Name: wholemount immunohistochemistry for revealing complex brain topography
Uploaded: 2012-04-05T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Wholemount Immunohistochemistry for Revealing Complex Brain Topography at JoVE.com

RVS Yeshiva Üniversitesi Albert Einstein Tıp Koleji start-up fonları yeni araştırmacı tarafından desteklenmektedir.

1. Hayvan Perfüzyon ve Beyincik Diseksiyon <ol><li> Protein bağlı olarak, başarılı bir boyama 1,2 perfüzyon için gerekli olabilir. Transcardiac perfüzyon anesteziklerin doğru kullanımı gerektiren bir invaziv olmayan, hayatta kalma işlemdir. Doğru eğitim, kurumsal onayı ve IACUC onayı tüm prosedürü başlamadan önce gereklidir. Her zaman deneysel gereksinimleri belirlemek ve doğru eğitim edinme konusunda yardım almak için kurumun veteriner danışmak iyi bir fikirdir. İşlem öncesi,...

<ol>
	<li>Sillitoe, R. V., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-mount+Immunohistochemistry:+A+high-throughput+screen+for+patterning+defects+in+the+mouse+cerebellum.">Whole-mount Immunohistochemistry: A high-throughput screen for patterning defects in the mouse cerebellum.</a> J. Histochem. Cytochem. 50, 235-244 (2002).</li><li>Kim, S. -. H., Che, P., Chung, S. -. H., Doorn, D., Hoy, M., Larouche, M., Marzban, H., Sarna, J., Zahedi, S., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-Mount+Immunohistochemistry+of+the+Brain.">Whole-Mount Immunohistochemistry of the Brain.</a> Current Protocols in Neuroscience. , (2006).</li><li>Dent, J. A., Polson, A. G., Klymkowsky, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+whole-mount+immunocytochemical+analysis+of+the+expression+of+the+intermediate+filament+protein+vimentin+in+Xenopus.">A whole-mount immunocytochemical analysis of the expression of the intermediate filament protein vimentin in Xenopus.</a> Development. 105, 61-74 (1989).</li><li>Sillitoe, R. V., Malz, C. R., Rockland, K., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antigenic+compartmentation+of+the+primate+and+tree+shrew+cerebellum:+a+common+topography+of+zebrin+II+in+Macaca+mulatta+and+Tupaia+belangeri.">Antigenic compartmentation of the primate and tree shrew cerebellum: a common topography of zebrin II in Macaca mulatta and Tupaia belangeri.</a> J. Anat. 204, 257-269 (2004).</li><li>Ozol, K., Hayden, J. M., Oberdick, J., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transverse+zones+in+the+vermis+of+the+mouse+cerebellum.">Transverse zones in the vermis of the mouse cerebellum.</a> J. Comp. Neurol. 412, 95-111 (1999).</li><li>Apps, R., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebellar+cortical+organization:+a+one-map+hypothesis.">Cerebellar cortical organization: a one-map hypothesis.</a> Nat. Rev. Neurosci. 10, 670-681 (2009).</li><li>Reeber, S. L., Sillitoe, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterned+expression+of+a+cocaine-+and+amphetamine-regulated+transcript+peptide+reveals+complex+circuit+topography+in+the+rodent+cerebellar+cortex.">Patterned expression of a cocaine- and amphetamine-regulated transcript peptide reveals complex circuit topography in the rodent cerebellar cortex.</a> J. Comp. Neurol. 519, 1781-1796 (2011).</li><li>Sarna, J. R., Marzban, H., Watanabe, M., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complementary+stripes+of+phospholipase+Cbeta3+and+Cbeta4+expression+by+Purkinje+cell+subsets+in+the+mouse+cerebellum.">Complementary stripes of phospholipase Cbeta3 and Cbeta4 expression by Purkinje cell subsets in the mouse cerebellum.</a> J. Comp. Neurol. 496, 303-313 (2006).</li><li>Demilly, A., Reeber, S. L., Gebre, S. A., Sillitoe, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurofilament+heavy+chain+expression+reveals+a+unique+parasagittal+stripe+topography+in+the+mouse+cerebellum.">Neurofilament heavy chain expression reveals a unique parasagittal stripe topography in the mouse cerebellum.</a> Cerebellum. 10, 409-421 (2011).</li><li>Larouche, M., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+clusters+to+stripes:+the+developmental+origins+of+adult+cerebellar+compartmentation.">From clusters to stripes: the developmental origins of adult cerebellar compartmentation.</a> Cerebellum. 5, 77-88 (2006).</li><li>Marzban, H., Chung, S., Watanabe, M., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phospholipase+Cbeta4+expression+reveals+the+continuity+of+cerebellar+topography+through+development.">Phospholipase Cbeta4 expression reveals the continuity of cerebellar topography through development.</a> J. Comp. Neurol. 502, 857-871 (2007).