Name: derivation of adult human fibroblasts and their direct conversion into expandable neural progenitor cells
Uploaded: 2015-07-29T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Derivation of Adult Human Fibroblasts and their Direct Conversion into Expandable Neural Progenitor Cells at JoVE.com

Biz mükemmel teknik destek için yararlı öneriler ve Martina Gebhardt yanı sıra Heike Arthen için Kök Hücre ve Würzburg Üniversitesi Rejeneratif Tıp Grubu&#39;nun tüm üyelerine teşekkür etmek istiyorum. Bu çalışma, Deutsche Forschungsgemeinschaft DFG (ED79 / 1-2), Milli Eğitim Bakanlığı ve Alman Araştırma BMBF (0813 01 GN), Bavyera Araştırma Ağı uyarılmış pluripotent kök hücrelerin &quot;forIPS&quot; ve &quot;Stiftung Sibylle Assmus hibe ile desteklenmiştir &quot;. Şekil 1, www.servier.com temin edilebilen Servier tıp tekniğinde, kullanılarak üretilir.

Bu çalışmada kullanılan insan fibroblastlar Würzburg, Almanya Üniversitesi etik kurulu tarafından onay ve etik açıklığı haberdar olduktan sonra bir cilt punch biyopsi elde edildi (etik raporu no: 96/11 2011/10/06 tarihli). 1. Punch Biyopsi <ol><li> Hastanın cilt dezenfekte edin. Intrakütan 0.5 ml 1 mepivakain hidroklorür biyopsi (tercihen daha az güneşe maruz kalan bölge) alınacak olan cilt kısmını uyutmak ve steril 3mm biyopsi yumruk kullanarak deri biyopsisi hazırl...

Burada yalıtım ve genleşebilen transgen içermeyen nöral projenitör hücreleri içine insan fibroblastlarının doğrudan dönüşümü ve hücre değiştirme tedavisi ya da ilaç tarama analizleri uygulama için varsayılan bir temel olarak farklılaşmış döl göstermektedir. NPC içine somatik hücre soyu doğrudan dönüşüm seri spesifik transkripsiyon zorla ifade 26,33,34 faktörleri ile elde edilmiştir. Bununla birlikte, bir çok durumda fetal fibroblastlar transdiferansiasyon deneyler 33...

