Name: wholemount immunohistochemistry for revealing complex brain topography
Uploaded: 2012-04-05T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Wholemount Immunohistochemistry for Revealing Complex Brain Topography at JoVE.com

מ&quot;א נתמך על ידי החוקר חדש הזנק כספים אלברט איינשטיין קולג &#39;לרפואה של הישיבה יוניברסיטי.

1. בעלי חיים זלוף ו Dissection המוח הקטן <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בהתאם חלבון, זלוף עשוי להיות חיוני מכתים 1,2 מוצלח. זלוף Transcardiac היא פולשנית, לא הישרדות הליך הדורש שימוש נכון של חומרי הרדמה. הכשרה נכונה, אישור מוסדי, ואישור IACUC כל הדרוש לפני שתנס...

<ol>
	<li>Sillitoe, R. V., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-mount+Immunohistochemistry:+A+high-throughput+screen+for+patterning+defects+in+the+mouse+cerebellum.">Whole-mount Immunohistochemistry: A high-throughput screen for patterning defects in the mouse cerebellum.</a> J. Histochem. Cytochem. 50, 235-244 (2002).</li><li>Kim, S. -. H., Che, P., Chung, S. -. H., Doorn, D., Hoy, M., Larouche, M., Marzban, H., Sarna, J., Zahedi, S., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-Mount+Immunohistochemistry+of+the+Brain.">Whole-Mount Immunohistochemistry of the Brain.</a> Current Protocols in Neuroscience. , (2006).</li><li>Dent, J. A., Polson, A. G., Klymkowsky, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+whole-mount+immunocytochemical+analysis+of+the+expression+of+the+intermediate+filament+protein+vimentin+in+Xenopus.">A whole-mount immunocytochemical analysis of the expression of the intermediate filament protein vimentin in Xenopus.</a> Development. 105, 61-74 (1989).</li><li>Sillitoe, R. V., Malz, C. R., Rockland, K., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antigenic+compartmentation+of+the+primate+and+tree+shrew+cerebellum:+a+common+topography+of+zebrin+II+in+Macaca+mulatta+and+Tupaia+belangeri.">Antigenic compartmentation of the primate and tree shrew cerebellum: a common topography of zebrin II in Macaca mulatta and Tupaia belangeri.</a> J. Anat. 204, 257-269 (2004).</li><li>Ozol, K., Hayden, J. M., Oberdick, J., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transverse+zones+in+the+vermis+of+the+mouse+cerebellum.">Transverse zones in the vermis of the mouse cerebellum.</a> J. Comp. Neurol. 412, 95-111 (1999).</li><li>Apps, R., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebellar+cortical+organization:+a+one-map+hypothesis.">Cerebellar cortical organization: a one-map hypothesis.</a> Nat. Rev. Neurosci. 10, 670-681 (2009).</li><li>Reeber, S. L., Sillitoe, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterned+expression+of+a+cocaine-+and+amphetamine-regulated+transcript+peptide+reveals+complex+circuit+topography+in+the+rodent+cerebellar+cortex.">Patterned expression of a cocaine- and amphetamine-regulated transcript peptide reveals complex circuit topography in the rodent cerebellar cortex.</a> J. Comp. Neurol. 519, 1781-1796 (2011).</li><li>Sarna, J. R., Marzban, H., Watanabe, M., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complementary+stripes+of+phospholipase+Cbeta3+and+Cbeta4+expression+by+Purkinje+cell+subsets+in+the+mouse+cerebellum.">Complementary stripes of phospholipase Cbeta3 and Cbeta4 expression by Purkinje cell subsets in the mouse cerebellum.</a> J. Comp. Neurol. 496, 303-313 (2006).</li><li>Demilly, A., Reeber, S. L., Gebre, S. A., Sillitoe, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurofilament+heavy+chain+expression+reveals+a+unique+parasagittal+stripe+topography+in+the+mouse+cerebellum.">Neurofilament heavy chain expression reveals a unique parasagittal stripe topography in the mouse cerebellum.</a> Cerebellum. 10, 409-421 (2011).</li><li>Larouche, M., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+clusters+to+stripes:+the+developmental+origins+of+adult+cerebellar+compartmentation.">From clusters to stripes: the developmental origins of adult cerebellar compartmentation.</a> Cerebellum. 5, 77-88 (2006).</li><li>Marzban, H., Chung, S., Watanabe, M., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phospholipase+Cbeta4+expression+reveals+the+continuity+of+cerebellar+topography+through+development.">Phospholipase Cbeta4 expression reveals the continuity of cerebellar topography through development.</a> J. Comp. Neurol. 502, 857-871 (2007).</li><li>Blank, M. C., Grinberg, I., Aryee, E., Laliberte, C., Chizhikov, V. V., Henkelman, R. M., Millen, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+developmental+programs+are+altered+by+loss+of+Zic1+and+Zic4+to+cause+Dandy-Walker+malformation+cerebellar+pathogenesis.">Multiple developmental programs are altered by loss of Zic1 and Zic4 to cause Dandy-Walker malformation cerebellar pathogenesis.