Name: an optimized hemagglutination inhibition (hi) assay to quantify influenza-specific antibody titers
Uploaded: 2017-12-01T15:00:00
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अध्ययन प्रोटोकॉल स्थानीय एथिकल रिव्यू बोर्ड (www.EKNZ.ch) के माध्यम से अनुमोदित किया गया था और लिखित सूचित सहमति सभी सहभागियों से प्राप्त की गई थी ।
1. सीरम संग्रह
<ol><li>ब्याज की समय अंक पर मनुष्यों से ?...

<ol>
	<li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+and+control+of+seasonal+influenza+with+vaccines.+Recommendations+of+the+Advisory+Committee+on+Immunization+Practices--United+States,+2013-2014.">Prevention and control of seasonal influenza with vaccines. Recommendations of the Advisory Committee on Immunization Practices--United States, 2013-2014.</a> MMWR Recomm Rep. 62, 1-43 (2013).</li><li>Dominguez-Cherit, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critically+Ill+patients+with+2009+influenza+A(H1N1)+in+Mexico.">Critically Ill patients with 2009 influenza A(H1N1) in Mexico.</a> JAMA. 302 (17), 1880-1887 (2009).</li><li>Fox, B. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pandemic+influenza+(H1N1):+impact+on+lung+transplant+recipients+and+candidates.">Pandemic influenza (H1N1): impact on lung transplant recipients and candidates.</a> J Heart Lung Transplant. 29 (9), 1034-1038 (2010).</li><li>Piercy, J., Miles, A., Krankheiten, S. B. f. G. S. V., Values, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Economic Impact of Influenza in Switzerland: Interpandemic Situation. , (2003).</li><li>Barclay, V. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Positive+network+assortativity+of+influenza+vaccination+at+a+high+school:+implications+for+outbreak+risk+and+herd+immunity.">Positive network assortativity of influenza vaccination at a high school: implications for outbreak risk and herd immunity.</a> PLoS One. 9 (2), 87042 (2014).</li><li>Baluch, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Randomized+controlled+trial+of+high-dose+intradermal+versus+standard-dose+intramuscular+influenza+vaccine+in+organ+transplant+recipients.">Randomized controlled trial of high-dose intradermal versus standard-dose intramuscular influenza vaccine in organ transplant recipients.</a> Am J Transplant. 13 (4), 1026-1033 (2013).</li><li>Haralambieva, I. 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A., Stelling, J., Egli, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changing+face+of+vaccination+in+immunocompromised+hosts.">Changing face of vaccination in immunocompromised hosts.</a> Curr Infect Dis Rep. 16 (9), 420 (2014).</li><li>Meulemans, G., Carlier, M. C., Gonze, M., Petit, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+hemagglutination-inhibition,+agar+gel+precipitin,+and+enzyme-linked+immunosorbent+assay+for+measuring+antibodies+against+influenza+viruses+in+chickens.">Comparison of hemagglutination-inhibition, agar gel precipitin, and enzyme-linked immunosorbent assay for measuring antibodies against influenza viruses in chickens.</a> Avian Dis. 31 (3), 560-563 (1987).</li><li>Martins, T. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+internal+controls+for+the+Luminex+instrument+as+part+of+a+multiplex+seven-analyte+viral+respiratory+antibody+profile.">Development of internal controls for the Luminex instrument as part of a multiplex seven-analyte viral respiratory antibody profile.</a> Clin Diagn Lab Immunol. 9 (1), 41-45 (2002).</li><li>Webster, R., Cox, N., St&#246;hr, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=WHO+Animal+Influenza+Manual.">WHO Animal Influenza Manual.</a> WHO/CDS/CSR/NCS. 2002.5, 1-99 (2002).</li><li>Mittelholzer, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+cell+lines+used+in+a+micro+neutralization+test+for+measuring+influenza-neutralizing+antibodies.">Human cell lines used in a micro neutralization test for measuring influenza-neutralizing antibodies.</a> Scand J Immunol. 63 (4), 257-263 (2006).</li><li>Hamilton, R. S., Gravell, M., Major, E. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+antibody+titers+determined+by+hemagglutination+inhibition+and+enzyme+immunoassay+for+JC+virus+and+BK+virus.">Comparison of antibody titers determined by hemagglutination inhibition and enzyme immunoassay for JC virus and BK virus.</a> J Clin Microbiol. 38 (1), 105-109 (2000).</li><li>Kumakura, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+hemagglutination+inhibition+assay+and+enzyme+immunoassay+for+determination+of+mumps+and+rubella+immune+status+in+health+care+personnel.">Comparison of hemagglutination inhibition assay and enzyme immunoassay for determination of mumps and rubella immune status in health care personnel.</a> J Clin Lab Anal. 27 (5), 418-421 (2013).</li><li>Ogundiji, O. T., Okonko, I. O., Adu, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+measles+hemagglutination+inhibiting+antibody+levels+among+school+children+in+Ibadan,+Nigeria.">Determination of measles hemagglutination inhibiting antibody levels among school children in Ibadan, Nigeria.</a> J Immunoassay Immunochem. 34 (2), 208-217 (2013).</li><li>Cwach, K. T., Sandbulte, H. R., Klonoski, J. M., Huber, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+murine+innate+serum+inhibitors+toward+interference+within+influenza+virus+immune+assay.">Contribution of murine innate serum inhibitors toward interference within influenza virus immune assay.</a> Influenza Other Respir Viruses. 6 (2), 127-135 (2012).</li><li>Lee, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Receptor+mimicry+by+antibody+F045-092+facilitates+universal+binding+to+the+H3+subtype+of+influenza+virus.">Receptor mimicry by antibody F045-092 facilitates universal binding to the H3 subtype of influenza virus.</a> Nat Commun. 5, 3614 (2014).</li><li>Blumel, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+prevalence+of+cross-reactive+antibodies+against+influenza+A(H3N2)+variant+virus,+Germany,+2003+to+2010.">Age-related prevalence of cross-reactive antibodies against influenza A(H3N2) variant virus, Germany, 2003 to 2010.</a> Euro Surveill. 20 (32), 16-24 (2015).</li><li>Reber, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Seasonal+Influenza+Vaccination+of+Children+Induces+Humoral+and+Cell-Mediated+Immunity+Beyond+the+Current+Season:+Cross-reactivity+with+Past+and+Future+Strains.">Seasonal Influenza Vaccination of Children Induces Humoral and Cell-Mediated Immunity Beyond the Current Season: Cross-reactivity with Past and Future Strains.</a> J Infect Dis. , (2016).</li></ol>

