Name: hyperinsulinemic-euglycemic clamps in conscious, unrestrained mice
Uploaded: 2011-11-16T12:00:00
Duration: 11 min 10 s
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	<li>Ayala, J. E., Bracy, D. P., McGuinness, O. P., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Considerations+in+the+design+of+hyperinsulinemic-euglycemic+clamps+in+the+conscious+mouse.">Considerations in the design of hyperinsulinemic-euglycemic clamps in the conscious mouse.</a> Diabetes. 55, 390-397 (2006).</li><li>Berglund, E. D., Li, C. Y., Poffenberger, G., Ayala, J. E., Fueger, P. T., Willis, S. E., Jewell, M. M., Powers, A. C., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose+metabolism+in+vivo+in+four+commonly+used+inbred+mouse+strains.">Glucose metabolism in vivo in four commonly used inbred mouse strains.</a> Diabetes. 57, 1790-1799 (2008).</li><li>Niswender, K. D., Shiota, M., Postic, C., Cherrington, A. D., Magnuson, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+increased+glucokinase+gene+copy+number+on+glucose+homeostasis+and+hepatic+glucose+metabolism.">Effects of increased glucokinase gene copy number on glucose homeostasis and hepatic glucose metabolism.</a> J. Biol. Chem. 272, 22570-22575 (1997).</li><li>Kim, H. J., Higashimori, T., Park, S. Y., Choi, H., Dong, J., Kim, Y. J., Noh, H. L., Cho, Y. R., Cline, G., Kim, Y. B., Kim, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+interleukin-6+and+-10+on+skeletal+muscle+and+liver+insulin+action+in+vivo.">Differential effects of interleukin-6 and -10 on skeletal muscle and liver insulin action in vivo.</a> Diabetes. 53, 1060-1067 (2004).</li><li>Kim, J. K., Fillmore, J. J., Chen, Y., Yu, C., Moore, I. K., Pypaert, M., Lutz, E. P., Kako, Y., Velez-Carrasco, W., Goldberg, I. J., Breslow, J. L., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue-specific+overexpression+of+lipoprotein+lipase+causes+tissue-specific+insulin+resistance.">Tissue-specific overexpression of lipoprotein lipase causes tissue-specific insulin resistance.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 98, 7522-7527 (2001).</li><li>Kim, J. K., Fillmore, J. J., Gavrilova, O., Chao, L., Higashimori, T., Choi, H., Kim, H. J., Yu, C., Chen, Y., Qu, X., Haluzik, M., Reitman, M. L., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+rosiglitazone+on+skeletal+muscle+and+liver+insulin+resistance+in+A-ZIP/F-1+fatless+mice.">Differential effects of rosiglitazone on skeletal muscle and liver insulin resistance in A-ZIP/F-1 fatless mice.</a> Diabetes. 52, 1311-1318 (2003).</li><li>Kim, J. K., Fillmore, J. J., Sunshine, M. J., Albrecht, B., Higashimori, T., Kim, D. W., Liu, Z. X., Soos, T. J., Cline, G. W., O'Brien, W. R., Littman, D. R., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PKC-theta+knockout+mice+are+protected+from+fat-induced+insulin+resistance.">PKC-theta knockout mice are protected from fat-induced insulin resistance.</a> J. Clin. Invest. 114, 823-827 (2004).</li><li>Kim, J. K., Gavrilova, O., Chen, Y., Reitman, M. L., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+insulin+resistance+in+A-ZIP/F-1+fatless+mice.">Mechanism of insulin resistance in A-ZIP/F-1 fatless mice.</a> J. Biol. Chem. 275, 8456-8460 (2000).