</a> Development. 138, 1207-1216 (2011).</li><li>Sawada, K., Sakata-Haga, H., Fukui, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alternating+array+of+tyrosine+hydroxylase+and+heat+shock+protein+25+immunopositive+Purkinje+cell+stripes+in+zebrin+II-defined+transverse+zone+of+the+cerebellum+of+rolling+mouse.">Alternating array of tyrosine hydroxylase and heat shock protein 25 immunopositive Purkinje cell stripes in zebrin II-defined transverse zone of the cerebellum of rolling mouse.</a> Nagoya. Brain Res. 1343, 46-53 (2010).</li><li>Sawada, K., Fukui, Y., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+distribution+of+corticotropin-releasing+factor+immunopositive+climbing+fibers+in+the+mouse+cerebellum:+Analysis+by+whole+mount+immunohistochemistry.">Spatial distribution of corticotropin-releasing factor immunopositive climbing fibers in the mouse cerebellum: Analysis by whole mount immunohistochemistry.</a> Brain Res. 1222, 106-117 (2008).</li><li>Marzban, H., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+architecture+of+the+posterior+zone+of+the+cerebellum.">On the architecture of the posterior zone of the cerebellum.</a> Cerebellum. 10, 422-434 (2011).</li><li>Pakan, J. M., Graham, D. J., Wylie, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organization+of+visual+mossy+fiber+projections+and+zebrin+expression+in+the+pigeon+vestibulocerebellum.">Organization of visual mossy fiber projections and zebrin expression in the pigeon vestibulocerebellum.</a> J. Comp. Neurol. 518, 175-198 (2010).</li><li>Iwaniuk, A. N., Marzban, H., Pakan, J. M., Watanabe, M., Hawkes, R., Wylie, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compartmentation+of+the+cerebellar+cortex+of+hummingbirds+(Aves:+Trochilidae)+revealed+by+the+expression+of+zebrin+II+and+phospholipase+C+beta+4.">Compartmentation of the cerebellar cortex of hummingbirds (Aves: Trochilidae) revealed by the expression of zebrin II and phospholipase C beta 4.</a> J. Chem. Neuroanat. 37, 55-63 (2009).</li><li>Sarna, J. R., Larouche, M., Marzban, H., Sillitoe, R. V., Rancourt, D. E., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterned+Purkinje+cell+degeneration+in+mouse+models+of+Niemann-Pick+type+C+disease.">Patterned Purkinje cell degeneration in mouse models of Niemann-Pick type C disease.</a> J. Comp. Neurol. 456, 279-291 (2003).</li><li>Sarna, J. R., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterned+Purkinje+cell+loss+in+the+ataxic+sticky+mouse.">Patterned Purkinje cell loss in the ataxic sticky mouse.</a> Eur. J. Neurosci. 34, 79-86 (2011).</li><li>El-Bizri, N., Guignabert, C., Wang, L., Cheng, A., Stankunas, K., Chang, C. P., Mishina, Y., Rabinovitch, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SM22alpha-targeted+deletion+of+bone+morphogenetic+protein+receptor+1A+in+mice+impairs+cardiac+and+vascular+development,+and+influences+organogenesis.">SM22alpha-targeted deletion of bone morphogenetic protein receptor 1A in mice impairs cardiac and vascular development, and influences organogenesis.</a> Development. 135, 2981-2991 (2008).</li><li>Mondrinos, M. J., Koutzaki, S., Lelkes, P. I., Finck, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+tissue-engineered+model+of+fetal+distal+lung+tissue.">A tissue-engineered model of fetal distal lung tissue.</a> Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 293, 639-650 (2007).</li><li>Coppola, E., Rallu, M., Richard, J., Dufour, S., Riethmacher, D., Guillemot, F., Goridis, C., Brunet, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epibranchial+ganglia+orchestrate+the+development+of+the+cranial+neurogenic+crest.">Epibranchial ganglia orchestrate the development of the cranial neurogenic crest.</a> Proc. Nat. Acad. Sci. 107, 2066-2071 (2010).</li><li>Kubilus, J. K., Linsenmayer, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+guidance+of+embryonic+corneal+innervation:+roles+of+Semaphorin3A+and+Slit2.">Developmental guidance of embryonic corneal innervation: roles of Semaphorin3A and Slit2.</a> Dev. Biol. 344, 172-184 (2010).</li><li>Reeber, S. L., Gebre, S. A., Sillitoe, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence+mapping+of+afferent+topography+in+three+dimensions.">Fluorescence mapping of afferent topography in three dimensions.</a> Brain Struct. Funct. 216, 159-169 (2011).</li><li>Davis, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-mount+immunohistochemistry.">Whole-mount immunohistochemistry.</a> Methods Enzymol. 225, 502-516 (1993).</li></ol>