</li><li>Blank, M. C., Grinberg, I., Aryee, E., Laliberte, C., Chizhikov, V. V., Henkelman, R. M., Millen, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+developmental+programs+are+altered+by+loss+of+Zic1+and+Zic4+to+cause+Dandy-Walker+malformation+cerebellar+pathogenesis.">Multiple developmental programs are altered by loss of Zic1 and Zic4 to cause Dandy-Walker malformation cerebellar pathogenesis.</a> Development. 138, 1207-1216 (2011).</li><li>Sawada, K., Sakata-Haga, H., Fukui, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alternating+array+of+tyrosine+hydroxylase+and+heat+shock+protein+25+immunopositive+Purkinje+cell+stripes+in+zebrin+II-defined+transverse+zone+of+the+cerebellum+of+rolling+mouse.">Alternating array of tyrosine hydroxylase and heat shock protein 25 immunopositive Purkinje cell stripes in zebrin II-defined transverse zone of the cerebellum of rolling mouse.</a> Nagoya. Brain Res. 1343, 46-53 (2010).</li><li>Sawada, K., Fukui, Y., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+distribution+of+corticotropin-releasing+factor+immunopositive+climbing+fibers+in+the+mouse+cerebellum:+Analysis+by+whole+mount+immunohistochemistry.">Spatial distribution of corticotropin-releasing factor immunopositive climbing fibers in the mouse cerebellum: Analysis by whole mount immunohistochemistry.</a> Brain Res. 1222, 106-117 (2008).</li><li>Marzban, H., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+architecture+of+the+posterior+zone+of+the+cerebellum.">On the architecture of the posterior zone of the cerebellum.</a> Cerebellum. 10, 422-434 (2011).</li><li>Pakan, J. M., Graham, D. J., Wylie, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organization+of+visual+mossy+fiber+projections+and+zebrin+expression+in+the+pigeon+vestibulocerebellum.">Organization of visual mossy fiber projections and zebrin expression in the pigeon vestibulocerebellum.</a> J. Comp. Neurol. 518, 175-198 (2010).</li><li>Iwaniuk, A. N., Marzban, H., Pakan, J. M., Watanabe, M., Hawkes, R., Wylie, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compartmentation+of+the+cerebellar+cortex+of+hummingbirds+(Aves:+Trochilidae)+revealed+by+the+expression+of+zebrin+II+and+phospholipase+C+beta+4.">Compartmentation of the cerebellar cortex of hummingbirds (Aves: Trochilidae) revealed by the expression of zebrin II and phospholipase C beta 4.</a> J. Chem. Neuroanat. 37, 55-63 (2009).</li><li>Sarna, J. R., Larouche, M., Marzban, H., Sillitoe, R. V., Rancourt, D. E., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterned+Purkinje+cell+degeneration+in+mouse+models+of+Niemann-Pick+type+C+disease.">Patterned Purkinje cell degeneration in mouse models of Niemann-Pick type C disease.</a> J. Comp. Neurol. 456, 279-291 (2003).</li><li>Sarna, J. R., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterned+Purkinje+cell+loss+in+the+ataxic+sticky+mouse.">Patterned Purkinje cell loss in the ataxic sticky mouse.</a> Eur. J. Neurosci. 34, 79-86 (2011).</li><li>El-Bizri, N., Guignabert, C., Wang, L., Cheng, A., Stankunas, K., Chang, C. P., Mishina, Y., Rabinovitch, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SM22alpha-targeted+deletion+of+bone+morphogenetic+protein+receptor+1A+in+mice+impairs+cardiac+and+vascular+development,+and+influences+organogenesis.">SM22alpha-targeted deletion of bone morphogenetic protein receptor 1A in mice impairs cardiac and vascular development, and influences organogenesis.</a> Development. 135, 2981-2991 (2008).</li><li>Mondrinos, M. J., Koutzaki, S., Lelkes, P. I., Finck, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+tissue-engineered+model+of+fetal+distal+lung+tissue.">A tissue-engineered model of fetal distal lung tissue.</a> Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 293, 639-650 (2007).</li><li>Coppola, E., Rallu, M., Richard, J., Dufour, S., Riethmacher, D., Guillemot, F., Goridis, C., Brunet, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epibranchial+ganglia+orchestrate+the+development+of+the+cranial+neurogenic+crest.">Epibranchial ganglia orchestrate the development of the cranial neurogenic crest.</a> Proc. Nat. Acad. Sci. 107, 2066-2071 (2010).</li><li>Kubilus, J. K., Linsenmayer, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+guidance+of+embryonic+corneal+innervation:+roles+of+Semaphorin3A+and+Slit2.">Developmental guidance of embryonic corneal innervation: roles of Semaphorin3A and Slit2.</a> Dev. Biol. 344, 172-184 (2010).</li><li>Reeber, S. L., Gebre, S. A., Sillitoe, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence+mapping+of+afferent+topography+in+three+dimensions.">Fluorescence mapping of afferent topography in three dimensions.</a> Brain Struct. Funct. 216, 159-169 (2011).</li><li>Davis, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-mount+immunohistochemistry.">Whole-mount immunohistochemistry.</a> Methods Enzymol. 225, 502-516 (1993).</li></ol>