</li><li>Kim, J. K., Gimeno, R. E., Higashimori, T., Kim, H. J., Choi, H., Punreddy, S., Mozell, R. L., Tan, G., Stricker-Krongrad, A., Hirsch, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inactivation+of+fatty+acid+transport+protein+1+prevents+fat-induced+insulin+resistance+in+skeletal+muscle.">Inactivation of fatty acid transport protein 1 prevents fat-induced insulin resistance in skeletal muscle.</a> J. Clin. Invest. 113, 756-763 (2004).</li><li>Kim, J. K., Kim, H. J., Park, S. Y., Cederberg, A., Westergren, R., Nilsson, D., Higashimori, T., Cho, Y. R., Liu, Z. X., Dong, J., Cline, G. W., Enerback, S., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipocyte-specific+overexpression+of+FOXC2+prevents+diet-induced+increases+in+intramuscular+fatty+acyl+CoA+and+insulin+resistance.">Adipocyte-specific overexpression of FOXC2 prevents diet-induced increases in intramuscular fatty acyl CoA and insulin resistance.</a> Diabetes. 54, 1657-1663 (2005).</li><li>Kim, J. K., Kim, Y. J., Fillmore, J. J., Chen, Y., Moore, I., Lee, J., Yuan, M., Li, Z. W., Karin, M., Perret, P., Shoelson, S. E., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+fat-induced+insulin+resistance+by+salicylate.">Prevention of fat-induced insulin resistance by salicylate.</a> J. Clin. Invest. 108, 437-446 (2001).</li><li>Kim, J. K., Michael, P. r. e. v. i. s., Peroni, S. F., Mauvais-Jarvis, O. D., Neschen, F., Kahn, S., Kahn, B. B., R, C., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Redistribution+of+substrates+to+adipose+tissue+promotes+obesity+in+mice+with+selective+insulin+resistance+in+muscle.">Redistribution of substrates to adipose tissue promotes obesity in mice with selective insulin resistance in muscle.</a> J. Clin. Invest. 105, 1791-1797 (2000).</li><li>Kim, J. K., Zisman, A., Fillmore, J. J., Peroni, O. D., Kotani, K., Perret, P., Zong, H., Dong, J., Kahn, C. R., Kahn, B. B., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose+toxicity+and+the+development+of+diabetes+in+mice+with+muscle-specific+inactivation+of+GLUT4.">Glucose toxicity and the development of diabetes in mice with muscle-specific inactivation of GLUT4.</a> J. Clin. Invest. 108, 153-160 (2001).</li><li>Haluzik, M., Gavrilova, O., LeRoith, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peroxisome+proliferator-activated+receptor-alpha+deficiency+does+not+alter+insulin+sensitivity+in+mice+maintained+on+regular+or+high-fat+diet:+hyperinsulinemic-euglycemic+clamp+studies.">Peroxisome proliferator-activated receptor-alpha deficiency does not alter insulin sensitivity in mice maintained on regular or high-fat diet: hyperinsulinemic-euglycemic clamp studies.</a> Endocrinology. 145, 1662-1667 (2004).</li><li>Haluzik, M., Yakar, S., Gavrilova, O., Setser, J., Boisclair, Y., LeRoith, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+resistance+in+the+liver-specific+IGF-1+gene-deleted+mouse+is+abrogated+by+deletion+of+the+acid-labile+subunit+of+the+IGF-binding+protein-3+complex:+relative+roles+of+growth+hormone+and+IGF-1+in+insulin+resistance.">Insulin resistance in the liver-specific IGF-1 gene-deleted mouse is abrogated by deletion of the acid-labile subunit of the IGF-binding protein-3 complex: relative roles of growth hormone and IGF-1 in insulin resistance.