2006 yılında Yamanaka ve arkadaşları ilk kez bir pluripotent devleti 1 içine somatik hücre yeniden programlanması olasılığını gösterebilir. Bu farksızlaşma Oct4, Sox2, Klf4 ve c-Myc murin fibroblast dört transkripsiyon aşırı ifadesi ile faktörleri elde edilmiştir. oluşturulan adlandırılan uyarılmış pluripotent kök hücreler (iPSCs), embriyonik kök hücrelerin (ESCs) fonksiyonel eşdeğerliği gösterir ve bu nedenle, yetişkin organizmanın bütün hücre tiplerine ayırt edilebilir. Daha sonra iPSCs için yeniden programlama bir yıl insan fibroblastlar 2 için elde edilebilir. Hayvan modellerinde deneyler iPSC türetilmiş hücreler, genel olarak, Parkinson hastalığı (PD), örneğin, hücre değiştirme terapisi, 3-5 için kullanılabileceğini göstermektedir. Bununla birlikte, iPSCs kullanımı ile ortaya çıkan çeşitli sınırlamalar terapötik potansiyelinin tam olarak gerçekleştirilmesi için engelleri temsil etmektedir. Pluripotent durumuna ve daha sonra, hücrelerin yeniden programlanmasının Her şeyden önce,kalite kontrol, genel olarak, bir zaman alan ve geniş ve bu yüzden pahalı bir hücre kültürü prosedürlerinde elde verimsiz bir işlemdir. İkincisi, iPSCs önemli tümörojenik potansiyeli barındırmaktadır biyomedikal uygulama öncesi ilgi istenilen hücre tipi ve farklılaşmış nüfusa artık pluripotent hücrelerin olasılığı re-ayırt edilmesi gerekir ve böylece hücre nakli 6 sonra yüksek riski gösterir. Üçüncü olarak, yeniden programlama işlemi, genellikle lenti- ya da retroviral enfeksiyonu ile yeniden programlama faktörleri uyarılması ile elde edilir. konukçu genomuna bu virüslerin entegrasyonu girmeyle mutagenez ve / veya transgenlerin 7,8 kontrolsüz bir şekilde yeniden aktive edilmesine yol açabilir. Bütünleştirici olmayan sistemler sokma mutajenez ve transgen reaktivasyonu riskini en aza indirmek olduğu, hedef hücrelere yeniden programlama faktörleri sağlamak için geliştirilmiştir. Bu transgen içermeyen yaklaşımlar için, non-entegre kullanarak hücrelerin yeniden programlama olanAdeno veya Sendai virüsü 9,10, DNA-temelli vektörler 11 ya da yeniden birleştirici proteinlerin 13,14 sentetik mRNA 12 ya da transdüksiyon transfeksiyonu gibi bir DNA içermeyen yöntemlerin uygulanması. Transgen ücretsiz IPSC derivasyon için bir başka umut verici bir yöntem loxP modifiye lentiviral yeniden programlama yapıları ve Cre-loxP DNA rekombinasyon sistemini kullanan 15,16 transgenlerin sonraki silinmesi kullanılmasıdır. Hücre replasman tedavisi post-mitotik nöronlar 17-20 içine fibroblastların doğrudan dönüşüm temsil için daha basit bir yaklaşım nöral hücreleri üretmek için. Vierbuchen ve ark., Transkripsiyon aşırı murin fibroblast 17 ​​den% 20 nöronların nesil Ascl1, Brn2 ve Myt1l sonuçları faktörler olduğunu bildirmiştir. 2011 yılında NeuroD1 aşırı ekspresyonu ile kombinasyon halinde aynı üç transkripsiyon faktörleri neu, insan fibroblast transdiferansiyonun etkinleştirmek, gördünöronlar 19. İnsan kaynaklı nöron ayrıca çift SMAD- ve GSK3β- inhibisyonu altında 20 Ascl1 ve Ngn2 aşırı ifadesi ile oluşturulabilir. Özellikle, nöronlar fibroblastların doğrudan dönüşüm daha da genişlemesi ve biobanking izin vermeyen bir non-proliferatif, post-mitotik hücre popülasyonunu oluşturur. Son zamanlarda, bir çoğalan sinir kök / progenitör hücre popülasyonunun içine fibroblastların doğrudan dönüşüm 21-26 bildirildi. Açıklık uğruna, bütün bu hücre tipleri bu raporda uyarılmış nöral progenitör hücrelerin (iNPCs) olarak adlandırılır. Han ve ark. INPCs oluşturmak için Brn4, Sox2, c-myc ve Klf4 aşırı eksprese. Birincil doku veya pluripotent ya hücrelerden türetilmiş kendi nöral kök hücre meslektaşları gibi bu iNPCs tripotential ve nöronlar, astrositler ve oligodendrosit 21 içine ayırt edilebilir. Grubumuz Sox2, Klf4 aşırı ekspresyonu içeren biraz daha farklı bir dönüşüm protokolü bildirdiC-myc, ve sadece 5 gün süre ile indüklenen Oct4-ekspresyonu ve. Bu yaklaşımla biz yeniden programlama 22 faktörleri tam susturulması sergileyen fare embriyonik ve yetişkin fibroblastlardan stabil çoğalan iNPCs yaratabilir. IPSCs aksine, iNPCs nakli sonra 27 tümörijenik potansiyeli göstermezler. Biz iNPCs klinik 22 faydalı olduğunu gösteren, bir hayvan demiyelinizasyon modelinde miyelin eksikliği sıçanlarda başarıyla hücreleri dönüştürüldü kullandık. O zamana kadar, NPC yalnızca pluripotent kök hücreler veya birincil sinir dokusu 28-32 elde edilebilir. iNPCs dondurularak ve nöronlar, astrositler ve oligodendrositlere ayırt edebiliyoruz olabilir stabil genişletilebilir hücrelerdir. Çok çaba insan hücreleri 23,26,33,34 fare arasında doğrudan dönüşüm protokolü adapte yapılmıştır. 2012 yılında fibroblastlarda tek faktör Sox2 fazla sentezlenmesi sıçangil ve insan iNPCs oluşturmak için yeterli olduğu yayınlanmıştır <s&gt; 33 kadar. Yazarlar, fetal sünnet derisi fibroblast insan iNPCs üretilmesini bildirdi ve Sox2 ve Nestin karşı boyanarak bunları karakterize edilir. Bununla birlikte, yeniden programlama için kullanılan hedef hücreler, klinik uygulamada kullanılabilir ve uygulanan bir hayvan modelinde nakli ile dönüştürülmüş hücrelerin hiç bir işlevsel vasıflandırılması orada olmayacak bir çok özel, hücre tipini temsil etmektedir. Daha yeni bir yayın Sox2, c-myc ve Brn2 ya Brn4 34 ya da aşırı ifadesi ile insan fetusu fibroblastlannda nöronal sınırlı progenitörlerin üretimini tarif eder. oluşturulan hücre çizgileri kendini yenileme kapasite göstermiştir ve terminal nöronların çeşitli içine ayırt edilebilir. Bu hücreler, heterojen kökenlidir ve bir bakiye, örneğin, preparasyonlarda nöral tepe kök hücrelerin varlığını dışlamaz olabilir Ancak fetal fibroblast kullanımı sakıncalıdır. 2014 yılında, Zhu ve ark., Insan yetişkin ve neo doğrudan dönüşüm bildirdiTek başına ya da Oct4 Oct4 birlikte Sox2 aşırı ifadesi ve hücre kültür ortamına küçük moleküllerin ilave edilmesi ile tripotential nöral projenitör hücrelerine doğum fibroblastlar. Özellikle, kendi çalışmaları Sox2 dayalı tek başına doğrudan dönüşüm 26 uyarmak için yeterli oldu. Daha yakın zamanda, Lu ve ark. Yamanaka fazla sentezlenmesi genleşebilen tripotential sinir üretiminde yüksek sıcaklık sonuçları virüs 24 saat ve daha sonra inaktivasyonu için Sendai virüsü ile Oct4-, Sox2-, Klf4-, c-myc faktörleri rapor ön-madde hücreleri, 23. Insan hücreleri için yayınlanmış dönüşüm protokolleri şu ana kadar zamanında sınırlı bir şekilde, genellikle Yamanaka faktörlerin en az bir ya da daha fazla, ortak bir aşırı ekspresyonu sahip olsa da, sonuç olarak, doğrudan tahrik için gerekli olan en az bir moleküler faktörlerin açık bir belirti yoktur iNPCs içine dönüşüm. ya da genetik yollarla Oct4 zamanında sınırlı aşırı sentetik mRNA ile transfeksiyon, ya da Cı-Birlikte Sox2, Klf-4 ve C-Myc yapısal ifadesi ile Ell-nüfuz edici proteini henüz stabil insan iNPC hatlarında sonuçlanmamıştır. Böylece, Sendai virüsü uygulamanın tüm Yamanaka faktörleri aşın