Name: an optimized hemagglutination inhibition (hi) assay to quantify influenza-specific antibody titers
Uploaded: 2017-12-01T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Optimized Hemagglutination Inhibition HI Assay to Quantify Influenza-specific Antibody Titers at JoVE.com

تمت الموافقة على دراسة البروتوكولات عن طريق مجلس المراجعة الأخلاقية المحلية (www.EKNZ.ch) وتم الحصول على الموافقة الخطية من جميع المشاركين.
1. جمع المصل
<ol><li>جمع عينات مصل الدم من البشر في وقت النقاط المثيرة للاهتمام. لهذه الدراسة، جمعنا الأمصال في الأيام 0 (وقت التطعيم ضد الإنفل?...

<ol>
	<li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+and+control+of+seasonal+influenza+with+vaccines.+Recommendations+of+the+Advisory+Committee+on+Immunization+Practices--United+States,+2013-2014.">Prevention and control of seasonal influenza with vaccines. Recommendations of the Advisory Committee on Immunization Practices--United States, 2013-2014.</a> MMWR Recomm Rep. 62, 1-43 (2013).</li><li>Dominguez-Cherit, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critically+Ill+patients+with+2009+influenza+A(H1N1)+in+Mexico.">Critically Ill patients with 2009 influenza A(H1N1) in Mexico.</a> JAMA. 302 (17), 1880-1887 (2009).</li><li>Fox, B. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pandemic+influenza+(H1N1):+impact+on+lung+transplant+recipients+and+candidates.">Pandemic influenza (H1N1): impact on lung transplant recipients and candidates.</a> J Heart Lung Transplant. 29 (9), 1034-1038 (2010).</li><li>Piercy, J., Miles, A., Krankheiten, S. B. f. G. S. V., Values, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Economic Impact of Influenza in Switzerland: Interpandemic Situation. , (2003).</li><li>Barclay, V. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Positive+network+assortativity+of+influenza+vaccination+at+a+high+school:+implications+for+outbreak+risk+and+herd+immunity.">Positive network assortativity of influenza vaccination at a high school: implications for outbreak risk and herd immunity.</a> PLoS One. 9 (2), 87042 (2014).</li><li>Baluch, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Randomized+controlled+trial+of+high-dose+intradermal+versus+standard-dose+intramuscular+influenza+vaccine+in+organ+transplant+recipients.">Randomized controlled trial of high-dose intradermal versus standard-dose intramuscular influenza vaccine in organ transplant recipients.</a> Am J Transplant. 13 (4), 1026-1033 (2013).</li><li>Haralambieva, I. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Impact+of+Immunosenescence+on+Humoral+Immune+Response+Variation+after+Influenza+A/H1N1+Vaccination+in+Older+Subjects.">The Impact of Immunosenescence on Humoral Immune Response Variation after Influenza A/H1N1 Vaccination in Older Subjects.</a> PLoS One. 10 (3), 0122282 (2015).</li><li>Egli, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vaccine+adjuvants--understanding+molecular+mechanisms+to+improve+vaccines.">Vaccine adjuvants--understanding molecular mechanisms to improve vaccines.</a> Swiss Med Wkly. 144, 13940 (2014).</li><li>O'Shea, D., Widmer, L. A., Stelling, J., Egli, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changing+face+of+vaccination+in+immunocompromised+hosts.">Changing face of vaccination in immunocompromised hosts.</a> Curr Infect Dis Rep. 16 (9), 420 (2014).</li><li>Meulemans, G., Carlier, M. C., Gonze, M., Petit, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+hemagglutination-inhibition,+agar+gel+precipitin,+and+enzyme-linked+immunosorbent+assay+for+measuring+antibodies+against+influenza+viruses+in+chickens.">Comparison of hemagglutination-inhibition, agar gel precipitin, and enzyme-linked immunosorbent assay for measuring antibodies against influenza viruses in chickens.