitro+and+in+vivo.">Growth and differentiation characteristics of transformed keratinocytes from mouse and human skin in vitro and in vivo.</a> J. Invest. Dermatol. 81, 168s-175s (1983).</li><li>Nystrom, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+quantitative+method+to+analyse+tumour+cell+invasion+in+organotypic+culture.">Development of a quantitative method to analyse tumour cell invasion in organotypic culture.</a> J. Pathol. 205, 468-475 (2005).</li><li>Sabeh, F., Shimizu-Hirota, R., Weiss, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protease-dependent+versus+-independent+cancer+cell+invasion+programs:+three-dimensional+amoeboid+movement+revisited.">Protease-dependent versus -independent cancer cell invasion programs: three-dimensional amoeboid movement revisited.</a> J. Cell. Biol. 185, 11-19 (2009).</li><li>Amjad, S. B., Carachi, R., Edward, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Keratinocyte+regulation+of+TGF-beta+and+connective+tissue+growth+factor+expression:+a+role+in+suppression+of+scar+tissue+formation.">Keratinocyte regulation of TGF-beta and connective tissue growth factor expression: a role in suppression of scar tissue formation.</a> Wound Repair Regen. 15, 748-755 (2007).</li><li>Gaggioli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibroblast-led+collective+invasion+of+carcinoma+cells+with+differing+roles+for+RhoGTPases+in+leading+and+following+cells.">Fibroblast-led collective invasion of carcinoma cells with differing roles for RhoGTPases in leading and following cells.</a> Nat. Cell. Biol. 9, 1392-1400 (2007).</li></ol>

Biz ifşa etmek başka bir şey var.

Burada invaziv hücre göçü 6-8 çalışmalar için uygun bir 3-boyutlu matrisi üretmek için bir yöntem sunmaktır. Matris birincil insan epidermal fibroblastlar tarafından birkaç gün bir süre içinde sözleşmeli kollajen tip 1 fibrillerinin oluşmaktadır. Kollajen poli-peptit ucunda tepkime özelliklerini koruyan ve tampon koşulları 9 nötrleştirme üzerine daha büyük agregalar halinde kollajen fibrillerin çapraz bağlanma teşvik asit ekstraksiyon, değil enzimatik sindirimi ile hazırlanır. Daha yakından in vivo kolajen özelliklerini taklit eder ve jel içinde kültür hücrelerinin invazif özellikleri için önemli sonuçlara sahiptir yeniden oluşturulmuş jel elde edilir. Kollajen çapraz bağlama genç hayvanlarda daha kararsızdır çünkü taze veya dondurulmuş başlangıç ​​malzemesi kullanılıp kullanılmadığını önemli, ama ergen sıçan kuyrukları kullanmak değildir önemlidir. Kollajen Ben genç hayvanlardan elde etmek bu nedenle kolay ve w yeniden oluştururITH yüksek sadakat. Kolajen matris sabittir ve lekeli istilacı tümör hücreleri ya da stromal fibroblastlann 2,10 ya karşı yönlendirilmiş antikorlar ile ve istila 5,6 inhibe ilaçların etkinliğini test etmek için son derece yararlıdır edilebilir. Bu protokol, birincil insan derisi fibroblast kullanımını göstermektedir, ancak, bu araştırma altında doku tipine bağlı olarak, diğer doku tipi, ikinci birincil fibroblast kullanmak mümkündür. Bu stabil bir şekilde floresan protein konjugatları ile transfekte edilmiş olan hücreler de dahil olmak üzere ölümsüzleştirilmiş, fibroblastlar, kültürleri kullanılarak oluşturulması da mümkündür. Bu şekilde stromal tümör her iki hücre invazyonu 11 sırasında hücre-hücre etkileşimleri görselleştirmek için etiketlenmiş olabilir.