ve zamanında 22,31 bugüne kadar tercih edilen strateji temsil birlikte optimize nöral medya indüksiyon koşulları virüsün 23 ısı inaktivasyonu ile faaliyetlerini kısıtlamak. Çeşitli çalışmalar NSC&#39;lerde veya farklı hayvan hastalık modellerinde kendi farklılaşmış meslektaşları hücresel işlevlerini göstermektedir. Insan pluripotent kök hücrelerinden Sinir atalarıdır birden 35,36 skleroz nöroenflamatuar bozukluğu fare modellerinde nakledilen oylandı. EAE&#39;de HESC türetilmiş nöral projenitör hücrelerin uygulanabilirliği (deneysel otoimmün ensefalomiyelit) -mice ilk olarak 2008 yılında gördü 35. Multipotent nöral ön-madde hücreleri, fare beyin ventriküller içine enjekte edildi ve transplantasyon sonuçlarıEAE klinik belirtilerinin azalmasında ed. Kim ve ark. HESC oligodendroglial öncüleri oluşturulur ve EAE-farelere intraserebrovantriküler olan nakledilen. Nakli fazla 10 gün boyunca hayatta olmasa da, fareler, nörolojik fonksiyonu ve beyaz cevher 36 proinflamatuar bağışıklık hücrelerinin azalması önemli gelişme gösterdi. Kök hücre tedavisi, aynı zamanda NPC başarılı bir şekilde, ilgili hayvan modellerinde kullanılabilir olabilir gibi klinik öncesi Parkinson Hastalığının hedeflenmesi için uygulanmıştır. Bunun için, projenitör hücreler ya pluripotent kök hücreler 38-40 veya 41 kullanılmıştır mezenkimal kök hücrelerden ayırt fetal beyin dokusu 37 elde edilmiştir. 2012 yılında fare iNPCs miyelin eksikliği (md) sıçan 22 beyinlerine naklinden sonra proteolipid protein, büyük bir protein miyelin bileşenini üretmek mümkün olduğunu gösterdi. Bu proof-of-prensibi deney tedavi applicabil tarafındaniNPCs of Sığ öncelikle kanıtlanmış ve yakında başka bir çalışmada 32 ile teyit edilmiştir. Bununla birlikte, insan iNPCs terapötik kullanımı tam potansiyeli bir araştırma konusudur. Burada cilt biyopsisi yoluyla erişkin hastalarda insan primer hücreleri (i) türetme bir sağlam ve entegre sürecini göstermek, (ii) nöral progenitör devlet ve iNPCs (iii) yeteneği, insan fibroblast doğrudan dönüşüm nöronal içine ayırt edilmesi ve glial soy. Bu protokolün kullanımı terapötik uygulamalar için otolog insan hücrelerinin üretimini hızlandırmak için yardımcı olacaktır.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Astrocyte media</td>
			<td>ScienCell</td>
			<td align="right">1801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td>17504-044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BDNF</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>450-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biopsy Punch</td>
			<td>pfm medical</td>
			<td align="right">48301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cAMP</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A6885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CHIR99021</td>
			<td>Axon medchem</td>
			<td align="right">1386</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase Type2</td>
			<td>Worthington Biochemical</td>
			<td>LS004177</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dispase</td>
			<td>PAN&#160;</td>
			<td>P10-032100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td>41966-029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM F12</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td>11320-033</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Roth</td>
			<td align="right">4720</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td>14190-094</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGF</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>PHG0313</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FCS</td>
			<td>Biochrom AG</td>
			<td align="right">50115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GDNF</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>450-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamicin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G1397</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFAP-antibody</td>
			<td>Dako</td>
			<td>Z0334</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GlutaMAX</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td>35050-038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hLIF</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>300-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Seralab</td>
			<td>GEM-700-112-P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ki67-antibody</td>
			<td>NeoMarkers</td>
			<td>RM-9106-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td>25030-024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>L2020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N2</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td>17502-048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nestin-antibody</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>MAB1259</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td>21103-049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-essential amino acids</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td>11140-050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NSC freezing media</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C6295</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oct4-antibody</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc9081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pax6-antibody</td>
			<td>Covance</td>
			<td>PRB-278P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SB431542</td>
			<td>Invivogen</td>
			<td>inh-sb43</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sendai virus: CytoTune Sendai Reprogramming Kit</td>
			<td>&#160;LifeTechnologies</td>
			<td>A1378001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodiumpyruvate</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>11360-039</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sox1-antibody</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>AF3369</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sox2-antibody</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>MAB2018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T3</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-205725</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin/EDTA</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>15400-054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TUJ1-antibody</td>
			<td>Covance</td>
			<td>MMS-435P-250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitamin C</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A4544</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Y27632</td>
			<td>Calbiochem</td>
			<td>CAS 146986-50-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;-Mercaptoethanol</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td align="right">21985023</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

