Name: a new murine model of endovascular aortic aneurysm repair
Uploaded: 2013-07-07T14:00:00
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Los autores desean agradecer a Christine Guesdon (Abbott) por los dones de la endoprótesis.

Métodos El protocolo fue aprobado por el comité de ética de Bichat-Debré (N ° 2012-15/698-0074). El modelo de perfusión elastasa ha sido descrito por primera vez por Anidjar en 1990 1: aneurisma aórtico abdominal es inducida por perfusión elastasa en ratas Wistar macho, de 8 a 9 semanas, 250-300 g. Dos a 4 semanas más tarde, se realiza una re-laparotomía, y un diámetro de 3 mm cubierto endoprótesis coronaria se utiliza para excluir el aneurism...

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	<li>Anidjar, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elastase-induced+experimental+aneurysms+in+rats.">Elastase-induced experimental aneurysms in rats.</a> Circulation. 82, 973-981 (1990).</li><li>Azuma, J., Asagami, T., Dalman, R., Tsao, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creation+of+murine+experimental+abdominal+aortic+aneurysms+with+elastase.">Creation of murine experimental abdominal aortic aneurysms with elastase.</a> J. Vis. Exp. (29), e1280 (2009).</li><li>Parodi, J. C., Palmaz, J. C., Barone, H. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transfemoral+intraluminal+graft+implantation+for+abdominal+aortic+aneurysms.">Transfemoral intraluminal graft implantation for abdominal aortic aneurysms.</a> Ann. Vasc. Surg. 5, 491-499 (1991).</li><li>Lees, T., Stansby, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The nationalvascular database report, 2009. , (2012).</li><li>Sakalihasan, N., Limet, R., Defawe, O. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abdominal+aortic+aneurysm.">Abdominal aortic aneurysm.</a> Lancet. 365, 1577-1589 (2005).</li><li>Busuttil, R. W., Abou-Zamzam, A. M., Machleder, H. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collagenase+activity+of+the+human+aorta.+A+comparison+of+patients+with+and+without+abdominal+aortic+aneurysms.">Collagenase activity of the human aorta. A comparison of patients with and without abdominal aortic aneurysms.</a> Arch. Surg. 115, 1373-1378 (1980).</li><li>Michel, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contrasting+outcomes+of+atheroma+evolution:+intimal+accumulation+versus+medial+destruction.">Contrasting outcomes of atheroma evolution: intimal accumulation versus medial destruction.</a> Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 21, 1389-1392 (2001).</li><li>Vorp, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+of+intraluminal+thrombus+in+abdominal+aortic+aneurysm+with+local+hypoxia+and+wall+weakening.">Association of intraluminal thrombus in abdominal aortic aneurysm with local hypoxia and wall weakening.</a> J. Vasc. Surg. 34, 291-299 (2001).</li><li>Kazi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+intraluminal+thrombus+on+structural+and+cellular+composition+of+abdominal+aortic+aneurysm+wall.">Influence of intraluminal thrombus on structural and cellular composition of abdominal aortic aneurysm wall.</a> J. Vasc. Surg. 38, 1283-1292 (2003).</li><li>Kuijper, P. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+adhesion+to+fibrinogen+and+fibrin+under+flow+conditions+is+diminished+by+activation+and+L-selectin+shedding.">Neutrophil adhesion to fibrinogen and fibrin under flow conditions is diminished by activation and L-selectin shedding.</a> Blood. 89, 2131-2138 (1997).</li><li>Touat, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renewal+of+mural+thrombus+releases+plasma+markers+and+is+involved+in+aortic+abdominal+aneurysm+evolution.">Renewal of mural thrombus releases plasma markers and is involved in aortic abdominal aneurysm evolution.