पूर्व के ठहराव और बाद टीकाकरण इंफ्लूएंजा वायरस विशिष्ट एंटीबॉडी titers एक महत्वपूर्ण वैक्सीन अध्ययन के लिए आवश्यक उपकरण है । इस तरह के seroprotection के रूप में वायरस के संक्रमण के खिलाफ सुरक्षा के किराए के उपायों ...

इंफ्लूएंजा वायरस के साथ संक्रमण काफी रुग्णता, मृत्यु दर के साथ जुड़ा हुआ है, और उच्च स्वास्थ्य देखभाल लागत1,2,3,4। विशेष रूप से, बुजुर्ग, नवजात शिशुओं, गर्भवती महिलाओं, और पुराने रोग के साथ रोगियों और अधिक गंभीर नैदानिक परिणामों के लिए जोखिम में हैं । इसलिए, टीकाकरण इंफ्लूएंजा वायरस उपभेदों परिसंचारी के खिलाफ इन उच्च जोखिम आबादी में रोग के बोझ को कम करने के लिए प्राथमिक उपाय है । टीकाकरण के बाद व्यक्तिगत प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की वृद्धि, जैसे, इंफ्लूएंजा एक सुरक्षात्मक सीमा से ऊपर विशिष्ट एंटीबॉडी, संक्रमण के व्यक्तिगत जोखिम और सामांय में एक जनसंख्या के भीतर वायरल संचरण की संभावना कम कर देता है 5. वैक्सीन की एक विस्तृत समझ अलग आबादी और विभिंन आयु समूहों में प्रेरित विनोदी प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के लिए महत्वपूर्ण नैदानिक प्रश्नों का उत्तर देने के लिए एक महत्वपूर्ण तत्व है6,7,8 , 9, जैसे: क्यों कुछ बुजुर्ग रोगियों पिछले टीकाकरण के बावजूद संक्रमण है? एक "अच्छा" और "पर्याप्त" वैक्सीन-प्रेरित संरक्षण क्या है? कितनी बार एक टीका एक immunosuppressed रोगी के लिए लागू किया जाना चाहिए सुरक्षात्मक titers तक पहुंचने के लिए? सबसे प्रभावी खुराक क्या है? एक उपंयास सहायक के बाद टीकाकरण एंटीबॉडी titers पर क्या प्रभाव है? टीका-विशिष्ट एंटीबॉडी उत्पादन की माप इन महत्वपूर्ण सवालों के जवाब मदद और टीकाकरण परिणामों में सुधार हो सकता है ।
विषाणु-विशिष्ट एंटीबॉडी titers के ठहराव विभिन्न प्रतिरक्षा विधियों के साथ किया जा सकता है । यह भी शामिल है ठोस चरण10 या मनका आधारित एलिसा11 परख, हाय परख12, और13परख बेअसर । एलिसा आधारित विधियों सीरम नमूनों की अपेक्षाकृत बड़ी मात्रा में विभिंन एंटीजन के खिलाफ स्क्रीनिंग की अनुमति देते हैं । इसके अलावा, रोगज़नक़-विशिष्ट Immunoglobulin (़) एम और आईजीजी अलग से पता लगाया जा सकता है । हालांकि एक प्रतिजन की विशेषताओं, उदा, रैखिक एमिनो एसिड अनुक्रम या वायरस की तरह कण एंटीबॉडी के बंधन को प्रभावित कर सकते हैं, संभावित epitopes के स्पेक्ट्रम बहुत व्यापक है और क्या एक एंटीबॉडी के बारे में जानकारी प्रदान नहीं करता है प्रतिक्रिया कार्यात्मक प्रासंगिकता है ।