</a> Diabetes. 52, 2483-2489 (2003).</li><li>Haluzik, M. M., Lacinova, Z., Dolinkova, M., Haluzikova, D., Housa, D., Horinek, A., Vernerova, Z., Kumstyrova, T., Haluzik, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+of+insulin+sensitivity+after+peroxisome+proliferator-activated+receptor-alpha+agonist+treatment+is+accompanied+by+paradoxical+increase+of+circulating+resistin+levels.">Improvement of insulin sensitivity after peroxisome proliferator-activated receptor-alpha agonist treatment is accompanied by paradoxical increase of circulating resistin levels.</a> Endocrinology. 147, 4517-4524 (2006).</li><li>Kim, H., Haluzik, M., Asghar, Z., Yau, D., Joseph, J. W., Fernandez, A. M., Reitman, M. L., Yakar, S., Stannard, B., Heron-Milhavet, L., Wheeler, M. B., LeRoith, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peroxisome+proliferator-activated+receptor-alpha+agonist+treatment+in+a+transgenic+model+of+type+2+diabetes+reverses+the+lipotoxic+state+and+improves+glucose+homeostasis.">Peroxisome proliferator-activated receptor-alpha agonist treatment in a transgenic model of type 2 diabetes reverses the lipotoxic state and improves glucose homeostasis.</a> Diabetes. 52, 1770-1778 (2003).</li><li>Deibert, D. C., DeFronzo, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epinephrine-induced+insulin+resistance+in+man.">Epinephrine-induced insulin resistance in man.</a> J. Clin. Invest. 65, 717-721 (1980).</li><li>Rizza, R. A., Cryer, P. E., Haymond, M. W., Gerich, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adrenergic+mechanisms+for+the+effects+of+epinephrine+on+glucose+production+and+clearance+in+man.">Adrenergic mechanisms for the effects of epinephrine on glucose production and clearance in man.</a> J. Clin. Invest. 65, 682-689 (1980).</li><li>Nunemaker, C. S., Wasserman, D. H., McGuinness, O. P., Sweet, I. R., Teague, J. C., Satin, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+secretion+in+the+conscious+mouse+is+biphasic+and+pulsatile.">Insulin secretion in the conscious mouse is biphasic and pulsatile.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 290, 523-529 (2006).</li><li>Nunemaker, C. S., Zhang, M., Wasserman, D. H., McGuinness, O. P., Powers, A. C., Bertram, R., Sherman, A., Satin, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Individual+mice+can+be+distinguished+by+the+period+of+their+islet+calcium+oscillations:+is+there+an+intrinsic+islet+period+that+is+imprinted+in+vivo.">Individual mice can be distinguished by the period of their islet calcium oscillations: is there an intrinsic islet period that is imprinted in vivo.</a> Diabetes. 54, 3517-3522 (2005).</li><li>Halter, J. B., Beard, J. C., Jr, P. o. r. t. e., D, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+function+and+stress+hyperglycemia:+plasma+glucose+and+epinephrine+interaction.">Islet function and stress hyperglycemia: plasma glucose and epinephrine interaction.</a> Am. J. Physiol. 247, 47-52 (1984).</li><li>Jacobson, L., Ansari, T., McGuinness, O. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Counterregulatory+deficits+occur+within+24+h+of+a+single+hypoglycemic+episode+in+conscious,+unrestrained,+chronically+cannulated+mice.">Counterregulatory deficits occur within 24 h of a single hypoglycemic episode in conscious, unrestrained, chronically cannulated mice.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 290, 678-684 (2006).</li><li>Jacobson, L., Ansari, T., Potts, J., McGuinness, O. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucocorticoid-deficient+corticotropin-releasing+hormone+knockout+mice+maintain+glucose+requirements+but+not+autonomic+responses+during+repeated+hypoglycemia.">Glucocorticoid-deficient corticotropin-releasing hormone knockout mice maintain glucose requirements but not autonomic responses during repeated hypoglycemia.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 291, 15-22 (2006).</li><li>Ayala, J. E., Bracy, D. P., James, F. D., Julien, B. M., Wasserman, D. H., Drucker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+glucagon-like+peptide-1+receptor+regulates+endogenous+glucose+production+and+muscle+glucose+uptake+independent+of+its+incretin+action.">The glucagon-like peptide-1 receptor regulates endogenous glucose production and muscle glucose uptake independent of its incretin action.</a> Endocrinology. 150, 1155-1164 (2009).</li><li>Fueger, P. T., Bracy, D. P., Malabanan, C. M., Pencek, R. R., Granner, D. K., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hexokinase+II+overexpression+improves+exercise-stimulated+but+not+insulin-stimulated+muscle+glucose+uptake+in+high-fat-fed+C57BL/6J+mice.">Hexokinase II overexpression improves exercise-stimulated but not insulin-stimulated muscle glucose uptake in high-fat-fed C57BL/6J mice.</a> Diabetes. 53, 306-314 (2004).</li><li>Fueger, P. T., Bracy, D. P., Malabanan, C. M., Pencek, R. R., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distributed+control+of+glucose+uptake+by+working+muscles+of+conscious+mice:+roles+of+transport+and+phosphorylation.">Distributed control of glucose uptake by working muscles of conscious mice: roles of transport and phosphorylation.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 286, 77-84 (2004).</li><li>Fueger, P. T., Heikkinen, S., Bracy, D. P., Malabanan, C. M., Pencek, R. R., Laakso, M., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hexokinase+II+partial+knockout+impairs+exercise-stimulated+glucose+uptake+in+oxidative+muscles+of+mice.">Hexokinase II partial knockout impairs exercise-stimulated glucose uptake in oxidative muscles of mice.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 285, 958-963 (2003).</li><li>Fueger, P. T., Hess, H. S., Posey, K. A., Bracy, D. P., Pencek, R. R., Charron, M. J., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+exercise-stimulated+muscle+glucose+uptake+by+GLUT4+is+dependent+on+glucose+phosphorylation+capacity+in+the+conscious+mouse.">Control of exercise-stimulated muscle glucose uptake by GLUT4 is dependent on glucose phosphorylation capacity in the conscious mouse.</a> J. Biol. Chem. , (2004).</li><li>Fueger, P. T., Li, C. Y., Ayala, J. E., Shearer, J., Bracy, D. P., Charron, M. J., Rottman, J. N., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose+kinetics+and+exercise+tolerance+in+mice+lacking+the+GLUT4+glucose+transporter.">Glucose kinetics and exercise tolerance in mice lacking the GLUT4 glucose transporter.</a> J. Physiol. 582, 801-812 (2007).</li><li>Shearer, J., Coenen, K. R., Pencek, R. R., Swift, L. L., Wasserman, D. H., Rottman, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long+chain+fatty+acid+uptake+in+vivo:+comparison+of+[125I]-BMIPP+and+[3H]-bromopalmitate.">Long chain fatty acid uptake in vivo: comparison of [125I]-BMIPP and [3H]-bromopalmitate.</a> Lipids. 43, 703-711 (2008).</li></ol>

