Name: manual drainage of the zebrafish embryonic brain ventricles
Uploaded: 2012-12-16T12:00:00
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この作品は、国立精神衛生研究所、国立科学財団によってサポートされていました。博士ジェンGutzman博士アマンダ·ディッキンソン、多くの有用な議論や建設的な批判のための他のSive研究室のメンバーに、専門家の魚飼育用のオリビエ​​Paugoisのおかげで、特別です。

1。マイクロインジェクション針とセルトラムの準備<ol><li>製造元の指示に従って、ミネラルオイルをエッペンドルフCellTramオイルマイクロインジェクター装置を記入してください。 </li><li>サッター楽器ニードルプラーを使用してキャピラリーチューブを引いて、マイクロインジェクション針を準備します。 </li><li>エッペンドルフCellTramに接続マニピュレーターに針を取り付けます。 </li><li>...

<ol>
	<li>Chodobski, A., Szmydynger-Chodobska, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choroid+plexus:+target+for+polypeptides+and+site+of+their+synthesis.">Choroid plexus: target for polypeptides and site of their synthesis.</a> Microsc. Res. Tech. 52, 65-82 (2001).</li><li>Redzic, Z. B., Preston, J. E., Duncan, J. A., Chodobski, A., Szmydynger-Chodobska, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+choroid+plexus-cerebrospinal+fluid+system:+from+development+to+aging.">The choroid plexus-cerebrospinal fluid system: from development to aging.</a> Curr. Top. Dev. Biol. 71, 1-52 (2005).</li><li>Brown, P. D., Davies, S. L., Speake, T., Millar, I. 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Neurol. 13, 760-764 (2006).</li><li>Parada, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+cerebrospinal+fluid+collaborates+with+the+isthmic+organizer+to+regulate+mesencephalic+gene+expression.">Embryonic cerebrospinal fluid collaborates with the isthmic organizer to regulate mesencephalic gene expression.</a> J. Neurosci. Res. 82, 333-345 (2005).</li><li>Mashayekhi, F., Salehi, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+cerebrospinal+fluid+on+neural+cell+proliferation+in+developing+chick+cerebral+cortex.">The importance of cerebrospinal fluid on neural cell proliferation in developing chick cerebral cortex.</a> Eur. J. Neurol. 13, 266-272 (2006).</li><li>Martin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FGF2+plays+a+key+role+in+embryonic+cerebrospinal+fluid+trophic+properties+over+chick+embryo+neuroepithelial+stem+cells.">FGF2 plays a key role in embryonic cerebrospinal fluid trophic properties over chick embryo neuroepithelial stem cells.</a> Dev. Biol. 297, 402-416 (2006).</li><li>Martin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+embryonic+brain+development+in+rats+requires+the+trophic+influence+of+cerebrospinal+fluid.">Early embryonic brain development in rats requires the trophic influence of cerebrospinal fluid.</a> Int. J. Dev. Neurosci. 27, 733-740 (2009).</li><li>Gato, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+cerebrospinal+fluid+regulates+neuroepithelial+survival,+proliferation,+and+neurogenesis+in+chick+embryos.">Embryonic cerebrospinal fluid regulates neuroepithelial survival, proliferation, and neurogenesis in chick embryos.</a> Anat. Rec. A Discov. Mol. Cell Evol. Biol. 284, 475-484 (2005).</li><li>Desmond, M. E., Levitan, M. L., Haas, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Internal+luminal+pressure+during+early+chick+embryonic+brain+growth:+descriptive+and+empirical+observations.">Internal luminal pressure during early chick embryonic brain growth: descriptive and empirical observations.</a> Anat. Rec. A Discov. Mol. Cell Evol. Biol. 285, 737-747 (2005).</li><li>Alonso, M. 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A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Failure+in+cell+proliferation+in+the+germinal+epithelium+of+the+HTx+rats.">Failure in cell proliferation in the germinal epithelium of the HTx rats.</a> Eur. J. Pediatr. Surg. 11, S57-S59 (2001).</li><li>Lehtinen, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cerebrospinal+fluid+provides+a+proliferative+niche+for+neural+progenitor+cells.">The cerebrospinal fluid provides a proliferative niche for neural progenitor cells.