Name: wholemount immunohistochemistry for revealing complex brain topography
Uploaded: 2012-04-05T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Wholemount Immunohistochemistry for Revealing Complex Brain Topography at JoVE.com

RVS wordt ondersteund door nieuwe onderzoeker start-up gelden van Albert Einstein College of Medicine van de Yeshiva University.

1. Animal Perfusie en kleine hersenen Dissection <ol><li> Afhankelijk van het eiwit, kan perfusie essentieel voor de succesvolle kleuring 1,2. Transcardiac perfusie is een invasieve, niet-survival procedure die het juiste gebruik van verdoving nodig is. De juiste opleiding, institutionele goedkeuring en IACUC goedkeuring zijn alle noodzakelijke voordat de procedure. Het is altijd een goed idee om de instelling dierenartsen te raadplegen om hulp te krijgen bij het identificeren van experimentele eisen en het...

<ol>
	<li>Sillitoe, R. V., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-mount+Immunohistochemistry:+A+high-throughput+screen+for+patterning+defects+in+the+mouse+cerebellum.">Whole-mount Immunohistochemistry: A high-throughput screen for patterning defects in the mouse cerebellum.</a> J. Histochem. Cytochem. 50, 235-244 (2002).</li><li>Kim, S. -. H., Che, P., Chung, S. -. H., Doorn, D., Hoy, M., Larouche, M., Marzban, H., Sarna, J., Zahedi, S., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-Mount+Immunohistochemistry+of+the+Brain.">Whole-Mount Immunohistochemistry of the Brain.</a> Current Protocols in Neuroscience. , (2006).</li><li>Dent, J. A., Polson, A. G., Klymkowsky, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+whole-mount+immunocytochemical+analysis+of+the+expression+of+the+intermediate+filament+protein+vimentin+in+Xenopus.">A whole-mount immunocytochemical analysis of the expression of the intermediate filament protein vimentin in Xenopus.</a> Development. 105, 61-74 (1989).</li><li>Sillitoe, R. V., Malz, C. R., Rockland, K., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antigenic+compartmentation+of+the+primate+and+tree+shrew+cerebellum:+a+common+topography+of+zebrin+II+in+Macaca+mulatta+and+Tupaia+belangeri.">Antigenic compartmentation of the primate and tree shrew cerebellum: a common topography of zebrin II in Macaca mulatta and Tupaia belangeri.</a> J. Anat. 204, 257-269 (2004).</li><li>Ozol, K., Hayden, J. M., Oberdick, J., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transverse+zones+in+the+vermis+of+the+mouse+cerebellum.">Transverse zones in the vermis of the mouse cerebellum.</a> J. Comp. Neurol. 412, 95-111 (1999).</li><li>Apps, R., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebellar+cortical+organization:+a+one-map+hypothesis.">Cerebellar cortical organization: a one-map hypothesis.</a> Nat. Rev. Neurosci. 10, 670-681 (2009).</li><li>Reeber, S. L., Sillitoe, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterned+expression+of+a+cocaine-+and+amphetamine-regulated+transcript+peptide+reveals+complex+circuit+topography+in+the+rodent+cerebellar+cortex.">Patterned expression of a cocaine- and amphetamine-regulated transcript peptide reveals complex circuit topography in the rodent cerebellar cortex.</a> J. Comp. Neurol. 519, 1781-1796 (2011).</li><li>Sarna, J. R., Marzban, H., Watanabe, M., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complementary+stripes+of+phospholipase+Cbeta3+and+Cbeta4+expression+by+Purkinje+cell+subsets+in+the+mouse+cerebellum.">Complementary stripes of phospholipase Cbeta3 and Cbeta4 expression by Purkinje cell subsets in the mouse cerebellum.</a> J. Comp. Neurol. 496, 303-313 (2006).</li><li>Demilly, A., Reeber, S. L., Gebre, S. A., Sillitoe, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurofilament+heavy+chain+expression+reveals+a+unique+parasagittal+stripe+topography+in+the+mouse+cerebellum.">Neurofilament heavy chain expression reveals a unique parasagittal stripe topography in the mouse cerebellum.</a> Cerebellum. 10, 409-421 (2011).</li><li>Larouche, M., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+clusters+to+stripes:+the+developmental+origins+of+adult+cerebellar+compartmentation.">From clusters to stripes: the developmental origins of adult cerebellar compartmentation.</a> Cerebellum. 5, 77-88 (2006).</li><li>Marzban, H., Chung, S., Watanabe, M., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phospholipase+Cbeta4+expression+reveals+the+continuity+of+cerebellar+topography+through+development.">Phospholipase Cbeta4 expression reveals the continuity of cerebellar topography through development.</a> J. Comp. Neurol. 502, 857-871 (2007).