Name: echocardiographic and histological examination of cardiac morphology in the mouse
Uploaded: 2017-10-26T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Echocardiographic and Histological Examination of Cardiac Morphology in the Mouse at JoVE.com

העבודה נתמך על ידי הממשלה הצרפתית (סוכנות המחקר הלאומית, ANR) דרך התוכנית "השקעות עבור העתיד" LABEX SIGNALIFE (הפניה ANR-11-LABX-0028-01) ויוצקים על ידי מענקים ק' וו ד מ האגודה la Recherche sur le סרטן, Fondation דה פראנס, לתכנן Inserm סרטן. ד B. נ א קיבלו מלגות את Fondation pour la Médicale רשרש ומן העיר ניס, בהתאמה. Echocardiograph את המתמר היו מתבקשים המסופקים על ידי פיליפס. אנו מודים Borderie א, ס Destree, מ Cutajar-Bossert, א Landouar, א Martres, Biancardini א ו ס מ וגנר לסיוע טכני מיומן שלהם.

הניסויים המתוארים כאן בוצעו בהתאם החוקים הרלוונטיים לרווחת בעלי החיים מוסדיים ו צרפתי, קווים מנחים ומדיניות. . הם אושרו על ידי ועדת האתיקה צרפתי (Comité Institutionnel d &#39; Ethique Pour l &#39; חיה de Laboratoire; מספר NCE/2012-106).
 1. אקו <ol><li>לקבוע את משקל הגוף של העכבר באמצעות איזון מעבדה סטנדרטיים תוך ...

