Name: a new murine model of endovascular aortic aneurysm repair
Uploaded: 2013-07-07T14:00:00
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Os autores gostariam de agradecer a Christine Guesdon (Abbott) para os presentes dos Stentgrafts.

Métodos O protocolo foi aprovado pelo Comitê de Ética Bichat-Debré (N ° 2012-15/698-0074). O modelo de perfusão de elastase foi descrita pela primeira vez em 1990 por Anidjar 1: aneurisma aórtico abdominal é a perfusão induzida pela elastase em ratos Wistar machos, com idade de 8 a 9 semanas, 250-300 g. Duas a quatro semanas mais tarde, uma re-laparotomia, e um diâmetro de 3 mm revestido stentgraft coronária é utilizado para excluir o aneurism...

<ol>
	<li>Anidjar, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elastase-induced+experimental+aneurysms+in+rats.">Elastase-induced experimental aneurysms in rats.</a> Circulation. 82, 973-981 (1990).</li><li>Azuma, J., Asagami, T., Dalman, R., Tsao, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creation+of+murine+experimental+abdominal+aortic+aneurysms+with+elastase.">Creation of murine experimental abdominal aortic aneurysms with elastase.</a> J. Vis. Exp. (29), e1280 (2009).</li><li>Parodi, J. C., Palmaz, J. C., Barone, H. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transfemoral+intraluminal+graft+implantation+for+abdominal+aortic+aneurysms.">Transfemoral intraluminal graft implantation for abdominal aortic aneurysms.</a> Ann. Vasc. Surg. 5, 491-499 (1991).</li><li>Lees, T., Stansby, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The nationalvascular database report, 2009. , (2012).</li><li>Sakalihasan, N., Limet, R., Defawe, O. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abdominal+aortic+aneurysm.">Abdominal aortic aneurysm.</a> Lancet. 365, 1577-1589 (2005).</li><li>Busuttil, R. W., Abou-Zamzam, A. M., Machleder, H. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collagenase+activity+of+the+human+aorta.+A+comparison+of+patients+with+and+without+abdominal+aortic+aneurysms.">Collagenase activity of the human aorta. A comparison of patients with and without abdominal aortic aneurysms.</a> Arch. Surg. 115, 1373-1378 (1980).</li><li>Michel, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contrasting+outcomes+of+atheroma+evolution:+intimal+accumulation+versus+medial+destruction.">Contrasting outcomes of atheroma evolution: intimal accumulation versus medial destruction.</a> Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 21, 1389-1392 (2001).</li><li>Vorp, D. 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H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+adhesion+to+fibrinogen+and+fibrin+under+flow+conditions+is+diminished+by+activation+and+L-selectin+shedding.">Neutrophil adhesion to fibrinogen and fibrin under flow conditions is diminished by activation and L-selectin shedding.</a> Blood. 89, 2131-2138 (1997).</li><li>Touat, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renewal+of+mural+thrombus+releases+plasma+markers+and+is+involved+in+aortic+abdominal+aneurysm+evolution.">Renewal of mural thrombus releases plasma markers and is involved in aortic abdominal aneurysm evolution.</a> Am. J. Pathol. 168, 1022-1030 (2006).