</li><li>Blank, M. C., Grinberg, I., Aryee, E., Laliberte, C., Chizhikov, V. V., Henkelman, R. M., Millen, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+developmental+programs+are+altered+by+loss+of+Zic1+and+Zic4+to+cause+Dandy-Walker+malformation+cerebellar+pathogenesis.">Multiple developmental programs are altered by loss of Zic1 and Zic4 to cause Dandy-Walker malformation cerebellar pathogenesis.</a> Development. 138, 1207-1216 (2011).</li><li>Sawada, K., Sakata-Haga, H., Fukui, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alternating+array+of+tyrosine+hydroxylase+and+heat+shock+protein+25+immunopositive+Purkinje+cell+stripes+in+zebrin+II-defined+transverse+zone+of+the+cerebellum+of+rolling+mouse.">Alternating array of tyrosine hydroxylase and heat shock protein 25 immunopositive Purkinje cell stripes in zebrin II-defined transverse zone of the cerebellum of rolling mouse.</a> Nagoya. Brain Res. 1343, 46-53 (2010).</li><li>Sawada, K., Fukui, Y., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+distribution+of+corticotropin-releasing+factor+immunopositive+climbing+fibers+in+the+mouse+cerebellum:+Analysis+by+whole+mount+immunohistochemistry.">Spatial distribution of corticotropin-releasing factor immunopositive climbing fibers in the mouse cerebellum: Analysis by whole mount immunohistochemistry.</a> Brain Res. 1222, 106-117 (2008).</li><li>Marzban, H., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+architecture+of+the+posterior+zone+of+the+cerebellum.">On the architecture of the posterior zone of the cerebellum.</a> Cerebellum. 10, 422-434 (2011).</li><li>Pakan, J. M., Graham, D. J., Wylie, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organization+of+visual+mossy+fiber+projections+and+zebrin+expression+in+the+pigeon+vestibulocerebellum.">Organization of visual mossy fiber projections and zebrin expression in the pigeon vestibulocerebellum.</a> J. Comp. Neurol. 518, 175-198 (2010).</li><li>Iwaniuk, A. N., Marzban, H., Pakan, J. M., Watanabe, M., Hawkes, R., Wylie, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compartmentation+of+the+cerebellar+cortex+of+hummingbirds+(Aves:+Trochilidae)+revealed+by+the+expression+of+zebrin+II+and+phospholipase+C+beta+4.">Compartmentation of the cerebellar cortex of hummingbirds (Aves: Trochilidae) revealed by the expression of zebrin II and phospholipase C beta 4.</a> J. Chem. Neuroanat. 37, 55-63 (2009).</li><li>Sarna, J. R., Larouche, M., Marzban, H., Sillitoe, R. V., Rancourt, D. E., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterned+Purkinje+cell+degeneration+in+mouse+models+of+Niemann-Pick+type+C+disease.">Patterned Purkinje cell degeneration in mouse models of Niemann-Pick type C disease.</a> J. Comp. Neurol. 456, 279-291 (2003).</li><li>Sarna, J. R., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterned+Purkinje+cell+loss+in+the+ataxic+sticky+mouse.">Patterned Purkinje cell loss in the ataxic sticky mouse.</a> Eur. J. Neurosci. 34, 79-86 (2011).</li><li>El-Bizri, N., Guignabert, C., Wang, L., Cheng, A., Stankunas, K., Chang, C. P., Mishina, Y., Rabinovitch, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SM22alpha-targeted+deletion+of+bone+morphogenetic+protein+receptor+1A+in+mice+impairs+cardiac+and+vascular+development,+and+influences+organogenesis.">SM22alpha-targeted deletion of bone morphogenetic protein receptor 1A in mice impairs cardiac and vascular development, and influences organogenesis.</a> Development. 135, 2981-2991 (2008).</li><li>Mondrinos, M. J., Koutzaki, S., Lelkes, P. I., Finck, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+tissue-engineered+model+of+fetal+distal+lung+tissue.">A tissue-engineered model of fetal distal lung tissue.</a> Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 293, 639-650 (2007).</li><li>Coppola, E., Rallu, M., Richard, J., Dufour, S., Riethmacher, D., Guillemot, F., Goridis, C., Brunet, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epibranchial+ganglia+orchestrate+the+development+of+the+cranial+neurogenic+crest.">Epibranchial ganglia orchestrate the development of the cranial neurogenic crest.</a> Proc. Nat. Acad. Sci. 107, 2066-2071 (2010).</li><li>Kubilus, J. K., Linsenmayer, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+guidance+of+embryonic+corneal+innervation:+roles+of+Semaphorin3A+and+Slit2.">Developmental guidance of embryonic corneal innervation: roles of Semaphorin3A and Slit2.</a> Dev. Biol. 344, 172-184 (2010).</li><li>Reeber, S. L., Gebre, S. A., Sillitoe, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence+mapping+of+afferent+topography+in+three+dimensions.">Fluorescence mapping of afferent topography in three dimensions.</a> Brain Struct. Funct. 216, 159-169 (2011).</li><li>Davis, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-mount+immunohistochemistry.">Whole-mount immunohistochemistry.</a> Methods Enzymol. 225, 502-516 (1993).</li></ol>

