Name: a murine model of group b streptococcus vaginal colonization
Uploaded: 2016-11-16T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Group B Streptococcus Vaginal Colonization at JoVE.com

We would like to thank the vivarium manager and staff at San Diego State University for support with animal husbandry. During this work, K.A.P. was supported by an ARCS scholarship and a fellowship from the Inamori Foundation. K.S.D. is supported by an R01 grant, NS051247, from the National Institutes of Health.

وقد وافق كل عمل الحيوانية مكتب مختبر رعاية الحيوان في جامعة ولاية سان دييغو وأجرى بموجب المعايير البيطرية مقبولة. إناث الفئران، سن 8-16 أسابيع استخدمت، لتطوير هذا الأسلوب. 1. إعداد وداخل الصفاق حقن β استراديول <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";te...

لتعزيز النهوض فهم التفاعلات GBS مع كل من المضيف والميكروبات الأخرى في سياق المضيف، مطلوب نموذج حيواني. يصف هذا العمل الجوانب التقنية لإنشاء GBS الاستعمار المهبل في الفئران. هذا البروتوكول يحقق&gt; 90٪ الاستعمار من الفئران من دون استخدام التخدير لتطعيم البكتيريا أو لجمع ع...

العقدية القاطعة للدر، المجموعة الثانية العقدية (GBS)، هو، البكتيريا إيجابية الجرام مغلفة التي غالبا ما تكون معزولة من الأمعاء والجهاز البولي التناسلي من البالغين الأصحاء. في 1970s، ظهرت GBS وكيلا للوفيات حديثي الولادة المعدية، مع أكثر من 7000 حالة من حالات مرض حديثي الولادة سنويا 1. المبكر بداية GBS مرض (التخلص من الذخائر المتفجرة) ويحدث في الساعات أو الأيام الأولى من الحياة، ويطرح نفسه هو الالتهاب الرئوي أو ضيق في التنفس، وغالبا ما يتطور إلى تسمم الدم، في حين أن المرض تأخر ظهور (اللد) تستتبعه بعد عدة أشهر، ويقدم مع تجرثم الدم، والتي في كثير من الأحيان التقدم إلى التهاب السحايا 2. اعتبارا من عام 2002، ومراكز السيطرة على الأمراض والوقاية منها توصي الفحص الشامل لGBS الاستعمار المهبل في أواخر الحمل والوقاية باستخدام المضادات الحيوية الولاد (IAP) لأمهات GBS الإيجابية 1. وعلى الرغم من الحد من المرض المبكر بداية إلى ما يقرب من 1000 حالة في الولايات المتحدة بسبب سنويا لIAP،يبقى GBS السبب الرئيسي للتسمم في حديثي الولادة في وقت مبكر الحدوث، وتأخر ظهور قوع يبقى بمنأى 1. سواء في الرحم، أثناء العمل، أو حتى في الحالات المتأخرة من البداية، تعرض الرضع لGBS يتطلب البقاء على قيد الحياة، مستعرضة من خلال عدد من البيئات المضيفة والحواجز، والتهرب المناعي، وفي حالة التهاب السحايا، عبور بالدم درجة عالية من التنظيم حاجز الدماغ 2. المنبع من هذه التفاعلات خبيثة داخل الوليد هو الاستعمار الأولي من القناة المهبلية الأمهات. الأم GBS معدلات الاستعمار المهبلية تتراوح 8-18٪ في البلدان المتقدمة والنامية، وبمعدل متوسط يقدر ب 12.7٪ 3،4. GBS استعمار القناة المهبلية أثناء الحمل قد يكون ثابتا، متقطعة، أو عابرة في الطبيعة بين النساء الفردية 5. ومن المثير للاهتمام، ويرتبط والأمهات العمر&gt; 36 عاما مع الاستعمار المستمرة 6. عوامل الخطر البيولوجية والاجتماعية والاقتصادية العديدة لGBS الاستعمار المهبلتم تحديدها. وتشمل العوامل البيولوجية الهضمي الاستعمار GBS وغياب الملبنة في الأمعاء. ومع ذلك، كما تم المرتبطة العرق، السمنة، والنظافة، والنشاط الجنسي مع GBS النقل المهبل 7. على الرغم من اشتهر يسبب العدوى حديثي الولادة، يسبب GBS أيضا مجموعة متنوعة من الالتهابات الأمهات على حد سواء الفترة المحيطة بالولادة وبعد الولادة. يتم زيادة GBS النقل في النساء مع تقديم المهبل 8، وفي بعض الحالات، قد يكون حتى الكيان المرض 9. بالإضافة إلى ذلك، GBS صعود الجهاز التناسلي أثناء الحمل قد يؤدي إلى عدوى داخل السلى أو شريوأمنيونيتيس 10. وعلاوة على ذلك، في ما يصل إلى 3.5٪ من حالات الحمل، GBS نشر إلى المثانة البولية أن يسبب عدوى المسالك البولية أو الجرثومية عديمة الأعراض (11). ويرتبط الجرثومية GBS خلال فترة الحمل مع زيادة خطر الاصابة بالحمى أثناء الولادة، شريوأمنيونيتيس، الولادة المبكرة، وprematurالبريد تمزق الأغشية 12. معا، ويرتبط وجود GBS داخل القناة المهبلية لالتهابات أنسجة المضيف متعددة، والقدرة على القضاء على GBS من هذا المتخصصة