Biz gelişmekte olan ve yetişkin beyninde açığa protein ekspresyonu için çok yönlü bir immunohistokimyasal yaklaşımı kullanarak başarılı wholemount boyanması için gerekli teknik detayları tarif var. Bu yaklaşım kullanılarak, karmaşık moleküler salgılanma modellerini analiz edilebilir ve beyin topografisi zahmetli ve zaman alıcı bir doku kesit prosedürler için gerek olmaksızın takdir. Bu protokol, yetişkin 1,2,8,9 ve erken doğum sonrası fare serebel...

<table border="1"><tbody><tr><td> Malzemeler </td><td> Protokolü Fonksiyon </td></tr><tr><td> Perfüzyon pompası (Fisher Scientific/13-876-2) </td><td> Tutarlı ve yavaş perfüzyon sağlar. </td></tr><tr><td> Keskin uçlu Makas (FST/14081-08) </td><td> Perfüzyon ve diseksiyon Genel kullanım. </td></tr><tr><td> Künt uçlu Forseps (FST/91100-12) </td><td> Perfüzyon iğne yerleştirilmesi için kalp stabilize etmek. </td></tr><tr><td> Forseps (Dumont AA/11210-10 tarafından FST) </td><td> Kafatası beyin diseksiyonu sırasında kullanım için ve beynin geri kalanından serebellum ayırmak için. Onlar diseksiyonu sırasında beyincik hasarı minimuma indirmeye yardımcı olur biraz yuvarlak ucu var, çünkü bu gereklidir. </td></tr><tr><td> Nutator (Fisher Scientific) </td><td> Kuluçka dönemlerinde hareket doku tutmak için kullanılır. </td></tr><tr><td> 1.5 ml tüp (Sarstedt / Vida Kapağı Mikro Tüp) </td><td> Onun tüm adımlarıtochemistry protokolü bu mikrotüplerdeki yer almaktadır. Yuvarlak alt beyincik hareketli kalmasını sağlar. </td></tr><tr><td> Delikli kaşık (FST/10370-17) </td><td> Yavaşça geçirdi çözüm şişeden ise mikrotüplerdeki wholemounts tutmak için kullanılır. </td></tr><tr><td> Leica MZ16 FA mikroskop </td><td> Wholemount boyama incelemek için kullanılır. </td></tr><tr><td> Leica DFC3000 FX kamera </td><td> Wholemount görüntü yakalamak için kullanılır. </td></tr></tbody></table> Tablo 1. <table border="1"><tbody><tr><td colspan="9"> Tipik bir wholemount deney için örnek takvim </td></tr><tr><td> 1. Gün </td><td colspan="4"> Dent düzeltme, oda sıcaklığında, 8 saat </td><td colspan="4"> Dent ağartıcı, 4 ° C, bir gece boyunca </td></tr><tr><td> 2. Gün </td><td colspan="3"> % 100 MeOH, oda sıcaklığında, 2x, 30 dak, her </td><td colspan="3"> % 100 MeOH, Donma / çözülme, 4x, 30 min/15 dk </td><td colspa<html> n = &quot;2&quot;&gt; 100% MeOH, -80 ° C&#39;de, bir gece boyunca </td></tr><tr><td> 3. Gün </td><td> % 50 MeOH/50% PBS, oda sıcaklığında, 60-90 dak </td><td colspan="2"> % 15 MeOH /% 85 PBS, oda sıcaklığında, 60-90 dak </td><td colspan="2"> % 100 PBS, oda sıcaklığında, 60-90 dak </td><td> PBS içinde 10μg/mL Proteinaz K, oda sıcaklığında, 2-3 dakika </td><td> 3x 100% PBS, oda sıcaklığında, 10 dak, her </td><td> PMT gece boyunca, 4 ° C, </td></tr><tr><td> Gün 4-5 </td><td colspan="8"> PMT + 1 ° antikoru +% 5 DMSO, 4 ° C, 48 saat </td></tr><tr><td> 6. Gün </td><td colspan="3"> PMT, 4 ° C, 2-3x, 2-3 saat, her </td><td colspan="5"> PMT + 2 ° antikoru +% 5 DMSO, 4 ° C, 24 saat (Veya ABC kompleksi ile amplifikasyon başlangıç ​​adımları) </td></tr><tr><td> 7. Gün </td><td