We hebben de technische details die nodig zijn voor een succesvolle wholemount kleuring met behulp van een veelzijdige immunohistochemische aanpak voor het openbaren van eiwitexpressie in de ontwikkelende en volwassen hersenen. Door deze aanpak kan complexe moleculaire expressiepatronen geanalyseerd en hersenen topografie gewaardeerd zonder bewerkelijk en tijdrovend weefsel snijden procedures. Dit protocol is gebruikt om het patroon expressie van verschillende Purkinje cel eiwitten laten zie...

<table border="1"><tbody><tr><td> Materialen </td><td> Functie in protocol </td></tr><tr><td> Perfusie pomp (Fisher Scientific/13-876-2) </td><td> Zorgt voor consistente en langzame perfusie. </td></tr><tr><td> Sharp-tip Scharen (FST/14081-08) </td><td> Algemeen gebruik in perfusie en dissectie. </td></tr><tr><td> Blunt-tip tang (FST/91100-12) </td><td> Om het hart voor het inbrengen van de naald perfusie te stabiliseren. </td></tr><tr><td> Tang (FST door Dumont AA/11210-10) </td><td> Voor gebruik bij ontleding van de hersenen van de schedel en de cerebellum scheiden van de rest van de hersenen. Deze zijn essentieel omdat ze een licht afgeronde tip die helpt bij het minimaliseren schade aan de kleine hersenen tijdens de dissectie. </td></tr><tr><td> Nutator (Fisher Scientific) </td><td> Wordt gebruikt om weefsel in beweging te houden tijdens de incubatieperiode. </td></tr><tr><td> 1,5 ml buis (Sarstedt / Schroefdop Micro Tube) </td><td> Alle stappen van het zijntochemistry protocol plaats te vinden in deze microbuisjes. De afgeronde bodem zorgt ervoor dat de kleine hersenen blijft in beweging. </td></tr><tr><td> Geperforeerde lepel (FST/10370-17) </td><td> Wordt gebruikt om wholemounts te houden in de microbuisjes, terwijl voorzichtig decanteren van de gebruikte oplossing. </td></tr><tr><td> Leica MZ16 FA microscoop </td><td> Wordt gebruikt om wholemount vlekken te onderzoeken. </td></tr><tr><td> Leica DFC3000 FX-camera </td><td> Wordt gebruikt om wholemount beelden vast te leggen. </td></tr></tbody></table> Tabel 1. <table border="1"><tbody><tr><td colspan="9"> Voorbeeld agenda voor een typische wholemount experiment </td></tr><tr><td> Dag 1 </td><td colspan="4"> Dent&#39;s fix, kamertemperatuur, 8 uur </td><td colspan="4"> Dent&#39;s bleekmiddel, 4 ° C, &#39;s nachts </td></tr><tr><td> Dag 2 </td><td colspan="3"> 100% MeOH, kamertemperatuur, 2x, 30 min elk </td><td colspan="3"> 100% MeOH, Vorst / dooi, 4x, 30 min/15 min </td><td colspa<html> n = &quot;2&quot;&gt; 100% MeOH, 80 ° C een nacht </td></tr><tr><td> Dag 3 </td><td> 50% MeOH/50% PBS, kamertemperatuur, 60-90 minuten </td><td colspan="2"> 15% MeOH / 85% PBS, kamertemperatuur, 60-90 minuten </td><td colspan="2"> 100% PBS, kamertemperatuur, 60-90 minuten </td><td> 10μg/mL proteïnase K in PBS, kamertemperatuur, 2-3 min. </td><td> 100% PBS, kamertemperatuur, 3x 10 minuten elk </td><td> PMT, 4 ° C een nacht </td></tr><tr><td> Dag 4-5 </td><td colspan="8"> PMT + 1 ° antilichaam + 5% DMSO, 4 ° C, 48 uur </td></tr><tr><td> Dag 6 </td><td colspan="3"> PMT, 4 ° C, 2-3x 2-3 uur elk </td><td colspan="5"> PMT + 2 ° antilichaam + 5% DMSO, 4 ° C, 24 uur (of te beginnen versterking stappen met ABC-complex) </td></tr><tr><td> Dag 7 </td><td colspan="2"> PMT, 4 ° C, 2-3x 2-3 uur elk </td><td