<ol>
	<li>Ormandy, E. H., Dale, J., Griffin, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+engineering+of+animals:+ethical+issues,+including+welfare+concerns.">Genetic engineering of animals: ethical issues, including welfare concerns.</a> Can Vet J. 52 (5), 544-550 (2011).</li><li>Karl, T., Pabst, R., von H&#246;rsten, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+phenotyping+of+mice+in+pharmacological+and+toxicological+research.">Behavioral phenotyping of mice in pharmacological and toxicological research.</a> Exp Toxicol Pathol. 55 (1), 69-83 (2003).</li><li>Phoon, C. K., Turnbull, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+Imaging+in+Mice.">Cardiovascular Imaging in Mice.</a> Curr Protoc Mouse Biol. 6 (1), 15-38 (2016).</li><li>Wagner, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peroxisome+proliferator-activated+receptor+beta+stimulation+induces+rapid+cardiac+growth+and+angiogenesis+via+direct+activation+of+calcineurin.">Peroxisome proliferator-activated receptor beta stimulation induces rapid cardiac growth and angiogenesis via direct activation of calcineurin.</a> Cardiovasc Res. 83 (1), 61-71 (2009).</li><li>Wagner, K. D., Vukolic, A., Baudouy, D., Michiels, J. F., Wagner, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inducible+Conditional+Vascular-Specific+Overexpression+of+Peroxisome+Proliferator-Activated+Receptor+Beta/Delta+Leads+to+Rapid+Cardiac+Hypertrophy.">Inducible Conditional Vascular-Specific Overexpression of Peroxisome Proliferator-Activated Receptor Beta/Delta Leads to Rapid Cardiac Hypertrophy.</a> PPAR Res. 2016, 7631085 (2016).</li><li>Ghanbarian, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dnmt2/Trdmt1+as+Mediator+of+RNA+Polymerase+II+Transcriptional+Activity+in+Cardiac+Growth.">Dnmt2/Trdmt1 as Mediator of RNA Polymerase II Transcriptional Activity in Cardiac Growth.</a> PLoS One. 11 (6), e0156953 (2016).</li><li>Meguro, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyclosporine+attenuates+pressure-overload+hypertrophy+in+mice+while+enhancing+susceptibility+to+decompensation+and+heart+failure.">Cyclosporine attenuates pressure-overload hypertrophy in mice while enhancing susceptibility to decompensation and heart failure.</a> Circ Res. 84 (6), 735-740 (1999).</li><li>de Ara&#250;jo, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regular+and+moderate+aerobic+training+before+allergic+asthma+induction+reduces+lung+inflammation+and+remodeling.">Regular and moderate aerobic training before allergic asthma induction reduces lung inflammation and remodeling.</a> Scand J Med Sci Sports. 26 (11), 1360-1372 (2016).</li><li>Benavides-Vallve, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+strategies+for+echocardiographic+evaluation+of+left+ventricular+function+in+a+mouse+model+of+long-term+myocardial+infarction.">New strategies for echocardiographic evaluation of left ventricular function in a mouse model of long-term myocardial infarction.</a> PLoS One. 7 (7), e41691 (2012).</li><li>Colazzo, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+left+atrium+and+left+atrial+appendage+structure+and+function:+echocardiographic+and+morphologic+evaluation.">Murine left atrium and left atrial appendage structure and function: echocardiographic and morphologic evaluation.</a> PLoS One. 10 (4), e0125541 (2015).</li><li>Pachon, R. E., Scharf, B. A., Vatner, D. E., Vatner, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Best+anesthetics+for+assessing+left+ventricular+systolic+function+by+echocardiography+in+mice.">Best anesthetics for assessing left ventricular systolic function by echocardiography in mice.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 308 (12), H1525-H1529 (2015).</li><li>Gao, S., Ho, D., Vatner, D. E., Vatner, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiography+in+Mice.">Echocardiography in Mice.</a> Curr Protoc Mouse Biol. 1, 71-83 (2011).</li><li>Mor-Avi, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+and+evolving+echocardiographic+techniques+for+the+quantitative+evaluation+of+cardiac+mechanics:+ASE/EAE+consensus+statement+on+methodology+and+indications+endorsed+by+the+Japanese+Society+of+Echocardiography.">Current and evolving echocardiographic techniques for the quantitative evaluation of cardiac mechanics: ASE/EAE consensus statement on methodology and indications endorsed by the Japanese Society of Echocardiography.