</li><li>Fontaine, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+leukocyte+elastase+in+preventing+cellular+re-colonization+of+the+mural+thrombus.">Role of leukocyte elastase in preventing cellular re-colonization of the mural thrombus.</a> Am. J. Pathol. 164, 2077-2087 (2004).</li><li>Sakalihasan, N., Delvenne, P., Nusgens, B. V., Limet, R., Lapiere, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activated+forms+of+MMP2+and+MMP9+in+abdominal+aortic+aneurysms.">Activated forms of MMP2 and MMP9 in abdominal aortic aneurysms.</a> J. Vasc. Surg. 24, 127-133 (1996).</li><li>Alsac, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+significance+of+endoleaks+in+thoracic+endovascular+aneurysm+repair.">The significance of endoleaks in thoracic endovascular aneurysm repair.</a> Ann. Vasc. Surg. 25, 345-351 (2011).</li><li>Buth, J., Harris, P. L., van Marrewijk, C., Fransen, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+significance+and+management+of+different+types+of+endoleaks.">The significance and management of different types of endoleaks.</a> Semin. Vasc. Surg. 16, 95-102 (2003).</li><li>Fransen, G. 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Proof of Concept in Rats.</a> PLoS One. 6, e18679 (2011).</li><li>Trollope, A., Moxon, J. V., Moran, C. S., Golledge, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+abdominal+aortic+aneurysm+and+their+role+in+furthering+management+of+human+disease.">Animal models of abdominal aortic aneurysm and their role in furthering management of human disease.</a> Cardiovasc Pathol. 20, 114-123 (2011).</li><li>Yamaguchi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+influencing+mortality+in+the+rat+elastase-induced-aneurysm+model.">Factors influencing mortality in the rat elastase-induced-aneurysm model.</a> J. Surg. Res. 94, 81-83 (2000).</li><li>von Bruhl, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monocytes,+neutrophils,+and+platelets+cooperate+to+initiate+and+propagate+venous+thrombosis+in+mice+in+vivo.">Monocytes, neutrophils, and platelets cooperate to initiate and propagate venous thrombosis in mice in vivo.</a> J. Exp. Med. 209, 819-835 (2012).</li><li>Smith, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+activation+and+mediators+of+inflammation+in+chronic+venous+insufficiency.">Neutrophil activation and mediators of inflammation in chronic venous insufficiency.</a> J. Vasc. Res. 36, 24-36 (1999).</li><li>Zaragoza, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+cardiovascular+diseases.">Animal models of cardiovascular diseases.</a> J. Biomed. Biotechnol. 2011, 497841 (2011).</li><li>Kuivaniemi, H., Elmore, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Opportunities+in+abdominal+aortic+aneurysm+research:+epidemiology,+genetics,+and+pathophysiology.">Opportunities in abdominal aortic aneurysm research: epidemiology, genetics, and pathophysiology.</a> Ann. Vasc. Surg. 26 (12), 862-870 (2012).</li><li>Schanzer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predictors+of+abdominal+aortic+aneurysm+sac+enlargement+after+endovascular+repair.">Predictors of abdominal aortic aneurysm sac enlargement after endovascular repair.</a> Circulation. 123, 2848-2855 (2011).</li></ol>

