Name: manual drainage of the zebrafish embryonic brain ventricles
Uploaded: 2012-12-16T12:00:00
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이 작품은 국립 정신 건강 연구소와 국립 과학 재단 (National Science Foundation)에서 지원되었습니다. 박사 젠 Gutzman 박사 아만다 디킨스 많은 유용한 토론과 건설적인 비판에 대한 다른 Sive 연구소 회원, 전문 생선 축산을위한 올리비에 Paugois에 특별 감사드립니다.

1. Microinjection의 바늘과 셀 트램 준비 <ol><li> 제조업체의 지침에 따라 미네랄 오일과 함께 Eppendorf CellTram 오일 microinjector 장치를 입력합니다. </li><li> 셔터 계기 바늘 풀러를 사용하여 모세관 튜브를 당겨 microinjection의 바늘을 준비합니다. </li><li> Eppendorf CellTram에 연결 micromanipulator에 바늘을 탑재합니다. </li><li> 조심스럽게 바늘의 끝을 부러. 균일 팁 크기를 들어, 마이크로 미터로 측정하거나, 참조...

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	<li>Chodobski, A., Szmydynger-Chodobska, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choroid+plexus:+target+for+polypeptides+and+site+of+their+synthesis.">Choroid plexus: target for polypeptides and site of their synthesis.</a> Microsc. Res. Tech. 52, 65-82 (2001).</li><li>Redzic, Z. B., Preston, J. E., Duncan, J. A., Chodobski, A., Szmydynger-Chodobska, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+choroid+plexus-cerebrospinal+fluid+system:+from+development+to+aging.">The choroid plexus-cerebrospinal fluid system: from development to aging.</a> Curr. Top. Dev. Biol. 71, 1-52 (2005).</li><li>Brown, P. D., Davies, S. L., Speake, T., Millar, I. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+of+cerebrospinal+fluid+production.">Molecular mechanisms of cerebrospinal fluid production.</a> Neuroscience. 129, 957-970 (2004).</li><li>Praetorius, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Water+and+solute+secretion+by+the+choroid+plexus.">Water and solute secretion by the choroid plexus.</a> Pflugers Arch. 454, 1-18 (2007).</li><li>Speake, T., Whitwell, C., Kajita, H., Majid, A., Brown, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+CSF+secretion+by+the+choroid+plexus.">Mechanisms of CSF secretion by the choroid plexus.</a> Microsc. Res. Tech. 52, 49-59 (2001).</li><li>Garcia-Lecea, M., Kondrychyn, I., Fong, S. H., Ye, Z. R., Korzh, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+analysis+of+choroid+plexus+morphogenesis+in+zebrafish.">In vivo analysis of choroid plexus morphogenesis in zebrafish.</a> PLoS One. 3, e3090 (2008).</li><li>Welss, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secretory+activity+of+the+inner+layer+of+the+embryonic+mid-brain+of+the+chick,+as+revealed+by+tissue+culture.">Secretory activity of the inner layer of the embryonic mid-brain of the chick, as revealed by tissue culture.</a> The Anatomical Record. 58, 299-302 (1934).</li><li>Saunders, N. R., Habgood, M. D., Dziegielewska, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Barrier+mechanisms+in+the+brain,+II.+Immature+brain.">Barrier mechanisms in the brain, II. Immature brain.</a> Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 26, 85-91 (1999).</li><li>Zheng, W., Chodobski, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The blood-cerebrospinal fluid barrier. , (2005).</li><li>Salehi, Z., Mashayekhi, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+cerebrospinal+fluid+on+neural+cell+survival+in+the+developing+chick+cerebral+cortex:+an+in+vivo+study.">The role of cerebrospinal fluid on neural cell survival in the developing chick cerebral cortex: an in vivo study.</a> Eur. J. Neurol. 13, 760-764 (2006).</li><li>Parada, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+cerebrospinal+fluid+collaborates+with+the+isthmic+organizer+to+regulate+mesencephalic+gene+expression.">Embryonic cerebrospinal fluid collaborates with the isthmic organizer to regulate mesencephalic gene expression.</a> J. Neurosci. Res. 82, 333-345 (2005).</li><li>Mashayekhi, F., Salehi, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+cerebrospinal+fluid+on+neural+cell+proliferation+in+developing+chick+cerebral+cortex.">The importance of cerebrospinal fluid on neural cell proliferation in developing chick cerebral cortex.</a> Eur. J. Neurol. 13, 266-272 (2006).</li><li>Martin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FGF2+plays+a+key+role+in+embryonic+cerebrospinal+fluid+trophic+properties+over+chick+embryo+neuroepithelial+stem+cells.">FGF2 plays a key role in embryonic cerebrospinal fluid trophic properties over chick embryo neuroepithelial stem cells.</a> Dev. Biol. 297, 402-416 (2006).</li><li>Martin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+embryonic+brain+development+in+rats+requires+the+trophic+influence+of+cerebrospinal+fluid.">Early embryonic brain development in rats requires the trophic influence of cerebrospinal fluid.</a> Int. J. Dev. Neurosci. 27, 733-740 (2009).</li><li>Gato, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+cerebrospinal+fluid+regulates+neuroepithelial+survival,+proliferation,+and+neurogenesis+in+chick+embryos.">Embryonic cerebrospinal fluid regulates neuroepithelial survival, proliferation, and neurogenesis in chick embryos.</a> Anat. Rec. A Discov. Mol. Cell Evol. Biol. 284, 475-484 (2005).</li><li>Desmond, M. E., Levitan, M. L., Haas, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Internal+luminal+pressure+during+early+chick+embryonic+brain+growth:+descriptive+and+empirical+observations.">Internal luminal pressure during early chick embryonic brain growth: descriptive and empirical observations.