</a> J Am Soc Echocardiogr. 24 (3), 277-313 (2011).</li><li>Collins, K. A., Korcarz, C. E., Lang, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+echocardiography+for+the+phenotypic+assessment+of+genetically+altered+mice.">Use of echocardiography for the phenotypic assessment of genetically altered mice.</a> Physiol Genomics. 13 (3), 227-239 (2003).</li><li>Rottman, J. N., Ni, G., Brown, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiographic+evaluation+of+ventricular+function+in+mice.">Echocardiographic evaluation of ventricular function in mice.</a> Echocardiography. 24 (1), 83-89 (2007).</li><li>Hart, C. Y., Burnett, J. C., Redfield, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+avertin+versus+xylazine-ketamine+anesthesia+on+cardiac+function+in+normal+mice.">Effects of avertin versus xylazine-ketamine anesthesia on cardiac function in normal mice.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 281 (5), H1938-H1945 (2001).</li><li>Moran, C. M., Thomson, A. J., Rog-Zielinska, E., Gray, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+echocardiography+in+the+assessment+of+cardiac+physiology+and+disease+in+preclinical+models.">High-resolution echocardiography in the assessment of cardiac physiology and disease in preclinical models.</a> Exp Physiol. 98 (3), 629-644 (2013).</li><li>Fayssoil, A., Tournoux, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analyzing+left+ventricular+function+in+mice+with+Doppler+echocardiography.">Analyzing left ventricular function in mice with Doppler echocardiography.</a> Heart Fail Rev. 18 (4), 511-516 (2013).</li><li>Schoensiegel, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+throughput+echocardiography+in+conscious+mice:+training+and+primary+screens.">High throughput echocardiography in conscious mice: training and primary screens.</a> Ultraschall Med. 32, S124-S129 (2011).</li><li>Yariswamy, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac-restricted+Overexpression+of+TRAF3+Interacting+Protein+2+(TRAF3IP2)+Results+in+Spontaneous+Development+of+Myocardial+Hypertrophy,+Fibrosis,+and+Dysfunction.">Cardiac-restricted Overexpression of TRAF3 Interacting Protein 2 (TRAF3IP2) Results in Spontaneous Development of Myocardial Hypertrophy, Fibrosis, and Dysfunction.</a> J Biol Chem. 291 (37), 19425-19436 (2016).</li><li>Jara, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac-Specific+Disruption+of+GH+Receptor+Alters+Glucose+Homeostasis+While+Maintaining+Normal+Cardiac+Performance+in+Adult+Male+Mice.">Cardiac-Specific Disruption of GH Receptor Alters Glucose Homeostasis While Maintaining Normal Cardiac Performance in Adult Male Mice.</a> Endocrinology. 157 (5), 1929-1941 (2016).</li><li>Kerr, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stability+and+function+of+adult+vasculature+is+sustained+by+Akt/Jagged1+signalling+axis+in+endothelium.">Stability and function of adult vasculature is sustained by Akt/Jagged1 signalling axis in endothelium.</a> Nat Commun. 7, 10960 (2016).</li><li>Wagner, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+vessel+development+requires+activation+of+the+TrkB+neurotrophin+receptor+by+the+Wilms'+tumor+transcription+factor+Wt1.">Coronary vessel development requires activation of the TrkB neurotrophin receptor by the Wilms' tumor transcription factor Wt1.</a> Genes Dev. 19 (21), 2631-2642 (2005).</li><li>Wagner, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Wilms'+tumour+suppressor+Wt1+is+a+major+regulator+of+tumour+angiogenesis+and+progression.">The Wilms' tumour suppressor Wt1 is a major regulator of tumour angiogenesis and progression.</a> Nat Commun. 5, 5852 (2014).</li><li>Yang, X. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiographic+assessment+of+cardiac+function+in+conscious+and+anesthetized+mice.">Echocardiographic assessment of cardiac function in conscious and anesthetized mice.</a> Am J Physiol. 277 (5 Pt 2), H1967-H1974 (1999).