</a> Am. J. Pathol. 168, 1022-1030 (2006).</li><li>Fontaine, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+leukocyte+elastase+in+preventing+cellular+re-colonization+of+the+mural+thrombus.">Role of leukocyte elastase in preventing cellular re-colonization of the mural thrombus.</a> Am. J. Pathol. 164, 2077-2087 (2004).</li><li>Sakalihasan, N., Delvenne, P., Nusgens, B. V., Limet, R., Lapiere, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activated+forms+of+MMP2+and+MMP9+in+abdominal+aortic+aneurysms.">Activated forms of MMP2 and MMP9 in abdominal aortic aneurysms.</a> J. Vasc. Surg. 24, 127-133 (1996).</li><li>Alsac, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+significance+of+endoleaks+in+thoracic+endovascular+aneurysm+repair.">The significance of endoleaks in thoracic endovascular aneurysm repair.</a> Ann. Vasc. Surg. 25, 345-351 (2011).</li><li>Buth, J., Harris, P. L., van Marrewijk, C., Fransen, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+significance+and+management+of+different+types+of+endoleaks.">The significance and management of different types of endoleaks.</a> Semin. Vasc. Surg. 16, 95-102 (2003).</li><li>Fransen, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rupture+of+infra-renal+aortic+aneurysm+after+endovascular+repair:+a+series+from+EUROSTAR+registry.">Rupture of infra-renal aortic aneurysm after endovascular repair: a series from EUROSTAR registry.</a> Eur. J. Vasc. Endovasc. Surg. 26, 487-493 (2003).</li><li>van der Vaart, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+PET/SPECT+imaging+in+vascular+disease.">Application of PET/SPECT imaging in vascular disease.</a> Eur. J. Vasc. Endovasc. 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Proof of Concept in Rats.</a> PLoS One. 6, e18679 (2011).</li><li>Trollope, A., Moxon, J. V., Moran, C. S., Golledge, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+abdominal+aortic+aneurysm+and+their+role+in+furthering+management+of+human+disease.">Animal models of abdominal aortic aneurysm and their role in furthering management of human disease.</a> Cardiovasc Pathol. 20, 114-123 (2011).</li><li>Yamaguchi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+influencing+mortality+in+the+rat+elastase-induced-aneurysm+model.">Factors influencing mortality in the rat elastase-induced-aneurysm model.</a> J. Surg. Res. 94, 81-83 (2000).</li><li>von Bruhl, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monocytes,+neutrophils,+and+platelets+cooperate+to+initiate+and+propagate+venous+thrombosis+in+mice+in+vivo.">Monocytes, neutrophils, and platelets cooperate to initiate and propagate venous thrombosis in mice in vivo.</a> J. Exp. Med. 209, 819-835 (2012).</li><li>Smith, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+activation+and+mediators+of+inflammation+in+chronic+venous+insufficiency.">Neutrophil activation and mediators of inflammation in chronic venous insufficiency.</a> J. Vasc. Res. 36, 24-36 (1999).</li><li>Zaragoza, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+cardiovascular+diseases.">Animal models of cardiovascular diseases.</a> J. Biomed. Biotechnol. 2011, 497841 (2011).</li><li>Kuivaniemi, H., Elmore, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Opportunities+in+abdominal+aortic+aneurysm+research:+epidemiology,+genetics,+and+pathophysiology.">Opportunities in abdominal aortic aneurysm research: epidemiology, genetics, and pathophysiology.</a> Ann. Vasc. Surg. 26 (12), 862-870 (2012).</li><li>Schanzer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predictors+of+abdominal+aortic+aneurysm+sac+enlargement+after+endovascular+repair.">Predictors of abdominal aortic aneurysm sac enlargement after endovascular repair.</a> Circulation. 123, 2848-2855 (2011).</li></ol>