इसके विपरीत, बेअसर परख एंटीबॉडी की क्षमता को कार्यात्मक कोशिकाओं के संक्रमण को बाधित करने के लिए निर्धारित करता है और इसलिए बेअसर क्षमता को दर्शाता है । हालांकि, इस विधि बहुत गहन श्रम है, विशिष्ट सेल लाइनों और लाइव वायरस के संवर्धन की आवश्यकता है, और इसलिए, यह समय लेने वाली है, महंगा है, और विशेष उपकरणों की आवश्यकता है ।
इस लेख का वर्णन एक कदम दर कदम विश्व स्वास्थ्य संगठन (डब्ल्यूएचओ)-आधारित हाय प्रोटोकॉल12 इंफ्लूएंजा-विशिष्ट एंटीबॉडी titers यों तो । Hemagglutination कुछ वायरस एरिथ्रोसाइट्स के समूहन के लिए अग्रणी का एक विशिष्ट प्रभाव है । रोगी सीरा के साथ इस आशय के निषेध निरोधात्मक एंटीबॉडी सांद्रता, जो एक बेअसर प्रभाव को दर्शाता है की माप की अनुमति देता है ।
हमने एक ही समय में एकाधिक नमूनों की अधिक कुशल हैंडलिंग और इस प्रकार आवश्यक समय को कम करने की अनुमति देने के लिए डब्ल्यूएचओ-प्रोटोकॉल के कार्यप्रवाह को संशोधित किया है । पहली प्रोटोकॉल एक विशेष इंफ्लूएंजा प्रतिजन के समूहन क्षमता के निर्धारण का वर्णन । ऐसा करने में, सही इंफ्लूएंजा प्रतिजन एकाग्रता दूसरे प्रोटोकॉल के लिए निर्धारित किया जाता है । यह हिस्सा हर नई वायरल प्रतिजन के साथ दोहराया जाना चाहिए, साथ ही रक्त के प्रत्येक बैच ।
दूसरा प्रोटोकॉल इंफ्लूएंजा के निर्धारण-विशिष्ट एंटीबॉडी titers का वर्णन । प्रस्तुत प्रोटोकॉल इंफ्लूएंजा वायरस और मानव सीरम नमूनों की जांच के लिए अनुकूलित कर रहे है तथापि, यह भी माउस सीरम नमूने या कोशिका संस्कृति supernatants के लिए प्रेरित प्रतिरक्षा कोशिकाओं से लागू किया जा सकता है, जैसे, वायरस-विशिष्ट बी कोशिकाओं । परिणाम निरपेक्ष मापा titers के रूप में निर्धारित किया जा सकता है । कई वैक्सीन अध्ययन में, ज्यामितीय माध्य titers और ९५% विश्वास अंतराल प्रत्येक विशेष जनसंख्या के लिए दिखाए जाते हैं । व्याख्या के लिए, seroprotection या seroconversion अक्सर एक निश्चित वायरस के लिए एक जनसंख्या की संवेदनशीलता का वर्णन करने के लिए उपयोग किया जाता है । Seroprotection ≥ 1:40 के एक titer के रूप में परिभाषित किया गया है, और seroconversion दो समय अंकों के बीच titer seroprotective की उपलब्धि के साथ एक से अधिक 4 गुना titers वृद्धि के रूप में (सबसे अधिक पूर्व टीकाकरण और 30 दिनों के बाद टीकाकरण का इस्तेमाल कर रहे हैं) ।
दोनों प्रोटोकॉल का उपयोग करने के लिए आसान कर रहे है और वे अनुसंधान के सवालों का एक व्यापक रेंज के लिए अनुकूलित किया जा सकता है । विशेष रूप से, वे hemagglutination, जैसे खसरा, polyomaviruses, कण्ठमाला, या रूबेला के रूप में क्षमता के साथ विभिन्न अन्य वायरसों के खिलाफ एंटीबॉडी titers मज़बूती से और जल्दी से निर्धारित करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है14,15,16 .