</li><li>Rottman, J. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+changes+in+ventricular+function+assessed+echocardiographically+in+conscious+and+anesthetized+mice.">Temporal changes in ventricular function assessed echocardiographically in conscious and anesthetized mice.</a> J Am Soc Echocardiogr. 16 (11), 1150-1157 (2003).</li><li>Qui&#241;ones, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendations+for+quantification+of+Doppler+echocardiography:+a+report+from+the+Doppler+Quantification+Task+Force+of+the+Nomenclature+and+Standards+Committee+of+the+American+Society+of+Echocardiography.">Recommendations for quantification of Doppler echocardiography: a report from the Doppler Quantification Task Force of the Nomenclature and Standards Committee of the American Society of Echocardiography.</a> J Am Soc Echocardiogr. 15 (2), 167-184 (2002).</li><li>van Laake, L. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+of+cell+therapy+and+assessment+of+cardiac+function+using+magnetic+resonance+imaging+in+a+mouse+model+of+myocardial+infarction.">Monitoring of cell therapy and assessment of cardiac function using magnetic resonance imaging in a mouse model of myocardial infarction.</a> Nat Protoc. 2 (10), 2551-2567 (2007).</li><li>Wagner, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Wilms'+tumor+suppressor+Wt1+is+expressed+in+the+coronary+vasculature+after+myocardial+infarction.">The Wilms' tumor suppressor Wt1 is expressed in the coronary vasculature after myocardial infarction.</a> FASEB J. 16 (9), 1117-1119 (2002).</li><li>Wagner, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+induction+and+inheritance+of+epigenetic+cardiac+hypertrophy+in+the+mouse.">RNA induction and inheritance of epigenetic cardiac hypertrophy in the mouse.</a> Dev Cell. 14 (6), 962-969 (2008).</li><li>Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIH+Image+to+ImageJ:+25+years+of+image+analysis.">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nat Methods. 9 (7), 671-675 (2012).</li><li>Ruifrok, A. C., Johnston, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+histochemical+staining+by+color+deconvolution.">Quantification of histochemical staining by color deconvolution.</a> Anal Quant Cytol Histol. 23 (4), 291-299 (2001).</li><li>Lazzeroni, D., Rimoldi, O., Camici, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+Left+Ventricular+Hypertrophy+to+Dysfunction+and+Failure.">From Left Ventricular Hypertrophy to Dysfunction and Failure.</a> Circ J. 80 (3), 555-564 (2016).</li><li>Ismail, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistologic+labeling+of+murine+endothelium.">Immunohistologic labeling of murine endothelium.</a> Cardiovasc Pathol. 12 (2), 82-90 (2003).</li><li>Benton, R. L., Maddie, M. A., Minnillo, D. R., Hagg, T., Whittemore, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Griffonia+simplicifolia+isolectin+B4+identifies+a+specific+subpopulation+of+angiogenic+blood+vessels+following+contusive+spinal+cord+injury+in+the+adult+mouse.">Griffonia simplicifolia isolectin B4 identifies a specific subpopulation of angiogenic blood vessels following contusive spinal cord injury in the adult mouse.</a> J Comp Neurol. 507 (1), 1031-1052 (2008).</li><li>Ayoub, A. E., Salm, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+morphological+diversity+of+microglia+in+the+activated+hypothalamic+supraoptic+nucleus.">Increased morphological diversity of microglia in the activated hypothalamic supraoptic nucleus.</a> J Neurosci. 23 (21), 7759-7766 (2003).</li><li>Maddox, D. E., Shibata, S., Goldstein, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stimulated+macrophages+express+a+new+glycoprotein+receptor+reactive+with+Griffonia+simplicifolia+I-B4+isolectin.">Stimulated macrophages express a new glycoprotein receptor reactive with Griffonia simplicifolia I-B4 isolectin.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 79 (1), 166-170 (1982).</li><li>dela Paz, N. G., D'Amore, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arterial+versus+venous+endothelial+cells.">Arterial versus venous endothelial cells.</a> Cell Tissue Res. 335 (1), 5-16 (2009).</li></ol>