תיארנו את הפרטים הטכניים הדרושים מכתים wholemount מוצלח באמצעות גישה immunohistochemical תכליתי עבור ביטוי חושפני חלבון במוח המתפתח ומבוגרים. על ידי שימוש בגישה זו, מורכבים דפוסי הביטוי מולקולרית ניתן לנתח והטופוגרפיה המוח מוערך ללא צורך מייגעים זמן רב נהלים חתך רקמות. <p class="jove...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> חומרים </td><td> פונקציה בפרוטוקול </td></tr><tr><td> זלוף המשאבה (פישר Scientific/13-876-2) </td><td> מאפשר טפטוף עקבי ואיטי. </td></tr><tr><td> חד עצה מספריים (FST/14081-08) </td><td> שימוש כללי זלוף ו לנתיחה. </td></tr><tr><td> בלאנט, עצה מלקחיים (FST/91100-12) </td><td> כדי לייצב את הלב על החדרת המחט זלוף. </td></tr><tr><td> מלקחיים (FST ידי דומון AA/11210-10) </td><td> לשימוש במהלך דיסקציה של המוח מהגולגולת כדי להפריד את המוח הקטן משאר המוח. אלה הם חיוניים, כי יש להם קצה מעוגל מעט, המסייע לצמצם פגיעה במוח הקטן במהלך לנתיחה. </td></tr><tr><td> Nutator (פישר סיינטיפיק) </td><td> משמש כדי לשמור על רקמת בתנועה בתקופות הדגירה. </td></tr><tr><td> 1.5 מ&quot;ל צינור (Sarstedt / בורג שווי מיקרו Tube) </td><td> כל הצעדים של שלוtochemistry פרוטוקול להתקיים microtubes אלה. תחתית מעוגלת מבטיח כי המוח הקטן נשאר בתנועה. </td></tr><tr><td> כף מחוררת (FST/10370-17) </td><td> נהג להחזיק wholemounts ב microtubes תוך בעדינות decanting את הפתרון בילו. </td></tr><tr><td> לייקה MZ16 מיקרוסקופ FA </td><td> נהג לבחון מכתים wholemount. </td></tr><tr><td> לייקה DFC3000 FX המצלמה </td><td> נהג ללכוד תמונות wholemount. </td></tr></tbody></table> טבלה 1. <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td colspan="9"> למשל לוח שנה לניסוי wholemount טיפוסי </td></tr><tr><td> יום 1 </td><td colspan="4"> דנט של תיקון, בטמפרטורת החדר, 8 שעות </td><td colspan="4"> דנט של אקונומיקה, 4 ° C, בן לילה </td></tr><tr><td> יום 2 </td><td colspan="3"> 100% MeOH, בטמפרטורת החדר, 2x, 30 דק &#39;כל אחד </td><td colspan="3"> 100 MeOH%, פריז / הפשרה, 4x, 30 דקות min/15 </td><td colspa<html> n = &quot;2&quot;&gt; MeOH 100%, -80 ° C, בן לילה </td></tr><tr><td> יום 3 </td><td> 50% MeOH/50% PBS, בטמפרטורת החדר, 60-90 דקות </td><td colspan="2"> 15% MeOH / PBS 85%, בטמפרטורת החדר, 60-90 דקות </td><td colspan="2"> 100% PBS, בטמפרטורת החדר, 60-90 דקות </td><td> 10μg/mL proteinase K ב PBS, בטמפרטורת החדר, 2-3 דקות </td><td> 100% PBS, בטמפרטורת החדר, 3x, 10 דק &#39;כל אחד </td><td> PMT, 4 ° C, בן לילה </td></tr><tr><td> יום 4-5 </td><td colspan="8"> PMT + 1 ° נוגדנים + 5% DMSO, 4 ° C, 48 שעות </td></tr><tr><td> יום 6 </td><td colspan="3"> PMT, 4 מעלות צלזיוס, 2-3X, 2-3 שעות כל אחד </td><td colspan="5"> PMT + 2 ° נוגדנים + 5% DMSO, 4 ° C, 24 שעות (או להתחיל צעדים הגברה עם ABC מורכבים) </td></tr><tr><td> יום 7 </td><td colspan="2"> PMT, 4 מעלות צלזיוס, 2-3X, 2-3 שעות כל אחד </td><td colspan="3"> PBT, בטמפרטורת החדר, 2 שעות </td><td colspan="3"> דגירה ב DAB טרי PBS עד מכתים האופטימלי הוא דמיינו </td></tr></tbody></table>_content &quot;&gt; לוח 2. <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td colspan="2"> מתכונים (* = להכין טרי בכל פעם) </td></tr><tr><td> PBS (פוספט שנאגרו מלוחים) </td><td> 0.1M פוספט שנאגרו מלוחים במים deionized. ה-pH 7.2 (טבליות סיגמא: P4417) </td></tr><tr><td> PFA (Paraformaldehyde) </td><td> עשה קפוא מאוחסנים כפתרון 20% ולאחר מכן מדולל ל -4% ב PBS לפתרון העבודה (פישר סיינטיפיק, T353) </td></tr><tr><td> דנט של * מקבע 3 </td><td> 4 חלקים מתנול 1 dimethylsulfoxide חלק (DMSO, פישר סיינטיפיק, D159-4) </td></tr><tr><td> דנט של בליץ 3 * </td><td> 4 חלקים מתנול 1 dimethylsulfoxide חלק (DMSO, פישר סיינטיפיק, D159-4) 1 30% מי חמצן חלק </td></tr><tr><td> עיכול אנזימתי </td><td> 10 מיקרוגרם / מ&quot;ל ​​של proteinase K (Roche Diagnostics, 03115828001) ב PBS. </td></tr><tr><td> PBST </td><td> PBS המכיל: 0.1% tween-20 (Fisheמחקר מדעי, BP337, טריטון יכול לשמש גם במקום Tween-20 בכל המקרים). </td></tr><tr><td> PMT 25 * </td><td> PBS המכיל: 2% שומן אבקת חלב רזה (הציפורנים העדיף) 0.1% tween-20 (פישר סיינטיפיק; BP337) </td></tr><tr><td> PBT 25 * </td><td> PBS המכיל: 0.2% (Sigma, B9001S) אלבומין בסרום שור 0.1% tween-20 (פישר סיינטיפיק; BP337) </td></tr><tr><td> DAB * </td><td> ממיסים 1 ל -10 מ&quot;ג של 3,3-diaminobenzidine (Sigma-Aldrich, D5905) ב 40 מ&quot;ל של PBS. הוסף 10 μl של מי חמצן 30% ליזום תגובה). </td></tr><tr><td> ABC קומפלקס פתרון </td><td> Vectastain KIT (וקטור Laboratories, Inc, PK-4000) </td></tr></tbody></table> לוח 3.

