Le membrane cellulari dei neuroni sono popolate da canali ionici che controllano il movimento della carica dentro e fuori la cellula, regolando così il fuoco dei neuroni. Una tecnica estremamente utile per studiare le proprietà biofisiche di questi canali è chiamata patch clamp recording. In questo metodo, i neuroscienziati posizionano una micropipetta di vetro lucido contro una cellula e applicano l'aspirazione per formare un sigillo ad alta resistenza. Questo processo isola una piccola "patch" di membrana che contiene uno o più canali ionici. Utilizzando un elettrodo all'interno della micropipetta, i ricercatori possono "bloccare" o controllare le proprietà elettriche della membrana, che è importante per l'analisi dell'attività del canale. L'elettrodo consente inoltre di registrare i cambiamenti nella tensione attraverso la membrana o il flusso di ioni attraverso la membrana.
Questo video inizia con una panoramica dei principi alla base dell'elettrofisiologia del patch clamp, un'introduzione alle attrezzature necessarie e descrizioni delle varie configurazioni di patch, tra cui patch a cellula intera, collegate a cellule, perforate, inside-out ed outside-out. Successivamente, vengono delineati i passaggi chiave di un tipico esperimento di patch clamp a cella intera, in cui viene generata una curva corrente-tensione (IV). Infine, vengono fornite applicazioni di registrazione del patch clamp per dimostrare come le proprietà biofisiche dei canali ionici, l'eccitabilità cellulare e i composti neuroattivi siano valutate oggi nei laboratori di neurofisiologia.
La registrazione del patch clamp è una tecnica estremamente utile per studiare le proprietà biofisiche dei canali ionici che controllano l'attivazione neuronale.
La procedura prevede la pressione di una micropipetta di vetro contro una cellula al fine di isolare una piccola "patch" di membrana che contiene uno o più canali ionici.
La configurazione sperimentale consente inoltre agli scienziati di "bloccare" l'ambiente elettrico dell'area rattoppata controllando con precisione la tensione attravers...
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