colspan="2"> PMT, 4 ° C, 2-3x, 2-3 saat, her </td><td colspan="3"> PBT, oda sıcaklığında, 2 saat </td><td colspan="3"> Optimum boyama görülünceye kadar PBS taze DAB inkübe </td></tr></tbody></table>_content &quot;&gt; Tablo 2. <table border="1"><tbody><tr><td colspan="2"> Tarifler (* = her zaman taze hazırlanması) </td></tr><tr><td> PBS (fosfat tamponlu tuz) </td><td> 0.1M fosfat deiyonize su içinde tamponlu tuz. pH 7.2 (Sigma tablet; P4417) </td></tr><tr><td> PFA (Paraformaldehyde) </td><td> Üretilen ve saklanan çalışma çözüm için PBS içinde% 4 oranında seyreltilmiş sonra% 20 çözüm olarak dondurulmuş ve (; T353 Fisher Scientific) </td></tr><tr><td> Dent Sabitleme 3 * </td><td> 4 parça metanol 1 parçası dimetilsülfoksit (DMSO; Fisher Scientific; D159-4) </td></tr><tr><td> Dent Bleach 3 * </td><td> 4 parça metanol 1 parçası dimetilsülfoksit (DMSO; Fisher Scientific; D159-4) 1 kısım% 30&#39;luk hidrojen peroksit </td></tr><tr><td> Enzimatik Sindirim </td><td> 10 ug / proteinaz K (Roche Diagnostics; 03115828001) ml PBS içerisinde. </td></tr><tr><td> PBST </td><td> PBS içeren: % 0.1 Tween-20 (Fisher Bilimsel, BP337; Triton tüm durumlarda Tween-20 yerine de kullanılabilir). </td></tr><tr><td> PMT 25 * </td><td> PBS içeren: % 2 oranında yağsız yağsız süt tozu (Karanfil tercih edilir) % 0.1 Tween-20 (Fisher Scientific; BP337) </td></tr><tr><td> PBT 25 * </td><td> PBS içeren: % 0.2 sığır serum albumin (Sigma; B9001S) % 0.1 Tween-20 (Fisher Scientific; BP337) </td></tr><tr><td> DAB * </td><td> PBS 40 ml; 3,3-diaminobenzidin biri 10 mg tablet, (D5905 Sigma-Aldrich) içinde çözülür. ) Reaksiyonu başlatmak için% 30 hidrojen peroksit ve 10 ul ekleyin. </td></tr><tr><td> ABC Kompleksi Çözüm </td><td> Vectastain kiti (Vektör laboratuarlar, Inc; PK-4000) </td></tr></tbody></table> Tablo 3.

wholemount immunohistochemistry for revealing complex brain topography

Serebellumun tekrarlanan ve iyi anlaşılmış hücresel mimarisi beyin topoğrafya keşfetmek için ideal bir model sistem haline getirmektedir. Nispeten homojen cytoarchitecture altında yatan gen ve protein ifade parasagital etki karmaşık bir dizidir. Serebellumun moleküler kompartımanlara afferent liflerin anatomik ve fonksiyonel organizasyon tarafından yansıtılır. Tam serebellar organizasyonun karmaşıklığını anlamak için, daha önce fare serebellumda desenlendirme kusurları yüksek verimlilik analizi için wholemount boyama yaklaşım rafine. Bu protokol ayrıntılı reaktiflerin, alet ve başarıyla wholemount immun kullanarak erişkin fare beyincik protein ekspresyonu ortaya çıkarmak için yararlı olan pratik adımları açıklar. Adımları burada beyin ince topografisi ile ortaya edilebilir bir örnek olarak zebrinII / aldolaseC ifadesi kullanılarak bu yöntemin yardımcı sergilemektediryerli üç boyutlu yapı. Ayrıca açıklanan moleküler topografya karşılaştırmalı çalışmalar için afferent projeksiyonları ve büyük cerebella protein ifade görselleştirme izin protokolü için uyarlamaları vardır. Bu uygulamaları göstermek için, sıçan serebellumun afferent boyama veri dahildir.