</a> Neuron. 69, 893-905 (2011).</li><li>Zappaterra, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparative+proteomic+analysis+of+human+and+rat+embryonic+cerebrospinal+fluid.">A comparative proteomic analysis of human and rat embryonic cerebrospinal fluid.</a> J. Proteome. Res. 6, 3537-3548 (2007).</li><li>Parvas, M., Parada, C., Bueno, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+blood-CSF+barrier+function+controls+embryonic+CSF+protein+composition+and+homeostasis+during+early+CNS+development.">A blood-CSF barrier function controls embryonic CSF protein composition and homeostasis during early CNS development.</a> Dev. Biol. 321, 51-63 (2008).</li><li>Parada, C., Gato, A., Bueno, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mammalian+embryonic+cerebrospinal+fluid+proteome+has+greater+apolipoprotein+and+enzyme+pattern+complexity+than+the+avian+proteome.">Mammalian embryonic cerebrospinal fluid proteome has greater apolipoprotein and enzyme pattern complexity than the avian proteome.</a> J. Proteome Res. 4, 2420-2428 (2005).</li><li>Gato, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+cerebro-spinal+fluid+protein+composition+in+early+developmental+stages+in+chick+embryos.">Analysis of cerebro-spinal fluid protein composition in early developmental stages in chick embryos.</a> J. Exp. Zool. A Comp. Exp. Biol. 301, 280-289 (2004).</li><li>Westerfield, M., Sprague, J., Doerry, E., Douglas, S., Grp, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Zebrafish+Information+Network+(ZFIN):+a+resource+for+genetic,+genomic+and+developmental+research.">The Zebrafish Information Network (ZFIN): a resource for genetic, genomic and developmental research.</a> Nucleic Acids Res. 29, 87-90 (2001).</li><li>Gutzman, J. H., Sive, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+Brain+Ventricle+Injection.">Zebrafish Brain Ventricle Injection.</a> J. Vis. Exp. (26), e1218 (2009).</li><li>Parada, C., Gato, A., Bueno, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=All-trans+retinol+and+retinol-binding+protein+from+embryonic+cerebrospinal+fluid+exhibit+dynamic+behaviour+during+early+central+nervous+system+development.">All-trans retinol and retinol-binding protein from embryonic cerebrospinal fluid exhibit dynamic behaviour during early central nervous system development.</a> Neuroreport. 19, 945-950 (2008).</li><li>Parada, C., Escola-Gil, J. C., Bueno, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-density+lipoproteins+from+embryonic+cerebrospinal+fluid+are+required+for+neural+differentiation.">Low-density lipoproteins from embryonic cerebrospinal fluid are required for neural differentiation.</a> J. Neurosci. Res. 86, 2674-2684 (2008).</li><li>Kramer-Zucker, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cilia-driven+fluid+flow+in+the+zebrafish+pronephros,+brain+and+Kupffer's+vesicle+is+required+for+normal+organogenesis.">Cilia-driven fluid flow in the zebrafish pronephros, brain and Kupffer's vesicle is required for normal organogenesis.</a> Development. 132, 1907-1921 (2005).</li><li>Lowery, L. A., Sive, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Initial+formation+of+zebrafish+brain+ventricles+occurs+independently+of+circulation+and+requires+the+nagie+oko+and+snakehead/atp1a1a.1+gene+products.">Initial formation of zebrafish brain ventricles occurs independently of circulation and requires the nagie oko and snakehead/atp1a1a.1 gene products.</a> Development. 132, 2057-2067 (2005).</li><li>Lowery, L. A., De Rienzo, G., Gutzman, J. H., Sive, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+and+classification+of+zebrafish+brain+morphology+mutants.">Characterization and classification of zebrafish brain morphology mutants.</a> Anat. Rec. (Hoboken). 292, 94-106 (2009).</li></ol>