<table style="border-collapse:collapse;width:716pt" width="955">
	<colgroup>
		<col style="width:263pt" width="351" />
		<col style="width:100pt" width="133" />
		<col style="width:85pt" width="113" />
		<col style="width:269pt" width="358" />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl67" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">25 ml Disposable Multichannel Pipette Reservoirs</td>
			<td class="xl67" style="width:100pt" width="133">Integra</td>
			<td class="xl67" style="width:85pt" width="113">4312</td>
			<td class="xl68" style="width:269pt" width="358"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">8-well PCR tubes</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Brand GMBH</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">781332</td>
			<td class="xl66">For serum aliquots</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">96-well microtiter plate, U-shaped</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">TPP</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">92097</td>
			<td class="xl66">For HI assay when using mammalian RBCs</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">96-well microtiter plate, V-shaped</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Corning Costar</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">3897</td>
			<td class="xl66">For HI assay when using avian RBCs</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Aqua ad iniect. Steril</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Bichsel AG</td>
			<td align="right" class="xl63" style="width:85pt" width="113">1000004</td>
			<td class="xl66">For preparing influenza antigen and cholera filtrate solutions</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Chicken RBC (10%)</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Cedarlane</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">CLC8800</td>
			<td class="xl66">10% suspension of chicken red blood cells in Alsever&#39;s solution</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Cholera filtrate</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">C8772</td>
			<td class="xl66">Used as receptor destroying enzyme (RDE)</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Dulbecco&#39;s PBS</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">D8537</td>
			<td class="xl66">For diluting the serum samples, RBCs and antigens</td>
		</tr>
		<tr height="42" style="height:31.5pt">
			<td class="xl63" height="42" style="width:263pt;height:31.5pt" width="351">Eppendorf Multichannel pipette, 12-channel, 10-100 &#181;l</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl67" style="width:85pt" width="113">Z683949</td>
			<td class="xl66"></td>
		</tr>
		<tr height="42" style="height:31.5pt">
			<td class="xl63" height="42" style="width:263pt;height:31.5pt" width="351">Eppendorf Multichannel pipette, 8-channel, 10-100 &#181;l</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl67" style="width:85pt" width="113">Z683930</td>
			<td class="xl66"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Guinea Pig RBC (10%)</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Cedarlane</td>
			<td class="xl67" style="width:85pt" width="113">CLC1800</td>
			<td class="xl66">10% suspension of guinea pig red blood cells in Alsever&#39;s solution</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Influenza Anti-A/California/7/09 HA serum&#160;</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">NIBSC</td>
			<td class="xl67" style="width:85pt" width="113">14/134&#160;</td>
			<td class="xl66">Used as positive control at the HI assay</td>
		</tr>
		<tr height="42" style="height:31.5pt">
			<td class="xl63" height="42" style="width:263pt;height:31.5pt" width="351">Influenza Anti-A/Switzerland/9715293/2013-like HA serum&#160;</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">NIBSC</td>
			<td class="xl67" style="width:85pt" width="113">14/272</td>
			<td class="xl66">Used as positive control at the HI assay</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Influenza Anti-A/Texas/50/2012-Like HA Serum&#160;</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">NIBSC</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">13/178</td>
			<td class="xl66">Used as positive control at the HI assay</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Influenza Anti-B/Brisbane/60/2008-HA serum&#160;</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">NIBSC</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">13/254&#160;</td>
			<td class="xl66">Used as positive control at the HI assay</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Influenza Anti-B/Massachusetts/02/2012 HA serum&#160;</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">NIBSC</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">13/182</td>
			<td class="xl66">Used as positive control at the HI assay</td>
		</tr>
		<tr height="42" style="height:31.5pt">
			<td class="xl63" height="42" style="width:263pt;height:31.5pt" width="351">Influenza antigen A/California/7/09 (H1N1)(NYMC-X181)&#160;</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">NIBSC</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">12/168</td>
			<td class="xl66">Inactivated, partially purified A/California/7/09 (H1N1)(NYMC-X181)&#160; virus (ca. 46&#181;gHA/ml)</td>
		</tr>
		<tr height="42" style="height:31.5pt">
			<td class="xl63" height="42" style="width:263pt;height:31.5pt" width="351">Influenza antigen A/Switzerland/9715293/2013 (NIB88)</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">NIBSC</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">14/254</td>
			<td class="xl66">Inactivated, partially purified A/Switzerland/9715293/2013 (NIB88) virus (ca. 55&#181;gHA/ml)</td>
		</tr>
		<tr height="42" style="height:31.5pt">
			<td class="xl63" height="42" style="width:263pt;height:31.5pt" width="351">Influenza antigen A/Texas/50/2012 (H3N2)(NYMCX-223)</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">NIBSC</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">13/112</td>
			<td class="xl66">Inactivated, partially purified A/Texas/50/2012 (H3N2)(NYMCX-223) virus (ca. 74&#181;gHA/ml)</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Influenza antigen B/Brisbane/60/2008</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">NIBSC</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">13/234</td>
			<td class="xl66">Inactivated, partially purified B/Brisbane/60/2008 virus (ca. 42&#181;gHA/ml)</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Influenza antigen B/Massachusetts/02/2012</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">NIBSC</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">13/134</td>
			<td class="xl66">Inactivated, partially purified B/Massachusetts/02/2012 virus (ca. 35&#181;gHA/ml)</td>
		</tr>
		<tr height="42" style="height:31.5pt">
			<td class="xl63" height="42" style="width:263pt;height:31.5pt" width="351">Serum-Tubes</td>
			<td class="xl75" style="width:100pt" width="133">S-Monovette, Sardstedt</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">01.1601.100</td>
			<td class="xl66">For serum extraction with clotting activator</td>
		</tr>
		<tr height="42" style="height:31.5pt">
			<td class="xl63" height="42" style="width:263pt;height:31.5pt" width="351">Single Donor Human RBC, Type 0</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Innovative Research</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">IPLA-WB3&#160;</td>
			<td class="xl66">Suspension of single donor human red blood cells in Alsever&#39;s solution (ca. 26%)</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Turkey RBC (10%)</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Cedarlane</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113">CLC1180</td>
			<td class="xl66">10% suspension of turkey red blood cells in Alsever&#39;s solution</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl63" height="21" style="width:263pt;height:15.75pt" width="351">Phosphate Buffered Saline (PBS)</td>
			<td class="xl63" style="width:100pt" width="133">Gibco</td>
			<td class="xl63" style="width:85pt" width="113"></td>
			<td class="xl66"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an optimized hemagglutination inhibition (hi) assay to quantify influenza-specific antibody titers