שיטות שונות פותחו כדי להעריך את מבנה הלב ותפקודו בעכברים, כולל אקוקרדיוגרפיה חדות משופרת MRI, מיקרו CT, סריקת PET. בשל העלות האפקטיביות שלה פשטות, אקו הוא הטכניקה הנפוצה ביותר לניתוח פונקציונלי עכברים11. באופן כללי, בגלל גודלו הקטן של הלב ואת תדירות גבוהה של קצב הלב בעכברים, מתמרים ?...

מגוון רחב של מודלים מהונדס גנטית עכבר זמינים, מספר מחקרים בעכברים גבוהה1,2. אקוקרדיוגרפיה MRI הגישות הנפוצות עבור אפיון פנוטיפי מורפולוגיה של מודלים אלה עכבר3ותפקוד הלב בקרב אנשי עסקים ותיירים כאחד. המטרה של פרוטוקול הציג היא לנתח את תפקוד הלב ואת מורפולוגיה בעכברים בוגרים. הוא משלב echocardiographic, היסטולוגית, מדידות immunohistochemical. בדיקה echocardiographic נעשה שימוש נרחב עכברים4,5,6,7,8,9,10,11, 12. . Pachon et al. 11 מזוהה 205 מחקרים שפורסמו בזרימת הדם, זרימת הדם מחקר, כתב העת האמריקאי לפיזיולוגיה - פיזיולוגיה הדם והלבומחקר לב וכלי דם בין 2012 ו 2015 זה שימוש בבדיקה echocardiographic בבעלי חיים.
אקוקרדיוגרפיה משמש לזיהוי פנוטיפים לב עכברים מהונדסים5,6,13,14,15,16, 17 , 18 , 19 , 20 , 21 , 22, כמו גם וניתוח תפקוד הלב אצל היפרטרופיה הנוצרות על-ידי עומס יתר כרונית, איסכמיה בשריר הלב, ומודלים של שריר הלב בעכברים (נבדקה12). ציוד אקוקרדיוגרפיה משופר מאפשר המדד הסטנדרטי של שמאל-חדרית (LV) בהתכווצות והתרחבות של מידות, הדמיה דופלר רקמות, ניגודיות שריר הלב echography את ההערכה של הפונקציה אזוריים LV ושמורת כלילית 12. באופן אידיאלי, יש לבצע בדיקה echocardiographic בעכברים בהכרה כדי למנוע את ההשפעות השליליות של הרדמה על הפונקציה כויץ, שליטה רפלקס אוטונומי, ולדרג את הלב11. עם זאת, גישה זו הוא מוגבל על ידי הדרישה לאמן את החיות; קשיים בשמירה על טמפרטורת הגוף יציב; תנועת חפצים; לחץ; תדרים לב גבוהה מאוד; את הדרישה לפחות שני חוקרים כדי לבצע את הניסוי, במיוחד אם מספר גדול של בעלי חיים נמצאים תחת חקירה. מעניין, מחקר שנערך לאחרונה דיווח אין הבדלים בפרמטרים echocardiographic מיומנים ובעלי לא מאומן19. אנו מבצעים מדידות echocardiographic בעכברים מורדם. פרוטוקולי הרדמה שונות יידונו להלן.
למרות אקוקרדיוגרפיה ברזולוציה תקנית (&#62; 10 מגה-הרץ) היא מספקת מידה LV סיסטולי, דיאסטולי מידות, תפקוד הלב בעכברים מבוגרים, השיטה היא מוגבלת בתיאור שלה התופעות המבנית הבסיסית. לפיכך, אנו משלבים את המידות ויוו עם היסטולוגית וניתוחים immunohistological כדי למדוד, לדוגמה, צפיפות cardiomyocyte בקוטר של כלי השיט. חקירות היסטולוגית ו immunohistological אחרים, כגון הקביעה של התפשטות, בחינת אפופטוזיס, מדידות גודל לאוטם, קביעה של פיברוזיס, ועל חופש הביטוי סמן ספציפיים, ניתן גם לבצע את אותו סוג של עובד הרקמה אך אינם הנושא של פרוטוקול זה. השילוב של ויוו echocardiographic בדיקה היסטולוגית ניתוחים מספק תובנות נוספות המשמשות כבסיס שינויים מבניים. בצעד נוסף, אנחנו יכולים להשלים מדידות אלה עם חקירות מולקולרית ומבניים אולטרה. ניתוחים היסטולוגית לא רק להשלים את הבדיקה echocardiographic, אלא גם להפוך חיוניות כאשר הרזולוציה של אקוקרדיוגרפיה אינה מספיקה. זהו המצב, מודלים של עכברים מהונדסים כי הם מתחלקים קטלני23,24.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Wheat germ agglutinin (WGA) conjugated tetramethylrhodamine</td>
			<td>Life Technologies, Molecular Probes</td>
			<td>W849</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotinylated Goat Anti-Rabbit IgG Antibody</td>
			<td>Vectorlabs</td>
			<td>BA-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Avidin/Biotin Blocking Kit</td>
			<td>Vectorlabs</td>
			<td>SP-2001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VECTASTAIN Elite ABC HRP Kit (Peroxidase, Standard)</td>
			<td>Vectorlabs</td>
			<td>PK-6100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VECTASHIELD Antifade Mounting Medium with DAPI</td>
			<td>Vectorlabs</td>
			<td>H-1200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SIGMAFAST 3,3&#39;-Diaminobenzidine tablets</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D4168</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrogen peroxide solution</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H1009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Pecam-1 (CD31) antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab28364</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound transmission gel, Gel Aquasonic 100</td>
			<td>Parker</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Linear ultrasound probe, L15-7io</td>
			<td>Philips Healthcare</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Echocardiograph, IE33 xMATRIX</td>
			<td>Philips Healthcare</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope, Leica DMi8</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Filterset DAPI</td>
			<td>Leica</td>
			<td>11525304</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filterset TxR</td>
			<td>Leica</td>
			<td>11525310</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Camera, SPOT RT3 Color Slider</td>
			<td>Spot Imaging</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaging Software, SPOT 5.2 Advanced and Basic Software</td>
			<td>Spot Imaging</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaging Computer</td>
			<td>Dell</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14028-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14501-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel blades</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10023-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11650-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent shaver</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>34-0243</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cassettes for paraffin embedding</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4155F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>neutral buffered Formalin</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>8727</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>8733</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraffine TEK III</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4511</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>automated embedding apparatus, Tissue-Tek VIP</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>6032</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>paraffin-embedding station Tissue-Tek TEC 5</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>5229</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microtome blades,Accu-Edge S35</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4685</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microscopy slides, Tissue-Tek</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>9533</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cover slips, Tissue-Tek</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>9582</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting medium Tissue-Tek</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>1408</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>slide boxes</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>3958</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>eosine solution</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>8703</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hematoxyline solution</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>8711</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microtome, RM2125RT</td>
			<td>Leica</td>
			<td>720-1880 (VWR)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>water bath, Leica HI1210</td>
			<td>Leica</td>
			<td>720-0113(VWR)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>VWR</td>
			<td>ACRO444220050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 ml tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>734-0451</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>staining glass dish</td>
			<td>VWR</td>
			<td>MARI4220004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>staining jars</td>
			<td>VWR</td>
			<td>MARI4200005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Binder</td>
			<td>9010-0012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB and urea hydrogen peroxide tablets, SIGMAFAST 3,3&#8242;-Diaminobenzidine tablets</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D4293</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS (10X)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>70011044</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