colspan="3"> PBT, kamertemperatuur, 2 uur </td><td colspan="3"> Incubeer in verse DAB in PBS tot een optimale kleuring is gevisualiseerd </td></tr></tbody></table>_content &quot;&gt; Tabel 2. <table border="1"><tbody><tr><td colspan="2"> Recepten (* = voor te bereiden verse elke keer) </td></tr><tr><td> PBS (fosfaatgebufferde zoutoplossing) </td><td> 0,1 M fosfaatgebufferde zoutoplossing in gedeïoniseerd water. pH 7,2 (Sigma tabletten; P4417) </td></tr><tr><td> PFA (Paraformaldehyde) </td><td> Gemaakt en in bevroren toestand bewaard als een 20% oplossing en vervolgens verdund tot 4% in PBS voor de werkende oplossing (Fisher Scientific, T353) </td></tr><tr><td> Dent&#39;s Fixatief 3 * </td><td> 4 delen methanol 1 deel dimethylsulfoxide (DMSO; Fisher Scientific, D159-4) </td></tr><tr><td> Dent&#39;s Bleach 3 * </td><td> 4 delen methanol 1 deel dimethylsulfoxide (DMSO; Fisher Scientific, D159-4) 1 deel 30% waterstofperoxide </td></tr><tr><td> Enzymatische digestie </td><td> 10 ug / ml Proteinase K (Roche Diagnostics; 03115828001) in PBS. </td></tr><tr><td> PBST </td><td> PBS bevattende: 0,1% Tween-20 (Visserij, de drier Scientific BP337, Triton kan ook worden gebruikt in plaats van Tween-20 in alle gevallen). </td></tr><tr><td> PMT 25 * </td><td> PBS bevattende: 2% magere magere melkpoeder (Anjer voorkeur) 0,1% Tween-20 (Fisher Scientific, BP337) </td></tr><tr><td> PBT 25 * </td><td> PBS bevattende: 0,2% bovine serum albumine (Sigma; B9001S) 0,1% Tween-20 (Fisher Scientific, BP337) </td></tr><tr><td> DAB * </td><td> Los een 10 mg tablet 3,3-diaminobenzidine (Sigma-Aldrich; D5905) in 40 ml PBS. Voeg 10 pi 30% waterstofperoxide reactie te starten). </td></tr><tr><td> ABC complexe oplossing </td><td> Vectastain kit (Vector Laboratories, Inc; PK-4000) </td></tr></tbody></table> Tabel 3.

wholemount immunohistochemistry for revealing complex brain topography

De herhaalde en goed begrepen cellulaire architectuur van de kleine hersenen maken het een ideaal model systeem voor het verkennen van de hersenen topografie. Onderliggende zijn relatief uniforme morfologie is een complexe serie van parasagittal domeinen van gen-en eiwitexpressie. De moleculaire compartimentering van de kleine hersenen wordt weerspiegeld door de anatomische en functionele organisatie van afferente vezels. Om ten volle bewust van de complexiteit van cerebellaire organisatie hebben we eerder een verfijnd wholemount vlekken aanpak voor hoge doorvoer analyse van de patronen gebreken in de muis cerebellum. Dit protocol beschrijft in detail de reagentia, hulpmiddelen en praktische stappen die nuttig zijn om met succes eiwit expressie patronen laten zien in de volwassen muis kleine hersenen met behulp van wholemount immunokleuring. De stappen die hier aandacht aan te tonen het nut van deze methode gebruik van de uitdrukking van zebrinII / aldolaseC als een voorbeeld van hoe de fijne topografie van de hersenen kan worden onthuld in zijnnatieve driedimensionale conformatie. Ook beschreven zijn aanpassingen aan het protocol die het mogelijk maken voor de visualisatie van de expressie van eiwitten in afferente projecties en grote cerebella voor vergelijkende studies van moleculaire topografie. Om deze toepassingen te illustreren, worden de gegevens van afferente kleuring van de rat cerebellum inbegrepen.