एंटीबॉडी titers सामांयतः इंफ्लूएंजा और अंय रोगजनकों के खिलाफ सीरम संरक्षण के लिए किराए मार्कर के रूप में इस्तेमाल किया जाता है । एंटीबॉडी उत्पादन पूर्व और बाद टीकाकरण की विस्तृत जानकारी के लिए वैक्सीन प्रेरित प्रतिरक्षा समझ की आवश्यकता है । इस लेख का वर्णन एक विश्वसनीय बिंदु द्वारा-point प्रोटोकॉल इंफ्लूएंजा-विशिष्ट एंटीबॉडी titers निर्धारित करने के लिए । पहले प्रोटोकॉल एक विधि का वर्णन करने के लिए antigen hemagglutination, जो दूसरे प्रोटोकॉल (hemagglutination परख, हा परख) में बाद के उपयोग के लिए सांद्रता मानकीकरण के लिए आवश्यक मात्रा निर्दिष्ट करें । दूसरा प्रोटोकॉल का वर्णन इंफ्लूएंजा के ठहराव-विशिष्ट एंटीबॉडी titers अलग वायरल उपभेदों के खिलाफ मानव सीरम या सेल संस्कृति supernatants (hemagglutination अवरोध परख, हाय परख) के एक धारावाहिक कमजोर पड़ने का उपयोग करके ।
एक लागू उदाहरण के रूप में, हम एक स्वस्थ पलटन, जो एक त्रिसंयोजक निष्क्रिय इंफ्लूएंजा वैक्सीन प्राप्त की एंटीबॉडी प्रतिक्रिया दिखाते हैं । इसके अतिरिक्त, विभिंन इंफ्लूएंजा वायरस के बीच पार जेट दिखाया गया है और तरीकों पशु लाल रक्त कोशिकाओं (कोशिकाओं) के विभिंन प्रकार का उपयोग करके पार जेट कम करने के लिए समझाया जाता है । चर्चा के लाभों और प्रस्तुत की परख के नुकसान पर प्रकाश डाला गया और कैसे इंफ्लूएंजा के निर्धारण विशिष्ट एंटीबॉडी titers टीका से संबंधित प्रतिरक्षा की समझ में सुधार कर सकते हैं ।