echocardiographic and histological examination of cardiac morphology in the mouse

מספר גדל והולך של מודלים מהונדס גנטית העכבר הפך זמין בשנים האחרונות. יתר על כן, מספר מחקרים שבוצעו בעכברים הוא גבוה. אפיון פנוטיפי של מודלים אלה העכבר גם דורש הבחינה של תפקוד הלב ואת מורפולוגיה. אקוקרדיוגרפיה דימות תהודה מגנטית (MRI) גישות נפוצות כדי לאפיין מורפולוגיה בעכברים ותפקוד הלב בקרב אנשי עסקים ותיירים כאחד. ציוד Echocardiographic ו- MRI המתמחה בשימוש מכרסמים קטנים הוא יקר ודורש שטח ייעודי. פרוטוקול זה מתאר מידות הלב בעכברים באמצעות מערכת echocardiographic קליניים גשש כלי דם אנושי 15 מגה-הרץ. המדידות מבוצעות על עכברים בוגרים מורדם. רצפי תמונות לפחות שלושה מוקלט, נותחו עבור כל בעל חיים במצב M בתצוגת ציר קצר מתחת. לאחר מכן מבוצעת בדיקה היסטולוגית הלב, קטרים cardiomyocyte נקבעים ב hematoxylin-agglutinin eosin - או נבט חיטה (WGA)-פרפין סעיפים מוכתמים. צפיפות כלי הוא נחוש morphometrically אחרי immunostaining Pecam-1. הפרוטוקול עבר בהצלחה שימושית ללימודים תרופתי ושונה גנטי מודלים בעלי חיים בתנאים בסיסית, כמו גם לאחר ניסיוני אוטם שריר הלב על ידי מצדו קבוע של השמאלי הקדמי היורד עורקים ( LAD). מניסיוננו, חקירה echocardiographic מוגבל לבעלי מרדימים, הוא ריאלי בעכברים בוגרים במשקל של פחות 25 גרם.

איור 1, הקלטות echocardiographic נציג מדגימים את התועלת אקוקרדיוגרפיה כדי לזהות פנוטיפים הלב בעכברים מהונדסים. ניתן בקלות לזהות את ההבדל בין עכבר עם תפקוד הלב תקין (איור 1 א') חיה עם החדר השמאלי מורחבים, LV מופחתת פונקציה (איור 1B). <strong ...