</a> Avian Dis. 31 (3), 560-563 (1987).</li><li>Martins, T. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+internal+controls+for+the+Luminex+instrument+as+part+of+a+multiplex+seven-analyte+viral+respiratory+antibody+profile.">Development of internal controls for the Luminex instrument as part of a multiplex seven-analyte viral respiratory antibody profile.</a> Clin Diagn Lab Immunol. 9 (1), 41-45 (2002).</li><li>Webster, R., Cox, N., St&#246;hr, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=WHO+Animal+Influenza+Manual.">WHO Animal Influenza Manual.</a> WHO/CDS/CSR/NCS. 2002.5, 1-99 (2002).</li><li>Mittelholzer, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+cell+lines+used+in+a+micro+neutralization+test+for+measuring+influenza-neutralizing+antibodies.">Human cell lines used in a micro neutralization test for measuring influenza-neutralizing antibodies.</a> Scand J Immunol. 63 (4), 257-263 (2006).</li><li>Hamilton, R. S., Gravell, M., Major, E. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+antibody+titers+determined+by+hemagglutination+inhibition+and+enzyme+immunoassay+for+JC+virus+and+BK+virus.">Comparison of antibody titers determined by hemagglutination inhibition and enzyme immunoassay for JC virus and BK virus.</a> J Clin Microbiol. 38 (1), 105-109 (2000).</li><li>Kumakura, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+hemagglutination+inhibition+assay+and+enzyme+immunoassay+for+determination+of+mumps+and+rubella+immune+status+in+health+care+personnel.">Comparison of hemagglutination inhibition assay and enzyme immunoassay for determination of mumps and rubella immune status in health care personnel.</a> J Clin Lab Anal. 27 (5), 418-421 (2013).</li><li>Ogundiji, O. T., Okonko, I. O., Adu, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+measles+hemagglutination+inhibiting+antibody+levels+among+school+children+in+Ibadan,+Nigeria.">Determination of measles hemagglutination inhibiting antibody levels among school children in Ibadan, Nigeria.</a> J Immunoassay Immunochem. 34 (2), 208-217 (2013).</li><li>Cwach, K. T., Sandbulte, H. R., Klonoski, J. M., Huber, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+murine+innate+serum+inhibitors+toward+interference+within+influenza+virus+immune+assay.">Contribution of murine innate serum inhibitors toward interference within influenza virus immune assay.</a> Influenza Other Respir Viruses. 6 (2), 127-135 (2012).</li><li>Lee, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Receptor+mimicry+by+antibody+F045-092+facilitates+universal+binding+to+the+H3+subtype+of+influenza+virus.">Receptor mimicry by antibody F045-092 facilitates universal binding to the H3 subtype of influenza virus.</a> Nat Commun. 5, 3614 (2014).</li><li>Blumel, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+prevalence+of+cross-reactive+antibodies+against+influenza+A(H3N2)+variant+virus,+Germany,+2003+to+2010.">Age-related prevalence of cross-reactive antibodies against influenza A(H3N2) variant virus, Germany, 2003 to 2010.</a> Euro Surveill. 20 (32), 16-24 (2015).</li><li>Reber, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Seasonal+Influenza+Vaccination+of+Children+Induces+Humoral+and+Cell-Mediated+Immunity+Beyond+the+Current+Season:+Cross-reactivity+with+Past+and+Future+Strains.">Seasonal Influenza Vaccination of Children Induces Humoral and Cell-Mediated Immunity Beyond the Current Season: Cross-reactivity with Past and Future Strains.</a> J Infect Dis. , (2016).</li></ol>

القياس الكمي لما قبل وبعد التطعيم ضد الإنفلونزا الفيروس أضداد معينة التتر أداة هامة ضرورية للدراسات لقاح. تستند إلى تدابير بديلة للحماية ضد الإصابة بعدوى الفيروس، مثل سيروبروتيكشن (> 01:40) أو السيرولوجي (زيادة عيار النوبات)، يمكن أن تكون استراتيجيات التطعيم الأمثل9. استخدام ال?...