Dois modelos de AAA já foi descrita em nosso laboratório: xenoenxerto 19 e modelos induzidos elastase um modelo elastase é o mais semelhante ao aneurisma da aorta humanos:. Uma grande trombo intraluminal circunferencial é então excluída pela correção endovascular de aneurisma. Vazamentos são uma complicação comum de EVAR 14,15. Muitas perguntas permanecem sem solução: ruptura do AAA foram descritos com baixos vazamentos, e às vezes sem aneurisma...

Habilidades endovasculares têm progredido desde a primeira reparação endovascular de aneurisma da aorta (EVAR) por Parodi, em 1991, 3, quase a metade de todos os aneurismas abdominais são agora tratados por EVAR 4. Ao contrário da cirurgia, EVAR deixa o trombo, excluindo-a da corrente sanguínea sistêmica. Os aneurismas são caracterizados por uma hemoglobina ricos trombo várias camadas, uma fina mídia e uma adventícia fibrosado e inflamado. O papel essencial da proteólise 5 em progressão aneurisma foi demonstrada de trinta anos atrás 6, 7: aneurisma saco de trombos está associada com uma fina parede da aorta, a lise de elastina, de baixa densidade de células de músculo liso nos meios de comunicação, bem como um elevado nível de imuno -reacção inflamatória adventícia 8,9. Estas modificações sugerem que a actividade enzimática proteolítica ocorre dentro do trombo, em vez de directamente na parede da aorta. Além disso, a camada luminal do trombo é rico em aglutinado vermelho sangue cells liberando hemoglobina. Eles estão envolvidos principalmente na formação de fibrina, a activação de plaquetas e induzir a formação de trombina. Finalmente, trombo também induz t-PA e plasminogênio retenção, que estão envolvidos na fibrinólise e recrutamento de leucócitos, principalmente neutrófilos. Estes são 12 vezes mais importantes do que os trombos na corrente sanguínea 10. A sua presença é associado com uma alta taxa de metaloproteinase de matriz tipo 8 (MMP-8), MMP-9 e elastase: serina-proteases que libertam granulares e agentes oxidantes profissionais que conduzem à degradação da matriz fibrilar, e a parede da aorta, finalmente, rotura 9,11 -13. Intervenção aneurisma eletivo tem como objetivo evitar a ruptura. EVAR deixa ambos parede aneurisma e trombo intacta. Assim, aneurisma de perfusão por colaterais da aorta (artérias lombares, artéria mesentérica inferior ...), é chamado de vazamento, e é uma complicação específico de tratamento endovascular 14,15, às vezes levando à ruptura vésperaN com vazamentos de baixa pressão. Além disso, em alguns pacientes, não há um aumento de diâmetro do aneurisma 16. Interação entre sangue circulante e da parede do aneurisma mantém a atividade trombo luminal intra mencionado biológica. Assim, tipo V vazamentos, definido como expansão do saco do aneurisma, sem vazamento identificado, pode ser explicado pela atividade enzimática dentro do trombo aneurisma. Nenhum exame radiológico (18FDG-PET digitalização, cintilografia ativação plaquetária, óxido de ferro contraste MRI17), nem coleta de sangue periférico (MMP-9, micropartículas de plaquetas derivadas, plasmina / complexos anti-plasmina) usado para explorar o impacto endovascular em aneurismas da aorta em humanos diretamente avaliar as vias bioquímicas. Em nosso conhecimento, não há nenhum aneurisma modelos animais experimentais reprodutíveis de exclusão e barato. Este permite exclusão do aneurisma modificações pré e pós-biológicos e histológicos para ser explorado.

<table border="1">
<tbody>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Animals </td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Wistar rats</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>aged from 8 to 9 weeks. Weight range from 350 to 400 g</td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Instruments</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Isoflurane anesthesic system</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>4,5% at the beginning, then 2%</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Penthobarbital</td>
 <td>Ceva sante animale, Libourne, France</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Dissection stereomicroscope</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Steriles gloves</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Microsurgical Steriles instruments</td>
 <td>Moria, Antony, France</td>
 <td></td>
 <td>Needle holder,	Forceps, Scissors,Gilbert approximator
o	3 Micro clamps</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>N&deg;40 Silk string</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Prolen 9-0 and 10-0</td>
 <td>Ethicon, Johnson &amp; Johnson, Auneau, France</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Heat-tapered polyethylene tubing</td>
 <td>PE 10</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Syringe infusion pump</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Porcine pancreatic elastase</td>
 <td>Sigma, St. Louis, Mo., USA</td>
 <td></td>
 <td>550 &mu;l of salin is mixed with 175 &mu;l of elastase</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Indeflator</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>9 to 16 mm length, 3 mm diameter coronary PTFE covered stentgraft</td>
 <td>Abbott, Abbott Park, Illinois, USA</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>C-Arm OEC 9800</td>
 <td>GE Medical Systems, Milwaukee, WI</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Aspegic 1000 mg</td>
 <td>Aspirin, Sanofi-Aventis, Paris, France</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Reagent</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Aerane isoflurane 100ML</td>
 <td>Baxter</td>
 <td>Aerane</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Penthobarbital</td>
 <td>Centravet</td>
 <td>053pen203</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Silk Suture 4-0</td>
 <td>Fine Science</td>
 <td>18020-40</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Microsurgical steriles instruments</td>
 <td>Moria</td>
 <td>9980-9983-9987-204/A-204/D-8148-4877A-4878A</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Prolen 9-0 and 10-0</td>
 <td>Ethicon</td>
 <td>W2829 &ndash; NS2850</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Heat tapered Polyethylene tubing : PE 10</td>
 <td>Bioseb</td>
 <td>MRE-010</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Infusion pump</td>
 <td>World precision instrument</td>
 <td>AL-1000</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Porcine pancreatic elastase</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>E1250-100MG</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Indeflator</td>
 <td>Longreal</td>
 <td>KY025 25 100</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Aspegic 1000mg (Aspirin)</td>
 <td>Sanofi-Aventis</td>
 <td>3400931898191</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>C-Arm OEC 9800</td>
 <td>General electric.</td>
 <td>OEC 9800</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Stentgraft : Jostent</td>
 <td>Abbott</td>
 <td>210CG1230 
 210CG1630</td>
 <td></td>
 </tr>
</tbody>
</table>