Watch this Scientific Journal Video about Echocardiographic and Histological Examination of Cardiac Morphology in the Mouse at JoVE.com

Echocardiographic and Histological Examination of Cardiac Morphology in the Mouse

בדיקה echocardiographic משמש לעתים קרובות בעכברים. מכשירי אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה יקר פותחו למטרה זו. פרוטוקול זה מתאר הליך echocardiographic סבירים בשילוב עם morphometric היסטולוגית ניתוחים כדי לקבוע מורפולוגיה לב.

בבדיקה היסטולוגית ו echocardiographic של מורפולוגיה לב העכבר

An increasing number of genetically modified mouse models has become available in recent years. Moreover, the number of pharmacological studies performed ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Assessment of Cardiac Function and Myocardial Morphology Using Small Animal Look-locker Inversion Recovery (SALLI) MRI in Rats

Assessment of Cardiac Function and Myocardial Morphology Using Small Animal Look-locker Inversion Recovery SALLI MRI in Rats

הערכה של תפקוד לב ומורפולוגיה שריר הלב באמצעות שחזור קטן בעלי חיים תראו-הלבשה היפוך (SALLI) בדיקת MRI בחולדות

Small animal magnetic resonance  imaging is an important tool to study cardiac function and changes in myocardial  tissue. The high heart rates of small ...

Technical Aspects of the Mouse Aortocaval Fistula

היבטים טכניים של מורסת Aortocaval מאוס

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta ...

Echocardiographic Assessment of the Right Heart in Mice

אקו הערכה של הלב הימני בעכברים

Transgenic and toxic models of pulmonary arterial hypertension (PAH) are widely used to study the pathophysiology of PAH and to investigate potential ...

Noninvasive Assessment of Cardiac Abnormalities in Experimental Autoimmune Myocarditis by Magnetic Resonance Microscopy Imaging in the Mouse

הערכה לא פולשנית של לב חריגות בניסויית אוטואימוניות דלקת שריר לב על ידי תהודה מגנטית מיקרוסקופית הדמיה בעכבר

Myocarditis is an inflammation of the myocardium, but only ~10% of those affected show clinical manifestations of the disease. To study the immune events ...

Visualization of Streptococcus pneumoniae within Cardiac Microlesions and Subsequent Cardiac Remodeling

Visualization of Streptococcus pneumoniae within Cardiac Microlesions and Subsequent Cardiac Remodeling

ויזואליזציה של<em&gt; Streptococcus pneumoniae</em&gt; בתוך Microlesions הלב וRemodeling לב לאחר

During bacteremia Streptococcus pneumoniae can translocate across the vascular endothelium into the myocardium and form discrete bacteria-filled ...

Do's and Don'ts in the Preparation of Muscle Cryosections for Histological Analysis

עשה ואל תעשה בהכנת השריר cryosections לניתוח היסטולוגית

Histological evaluation of muscle biopsies has served as an indispensable tool in the understanding of the development and progression of pathology of ...

Assessment of Cardiac Morphological and Functional Changes in Mouse Model of Transverse Aortic Constriction by Echocardiographic Imaging

שינויים הערכה לב מורפולוגי תפקודי עכבר דגם של מועקה הרוחבית אב עורקים על ידי הדמית אקו

Transverse aortic constriction (TAC) in mice has been used as a valuable model to study mechanisms of cardiac hypertrophy and heart failure1. A reliable ...

Dissection of the Mouse Pancreas for Histological Analysis and Metabolic Profiling

דיסקציה של הלבלב העכבר עבור ניתוח היסטולוגית והגדרת פרופיל מטבולי

We have been investigating the pancreas specific transcription factor, 1a cre-recombinase; lox-stop-lox- Kristen rat sarcoma, glycine to aspartic acid at ...

Cardiac Magnetic Resonance Imaging at 7 Tesla

דימות תהודה מגנטית לב בטסלה 7

CMR at an ultra-high field (magnetic field strength B0&#160;&#8805; 7 Tesla) benefits from the signal-to-noise ratio (SNR) advantage inherent at higher ...