derivation of adult human fibroblasts and their direct conversion into expandable neural progenitor cells

Somatik hücre içine yetişkin deri fibroblastlardan uyarılmış pluripotent kök hücre (iPSCs) ve sonraki farklılaşma Nesil histokompatibilite engelleri aşmak otolog nakli türetilmesi için ilginç umutları sağlar. Ancak, pluripotent devleti ve istenen soy içine sonradan tam farklılaşma yoluyla ilerleme nedeniyle ilgili neoplastik potansiyeli ve genomik istikrarsızlık iPSC teknolojisinin klinik çeviri için bir barikat olmaya devam etmektedir. Son zamanlarda, ve diğerleri, somatik hücreler, sadece bu şekilde, pluripotent durumda ilerlemeyi engellemeyi, tanımlanmış faktörleri kullanılarak iPSCs halinde değil, aynı zamanda multipotent somatik kök hücrelerin farklı tiplerine dönüştürülemez gösterdi. Özel olarak, indüklenen nöral projenitör hücreler (iNPCs), insan fibroblast doğrudan dönüştürme, hücre değiştirme, hastalık modelleme gibi çeşitli uygulamalar için yeni bir otolog hücre kaynağı olasılığını habercisidirve ilaç tarama. Burada, zamanında yoktur Oct4, Sox2, Klf4 ifadesi, hem de c-myc göre iNPCs içine deri biyopsisi ve etkin doğrudan dönüştürme ile, yetişkin insan primer fibroblastlar izolasyonunu tarif eder. Sox2 pozitif nöroepitelyal koloniler indüksiyon 17 gün sonra ortaya çıkar ve iNPC hatları monoklonal izolasyon ve genişlemesi ile etkin bir şekilde tespit edilebilir. Indüksiyon aşamasında enfeksiyon ve lösemi inhibitör faktör takviyesi viral çokluğu hassas ayar kadar% 0.2 dönüşüm verimi elde etmek için kritik faktörleri temsil etmektedir. Şimdiye kadar, hastaya özgü iNPC hatları fazla 12 geçişleri için genişletilmiş ve eşit örneğin Nestin ve Sox2 ifadesi olarak nöral kök / progenitör hücrelerin morfolojik ve moleküler özellikleri göstermek mümkündür. sırasıyla Tuj1 ve GFAP karşı boyama tarafından değerlendirilecek iNPC hatları nöronlar ve astrositler içine ayırt edilebilir. Sonuç olarak, türev ve korkunç için sağlam bir protokol raporBöyle otolog sinir hücre değişimi ve hastalık modelleme gibi biyomedikal uygulamalarda bir hücresel kaynak sağlayabilir stabil genişletilebilir nöral progenitör hücrelerin içine insan fibroblastlar ct dönüşüm.