الإصابة بفيروس الإنفلونزا يرتبط بقدر كبير من الاعتلال والوفاة، وارتفاع تكاليف الرعاية الصحية1،2،،من34. على وجه الخصوص، كبار السن والأطفال حديثي الولادة والنساء الحوامل والمرضى الذين يعانون من الأمراض المزمنة في خطر للنتائج السريرية أكثر شدة. ولذلك، التطعيم ضد تعميم سلالات فيروس الإنفلونزا هو التدبير الرئيسي لتقليل عبء المرض في هذه المجموعات السكانية المعرضة للخطر. زيادة الاستجابة المناعية الفردية بعد التطعيم، مثلاً، والأجسام المضادة الخاصة بالإنفلونزا عتبة واقية، يقلل من خطر الفردية من العدوى، وبشكل عام احتمال انتقال العدوى الفيروسية ضمن عدد سكان 5. فهم مفصل استجابة مناعية خلطيه الناجمة عن اللقاحات في مختلف قطاعات السكان، وعبر مختلف الفئات العمرية عنصر أساسي للإجابة على أسئلة سريرية هامة6،،من78 , 9، مثل: لماذا يكون بعض المرضى المسنين العدوى رغم التلقيح السابق؟ ما هو "جيد" و "كافية" الناجمة عن اللقاحات حماية؟ كم مرة ينبغي تطبيق لقاح مريض إيمونوسوبريسيد للوصول إلى الحماية التتر؟ ما هي الجرعة الأكثر فعالية؟ ما هو أثر رواية adjuvant في جسم التطعيم بعد انتهاء التتر؟ قياس إنتاج الأجسام المضادة الخاصة باللقاحات قد تساعد على الإجابة على هذه الأسئلة الهامة وتحسين نتائج التلقيح.
التحديد الكمي التتر الأجسام المضادة الخاصة بالفيروس يمكن أن يؤديها مع مختلف طرق مناعية. وهذا يشمل المرحلة الصلبة10 أو المستندة إلى حبة فحوصات11 أليسا، مرحبا بالانزيم12، وتحييد فحوصات13. الأساليب المستندة إلى أليسا السماح بفرز كميات كبيرة نسبيا من عينات مصل ضد المستضدات المختلفة. أيضا، يمكن استكشاف الغلوبولين المناعي (Ig) م الخاصة بالعوامل الممرضة ومفتش بشكل منفصل. على الرغم من أن الخصائص مستضد، مثلاً، وتسلسل خطي من الأحماض الأمينية أو جسيمات شبيهة بالفيروس قد تؤثر على الربط من الأجسام المضادة، الطائفة من المحتمل [ابيتوبس] واسعة جداً، وعدم تقديم معلومات عن ما إذا كان جسم وقد رد صلة وظيفية.
وفي المقابل، مقايسة تحييد يحدد إمكانات أجسام مضادة لمنع انتقال العدوى إلى الخلايا وظيفيا ويعكس ذلك تحييد المحتملة. ومع ذلك، هذا الأسلوب المكثف جداً العمل، يتطلب استزراع محددة الخلية خطوط وتعيش الفيروسات، وعليه، هو مضيعة للوقت ومكلفة، وتتطلب معدات خاصة.
توضح هذه المقالة خطوة بخطوة بروتوكول المستندة إلى منظمة الصحة العالمية مرحبا12 كمياً التتر الأجسام المضادة الخاصة بالإنفلونزا. هيماجلوتينيشن تأثير مميزة لبعض الفيروسات مما أدى إلى تراص من الكريات الحمراء. تثبيط هذا التأثير مع المريض الأمصال يسمح بقياس تركيزات الأجسام المضادة المثبطة، مما يعكس تأثير تحييد.
وقد قمنا بتعديل سير العمل من منظمة الصحة العالمية-بروتوكول للسماح معالجة أكثر كفاءة من عينات متعددة في نفس الوقت، ومما يقلل من الوقت اللازم. ويصف البروتوكول الأول تحديد إمكانات تراص مستضد الإنفلونزا خاصة. في القيام بذلك، يتم تحديد تركيز مستضد الإنفلونزا الصحيح للبروتوكول الثاني. وينبغي أن يتكرر هذا الجزء مع كل مستضد الفيروسية الجديدة، فضلا عن كل دفعة من الدم.
البروتوكول الثاني يصف تصميم التتر الأجسام المضادة الخاصة بالإنفلونزا. البروتوكولات المقدمة هي الأمثل للتحقيق في عينات مصل الدم البشري وفيروس الإنفلونزا ومع ذلك، يمكن تطبيقه أيضا لعينات المصل الماوس أو supernatants ثقافة الخلية من حفز الخلايا المناعية، مثلاً، ب-الخلايا الخاصة بالفيروس. ويمكن تحديد النتائج كالتتر المقاسة المطلق. في العديد من الدراسات اللقاح، ترد التتر هندسي وفاصل الثقة 95% لكل السكان خاصة. للتفسير، أو سيروبروتيكشن، أو الدراسة تستخدم غالباً لوصف قابلية السكان لفيروس معين. ويعرف سيروبروتيكشن عيار ≥1:40، والدراسة كما تزيد عيار أكثر من النوبات مع تحقيق التتر سيروبروتيكتيفي بين اثنين من النقاط الزمنية (الأكثر استخداماً وتستخدم قبل التطعيم والتلقيح بعد 30 يوما).
كلا البروتوكولين سهلة الاستخدام، ويمكن أن تتكيف مع طائفة واسعة من الأسئلة البحثية. على وجه الخصوص، يمكن استخدامها لتحديد موثوقية وسرعة التتر الأجسام المضادة ضد الفيروسات الأخرى المختلفة مع القدرة على هيماجلوتينيشن، مثل الحصبة الألمانية، والنكاف، الحصبة أو بوليومافيروسيس14،15،16 .