पूर्व और बाद टीकाकरण प्रेरित इंफ्लूएंजा एक H3N2 के खिलाफ एंटीबॉडी प्रतिक्रिया टीका-प्रेरित एंटीबॉडी प्रतिक्रिया 26 स्वस्थ स्वयंसेवकों में मूल्यांकन किया गया था जो एक निष्क्रिय त्र?...

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An Optimized Hemagglutination Inhibition HI Assay to Quantify Influenza-specific Antibody Titers

प्रस्तुत प्रोटोकॉल का वर्णन कैसे एक hemagglutination अवरोध परख प्रदर्शन के लिए इंफ्लूएंजा-विशिष्ट एंटीबॉडी titers इंफ्लूएंजा वैक्सीन प्राप्तकर्ताओं के सीरम के नमूनों से । पहली परख hemagglutination द्वारा इष्टतम वायरल प्रतिजन सांद्रता निर्धारित करता है । दूसरी परख quantifies इंफ्लूएंजा-hemagglutination निषेध द्वारा विशिष्ट एंटीबॉडी titers ।

एक अनुकूलित Hemagglutination अवरोध (हाय) परख के लिए इंफ्लूएंजा यों तो विशिष्ट एंटीबॉडी Titers

Antibody titers are commonly used as surrogate markers for serological protection against influenza and other pathogens. Detailed knowledge of antibody ...

Research

JoVE Journal

Medicine

An Optimized Hemagglutination Inhibition (HI) Assay to Quantify Influenza-specific Antibody Titers

Methods to Quantify Pharmacologically Induced Alterations in Motor Function in Human Incomplete SCI

मानव अधूरा एससीआई में मोटर समारोह में pharmacologically प्रेरित बदलाव यों के तरीके

Spinal cord injury (SCI) is a debilitating disorder, which produces profound deficits in volitional motor control. Following medical stabilization, ...