Burada en az 8 haftalık (Şekil 1) içinde deriden punch biyopsi ile elde edilmiş olan insan fibroblastlarında indüklenen nöral projenitör hücreleri (iNPCs) üretilmesini sağlayan entegre işlemin tanımını. Hasta specifc iNPCs daha nöronal ve glial soy içine farklılaşmış hücre replasman tedavisi ve hastalık modelleme için büyük bir potansiyel liman olabilir. Oct4-, Klf4-, Sox2- ve c-Myc Sendai ile fibroblast Enfeksiyon fibroblast ve 17 gün sonra enfeks...

Watch this Scientific Journal Video about Derivation of Adult Human Fibroblasts and their Direct Conversion into Expandable Neural Progenitor Cells at JoVE.com

Derivation of Adult Human Fibroblasts and their Direct Conversion into Expandable Neural Progenitor Cells

Uyarılmış pluripotent kök hücrelerin üretilmesi otolog nakli türetilmesi için ilginç umutları sağlar. Ancak, pluripotent devlet ve zahmetli yeniden farklılaşma yoluyla ilerleme hala klinik çeviri engellemektedir. Burada erişkin insan fibroblast türetme ve uyarılmış nöral progenitör hücrelerin içine doğrudan dönüşüm ve nöral soy içine sonradan farklılaşmayı açıklar.

Yetişkin İnsan Fibroblastları türetilmesi ve Genişletilebilir Sinir Progenitör Hücreler içine Doğrudan Dönüşüm

Generation of&#160;induced pluripotent stem cell (iPSCs) from adult skin fibroblasts and subsequent differentiation into somatic cells provides ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Time-lapse Live Imaging of Clonally Related Neural Progenitor Cells in the Developing Zebrafish Forebrain

Gelişmekte olan Zebra balığı önbeyin klonal olarak ilişkilidir Sinir Progenitör Hücreler Zaman atlamalı Canlı Görüntüleme

Precise patterns of division, migration and differentiation of neural progenitor cells are crucial for proper brain development and function1,2. To ...