أمر حتمي بالنسبة للصحة الأمهات والأطفال حديثي الولادة. حتى وقت قريب، والغالبية العظمى من عمل دراسة التفاعلات GBS مع الجهاز عنقي مهبلي اقتصر على نماذج الخلايا في المختبر 13-15. وقد كشفت هذه التجارب في المختبر العوامل البكتيرية التي تعتبر مهمة للالتزام، بما في ذلك البروتينات السطحية مثل هذه الشعرة وسيرين الغنية يكرر 17،18، وكذلك النظم التنظيمية اثنين من عناصر 15،19 واستجابة النسخي العالمية للظهارة المهبل ل GBS 19. ومع ذلك، لتوضيح كامل التفاعلات المضيف ميكروب داخل القناة المهبلية، وهذا نموذج حيوان قوي أمر ضروري. أظهر العمل في وقت مبكر أن GBS يمكن استردادها من القناة المهبلية من الفئران الملقحة 20،21 والجرذان &lt;سوب&gt; 22 في كل الظروف الحوامل وغير الحوامل. في عام 2005، كان على غرار المدى القصير GBS الاستعمار المهبل في الفئران لدراسة فعالية انزيم فج التحللي لعلاج GBS المهبلية خلال فترة 24 ساعة 23. بعد عدة سنوات، وقد وضعت على المدى الطويل GBS الاستعمار المهبل نموذج الفأر لدراسة العوامل المضيفة والبكتيرية التي تحكم GBS المثابرة. وقد حدد هذا النموذج العديد من العوامل التي تسهم في GBS الاستعمار، بما في ذلك الزوائد سطح 17،18 وGBS أنظمة اثنين من عناصر 19،24. وقد ساهم هذا النموذج على تحديد آليات الاستجابة المضيف 19،25، وكان يستخدم لاختبار العديد من الاستراتيجيات العلاجية، بما في ذلك الببتيدات المناعية 26 و البروبيوتيك 27. هذا البروتوكول يعطي التوجيهات اللازمة لتطعيم GBS في القناة المهبلية الماوس وتتبع فيما بعد الاستعمار وجمع عينات لإجراء المزيد من التحليلات.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="592">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">Sesame oil&#160;</td>
			<td style="width:91px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">S3547-250ML</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:46px;width:216px;">&#946;-Estradiol&#160;</td>
			<td style="width:91px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">E8875-1G</td>
			<td>CAUTION: Wear appropriate PPE. &#946;-estradiol can be absorbed through the skin and mucosal surfaces.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">200 &#956;L gel loading pipette tips&#160;</td>
			<td style="width:91px;">USA Scientific</td>
			<td style="width:119px;">1252-0610</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Urethro-genital, sterile, calcium alginate swabs</td>
			<td style="width:91px;">Puritan</td>
			<td style="width:119px;">25-801 A 50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">CHROMagar StrepB</td>
			<td style="width:91px;">DRG International</td>
			<td style="width:119px;">SB282</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Todd Hewitt Broth</td>
			<td style="width:91px;">Hardy Diagnostics</td>
			<td style="width:119px;">7161C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">18 G, 1.5 inch needles</td>
			<td style="width:91px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">305199</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">26 G, 0.5 inch needles</td>
			<td style="width:91px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">305111</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">10 mL syringes</td>
			<td style="width:91px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">309604</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">1 mL syringes</td>
			<td style="width:91px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">0.45 &#956;m PVDF syringe filters</td>
			<td style="width:91px;">Whatman</td>
			<td style="width:119px;">6900-2504</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Dulbecco&#39;s Phosphate-Buffered Salt Solution 1X</td>
			<td style="width:91px;">Corning</td>
			<td style="width:119px;">21-031-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a murine model of group b streptococcus vaginal colonization