<table style="border-collapse:collapse;width:716pt" width="955">
	<colgroup>
		<col style="width:263pt" width="351" />
		<col style="width:100pt" width="133" />
		<col style="width:85pt" width="113" />
		<col style="width:269pt" width="358" />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl67" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">25 ml Disposable Multichannel Pipette Reservoirs</td>
			<td class="xl67" style="width:100pt" width="133">Integra</td>
			<td class="xl67" style="width:85pt" width="113">4312</td>
			<td class="xl68" style="width:269pt" width="358"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">8-well PCR tubes</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Brand GMBH</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">781332</td>
			<td class="xl66">For serum aliquots</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">96-well microtiter plate, U-shaped</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">TPP</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">92097</td>
			<td class="xl66">For HI assay when using mammalian RBCs</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">96-well microtiter plate, V-shaped</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Corning Costar</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">3897</td>
			<td class="xl66">For HI assay when using avian RBCs</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Aqua ad iniect. Steril</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Bichsel AG</td>
			<td align="right" class="xl63" style="width:85pt" width="113">1000004</td>
			<td class="xl66">For preparing influenza antigen and cholera filtrate solutions</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Chicken RBC (10%)</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Cedarlane</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">CLC8800</td>
			<td class="xl66">10% suspension of chicken red blood cells in Alsever&#39;s solution</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Cholera filtrate</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">C8772</td>
			<td class="xl66">Used as receptor destroying enzyme (RDE)</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Dulbecco&#39;s PBS</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">D8537</td>
			<td class="xl66">For diluting the serum samples, RBCs and antigens</td>
		</tr>
		<tr height="42" style="height:31.5pt">
			<td class="xl63" height="42" style="width:263pt;height:31.5pt" width="351">Eppendorf Multichannel pipette, 12-channel, 10-100 &#181;l</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl67" style="width:85pt" width="113">Z683949</td>
			<td class="xl66"></td>
		</tr>
		<tr height="42" style="height:31.5pt">
			<td class="xl63" height="42" style="width:263pt;height:31.5pt" width="351">Eppendorf Multichannel pipette, 8-channel, 10-100 &#181;l</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl67" style="width:85pt" width="113">Z683930</td>
			<td class="xl66"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Guinea Pig RBC (10%)</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Cedarlane</td>
			<td class="xl67" style="width:85pt" width="113">CLC1800</td>
			<td class="xl66">10% suspension of guinea pig red blood cells in Alsever&#39;s solution</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Influenza Anti-A/California/7/09 HA serum&#160;</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">NIBSC</td>
			<td class="xl67" style="width:85pt" width="113">14/134&#160;</td>
			<td class="xl66">Used as positive control at the HI assay</td>
		</tr>
		<tr height="42" style="height:31.5pt">
			<td class="xl63" height="42" style="width:263pt;height:31.5pt" width="351">Influenza Anti-A/Switzerland/9715293/2013-like HA serum&#160;</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">NIBSC</td>
			<td class="xl67" style="width:85pt" width="113">14/272</td>
			<td class="xl66">Used as positive control at the HI assay</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Influenza Anti-A/Texas/50/2012-Like HA Serum&#160;</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">NIBSC</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">13/178</td>
			<td class="xl66">Used as positive control at the HI assay</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Influenza Anti-B/Brisbane/60/2008-HA serum&#160;</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">NIBSC</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">13/254&#160;</td>
			<td class="xl66">Used as positive control at the HI assay</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Influenza Anti-B/Massachusetts/02/2012 HA serum&#160;</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">NIBSC</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">13/182</td>
			<td class="xl66">Used as positive control at the HI assay</td>
		</tr>
		<tr height="42" style="height:31.5pt">
			<td class="xl63" height="42" style="width:263pt;height:31.5pt" width="351">Influenza antigen A/California/7/09 (H1N1)(NYMC-X181)&#160;</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">NIBSC</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">12/168</td>
			<td class="xl66">Inactivated, partially purified A/California/7/09 (H1N1)(NYMC-X181)&#160; virus (ca. 46&#181;gHA/ml)</td>
		</tr>
		<tr height="42" style="height:31.5pt">
			<td class="xl63" height="42" style="width:263pt;height:31.5pt" width="351">Influenza antigen A/Switzerland/9715293/2013 (NIB88)</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">NIBSC</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">14/254</td>
			<td class="xl66">Inactivated, partially purified A/Switzerland/9715293/2013 (NIB88) virus (ca. 55&#181;gHA/ml)</td>
		</tr>
		<tr height="42" style="height:31.5pt">
			<td class="xl63" height="42" style="width:263pt;height:31.5pt" width="351">Influenza antigen A/Texas/50/2012 (H3N2)(NYMCX-223)</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">NIBSC</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">13/112</td>
			<td class="xl66">Inactivated, partially purified A/Texas/50/2012 (H3N2)(NYMCX-223) virus (ca. 74&#181;gHA/ml)</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Influenza antigen B/Brisbane/60/2008</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">NIBSC</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">13/234</td>
			<td class="xl66">Inactivated, partially purified B/Brisbane/60/2008 virus (ca. 42&#181;gHA/ml)</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Influenza antigen B/Massachusetts/02/2012</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">NIBSC</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">13/134</td>
			<td class="xl66">Inactivated, partially purified B/Massachusetts/02/2012 virus (ca. 35&#181;gHA/ml)</td>
		</tr>
		<tr height="42" style="height:31.5pt">
			<td class="xl63" height="42" style="width:263pt;height:31.5pt" width="351">Serum-Tubes</td>
			<td class="xl75" style="width:100pt" width="133">S-Monovette, Sardstedt</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">01.1601.100</td>
			<td class="xl66">For serum extraction with clotting activator</td>
		</tr>
		<tr height="42" style="height:31.5pt">
			<td class="xl63" height="42" style="width:263pt;height:31.5pt" width="351">Single Donor Human RBC, Type 0</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Innovative Research</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">IPLA-WB3&#160;</td>
			<td class="xl66">Suspension of single donor human red blood cells in Alsever&#39;s solution (ca. 26%)</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Turkey RBC (10%)</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Cedarlane</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">CLC1180</td>
			<td class="xl66">10% suspension of turkey red blood cells in Alsever&#39;s solution</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Phosphate Buffered Saline (PBS)</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Gibco</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113"></td>
			<td class="xl66"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an optimized hemagglutination inhibition (hi) assay to quantify influenza-specific antibody titers