Nörobilim

Neural-Colony Forming Cell Assay: An Assay To Discriminate Bona Fide Neural Stem Cells from Neural Progenitor Cells

Hücre Testi Şekillendirme Sinir-Koloni: Sinir Progenitör Hücreler Bona Fide Sinir Kök Hücreler Ayırım Bir Testi

The neurosphere assay (NSA) is one of the most frequently used methods to isolate, expand and also calculate the frequency of neural stem cells (NSCs). ...

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Bozulmamış Duyu Organ Öncü Hücreler Canlı hücre Görüntüleme Drosophila Pupa

Since the discovery of Green Fluorescent Protein (GFP), there has been a revolutionary change in the use of live-cell imaging as a tool for understanding ...

Lineage-reprogramming of Pericyte-derived Cells of the Adult Human Brain into Induced Neurons

Kaynaklı Nöronlar içine Yetişkin İnsan Beyninin perisit türetilmiş Hücreler Lineage yeniden programlama

Direct lineage-reprogramming of non-neuronal cells into induced neurons (iNs) may provide insights into the molecular mechanisms underlying neurogenesis ...

Feeder-free Derivation of Neural Crest Progenitor Cells from Human Pluripotent Stem Cells

İnsan Pluripotent dan Sinir Crest Progenitör Hücreler besleyici ücretsiz Derivasyon Kök Hücre

Human pluripotent stem cells (hPSCs) have great potential for studying human embryonic development, for modeling human diseases in the dish and as a ...

Cell Sorting of Neural Stem and Progenitor Cells from the Adult Mouse Subventricular Zone and Live-imaging of their Cell Cycle Dynamics

Hücre Yetişkin Fare subventricular Bölgesinden Nöral Kök ve Progenitör Hücreler Sıralama ve Hücre Döngüsü Dynamics Canlı görüntüleme

Neural stem cells (NSCs) in the subventricular zone of the lateral ventricles (SVZ) sustain olfactory neurogenesis throughout life in the mammalian brain. ...

Development of a Refined Protocol for Trans-scleral Subretinal Transplantation of Human Retinal Pigment Epithelial Cells into Rat Eyes

Sıçan gözlerinin içine insan retina Pigment epitel hücrelerinin Trans-scleral Subretinal nakli için rafine bir protokol geliştirilmesi

Degenerative retinal diseases such as age-related macular degeneration (AMD) are the leading cause of irreversible vision loss worldwide. AMD is ...

Homochronic Transplantation of Interneuron Precursors into Early Postnatal Mouse Brains

Erken Postnatal fare beyin içine Interneuron öncüleri Homochronic nakli

Neuronal fate determination and maturation requires an intricate interplay between genetic programs and environmental signals. However, disentangling the ...

Identifying Cell Surface Markers of Primary Neural Stem and Progenitor Cells by Metabolic Labeling of Sialoglycan

Primer Nöral Kök ve Progenitor Hücrelerinin Hücre Yüzey Belirteçlerinin Sialoglycan'ın Metabolik Etiketlemesi ile Belirlenmesi

Neural stem and progenitor cells (NSPCs) are the cellular basis for the complex structures and functions of the brain. They are located in specialized ...

Conversion of Human Induced Pluripotent Stem Cells (iPSCs) into Functional Spinal and Cranial Motor Neurons Using PiggyBac Vectors

Conversion of Human Induced Pluripotent Stem Cells iPSCs into Functional Spinal and Cranial Motor Neurons Using PiggyBac Vectors

Insan kaynaklı pluripotent kök hücrelerinin (iPSCs), PiggyBac vektörler kullanarak fonksiyonel spinal ve kranial motor nöronlara dönüşümü

We describe here a method to obtain functional spinal and cranial motor neurons from human induced pluripotent stem cells (iPSCs). Direct conversion into ...