العقدية القاطعة للدر (المجموعة الثانية العقدية، GBS)، هو إيجابية الجرام، المستعمر بدون أعراض في الجهاز الهضمي البشري والقناة المهبلية من 10 - 30٪ من البالغين. في الأفراد المناعة للخطر، بما في ذلك حديثي الولادة، والنساء الحوامل، وكبار السن، قد GBS التبديل إلى الممرض الغازية تسبب تعفن الدم والتهاب المفاصل والالتهاب الرئوي، والتهاب السحايا. لأن GBS هي العوامل المسببة للأمراض البكتيرية الرائدة في مجال حديثي الولادة، وتتألف الوقاية الحالية من أواخر فحص الحمل للGBS الاستعمار المهبل واللاحقة العلاج بالمضادات الحيوية الفترة المحيطة بالولادة من الأمهات GBS إيجابية. عبء المهبل GBS الثقيل هو أحد عوامل الخطر بالنسبة للأمراض الأطفال حديثي الولادة والاستعمار. للأسف، لا يعرف إلا القليل عن البلد المضيف والعوامل البكتيرية التي تشجع أو تسمح GBS الاستعمار المهبل. يصف هذا البروتوكول تقنية لإنشاء المستمر GBS الاستعمار المهبل باستخدام واحدة-β استراديول ما قبل المعالجة وأخذ العينات اليومية لتحديد مبناها البكتيريةد. ذلك مزيدا من التفاصيل أساليب لإدارة العلاجات أو الكواشف من فوائد إضافية وجمع المهبل السائل غسل وأنسجة الجهاز التناسلي. وهذا نموذج الفأر يعزز فهم التفاعل GBS المضيف ضمن بيئة المهبل، والتي سوف تؤدي إلى الأهداف العلاجية المحتملة للسيطرة الاستعمار المهبل الأمهات أثناء الحمل ومنع انتقال العدوى إلى الأطفال حديثي الولادة المعرضين للخطر. كما سيكون من مصلحة لزيادة فهمنا للتفاعلات البكتيريا في استضافة العامة في القناة المهبلية الإناث.

خلال تطوير هذا النموذج، لوحظ متعددة بشأن العوامل التي تؤثر على مدة GBS الاستعمار المهبل. لتحديد مرحلة كيف داقية في الآثار التلقيح GBS استمرار البكتيرية، ونظموا الفئران في يوم من التلقيح عن طريق السائل غسل المهبل. ويوضح الشكل 1 المراحل الأربع ?...

Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Group B Streptococcus Vaginal Colonization at JoVE.com

A Murine Model of Group B Streptococcus Vaginal Colonization

والغرض من هذا البروتوكول هو تقليد مجموعة بشرية الثانية العقدية (GBS) الاستعمار المهبل في نموذج الفئران. ويمكن استخدام هذا الأسلوب لتحقيق الاستجابة المناعية والعوامل البكتيرية المساهمة في GBS استمرار المهبلي، وكذلك لاختبار الاستراتيجيات العلاجية.

نموذج الفئران من المجموعة الثانية<em&gt; العقدية</em&gt; المهبلية الاستعمار

Streptococcus agalactiae (group B Streptococcus, GBS), is a Gram-positive, asymptomatic colonizer of the human gastrointestinal tract and vaginal tract of ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

A Murine Model of Group B Streptococcus Vaginal Colonization

Murine Model of CD40-activation of B cells

الفئران نموذج تفعيل CD40 - B من الخلايا

Research on B cells has shown that CD40 activation improves their antigen presentation capacity. When stimulated with interleukin-4 and CD40 ligand ...