ويشيع استخدام جسم التتر كعلامات بديلة لحماية مصلية ضد الإنفلونزا ومسببات الأمراض الأخرى. معرفة تفصيلية بجسم إنتاج ما قبل وما بعد التطعيم مطلوب لفهم الحصانة التي يسببها اللقاح. توضح هذه المقالة بروتوكول نقطة بنقطة يمكن الاعتماد عليها لتحديد الأجسام المضادة الخاصة بالإنفلونزا التتر. البروتوكول الأول وصف أسلوب لتحديد مستضد المبالغ اللازمة هيماجلوتينيشن، التي توحد التركيزات للاستخدام اللاحق في البروتوكول الثاني (مقايسة hemagglutination، مقايسة هكتار). البروتوكول الثاني يصف التحديد الكمي للأجسام المضادة الخاصة بالإنفلونزا التتر ضد سلالات فيروسية مختلفة باستخدام مسلسل إضعاف البشرية المصل أو خلية ثقافة سوبيرناتانتس (هيماجلوتينيشن بتثبيط الإنزيم، مرحبا بالانزيم).
على سبيل مثال التطبيقي، نعرض استجابة الأجسام المضادة لمجموعة صحية، الذي تلقي لقاح إنفلونزا المعطل تمكنت. بالإضافة إلى ذلك، يتم عرض ه بين فيروسات الإنفلونزا المختلفة ويتم شرح طرق لتقليل ه باستخدام أنواع مختلفة من الحيوانات من خلايا الدم الحمراء (كرات الدم الحمراء). ويسلط الضوء على المناقشة مزايا وعيوب من فحوصات المقدمة وكيفية تصميم التتر الخاصة بالإنفلونزا جسم يمكن تحسين الفهم للحصانة المتصلة باللقاحات.