wholemount immunohistochemistry for revealing complex brain topography

ארכיטקטורת הסלולר חזר היטב הבין של המוח הקטן לעשות את זה במערכת מודל אידיאלי לחקר הטופוגרפיה המוח. בבסיס cytoarchitecture אחידה יחסית הוא מערך מורכב של תחומים parasagittal של גנים ביטוי החלבון. מידור המולקולרי של המוח הקטן ניצבת ארגון אנטומי ופונקציונלי של סיבים מביא. כדי להעריך במלואה את המורכבות של הארגון cerebellar מיקדנו בעבר הגישה מכתים wholemount לניתוח קצב העברת נתונים גבוה של מומים דפוסים במוח הקטן העכבר. פרוטוקול זה מתאר בפירוט את ריאגנטים, כלים וצעדים מעשיים מועילים בהצלחה לחשוף דפוסי ביטוי חלבונים במוח הקטן העכבר למבוגרים באמצעות immunostaining wholemount. הצעדים מודגשת כאן להדגים את התועלת של שיטה זו באמצעות ביטוי zebrinII / aldolaseC כדוגמה כיצד הטופוגרפיה קנס של המוח יכול להתגלות שלהקונפורמציה יליד תלת מימדי. מתואר גם הם עיבודים לפרוטוקול המאפשרים הדמיה של ביטוי החלבון תחזיות מביא ו cerebella גדול של מחקרים השוואתיים של הטופוגרפיה מולקולרית. כדי להמחיש יישומים אלה, נתוני מכתים מביא של המוח הקטן עכברוש כלולים.