</a> Anat. Rec. A Discov. Mol. Cell Evol. Biol. 285, 737-747 (2005).</li><li>Alonso, M. I., Martin, C., Carnicero, E., Bueno, D., Gato, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebrospinal+fluid+control+of+neurogenesis+induced+by+retinoic+acid+during+early+brain+development.">Cerebrospinal fluid control of neurogenesis induced by retinoic acid during early brain development.</a> Dev. Dyn. 240, 1650-1659 (2011).</li><li>Miyan, J. A., Zendah, M., Mashayekhi, F., Owen-Lynch, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebrospinal+fluid+supports+viability+and+proliferation+of+cortical+cells+in+vitro,+mirroring+in+vivo+development.">Cerebrospinal fluid supports viability and proliferation of cortical cells in vitro, mirroring in vivo development.</a> Cerebrospinal Fluid Res. 3, 2 (2006).</li><li>Mashayekhi, F., Bannister, C. M., Miyan, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Failure+in+cell+proliferation+in+the+germinal+epithelium+of+the+HTx+rats.">Failure in cell proliferation in the germinal epithelium of the HTx rats.</a> Eur. J. Pediatr. Surg. 11, S57-S59 (2001).</li><li>Lehtinen, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cerebrospinal+fluid+provides+a+proliferative+niche+for+neural+progenitor+cells.">The cerebrospinal fluid provides a proliferative niche for neural progenitor cells.</a> Neuron. 69, 893-905 (2011).</li><li>Zappaterra, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparative+proteomic+analysis+of+human+and+rat+embryonic+cerebrospinal+fluid.">A comparative proteomic analysis of human and rat embryonic cerebrospinal fluid.</a> J. Proteome. Res. 6, 3537-3548 (2007).</li><li>Parvas, M., Parada, C., Bueno, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+blood-CSF+barrier+function+controls+embryonic+CSF+protein+composition+and+homeostasis+during+early+CNS+development.">A blood-CSF barrier function controls embryonic CSF protein composition and homeostasis during early CNS development.</a> Dev. Biol. 321, 51-63 (2008).</li><li>Parada, C., Gato, A., Bueno, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mammalian+embryonic+cerebrospinal+fluid+proteome+has+greater+apolipoprotein+and+enzyme+pattern+complexity+than+the+avian+proteome.">Mammalian embryonic cerebrospinal fluid proteome has greater apolipoprotein and enzyme pattern complexity than the avian proteome.</a> J. Proteome Res. 4, 2420-2428 (2005).</li><li>Gato, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+cerebro-spinal+fluid+protein+composition+in+early+developmental+stages+in+chick+embryos.">Analysis of cerebro-spinal fluid protein composition in early developmental stages in chick embryos.</a> J. Exp. Zool. A Comp. Exp. Biol. 301, 280-289 (2004).</li><li>Westerfield, M., Sprague, J., Doerry, E., Douglas, S., Grp, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Zebrafish+Information+Network+(ZFIN):+a+resource+for+genetic,+genomic+and+developmental+research.">The Zebrafish Information Network (ZFIN): a resource for genetic, genomic and developmental research.</a> Nucleic Acids Res. 29, 87-90 (2001).</li><li>Gutzman, J. H., Sive, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+Brain+Ventricle+Injection.">Zebrafish Brain Ventricle Injection.</a> J. Vis. Exp. (26), e1218 (2009).</li><li>Parada, C., Gato, A., Bueno, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=All-trans+retinol+and+retinol-binding+protein+from+embryonic+cerebrospinal+fluid+exhibit+dynamic+behaviour+during+early+central+nervous+system+development.">All-trans retinol and retinol-binding protein from embryonic cerebrospinal fluid exhibit dynamic behaviour during early central nervous system development.</a> Neuroreport. 19, 945-950 (2008).</li><li>Parada, C., Escola-Gil, J. C., Bueno, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-density+lipoproteins+from+embryonic+cerebrospinal+fluid+are+required+for+neural+differentiation.">Low-density lipoproteins from embryonic cerebrospinal fluid are required for neural differentiation.</a> J. Neurosci. Res. 86, 2674-2684 (2008).</li><li>Kramer-Zucker, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cilia-driven+fluid+flow+in+the+zebrafish+pronephros,+brain+and+Kupffer's+vesicle+is+required+for+normal+organogenesis.">Cilia-driven fluid flow in the zebrafish pronephros, brain and Kupffer's vesicle is required for normal organogenesis.</a> Development. 132, 1907-1921 (2005).</li><li>Lowery, L. A., Sive, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Initial+formation+of+zebrafish+brain+ventricles+occurs+independently+of+circulation+and+requires+the+nagie+oko+and+snakehead/atp1a1a.1+gene+products.">Initial formation of zebrafish brain ventricles occurs independently of circulation and requires the nagie oko and snakehead/atp1a1a.1 gene products.</a> Development. 132, 2057-2067 (2005).</li><li>Lowery, L. A., De Rienzo, G., Gutzman, J. H., Sive, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+and+classification+of+zebrafish+brain+morphology+mutants.">Characterization and classification of zebrafish brain morphology mutants.</a> Anat. Rec. (Hoboken). 292, 94-106 (2009).</li></ol>