<table border="1"><tbody><tr><th> Reaktif Adı </th><th> Şirket </th><th> Katalog numarası </th><th> Yorumlar (isteğe bağlı) </th></tr><tr><td> 10x MEM </td><td> Gibco </td><td> 21430 </td><td> - </td></tr><tr><td> NaOH </td><td> Sigma </td><td> 367176-500G </td><td> Su içinde 0.22 M stok hazırlayın </td></tr><tr><td> FCS </td><td> PAA Laboratuvarlar </td><td> A15-101 </td><td> - </td></tr><tr><td> 35 mm yemekleri </td><td> Şahin </td><td> 353001 </td><td> Adım 3.4 için </td></tr><tr><td> 60 mm yemekleri </td><td> Şahin </td><td> 353004 </td><td> Adım 5.2 için </td></tr><tr><td> Bahar forseps künt </td><td> Samco </td><td> E003/02 </td><td> Düzgün değil, Dişli </td></tr><tr><td> % 16 paraformaldehit </td><td> Elektron Mikroskopi Hizmetleri </td><td> 15710 </td><td> Kullanımdan önce PBS içinde% 4 ile seyreltilir </td></tr><tr><td> Cd-1, boyutu 40 mesh için ekranlar </td><td> Sigma </td><td> S07707-5EA </td><td> Paslanmaz çelik ızgaralar, paket başına 5 </td></tr><tr><td> Diyaliz boru </td><td> Medicell Uluslararası </td><td> 7607 2295 </td><td> 12 - 14 kD </td></tr><tr><td> PBS </td><td> Oxoid </td><td> BR0014G </td><td> - </td></tr><tr><td> Asetik asit </td><td> Sigma </td><td> 242853 </td><td> - </td></tr><tr><td> 24 de çanak </td><td> Şahin </td><td> 353047 </td><td> Adım 4.1 için </td></tr><tr><td> Fungizone </td><td> Vitrogen In </td><td> 15290018 </td><td> - </td></tr></tbody></table>

organotypic collagen i assay: a malleable platform to assess cell behaviour in a 3-dimensional context

Hücre göçü gelişimi, yara iyileşmesi, bağışıklık sisteminin hücresel yanıtları, ve tümör hücrelerinin metastaz gibi biyolojinin birçok yönleri için esastır. Göç ışık mikroskobu ile incelenmesi için mükellef hücresel dinamikleri yapmak için cam lameller üzerine çalışılmıştır. Ancak, hücre göçü birçok açıdan sadakatle cam ve plastik 1 gibi sert iki boyutlu yüzeyler tarafından temsil edilmeyen, elastikiyet, protein kompozisyonu ve gözenek boyutu dahil yerel çevrenin özelliklerine bağlı olduğu açık hale gelmiştir. Ayrıca, stromal fibroblastlann 2 ve 3 bağışıklık hücreleri dahil olmak üzere diğer hücre tipleri ile etkileşimi kanser hücreleri istila teşvik edilmesinde önemli bir rol oynadığı gösterilmiştir. Moleküler düzeyde incelenmesi giderek karşılaştırıldığında aynı hücrelerin ilaç tedavisine yanıt dahil moleküler dinamik, önemli ölçüde farklı olduğunu göstermiştir <em&gt; In vitro ve in vivo 4. İdeal olarak, bu canlılar kendi doğal bağlamında hücre göçü incelemek için iyi olurdu, ancak bu her zaman mümkün değildir. Böyle hücre elde matrisi, Matrigel, organotipik kültürü (burada açıklanan) doku eksplant, organoids ve xenografts gibi Orta doku kültürü sistemleri, bu nedenle önemli deneysel ara vardır. Bu sistemler yaklaşık bazı in vivo ortamda yönlerini ancak böyle stably transfekte hücre hatları, ilaç tedavisi rejimleri, uzun vadeli ve yüksek çözünürlüklü görüntüleme kullanımı gibi deneysel manipülasyon için daha uygundurlar. Böyle ara sistemleri probları doğrulamak ve görüntü öncesinde vivo 5 görüntüleme üstlenen hücreleri ve floresan gazetecilere dinamik tepki için gerekli parametreleri kurmak Vaitoudden olarak özellikle yararlıdır. Bu nedenle, onlar livin üzerinde deney ihtiyacını azaltmada önemli bir rol hizmet edebilirg hayvanlar.