Watch this Scientific Journal Video about Wholemount Immunohistochemistry for Revealing Complex Brain Topography at JoVE.com

Wholemount Immunohistochemistry for Revealing Complex Brain Topography

מעגלים עצביים מאורגנים מבחינה טופוגרפית עם פרופילים מולקולריים ספציפיים לתאים פונקציונליים. כאן, אנו מספקים את הצעדים המעשיים והטכניים של חשיפת הטופוגרפיה המוח העולמי באמצעות גישה צדדי wholemount מכתים immunohistochemical. אנו להדגים את התועלת של השיטה באמצעות cytoarchitecture מבינים היטב ואת המעגלים של המוח הקטן.

אימונוהיסטוכימיה Wholemount על טופוגרפיה חושפני המוח קומפלקס

The repeated and well-understood cellular architecture of the cerebellum make it an ideal model system for exploring brain topography. Underlying its ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

The Subventricular Zone En-face: Wholemount Staining and Ependymal Flow

אזור Subventricular En פנים: מכתים Wholemount ושפל Ependymal

The walls of the lateral ventricles contain the largest germinal region in the adult mammalian brain. The subventricular zone (SVZ) in these walls is an ...

Revealing Neural Circuit Topography in Multi-Color

חשיפת טופוגרפיה מעגלים עצביים Multi-Color

Neural circuits are organized into functional topographic maps. In order to visualize complex circuit architecture we developed an approach to reliably ...

Immunohistochemical and Calcium Imaging Methods in Wholemount Rat Retina

שיטות הדמיה אימונוהיסטוכימיים וסידן בWholemount עכברוש הרשתית

In this paper we describe the tools, reagents, and the practical steps that are needed for: 1) successful preparation of wholemount retinas for ...

Complete Spinal Cord Injury and Brain Dissection Protocol for Subsequent Wholemount In Situ Hybridization in Larval Sea Lamprey

Complete Spinal Cord Injury and Brain Dissection Protocol for Subsequent Wholemount In Situ Hybridization in Larval Sea Lamprey

חוט השדרה מלא פגיעה ומוח Dissection פרוטוקול Wholemount לאחר<em&gt; באתר</em&gt; הכלאה בזחל ים צמד ים

After a complete spinal cord injury, sea lampreys at first are paralyzed below the level of transection. However, they recover locomotion after several ...

Primer for Immunohistochemistry on Cryosectioned Rat Brain Tissue: Example Staining for Microglia and Neurons

פריימר לאימונוהיסטוכימיה על רקמות Cryosectioned מוח חולדה: דוגמא להכתמת Microglia ונוירונים

Immunohistochemistry is a widely used technique for detecting the presence, location, and relative abundance of antigens in situ. This introductory level ...

External Excitation of Neurons Using Electric and Magnetic Fields in One- and Two-dimensional Cultures

עירור החיצוני של הנוירונים באמצעות שדות חשמליים ומגנטיים ב אחד&quot; ותרבויות דו ממדים

A neuron will fire an action potential when its membrane potential exceeds a certain threshold. In typical activity of the brain, this occurs as a result ...

Preparation of Non-human Primate Brain Tissue for Pre-embedding Immunohistochemistry and Electron Microscopy

הכנה של רקמת מוח הפרימאטים לא-אנושית עבור טרום הטבעת אימונוהיסטוכימיה ו מיקרוסקופי אלקטרונים

Despite all the technological advances at the light microscopy&#160;level, electron microscopy remains the only tool in neuroscience to examine and ...

Chronic Implantation of Whole-cortical Electrocorticographic Array in the Common Marmoset

השרשה כרונית של מערך שלם-קורטיקליים Electrocorticographic ב המרמוסט נפוצות

Electrocorticography (ECoG) allows the monitoring of electrical field potentials from the cerebral cortex with high spatiotemporal resolution. Recent ...

Purification of the Dendritic Filopodia-rich Fraction

טיהור של הדנדריטים הדנדריפיאה-חלק עשיר

Dendritic filopodia are thin and long protrusions based on the actin filament, and they extend and retract as if searching for a target axon. When the ...

Preparation of Mouse Retinal Cryo-sections for Immunohistochemistry

הכנת שאיפה של העכבר רשתית-סעיפים עבור אימונוהיסטוכימיה

Preparation of high-quality mouse eye sections for immunohistochemistry (IHC) is critical for assessing the retinal structure and function and for ...