Dos modelos de la AAA han sido ya descrito en nuestro laboratorio: xenoinjertos 19 y los modelos inducidos elastasa 1 modelo elastasa es la más parecida a aneurismas aórticos humanos:. Un gran trombo intraluminal circunferencial es entonces excluida por la reparación endovascular del aneurisma. Fugas internas son una complicación habitual de la REVA 14,15. Muchas preguntas permanecen sin resolver: la ruptura de AAA se han descrito con fugas internas bajas...

Habilidades endovasculares han progresado desde la primera reparación endovascular de aneurisma aórtico (REVA) por Parodi en 1991 3, casi la mitad de todos los aneurismas abdominales son tratados mediante REVA 4. A diferencia de la cirugía, la REVA sale del trombo, excluyéndola del torrente sanguíneo sistémico. Los aneurismas se caracterizan por un nivel de hemoglobina ricos trombo múltiples capas, la capa delgada de medios de comunicación y una adventicia fibroso y se inflama. El papel crucial de la proteolisis 5 en la progresión del aneurisma se ha demostrado hace treinta años, 6, 7: saco aneurismático de trombos se asocia con una delgada pared aórtica, la lisis de la elastina, la baja densidad de las células del músculo liso en los medios de comunicación, y un alto nivel de inmuno -inflamatoria reacción adventicia 8,9. Estos cambios sugieren que la actividad enzimática proteolítica se produce dentro del trombo, en lugar de directamente en la pared de la aorta. Además, la capa luminal del trombo es rica en glóbulos rojos aglutinados cells liberando hemoglobina. Ellos son los principales implicados en la formación de fibrina, activación de las plaquetas y de inducir la formación de trombina. Por último, trombo también induce t-PA y plasminógeno de retención, que están implicados en la fibrinolisis y el reclutamiento de leucocitos, principalmente neutrófilos. Estos son 12 veces más importantes en el trombo que en el torrente sanguíneo 10. Su presencia se asocia con una alta tasa de la metaloproteinasa de matriz tipo 8 (MMP-8), MMP-9 y elastasa: que liberan proteasas de serina granulares y agentes oxidantes pro que conducen a la degradación de la matriz fibrilar, y la pared aórtica en última instancia, la ruptura 9,11 -13. Intervención electiva de aneurisma tiene como objetivo evitar la ruptura. REVA deja a ambos pared del aneurisma y trombo intacta. Por lo tanto, el aneurisma de aorta perfusión por colaterales (arterias lumbares, la arteria mesentérica inferior ...), se llama fuga interna, y es una complicación específica del tratamiento endovascular 14,15, que a veces lleva a la ruptura vísperasn con endofugas de baja presión. Por otra parte, en ciertos pacientes, no hay aumento en el diámetro del aneurisma 16. La interacción entre la sangre circulante y la pared del aneurisma mantiene la actividad biológica trombo luminal intra mencionado. Por lo tanto, V endofugas de Tipo, definida como la expansión del saco del aneurisma sin endofuga identificado, se podrían explicar por la actividad enzimática en el interior del trombo aneurisma. Ni las imágenes radiológicas (18 FDG-PET, gammagrafía activación de las plaquetas, hierro óxido contraste MRI17), ni muestras de sangre periférica (MMP-9, micropartículas derivadas de plaquetas, complejos plasmina / anti-plasmina) utilizados para explorar el impacto endovascular en los aneurismas aórticos en los seres humanos directamente evaluar las vías bioquímicas. En nuestro conocimiento, no hay ningún modelos animales exclusión de aneurismas experimentales reproducibles y baratos. Éste permite aneurisma exclusión modificaciones biológicas e histológicas previas y posteriores a explorar.

<table border="1">
<tbody>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Animals </td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Wistar rats</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>aged from 8 to 9 weeks. Weight range from 350 to 400 g</td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Instruments</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Isoflurane anesthesic system</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>4,5% at the beginning, then 2%</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Penthobarbital</td>
 <td>Ceva sante animale, Libourne, France</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Dissection stereomicroscope</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Steriles gloves</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Microsurgical Steriles instruments</td>
 <td>Moria, Antony, France</td>
 <td></td>
 <td>Needle holder,	Forceps, Scissors,Gilbert approximator
o	3 Micro clamps</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>N&deg;40 Silk string</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Prolen 9-0 and 10-0</td>
 <td>Ethicon, Johnson &amp; Johnson, Auneau, France</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Heat-tapered polyethylene tubing</td>
 <td>PE 10</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Syringe infusion pump</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Porcine pancreatic elastase</td>
 <td>Sigma, St. Louis, Mo., USA</td>
 <td></td>
 <td>550 &mu;l of salin is mixed with 175 &mu;l of elastase</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Indeflator</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>9 to 16 mm length, 3 mm diameter coronary PTFE covered stentgraft</td>
 <td>Abbott, Abbott Park, Illinois, USA</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>C-Arm OEC 9800</td>
 <td>GE Medical Systems, Milwaukee, WI</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Aspegic 1000 mg</td>
 <td>Aspirin, Sanofi-Aventis, Paris, France</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Reagent</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Aerane isoflurane 100ML</td>
 <td>Baxter</td>
 <td>Aerane</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Penthobarbital</td>
 <td>Centravet</td>
 <td>053pen203</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Silk Suture 4-0</td>
 <td>Fine Science</td>
 <td>18020-40</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Microsurgical steriles instruments</td>
 <td>Moria</td>
 <td>9980-9983-9987-204/A-204/D-8148-4877A-4878A</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Prolen 9-0 and 10-0</td>
 <td>Ethicon</td>
 <td>W2829 &ndash; NS2850</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Heat tapered Polyethylene tubing : PE 10</td>
 <td>Bioseb</td>
 <td>MRE-010</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Infusion pump</td>
 <td>World precision instrument</td>
 <td>AL-1000</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Porcine pancreatic elastase</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>E1250-100MG</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Indeflator</td>
 <td>Longreal</td>
 <td>KY025 25 100</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Aspegic 1000mg (Aspirin)</td>
 <td>Sanofi-Aventis</td>
 <td>3400931898191</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>C-Arm OEC 9800</td>
 <td>General electric.</td>
 <td>OEC 9800</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Stentgraft : Jostent</td>
 <td>Abbott</td>
 <td>210CG1230 
 210CG1630</td>
 <td></td>
 </tr>
</tbody>
</table>