Induction and Assessment of Class Switch Recombination in Purified Murine B Cells

الاستقراء والتقييم من فئة التوحد التبديل في تنقية خلايا الفئران B

Humoral immunity is the branch of the immune system maintained by B cells and mediated through the secretion of antibodies. Upon B cell activation, the ...

Live Cell Imaging of Bacillus subtilis and Streptococcus pneumoniae using Automated Time-lapse Microscopy

Live Cell Imaging of Bacillus subtilis and Streptococcus pneumoniae using Automated Time-lapse Microscopy

تعيش خلية من التصوير<emالعصوية الرقيقة> و العقدية الرئوية الآلي باستخدام الميكروسكوب مرور الزمن

During the last few years scientists became increasingly aware that average data obtained from microbial population based experiments are not ...

Protocols for Vaginal Inoculation and Sample Collection in the Experimental Mouse Model of Candida vaginitis

Protocols for Vaginal Inoculation and Sample Collection in the Experimental Mouse Model of Candida vaginitis

بروتوكولات لتلقيح المهبل وجمع العينات في النموذج التجريبي للماوس المبيضات المهبل

Vulvovaginal candidiasis (VVC), caused by Candida species, is a fungal infection of the lower female genital tract that affects approximately 75% of ...

Quantification of Fungal Colonization, Sporogenesis, and Production of Mycotoxins Using Kernel Bioassays

الكمي للاستعمار الفطرية، تولد الأبواغ، وإنتاج السموم الفطرية عن طريق اختبارات بيولوجية على النواة

The rotting of grains by seed-infecting fungi poses one of the greatest economic challenges to cereal production worldwide, not to mention serious risks ...

Characterization of Inflammatory Responses During Intranasal Colonization with Streptococcus pneumoniae

Characterization of Inflammatory Responses During Intranasal Colonization with Streptococcus pneumoniae

توصيف الاستجابات الالتهابية خلال الاستعمار داخل الشرج مع الالتهاب الرئوي العقدي

Nasopharyngeal colonization by Streptococcus pneumoniae is a prerequisite to invasion to the lungs or bloodstream1. This organism is capable of colonizing ...

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

نموذج غير الغازية من ممرض للأعصاب<em&gt; الإشريكية القولونية</em&gt; العدوى في الأطفال حديثي الولادة الجرذ

Investigation of the interactions between animal host and bacterial pathogen is only meaningful if the infection model employed replicates the principal ...

Non-invasive Imaging of the Innate Immune Response in a Zebrafish Larval Model of Streptococcus iniae Infection

Non-invasive Imaging of the Innate Immune Response in a Zebrafish Larval Model of Streptococcus iniae Infection

التصوير غير الغازية من الاستجابة المناعية الفطرية في نموذج الزرد يرقات<em&gt; العقدية iniae</em&gt; العدوى

The aquatic pathogen, Streptococcus iniae, is responsible for over 100 million dollars in annual losses for the aquaculture industry and is capable of ...

Intracranial Subarachnoidal Route of Infection for Investigating Roles of Streptococcus suis Biofilms in Meningitis in a Mouse Infection Model

Intracranial Subarachnoidal Route of Infection for Investigating Roles of Streptococcus suis Biofilms in Meningitis in a Mouse Infection Model

داخل الجمجمة سوباراتشنويدال الطريق للعدوى "أدوار التحقيق" للأغشية الحيوية العقدية الخنزيرية في التهاب السحايا في "نموذج العدوى الماوس"

Streptococcus suis is not only a major bacterial pathogen of pigs worldwide but also an emerging zoonotic agent. In humans and pigs, meningitis is a major ...

Quantifying Vibrio cholerae Colonization and Diarrhea in the Adult Zebrafish Model

Quantifying Vibrio cholerae Colonization and Diarrhea in the Adult Zebrafish Model

التحديد الكمي لاستعمار الكوليرا والإسهال في النموذج الزرد الكبار

Vibrio cholerae is best known as the infectious agent that causes the human disease cholera. Outside the human host, V. cholerae primarily exists in the ...