수동으로 zebrafish의 뇌 심실에서 eCSF을 배수하기 위해이 기술의 사용은 개발 중에 eCSF에 대한 요구 사항을 결정하는 데 유용합니다. 또한이 기술은 배아 발달의 과정을 통해 eCSF 단백질 프로파일의 설명을 할 수 있습니다. 이 시간 동안 다른 단백질의 식별은 CSF와 뇌 개발하는 동안 잠재적 인 역할의 기능에 추가로 조사를하게됩니다. amniotes에서 eCSF (IGF2, FGF2, retinoic 산, 그리고 apolipoproteins)에서 확?...

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td></tr><tr><td> Eppendorf CellTram 오일 </td><td> Eppendorf </td><td> 516 000.025 </td></tr><tr><td> 미네랄 오일 </td><td> 시그마 </td><td> M8410 </td></tr><tr><td> Tricaine 분말 </td><td> 시그마 </td><td> A5040 </td></tr><tr><td> 모세관 튜브 </td><td> FHC 주식회사 </td><td> 30-30-1 </td></tr></tbody></table>

manual drainage of the zebrafish embryonic brain ventricles

중추 신경계 (CSF)는 뇌 심실 내에 포함 된 단백질이 풍부한 액체이다. 이 초기 척추 동물의 배아 발달 동안 존재하며, 수명이 다할 때까지 지속된다. 성인 CSF는, 뇌를 쿠션 폐기물을 제거하고 분비 분자의 1,2를 운반 것으로 생각됩니다. 성인 세 이상 배아에서 CSF의 대부분은 맥락막 얼기, 뇌 심실 3-5에 인접 매우 vascularized의 분비 지역 일련의에 의해 이루어집니다. zebrafish에서 맥락막 얼기 완전히 144시간 게시물 수정을 (hpf) 6시 형성된다. 이전에, 마우스 배아 CSF (eCSF)의 상당한 금액 등 zebrafish 및 기타 모두 척추 동물의 배아에 존재합니다. 여자에서 이러한 데이터와 연구는 neuroepithelium 개발의 초기 분비하고 사전에 맥락막 얼기 개발 7 eCSF의 주요 원인 일 수 있습니다하는 것이 좋습니다. eCSF는 약 세 배 더 많은 단백질 t을 포함가 개발 8,9 동안 중요한 역할을 할 수 있다는 한 성인 CSF를 제안. 여자와 마우스의 연구 eCSF, 유체 압력, 또는 이들의 조합에 분비 요소 neuroepithelium 10-20에서 neurogenesis, 유전자 발현, 세포 증식 및 세포 생존을 위해 중요하다는 것을 보여줍니다. 인간, 쥐, 마우스 및 여자 eCSF의 Proteomic 분석은 CSF 기능에 필요한 수 있습니다 많은 단백질을 확인했습니다. 이러한 세포 죽음과 확산 21-24에 참여 세포 외 기질 구성 요소, apolipoproteins, 삼투압 조절 단백질, 그리고 단백질이 포함되어 있습니다. 그러나, eCSF의 복잡한 기능은 대부분 알 수없는 수 있습니다. 우리는 따라서 eCSF 구성 요소의 식별 및 개발 중에 eCSF 요구 사항 분석을위한 수 있도록 zebrafish의 뇌 심실에서 eCSF을 제거하는 방법을 개발했습니다. 더 eCSF은 다른 척추 동물의 시스템 w에서 수집 할 수 있지만i 번째 큰 배아, eCSF은 zebrafish 개발의 초기 단계에서 수집하고, 이상 뇌 뇌실 볼륨이나 형태로 이어질 유전 또는 환경 조건 하에서 할 수 있습니다. eCSF의 제거 및 수집 분석에 심실에 선택 요소의 질량 spectrometric 분석, eCSF 기능의 조사, 그리고 재 도입의 기능을 할 수 있습니다. 따라서 초기 zebrafish의 배아의 접근성 개발 중 eCSF 기능의 상세 분석 할 수 있습니다.