Watch this Scientific Journal Video about Organotypic Collagen I Assay: A Malleable Platform to Assess Cell Behaviour in a 3-Dimensional Context at JoVE.com

Organotypic Collagen I Assay: A Malleable Platform to Assess Cell Behaviour in a 3-Dimensional Context

Bir yöntem olup kollajen tip I ve primer insan fibroblast oluşan bir 3-boyutlu matrisi hazırlanması için tarif edilmektedir. Bu doku stroma temel özelliklerini taklit eder ve mikroskopi birçok formları için müsait olduğundan bu organotipik jel invaziv hücre göçü değerlendirmek için yararlı bir substrat olarak hizmet vermektedir.

Organotipik Kollajen Ben Assay: 3-Boyutlu Bağlamında Hücre Davranışı değerlendirin A Dövülebilir Platformu

Cell migration is fundamental to many aspects of biology, including development, wound healing, the cellular responses of the immune system, and ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

A Method for Ovarian Follicle Encapsulation and Culture in a Proteolytically Degradable 3 Dimensional System

Proteolitik Degradable 3 Boyutlu Sistem Yumurtalık Folikül Encapsulation ve Kültür Bir Yöntem

The ovarian follicle is the functional unit of the ovary that secretes sex hormones and supports oocyte maturation. In vitro  follicle techniques provide ...

Creating Two-Dimensional Patterned Substrates for Protein and Cell Confinement

Protein ve hücre Etrafının İki Boyutlu Desenli Yüzeyler Oluşturma

Microcontact printing provides a rapid, highly reproducible method for the creation of well-defined patterned substrates.1  While microcontact printing ...

Cultivation of Human Neural Progenitor Cells in a 3-dimensional Self-assembling Peptide Hydrogel

3 boyutlu montaj Self-Peptid Hidrojel İnsan Sinir Progenitör Hücreler Yetiştiriciliği

The  influence of 3-dimensional (3D) scaffolds on growth, proliferation and finally  neuronal differentiation is of great interest in order to find new ...

Self-reporting Scaffolds for 3-Dimensional Cell Culture

3-Boyutlu Hücre Kültürü için Self-raporlama iskeleleri

Culturing cells in 3D on appropriate scaffolds is thought to better mimic the in vivo microenvironment and increase cell-cell interactions. The resulting ...

An Improved Method for the Preparation of Type I Collagen From Skin

Cilt Tip I Kolajen hazırlanması için geliştirilmiş bir yöntem

Soluble type 1 collagen (COL1) is used extensively as an adhesive substrate for cell cultures and as a cellular scaffold for regenerative applications. ...

Analysis of Cell Migration within a Three-dimensional Collagen Matrix

Bir Üç boyutlu Kollajen Matrix içindeki Hücre Göç Analizi

The ability to migrate is a hallmark of various cell types and plays a crucial role in several physiological processes, including&#160;embryonic ...

Planar Gradient Diffusion System to Investigate Chemotaxis in a 3D Collagen Matrix

Planar Gradient Difüzyon Sistemi 3D Kollajen Matrix Kemotaksis Araştırma

The importance of cell migration can be seen through the development of human life. When cells migrate, they generate forces and transfer these forces to ...

Minced Tissue in Compressed Collagen: A Cell-containing Biotransplant for Single-staged Reconstructive Repair

Sıkıştırılmış Kolajen kıyılmış Doku: Tek aşamalı Rekonstrüktif Onarım için Cep içeren Biotransplant

Conventional techniques for cell expansion and transplantation of autologous cells for tissue engineering purposes can take place in specially equipped ...

Recombinant Collagen I Peptide Microcarriers for Cell Expansion and Their Potential Use As Cell Delivery System in a Bioreactor Model

Rekombinant kolajen peptid Microcarriers hücre genişletme ve hücre teslim sistemi bir biyoreaktör olarak potansiyel kullanım için ben Model

Tissue engineering is a promising field, focused on developing solutions for the increasing demand on tissues and organs regarding transplantation ...

A Novel Tenorrhaphy Suture Technique with Tissue Engineered Collagen Graft to Repair Large Tendon Defects

Büyük Tendon Kusurlarını Onarmak İçin Doku Mühendisliği Kollajen Greftli Yeni Bir Tenorhaphy Dikiş Tekniği

Surgical management of large tendon defects with tendon grafts is challenging, as there are a finite number of sites where donors can be readily ...