استجابة جسم المستحث ما قبل وما بعد التطعيم ضد الإنفلونزا أ H3N2 تم تقييم استجابة الأجسام المضادة الناجمة عن اللقاحات في 26 صحية من المتطوعين الذين تلقوا لقاح إنفلونزا المعطل فرعية للتنسيق المحتوية على إنفلونزا A/H1N1/كاليفورنيا/2009، A/H3N2/تكساس/2012 وب/ماساتشوستس/02/2012 ق...

Watch this Scientific Journal Video about An Optimized Hemagglutination Inhibition HI Assay to Quantify Influenza-specific Antibody Titers at JoVE.com

An Optimized Hemagglutination Inhibition HI Assay to Quantify Influenza-specific Antibody Titers

البروتوكولات المقدمة تصف كيفية القيام مقايسة تثبيط hemagglutination كمياً التتر الأجسام المضادة الخاصة بالإنفلونزا من عينات المصل من المستلمين لقاح الإنفلونزا. الفحص الأول يحدد التركيزات المثلى مستضد الفيروسية بواسطة hemagglutination. الفحص الثاني يوضحها التتر الأجسام المضادة الخاصة بالإنفلونزا بتثبيط هيماجلوتينيشن.

مقايسة تثبيط (مرحبا) هيماجلوتينيشن أمثل لقياس الأجسام المضادة الخاصة بالإنفلونزا التتر

Antibody titers are commonly used as surrogate markers for serological protection against influenza and other pathogens. Detailed knowledge of antibody ...