Watch this Scientific Journal Video about Wholemount Immunohistochemistry for Revealing Complex Brain Topography at JoVE.com

Wholemount Immunohistochemistry for Revealing Complex Brain Topography

Neurale circuits topografisch georganiseerd in functionele compartimenten specifieke moleculaire profielen. Hier bieden wij de praktische en technische stappen voor het openbaren van globaal brein topografie met behulp van een veelzijdige wholemount immunohistochemische kleuring aanpak. We zien het nut van de methode met behulp van de goed begrepen morfologie en de circuits van cerebellum.

Wholemount Immunohistochemie voor het openbaren van Complex Brain Topografie

The repeated and well-understood cellular architecture of the cerebellum make it an ideal model system for exploring brain topography. Underlying its ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

The Subventricular Zone En-face: Wholemount Staining and Ependymal Flow

De subventriculaire zone En-face: Wholemount Beitsen en ependymale Flow

The walls of the lateral ventricles contain the largest germinal region in the adult mammalian brain. The subventricular zone (SVZ) in these walls is an ...

Revealing Neural Circuit Topography in Multi-Color

Revealing Neurale Circuit Topografie in Multi-Color

Neural circuits are organized into functional topographic maps. In order to visualize complex circuit architecture we developed an approach to reliably ...

Immunohistochemical and Calcium Imaging Methods in Wholemount Rat Retina

Immunohistochemische en Calcium Imaging Methods in Wholemount Rat Retina

In this paper we describe the tools, reagents, and the practical steps that are needed for: 1) successful preparation of wholemount retinas for ...

Complete Spinal Cord Injury and Brain Dissection Protocol for Subsequent Wholemount In Situ Hybridization in Larval Sea Lamprey

Complete Spinal Cord Injury and Brain Dissection Protocol for Subsequent Wholemount In Situ Hybridization in Larval Sea Lamprey

Compleet ruggenmergletsel en Brain Dissection Protocol voor Latere Wholemount<em&gt; In Situ</em&gt; Hybridisatie in Larvale Overzeese Lamprei

After a complete spinal cord injury, sea lampreys at first are paralyzed below the level of transection. However, they recover locomotion after several ...

Primer for Immunohistochemistry on Cryosectioned Rat Brain Tissue: Example Staining for Microglia and Neurons

Primer voor Immunohistochemie op Cryosectioned Rat Brain Tissue: Voorbeeld kleuring voor Microglia en Neuronen

Immunohistochemistry is a widely used technique for detecting the presence, location, and relative abundance of antigens in situ. This introductory level ...

External Excitation of Neurons Using Electric and Magnetic Fields in One- and Two-dimensional Cultures

Externe excitatie van neuronen Met behulp van elektrische en magnetische velden in een-en twee-dimensionale culturen

A neuron will fire an action potential when its membrane potential exceeds a certain threshold. In typical activity of the brain, this occurs as a result ...

Preparation of Non-human Primate Brain Tissue for Pre-embedding Immunohistochemistry and Electron Microscopy

De bereiding van niet-menselijke primaten Brain Tissue voor Pre-embedding immunohistochemie en elektronenmicroscopie

Despite all the technological advances at the light microscopy&#160;level, electron microscopy remains the only tool in neuroscience to examine and ...

Chronic Implantation of Whole-cortical Electrocorticographic Array in the Common Marmoset

Chronische implantatie van geheel-corticale Electrocorticographic Array in de gemeenschappelijke Hapalomys

Electrocorticography (ECoG) allows the monitoring of electrical field potentials from the cerebral cortex with high spatiotemporal resolution. Recent ...

Purification of the Dendritic Filopodia-rich Fraction

Zuivering van de dendritische Filopodia-rijke Fractie

Dendritic filopodia are thin and long protrusions based on the actin filament, and they extend and retract as if searching for a target axon. When the ...

Preparation of Mouse Retinal Cryo-sections for Immunohistochemistry

Voorbereiding van de muis netvlies Cryo-profielen voor Immunohistochemistry

Preparation of high-quality mouse eye sections for immunohistochemistry (IHC) is critical for assessing the retinal structure and function and for ...