a new murine model of endovascular aortic aneurysm repair

La exclusión del aneurisma endovascular es una técnica validado para prevenir la ruptura del aneurisma. Resultados a largo plazo destacan las limitaciones técnicas y nuevos aspectos de la fisiopatología del aneurisma de aorta abdominal (AAA). No hay aneurisma aórtico abdominal endoprótesis modelo de exclusión barato y reproducible, lo que permitiría a las investigaciones profundas de AAA antes y después del tratamiento. Por la presente, describimos cómo inducir y, a continuación, a excluimos con una endoprótesis coronaria cubierto de un aneurisma aórtico abdominal en una rata. El inducido modelo AAA conocido elastasa se ​​informó por primera vez en 1990 1 en una rata, a continuación, se describe en el ratón 2. Elastina degradación conduce a la dilatación de la aorta con la infiltración inflamatoria de la pared abdominal y trombo luminal intra, a juego con AAA humana. A continuación se realiza la exclusión endovascular con endoprótesis cubierta pequeña, con exclusión de cualquier interacción entre la sangre circulante y el trombo aneurisma. Exclusión apropiado y permeabilidad endoprótesis esconfirmada antes de la eutanasia por una angiografía pensamiento de la arteria carótida izquierda. Control parcial de la difusión de la elastasa hace aneurisma forma diferente para cada animal. Es difícil crear un aneurisma, lo que permitirá una longitud apropiada de la aorta por debajo del aneurisma para una fácil introducción endoprótesis, y con cuello proximal y distal adecuada para evitar fugas internas. Un montón de fracaso puede dar lugar a la introducción endoprótesis que a veces conducen a rotura aorta con dolor y dificultad para coserla y daño endotelial con post op trombosis de aorta. La administración de aspirina a ratas antes de la implantación endoprótesis disminuye tasa de fracaso sin hemorragias importantes. El tiempo de sujeción activa los neutrófilos, plaquetas y endotelio, y puede interferir con el análisis biológico.

<html> Aneurisma se fija en una solución de paraformaldehído al 4% durante 24 h, a continuación, en una solución salina tamponada con fosfato hasta que la fijación en un bloque de resina. Utilizamos una HPS (hematoxilina floxina Safran) (Figura 1) tinción, mostrando las células proliferativas curativas de todo el PTFE (Figura 2). A continuación, las células mesenquimales se caracterizan por la tinción de α-actina (Figura 3). <p class="jove_content" fo:keep...

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A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

Modificaciones histológicas y bioquímicas después de aneurisma endoprótesis exclusión aún no están claros. Se describe un nuevo modelo de implantación de endoprótesis en un aneurisma murino. A través del análisis de trombos con y sin circulación de interfaz de flujo de sangre persistente, y la nueva evaluación de biomateriales endovascular, este modelo nos ayudará a entender mejor la exclusión endovascular del aneurisma patobiología.

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