a new murine model of endovascular aortic aneurysm repair

Exclusão do aneurisma endovascular é uma técnica validada para evitar ruptura de aneurisma. Resultados a longo prazo destacar limitações da técnica e novos aspectos de aneurisma de aorta abdominal (AAA) fisiopatologia. Não há modelo de aneurisma da aorta abdominal endograft exclusão barato e reprodutível, o que permitiria que as investigações profundas de AAA, antes e após o tratamento. Vimos por este meio descrever como induzir e, em seguida, para excluir com uma stentgraft coronária coberto de um aneurisma da aorta abdominal em um rato. O modelo AAA bem conhecidos da elastase induzida foi relatada pela primeira vez em 1990, uma em um rato, descrito em seguida, em dois ratinhos. Elastina da degradação leva à dilatação da aorta com infiltrado inflamatório da parede abdominal e intra-trombo luminal, combinando com AAA humano. Exclusão endovascular com pequeno stentgraft coberto é então realizada, excluindo qualquer interação entre o sangue circulando e os trombos do aneurisma. Exclusão apropriado e permeabilidade stentgraft éconfirmado antes a eutanásia por uma angiografia pensei que a artéria carótida esquerda. Controle parcial de elastase difusão torna aneurisma forma diferente para cada animal. É difícil criar um aneurisma, o que irá permitir que um comprimento adequado da aorta abaixo do aneurisma por uma introdução stentgraft fácil, e com a gola proximal e distal adequada para evitar o extravasamento. Muita falha pode resultar da introdução stentgraft que às vezes levam a lágrima aorta com a dor e os problemas a ponto, e dano endotelial com trombose da aorta pós-operatório. Dar aspirina a ratos antes da implantação stentgraft diminui a taxa de falha, sem grande hemorragia. Pinçamento ativa neutrófilos, endotélio e plaquetas e podem interferir com a análise biológica.

<html> Aneurisma é fixada em uma solução de paraformaldeído 4% durante 24 horas, em seguida, em um tampão fosfato solução salina até a fixação em um bloco de resina. Nós usamos uma HPS (Hematoxilina Phloxin Safran) (Figura 1), mostrando coloração as células proliferativas de cura em todo o PTFE (Figura 2). As células mesenquimais são, em seguida, caracterizada por α-actina de coloração (Figura 3). <p class="jove_content" fo:keep-together.within-pag...

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A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

Modificações histológicas e bioquímicas após aneurisma endograft exclusão ainda não são claras. Descreve-se um novo modelo de implantação de endoprótese em aneurisma murino. Através da análise de trombo com e sem circulação persistente interface de fluxo de sangue, e nova avaliação biomateriais endovascular, este modelo vai ajudar a entender melhor endovascular pathobiology exclusão do aneurisma.

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