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

인슈린 과다 - euglycemic 클램프, 또는 인슐린 클램프는 널리 생체내에서 인슐린 행동을 평가하기위한 &quot;금 표준&quot;방식으로 간주됩니다. 이 기술은 인간, 개, 쥐 및 생쥐 등 여러 수종에 적용되었습니다. 신진 대사 질환에 대한 유전자 변형 마우스 모델의 증가 감안할 때, 마우스에 사용하기 위해 기술의 소형화는 신진 대사 연구에 중요한 진보를 제공하고 있습니다. 인슐린 클램프 뒤에 개념은 간단 있지만, 실제 인슐린 클램프 실험을 수행하기위한 다양한 방법이 있습니다. 실험이 수행되는 방식은 1 얻은 결과에는 영향을 미치지 때문에 이것은 사소한 요점은 그게 아니 잖아. 여기서 우리는 밴더빌트 MMPC에 의해 사용되는 프로토콜을 제시한다. 다른 우리의 프로토콜과 그 사이의 주요 구분은 우리가 혈액 샘플을 얻기위한 동맥 카테터를 사용하는 것입니다. 이것은 obt의 더 널리 사용되는 방식과는 달리에꼬리 4, 7, 11, 12, 14-17의 팁을 severing하여 혈액 샘플을 aining. 동맥 카테 테르에서 샘플링의 장점은 실험 의식과 억제 마우스로 진행된다는 점입니다. 꼬리에서 샘플링하면 자주 규제가 필요하며 대규모 혈액 샘플이 1을 취득한 때 스트레스 인덱스를 증가시킵니다. 스트레스 호르몬은 내생 포도당 생산을 자극하고 포도당 처리 18, 19 손상, 잠재적으로 인슐린 저항의 표현형의 모양을 제공. 잘린 꼬리에서 샘플링하는 것은 때문에 스트레스를 자연의 특수 기관 동물 관리 및 사용위원회의 승인이 필요할 수 있습니다. 동맥 catheterization 절차가 꼬리를 severing의 마우스에 스트레스를 피하기 위해 개발되었습니다. 인슐린 클램프를 수행의 핵심 요소는 euglycemia을 유지할 수있는 능력입니다. 제대로 GIR이 혈당 수치에 따라 조정되어야 방법을 예측할 수있는 알고리즘이 없습니다. 수술과 마찬가지로,인슐린 클램프 실험을 실시 직원은 경험을 통해 합리적인 euglycemia을 유지하는 실력이 될 것입니다. 때문에 그들의 높은 신진 대사 속도의 마우스 연구에서 얻은 데이터는 본질적으로 시끄러운됩니다 것이 중요합니다. 이것은 시간 포도당과 GIR의 코스와 플라즈마 인슐린, 고장, R &amp; D 및 결과를 해석하는 모든 리더의 능력에 대한 중요한 RG에 대한 절대적인 가치를 포함하는 데이터의 전체 프레 젠 테이션을합니다. 마우스 (인간의 속도보다 약 5 배 이상)의 높은 포도당 플럭스 요금은 포도당 샘플링의 높은 주파수를 보증합니다. 마우스의 혈액 볼륨이 제한되어 있지만, 한 번 10 분 간격으로 최소 샘플링 주파수는 적절한 클램프가 달성되었음을 확신하는 것이 필요합니다. 그림 4와 같이 클램프 인슐린 수준은 그룹 간의 다를 수 있습니다. 이러한 다이어트의 개입, 유전자 변형 조작이나 배경 종자의 차이 같은 요인이 FAS에 영향을 미칠 수이후 클램프 인슐린 수준에 영향을 줄 수 있습니다 ting의 인슐린 수준. 클램프 인슐린 수준이 다른 때 결과를 해석하는 것은 문제가 될 수 있습니다. 이것은 실험적으로 그룹 간의 상응하는 클램프 인슐린 수준을 달성 인슐린 주입 속도를 선택하는 파일럿 실험을 수행하여 해결할 수 있습니다. 또는, somatostatin은 췌장 호르몬의 분비를 억제하는 데 사용될 수 있으며, 인슐린과 글루카곤은 실험적으로 제어 속도로 교체할 수 있습니다. 이 후자의 방식이 더 일반적으로 생쥐보다 쥐의 인슐린 클램프에서 이루어집니다. 이러한 실험적 접근이 촬영되지 않은 경우, 정상 상태 GIR은 클램프 인슐린 수준으로 정상화 될 수있는, 또는 인슐린 감도 지수 (S I)가 S 나 = GIR / (G • ΔI), 어디로 클램프 데이터로부터 얻을 수 G는 정상 상태 포도당 농도이며 ΔI는 금식과 클램프 인슐린 농도의 차이입니다. 어느 방식으로 하나의 가설이 달성 클램프 인슐린 수준이있다인슐린 감도가 선형적으로 연구되고있는 그룹에 따라 인슐린 수준과 관련되는 범위. 인슐린 저항과 인슐린에 민감한 그룹을 비교했을 때이 후자의 가설이 적용되지 않을 수도 있습니다. 이상적으로, 인슐린 투여 응답 곡선은 적절한 인슐린 주입을 선택 생성해야합니다. 그러나, 추가적인 실험을위한 요구 사항, 이것은 거의 수행하지 않습니다. 동맥 catheterization에서 제공하는 다재 다능한이 euglycemic 클램프 이상의 실험 방법으로 확장됩니다. 예를 들어, 포도당은 공복시 혈당에 상대적인 고혈당증을 유지하기 위해 가변 속도로 주입되는 hyperglycemic 클램프는, 생체내 2, 20, 21 내생 췌장 기능을 평가하는 데 사용할 수 있습니다. 이 테스트 중 첫 단계의 인슐린 분비의 측정은 혈액 샘플을 자주 수집 (매 2-5 분 IE), 꼬리의 끝에서 샘플을 취득하면 가능하지 않습니다 필요합니다. 또한,꼬리 샘플링으로 인한 고가 catecholamines은 인슐린 분비를 손상과 글루카곤의 분비 22 강화할 수 있습니다. 인슐린 클램프 프로토콜은 또한 포도당 수준 카운터 규제 대응 2, 23, 24을 평가하기 위해 상대적으로 저혈당에 빠지게 할 수 있도록 수정할 수 있습니다. 동맥 catheterization도 운동 25-30시 포도당 대사의 역학을 파악하기 위해 사용될 수 있습니다. 이것은 하나의 시간 지점에서 실시하는 기존의 접근 방식을 통해 매우 유익 사전 및 사후 행사하거나 격리 근육의 전의 생체내 인치 여기에 제시 기술은 또한뿐만 아니라 포도당뿐만 아니라 지방산 대사 31 평가하는 데 사용할 수 있습니다.