Research

JoVE Journal

Medicine

An Optimized Hemagglutination Inhibition (HI) Assay to Quantify Influenza-specific Antibody Titers

Methods to Quantify Pharmacologically Induced Alterations in Motor Function in Human Incomplete SCI

أساليب لتحديد التعديلات المستحثة الفارماكولوجية في وظيفة الحركة في اصابات النخاع الشوكي الإنسان غير مكتمل

Spinal cord injury (SCI) is a debilitating disorder, which produces profound deficits in volitional motor control. Following medical stabilization, ...

An in vivo Assay to Test Blood Vessel Permeability

An in vivo Assay to Test Blood Vessel Permeability

على<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; الفحص لفحص الدم نفاذية سفينة

This method is based on the intravenous injection of Evans Blue in mice as the test animal model. Evans blue is a dye that binds albumin. Under ...

Using Quantitative Real-time PCR to Determine Donor Cell Engraftment in a Competitive Murine Bone Marrow Transplantation Model

باستخدام الكمي في الوقت الحقيقي PCR لتحديد الجهات المانحة Engraftment خلية في التنافسية نموذج الفئران زرع نخاع العظم

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules ...

A Sensitive Method to Quantify Senescent Cancer Cells

طريقة حساسة لقياس خلايا السرطان هرمة

Human cells do not indefinitely proliferate. Upon external and/or intrinsic  cues, cells might die or enter a stable cell cycle arrest called senescence. ...

A High Throughput, Multiplexed and Targeted Proteomic CSF Assay to Quantify Neurodegenerative Biomarkers and Apolipoprotein E Isoforms Status

إنتاجية عالية، تعدد والمستهدفة [بروتيوميك CSF الفحص لقياس المؤشرات الحيوية الاعصاب وئي E الإسوية الحالة

Many neurodegenerative diseases are&#160;still lacking effective treatments. Reliable biomarkers for identifying and classifying these diseases will be ...

Determination of the Relative Potency of an Anti-TNF Monoclonal Antibody (mAb) by Neutralizing TNF Using an In Vitro Bioanalytical Method

Determination of the Relative Potency of an Anti-TNF Monoclonal Antibody mAb by Neutralizing TNF Using an In Vitro Bioanalytical Method

تحديد "قوتها النسبية" من مكافحة-تنف [مونوكلونل] جسم (ماب) قبل Neutralizing تنف استخدام أسلوب بيواناليتيكال في المختبر

This protocol shows the measurement of the apoptotic activity neutralization of TNF&#945; in a mouse fibroblast cell model (WEHI 164) using an ...

An Optimized Evans Blue Protocol to Assess Vascular Leak in the Mouse

الأزرق إيفانز أمثل البروتوكول لتقييم تسرب الأوعية الدموية في الماوس

Vascular leak, or plasma extravasation, has a number of causes, and may be a serious consequence or symptom of an inflammatory response. This study may ...

Optimized Griess Reaction for UV-Vis and Naked-eye Determination of Anti-malarial Primaquine

رد فعل Griess الأمثل للاشعه فوق البنفسجية-فيس وتحديد العين العارية لپريماكين المضادة للملاريا

Primaquine (PMQ), an important anti-malarial drug, has been recommended by the World Health Organization (WHO) for the treatment of life-threatening ...

Vessel-Sparing Microsurgical Longitudinal Intussusception Vasoepididymostomy to Treat Epididymal Obstructive Azoospermia

استئصال الأوعية الدموية الخلقي الطولي الجانبي للشرايين لعلاج فقدان النطاف الانسدادي البربخي

The epididymis is a common site of obstruction in obstructive azoospermia (OA). Vasoepididymostomy has become an important method for the treatment of ...

A Simple Pit Assay Protocol to Visualize and Quantify Osteoclastic Resorption In Vitro

A Simple Pit Assay Protocol to Visualize and Quantify Osteoclastic Resorption In Vitro

بروتوكول فحص حفرة بسيط لتصور وقياس امتصاص الخلايا العظمية في المختبر

Mature osteoclasts are multinucleated cells that can degrade bone through the secretion of acids and enzymes. They play a crucial role in various diseases ...