배수 뇌 뇌실의 예는 그림 1B-C에 표시됩니다. 그들은 eCSF (그림 1B 대 C) 부족으로 뇌 심실이 접혀 있습니다. 으로 등쪽 이미지 (그림 1B-C, 그리고 그림 2A-D) hindbrain의 neuroepithelium는 특성 형태를 유지하지하고 강력한 힌지 포인트에 가능성으로 인해 eCSF의 부족에도 불구하고 열려있는 것 같습니다.에서 볼 그러나, 측면 전망은 (그림 2A&#39;-D &#39;...

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Manual Drainage of the Zebrafish Embryonic Brain Ventricles

우리는 뇌척수 (CSF)를 수집하고 배아 zebrafish의 뇌 심실 시스템 내에서 CSF 부족 시스템을 구축 할 수있는 방법을 제시한다. 이 태아의 뇌 발달 동안 CSF 구성 및 요구 사항의 추가 검사를 할 수 있습니다.

Zebrafish 배아 뇌 심실의 수동 배수

Cerebrospinal fluid  (CSF) is a protein rich fluid contained within the brain ventricles. It is  present during early vertebrate embryonic development and ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

An Assay for Permeability of the Zebrafish Embryonic Neuroepithelium

Zebrafish 배아 Neuroepithelium의 투과율에 대한 분석

The brain ventricular system is conserved among vertebrates and is composed of a series of interconnected cavities called brain ventricles, which form ...

연구

신경과학

Micromanipulation of Gene Expression in the Adult Zebrafish Brain Using Cerebroventricular Microinjection of Morpholino Oligonucleotides

모르 올리고 뉴클레오티드의 Cerebroventricular 미세 주입을 사용하여 성인 Zebrafish의 두뇌에서 유전자 발현의 미세 조작

Manipulation of gene expression in tissues is  required to perform functional studies. In this paper, we demonstrate the  cerebroventricular ...

Patch Clamp Recordings from Embryonic Zebrafish Mauthner Cells

배아 Zebrafish의 MAUTHNER 세포에서 패치 클램프 녹음

Mauthner cells (M-cells) are large  reticulospinal neurons located in the hindbrain of teleost fish. They are key  neurons involved in a characteristic ...

A Comprehensive Protocol for Manual Segmentation of the Medial Temporal Lobe Structures

내측 측두엽 구조의 수동 분할을위한 포괄적 인 프로토콜

The present paper describes a comprehensive protocol for manual tracing of the set of brain regions comprising the medial temporal lobe (MTL): amygdala, ...

Isolation and Culture of Endothelial Cells from the Embryonic Forebrain

배아 전뇌에서 내피 세포의 분리 및 문화

Embryonic brain endothelial cells can serve as an important tool in the study of angiogenesis and neurovascular development and interactions. The two ...

Electrophysiological Recording in the Brain of Intact Adult Zebrafish

온전한 성인 Zebrafish의의 뇌에 전기 생리학 기록

Previously, electrophysiological studies in adult zebrafish have been limited to slice preparations or to eye cup preparations and electrorentinogram ...

Live Imaging of Mitosis in the Developing Mouse Embryonic Cortex

개발 마우스 배아의 피질 유사 분열의 라이브 영상

Although of short duration, mitosis is a complex and dynamic multi-step process fundamental for development of organs including the brain. In the ...

Conditional Genetic Transsynaptic Tracing in the Embryonic Mouse Brain

배아 마우스의 뇌에 추적 조건부 유전 Transsynaptic

Anatomical path tracing is of pivotal importance to decipher the relationship between brain and behavior. Unraveling the formation of neural circuits ...