hyperinsulinemic-euglycemic clamps in conscious, unrestrained mice

제 2 형 당뇨병은 인슐린 작용의 결함이 특징입니다. 인슈린 과다 - euglycemic 클램프, 또는 인슐린 클램프는 널리 생체내에서 인슐린 행동을 평가하기위한 &quot;금 표준&quot;방식으로 간주됩니다. 인슐린 클램프 동안 hyperinsulinemia는 지속적인 인슐린 주입에 의해 이루어진다. Euglycemia는 가변 속도에 수반하는 포도당 주입을 통해 유지됩니다. 이 변수는 포도당 주입 속도 (GIR)은 실험을하는 동안 짧은 간격으로 혈당을 측정하고 이에 따라 GIR을 조정하여 결정됩니다. 향상된 인슐린 작용과 함께 마우스가 더 GIR을 필요로 GIR은 전체 - 바디 인슐린 동작을 나타내는 것입니다. 인슐린 클램프는 isotopic 2 관리를 통합할 수 있습니다 [14 C] deoxyglucose는 조직에 특정한 포도당 이해를 평가하고 [3-3 H] 글루코스 수치가 내생 포도당 모양 (고장)의 속도를 억제하는 인슐린의 능력의 표식을 평가하기 간장의 포도당 생산, 그리고 열정을전체 - 바디 포도당 실종 (RD)의 비율. 대사 질환의 유전자 마우스 모델에 사용하기 위해 인슐린 클램프의 소형화는 당뇨병 연구에 큰 발전하게되었다. 인슐린 클램프를 수행하는 방법은 실험실 사이에 다릅니다. 인슐린 클램프가 수행되는 방식은 크게 얻은 결과에 영향을 미칠 수 있습니다하는 것이 중요합니다. 우리는 의식이 생쥐 한뿐 아니라 다양한 클램프 기법 2을 사용하여 네 일반적으로 사용되는 근친 마우스 종자의 대사 반응의 평가 인슐린 클램프를 수행하기 위해 다양한 방법의 포괄적인 평가를 출판했습니다. 여기서 우리는 밴더빌트 마우스 신진 대사 Phenotyping 센터 (; www.mc.vanderbilt.edu / mmpc URL MMPC)에 의해 개발된 의식, 억제 생쥐에서 인슐린 클램프을 수행하기위한 프로토콜을 제시한다. 이것은 인슐린 클램프 동안 사용 카테터를 이온 주입을위한 방법에 대한 설명을 포함합니다. 고용 프로토콜밴더빌트 MMPC는 독특한 두 카테 테르 시스템 3을 활용합니다. 하나의 카테 테르는 약을위한 경정맥 혈관에 삽입됩니다. 두 번째 카테 테르는 마우스를 제지하거나 처리할 필요없이 혈액 샘플링을 허용 경동맥로 삽입됩니다. 이 기법은 꼬리의 절단 팁의 샘플입니다 인슐린 클램프 동안 혈액 샘플을 얻기위한 가장 일반적인 방법에 상당한 이점을 제공합니다. 이 후자의 방법과는 달리, 동맥 카테터에서 샘플링하면 마우스 1 스트레스를하지 않습니다. 우리는 또한 조직 구체적인 인슐린 작용을 평가하기 위해 isotopic 추적 시달렸다를 사용하는 방법을 설명합니다. 우리는 또한 인슐린 클램프에서 얻은 결과의 적절한 프레 젠 테이션에 대한 지침을 제공합니다.

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Hyperinsulinemic-euglycemic Clamps in Conscious, Unrestrained Mice

인슈린 과다 - euglycemic 클램프, 또는 인슐린 클램프는 인슐린 행동을 평가하기위한 황금 표준입니다<em&gt; 생체내에</em&gt;. 마우스에서 인슐린 클램프를 수행하는 방법이 설명되어 있습니다. 이것은 최소한의 스트레스와 의식, 억제 생쥐에서 수행하는 실험을 허용 동맥 catheterization을위한 방법을 포함하고 있습니다.

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