Watch this Scientific Journal Video about Wholemount Immunohistochemistry for Revealing Complex Brain Topography at JoVE.com

Wholemount Immunohistochemistry for Revealing Complex Brain Topography

Nöral devreler topografik spesifik moleküler profilleri ile fonksiyonel bölme halinde düzenlenmiştir. Burada, çok yönlü bir wholemount immünohistokimyasal yaklaşımını kullanarak global beyin topoğrafya ortaya çıkarılması için pratik ve teknik adımları sağlar. Bu iyi anlaşılmış cytoarchitecture ve beyincik devre kullanarak yöntemin yardımcı göstermektedir.

Revealing Kompleksi Beyin Topografya Wholemount İmmünohistokimya

The repeated and well-understood cellular architecture of the cerebellum make it an ideal model system for exploring brain topography. Underlying its ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

The Subventricular Zone En-face: Wholemount Staining and Ependymal Flow

En yüze Subventricular Bölge: Wholemount Boyama ve ependim Akış

The walls of the lateral ventricles contain the largest germinal region in the adult mammalian brain. The subventricular zone (SVZ) in these walls is an ...

Revealing Neural Circuit Topography in Multi-Color

Çok Renkli Sinir Devre Topografya Revealing

Neural circuits are organized into functional topographic maps. In order to visualize complex circuit architecture we developed an approach to reliably ...

Immunohistochemical and Calcium Imaging Methods in Wholemount Rat Retina

Wholemount Sıçan Retina Immunohistochemical ve Kalsiyum Görüntüleme Yöntemleri

In this paper we describe the tools, reagents, and the practical steps that are needed for: 1) successful preparation of wholemount retinas for ...

Complete Spinal Cord Injury and Brain Dissection Protocol for Subsequent Wholemount In Situ Hybridization in Larval Sea Lamprey

Complete Spinal Cord Injury and Brain Dissection Protocol for Subsequent Wholemount In Situ Hybridization in Larval Sea Lamprey

Sonradan wholemount için komple Omurilik Yaralanmalı ve Beyin Diseksiyon Protokolü<em&gt; Yerinde</em&gt; Larva Deniz taşemen içinde Hibritleşme

After a complete spinal cord injury, sea lampreys at first are paralyzed below the level of transection. However, they recover locomotion after several ...

Primer for Immunohistochemistry on Cryosectioned Rat Brain Tissue: Example Staining for Microglia and Neurons

Mikroglia ve nöronlar için örnek Boyama: Cryosectioned Rat Beyin Dokusu Üzerine İmmünohistokimya için Astar

Immunohistochemistry is a widely used technique for detecting the presence, location, and relative abundance of antigens in situ. This introductory level ...

External Excitation of Neurons Using Electric and Magnetic Fields in One- and Two-dimensional Cultures

Bir ve İki Boyutlu Kültürlerde Elektrik ve Manyetik Alanlar Kullanan Nöronların Harici Uyarımı

A neuron will fire an action potential when its membrane potential exceeds a certain threshold. In typical activity of the brain, this occurs as a result ...

Preparation of Non-human Primate Brain Tissue for Pre-embedding Immunohistochemistry and Electron Microscopy

İmmünohistokimya ve elektron mikroskobu Ön gömme için İnsan Olmayan Primat Beyin Dokusu Hazırlanması

Despite all the technological advances at the light microscopy&#160;level, electron microscopy remains the only tool in neuroscience to examine and ...

Chronic Implantation of Whole-cortical Electrocorticographic Array in the Common Marmoset

Kronik yaygın Marmoset bütün kortikal Electrocorticographic dizide implantasyonu

Electrocorticography (ECoG) allows the monitoring of electrical field potentials from the cerebral cortex with high spatiotemporal resolution. Recent ...

Purification of the Dendritic Filopodia-rich Fraction

Dendritic Filopodia-zengin kesir arıtma

Dendritic filopodia are thin and long protrusions based on the actin filament, and they extend and retract as if searching for a target axon. When the ...

Preparation of Mouse Retinal Cryo-sections for Immunohistochemistry

Immünhistokimya için fare retinal Cryo-bölümler hazırlanması

Preparation of high-quality mouse eye sections for immunohistochemistry (IHC) is critical for assessing the retinal structure and function and for ...