手動でゼブラフィッシュ脳室からeCSFを排出するために、この手法を使用するには、開発中にeCSFのための要件を決定するために有用であろう。また、この技術は、胚発生の過程でeCSFタンパク質プロファイルの説明をできるようになります。この時間の間に種々のタンパク質の同定は、CSFおよび脳の発達の間にその潜在的な役割の機能にさらに調査を可能にするでしょう。 amniotesで、eCSF（IGF2?...

<table border="1"><tbody><tr><td> 試薬の名称 </td><td> 会社 </td><td> カタログ番号 </td></tr><tr><td>エッペンドルフCellTramオイル</td><td>エッペンドルフ</td><td> 516 000.025 </td></tr><tr><td>鉱油</td><td>シグマ</td><td> M8410 </td></tr><tr><td> Tricaine粉</td><td>シグマ</td><td> A5040 </td></tr><tr><td>毛細管</td><td> FHC社</td><td> 30-30-1 </td></tr></tbody></table>

manual drainage of the zebrafish embryonic brain ventricles

脳脊髄液（CSF）は脳室内に含まれるタンパク質に富む流体である。これは初期の脊椎動物の胚発生時に存在しており、生涯にわたって持続します。アダルトCSFは、脳を和らげる廃棄物を削除して、分泌される分子の1,2を運ぶと考えられている。成人と高齢胚では、CSFの大半は脈絡叢、脳の脳室3から5に隣接して位置する高度に血管分泌領域のシリーズが作られています。ゼブラフィッシュでは、脈絡叢が完全に144時間後に受精（HPF）6が形成されている。これに先立ち、マウスを含むゼブラフィッシュや他の両方の脊椎動物の胚では、胚CSF（eCSF）かなりの量が存在しています。ひよこのこれらのデータと研究は神経上皮は、開発の早い段階で分泌され、前脈絡叢開発7〜eCSFの主要な源であることが示唆された。 eCSFは約3倍以上のタンパク質トンが含まれていますそれが発展8,9時に重要な役割を持っている可能性が示唆された漢成人CSF、。ニワトリとマウスでの研究はeCSF、流体圧力、またはこれらの組み合わせで分泌された因子は、神経上皮10月20日における神経発生、遺伝子発現、細胞増殖、細胞生存のために重要であることを実証している。ヒト、ラット、マウス、ニワトリeCSFのプロテオーム解析は、CSFの機能のために必要があるかもしれない多くのタンパク質を同定した。これらは、細胞外マトリックス成 ​​分、アポリポタンパク質、タンパク質を浸透圧調節、細胞死と増殖の21から24に関与するタンパク質を含む。しかし、eCSFの複雑な機能は不明な点が多い。 その結果、私たちはeCSFコンポーネントの識別のために、開発中のeCSF要件の分析が可能になり、ゼブラフィッシュの脳室からeCSFを除去するための方法を開発しました。もっとeCSFは他の脊椎動物システムワットから収集することができますがi番目の大きい胚、eCSFは、ゼブラフィッシュの開発の初期段階から収集され、異常な脳室の容積や形態につながる遺伝的または環境条件の下ですることができます。 eCSFの取り外しおよびコレクションは質量分析、eCSF機能の調査、およびアッセイに心室にselect into要因の再導入、それらの機能を可能にします。したがって、初期のゼブラフィッシュ胚のアクセシビリティは開発中eCSF機能の詳細な分析を可能にする。

排水脳室の例を図1B-Cに示されている。彼らはeCSF（C対図1B）を欠いているように脳室は折りたたまれています。背側の画像に見られるように（ 図1B-C、および図2A-D）後脳の神経上皮は、その特徴的な形態を保持しないと堅牢なヒンジ点に起因する可能性が高いeCSFの欠如にもかかわらず、開いていると思われる。しかし、横方向のビュー（ <str...

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Manual Drainage of the Zebrafish Embryonic Brain Ventricles

我々は、脳脊髄液（CSF）を収集し、ゼブラフィッシュ胚の脳室系内のCSFを欠いてシステムを作成する方法を提案する。これは、胚の脳の発達中に脳脊髄液の組成とその要件の精査が可能になります。

ゼブラフィッシュ胚の脳室の手動排水

Cerebrospinal fluid  (CSF) is a protein rich fluid contained within the brain ventricles. It is  present during early vertebrate embryonic development and ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

An Assay for Permeability of the Zebrafish Embryonic Neuroepithelium

ゼブラフィッシュ胚性神経上皮の透水性に関するアッセイ

The brain ventricular system is conserved among vertebrates and is composed of a series of interconnected cavities called brain ventricles, which form ...

Micromanipulation of Gene Expression in the Adult Zebrafish Brain Using Cerebroventricular Microinjection of Morpholino Oligonucleotides

モルホリノオリゴヌクレオチドの脳室マイクロインジェクションを使用した大人のゼブラフィッシュ脳における遺伝子発現のマイクロマニピュレーション

Manipulation of gene expression in tissues is  required to perform functional studies. In this paper, we demonstrate the  cerebroventricular ...

Patch Clamp Recordings from Embryonic Zebrafish Mauthner Cells

胚ゼブラフィッシュマウスナー細胞からパッチクランプ記録

Mauthner cells (M-cells) are large  reticulospinal neurons located in the hindbrain of teleost fish. They are key  neurons involved in a characteristic ...

A Comprehensive Protocol for Manual Segmentation of the Medial Temporal Lobe Structures

内側側頭葉構造の手動分割のための総合的なプロトコル

The present paper describes a comprehensive protocol for manual tracing of the set of brain regions comprising the medial temporal lobe (MTL): amygdala, ...

Isolation and Culture of Endothelial Cells from the Embryonic Forebrain

胚前脳からの内皮細胞の単離および培養

Embryonic brain endothelial cells can serve as an important tool in the study of angiogenesis and neurovascular development and interactions. The two ...

Electrophysiological Recording in the Brain of Intact Adult Zebrafish

無傷アダルトゼブラフィッシュの脳における電気生理学的記録

Previously, electrophysiological studies in adult zebrafish have been limited to slice preparations or to eye cup preparations and electrorentinogram ...

Live Imaging of Mitosis in the Developing Mouse Embryonic Cortex

発生中のマウス胚性皮質における有糸分裂のライブイメージング

Although of short duration, mitosis is a complex and dynamic multi-step process fundamental for development of organs including the brain. In the ...

Conditional Genetic Transsynaptic Tracing in the Embryonic Mouse Brain

マウス胎児の脳のトレース条件付き遺伝経シナプス

Anatomical path tracing is of pivotal importance to decipher the relationship between brain and behavior. Unraveling the formation of neural circuits ...