An in vivo Assay to Test Blood Vessel Permeability

An in vivo Assay to Test Blood Vessel Permeability

एक<em&gt; Vivo में</em&gt; रक्त वाहिका पारगम्यता परीक्षण परख

This method is based on the intravenous injection of Evans Blue in mice as the test animal model. Evans blue is a dye that binds albumin. Under ...

Using Quantitative Real-time PCR to Determine Donor Cell Engraftment in a Competitive Murine Bone Marrow Transplantation Model

मात्रात्मक वास्तविक समय पीसीआर का उपयोग करने के लिए एक प्रतियोगी murine अस्थि मज्जा प्रत्यारोपण के मॉडल में दाता कोशिका engraftment निर्धारित

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules ...

A Sensitive Method to Quantify Senescent Cancer Cells

वृद्ध होनेवाला कैंसर कोशिकाओं यों एक संवेदनशील तरीका

Human cells do not indefinitely proliferate. Upon external and/or intrinsic  cues, cells might die or enter a stable cell cycle arrest called senescence. ...

A High Throughput, Multiplexed and Targeted Proteomic CSF Assay to Quantify Neurodegenerative Biomarkers and Apolipoprotein E Isoforms Status

एक उच्च Throughput, मल्टिप्लेक्स और लक्षित प्रोटिओमिक सीएसएफ परख Neurodegenerative Biomarkers और apolipoprotein ई isoforms स्थिति यों

Many neurodegenerative diseases are&#160;still lacking effective treatments. Reliable biomarkers for identifying and classifying these diseases will be ...

Determination of the Relative Potency of an Anti-TNF Monoclonal Antibody (mAb) by Neutralizing TNF Using an In Vitro Bioanalytical Method

Determination of the Relative Potency of an Anti-TNF Monoclonal Antibody mAb by Neutralizing TNF Using an In Vitro Bioanalytical Method

एक विरोधी TNF मोनोक्लोनल एंटीबॉडी (मॉब) के सापेक्ष शक्ति का निर्धारण TNF द्वारा एक इन विट्रो विश्लेषणात्मक विधि का उपयोग कर बेअसर

This protocol shows the measurement of the apoptotic activity neutralization of TNF&#945; in a mouse fibroblast cell model (WEHI 164) using an ...

An Optimized Evans Blue Protocol to Assess Vascular Leak in the Mouse

माउस में संवहनी रिसाव का आकलन करने के लिए एक अनुकूलित इवांस ब्लू प्रोटोकॉल

Vascular leak, or plasma extravasation, has a number of causes, and may be a serious consequence or symptom of an inflammatory response. This study may ...

Optimized Griess Reaction for UV-Vis and Naked-eye Determination of Anti-malarial Primaquine

यूवी-विस और एंटी-मलेरिया प्राइमाक्विन के नग्न-आंख निर्धारण के लिए अनुकूलित ग्रिस रिएक्शन

Primaquine (PMQ), an important anti-malarial drug, has been recommended by the World Health Organization (WHO) for the treatment of life-threatening ...

Vessel-Sparing Microsurgical Longitudinal Intussusception Vasoepididymostomy to Treat Epididymal Obstructive Azoospermia

पोत-बख्शने वाले माइक्रोसर्जिकल अनुदैर्ध्य इंटुसससेप्शन Vasoepididymostomy Epididymal Obstructive Azoospermia का इलाज करने के लिए

The epididymis is a common site of obstruction in obstructive azoospermia (OA). Vasoepididymostomy has become an important method for the treatment of ...

A Simple Pit Assay Protocol to Visualize and Quantify Osteoclastic Resorption In Vitro

A Simple Pit Assay Protocol to Visualize and Quantify Osteoclastic Resorption In Vitro

एक सरल गड्ढे परख प्रोटोकॉल की कल्पना करने के लिए और विट्रो में ओस्टियोक्लास्टिक अवशोषण की मात्रा निर्धारित करने के लिए

Mature osteoclasts are multinucleated cells that can degrade bone through the secretion of acids and enzymes. They play a crucial role in various diseases ...