Name: tumor engraftment in a xenograft mouse model of human mantle cell lymphoma
Uploaded: 2018-03-30T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Tumor Engraftment in a Xenograft Mouse Model of Human Mantle Cell Lymphoma at JoVE.com

هذا العمل كان يدعمها جنيه جنيف رابطة مكافحة السرطان، مؤسسة الدكتور دوبوا فيريير دينو--Lipatti، أونكوسويسي شرطة-مكتب الدعم الدستوري، مكتب الدعم الدستوري-02260-08-2008 و 2914-02-2012، و "منحة من مؤسسة العلوم الوطنية السويسرية" 31003A_156760 و 310030-153456.

وقد استخدمت عينات الدم البشري وفقا للإجراءات التي أقرتها بالأخلاقيات المحلية ولجان إجراء التجارب على البشر في مستشفى جامعة جنيف.
وأجريت إجراءات الحيوانية وفقا "المؤسسية الأخلاقية اللجنة للحيوان الرعاية" في جنيف، سويسرا، ومكتب الطب البيطري الكانتونات (رقم الترخيص: جنرال ا...

<ol>
	<li>Baggiolini, M., Dewald, B., Moser, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+chemokines:+an+update.">Human chemokines: an update.</a> Annu Rev Immunol. 15, 675-705 (1997).</li><li>Baggiolini, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokines+and+leukocyte+traffic.">Chemokines and leukocyte traffic.</a> Nature. 392, 565-568 (1998).</li><li>Janeway, C. A., Travers, P., Walport, M., Shlomchik, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Immunobiology: The Immune System in Health and Disease. , (2001).</li><li>De Silva, N. S., Klein, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamics+of+B+cells+in+germinal+centres.">Dynamics of B cells in germinal centres.</a> Nat Rev Immunol. 15 (3), 137-148 (2015).</li><li>Cohen, P. L., Kurtin, P. J., Donovan, K. A., Hanson, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bone+marrow+and+peripheral+blood+involvement+in+mantle+cell+lymphoma.">Bone marrow and peripheral blood involvement in mantle cell lymphoma.</a> Br. J. Haematol. 101, 302-310 (1998).</li><li>Meusers, P., Hense, J., Brittinger, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mantle+cell+lymphoma:+diagnostic+criteria,+clinical+aspects+and+therapeutic+problems.">Mantle cell lymphoma: diagnostic criteria, clinical aspects and therapeutic problems.</a> Leukemia (Baltimore). 11 (Suppl 2), S60-S64 (1997).</li><li>Herrmann, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+of+overall+survival+in+advanced+stage+mantle+cell+lymphoma.">Improvement of overall survival in advanced stage mantle cell lymphoma.</a> J Clin Oncol. 27 (4), 511-518 (2008).</li><li>Martin, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intensive+treatment+strategies+may+not+provide+superior+outcomes+in+mantle+cell+lymphoma:+overall+survival+exceeding+7+years+with+standard+therapies.">Intensive treatment strategies may not provide superior outcomes in mantle cell lymphoma: overall survival exceeding 7 years with standard therapies.</a> Ann Oncol. 19 (7), 1327-1330 (2008).</li><li>Iyengar, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characteristics+of+human+primary+mantle+cell+lymphoma+engraftment+in+NSG+mice.">Characteristics of human primary mantle cell lymphoma engraftment in NSG mice.</a> Br J Haematol. 173 (1), 165-169 (2016).</li><li>Klco, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+heterogeneity+of+genetically+defined+subclones+in+acute+myeloid+leukemia.">Functional heterogeneity of genetically defined subclones in acute myeloid leukemia.</a> Cancer cell. 25 (3), 379-392 (2014).</li><li>Kerbel, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+tumor+xenografts+as+predictive+preclinical+models+for+anticancer+drug+activity+in+humans:+better+than+commonly+perceived-but+they+can+be+improved.">Human tumor xenografts as predictive preclinical models for anticancer drug activity in humans: better than commonly perceived-but they can be improved.</a> Cancer Biol Ther. 2 (4 Suppl 1), S134-S139 (2003).</li><li>Johnson, J. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationships+between+drug+activity+in+NCI+preclinical+in+vitro+and+in+vivo+models+and+early+clinical+trials.">Relationships between drug activity in NCI preclinical in vitro and in vivo models and early clinical trials.</a> Br. J. Cancer. 84, 1424-1431 (2001).</li><li>Scholz, C. C., Berger, D. P., Winterhalter, B. R., Henss, H., Fiebig, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+of+drug+response+in+patients+and+in+the+clonogenic+assay+with+solid+human+tumour+xenografts.">Correlation of drug response in patients and in the clonogenic assay with solid human tumour xenografts.</a> Eur. J. Cancer. 26, 901-905 (1990).</li><li>Do&#241;ate, C., Vijaya Kumar, A., Imhof, B. A., Matthes, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Frontline+Science:+Anti-JAM-C+therapy+eliminates+tumor+engraftment+in+a+xenograft+model+of+mantle+cell+lymphoma.">Frontline Science: Anti-JAM-C therapy eliminates tumor engraftment in a xenograft model of mantle cell lymphoma.</a> J Leukoc Biol. 100 (5), 843-853 (2016).</li></ol>

التجارب السريرية ممكنة للمخدرات التي في مرحلة متقدمة من التنمية ولكن لا يمكن استخدامها لاكتشاف المخدرات. واتبعت منذ فترة طويلة الجهود الرامية إلى تطوير المستلمين الحيوان للسلالة البشرية الخلية من أجل اختبار المخدرات المرحلة المبكرة. هنا نقدم نموذجا حيوان أن يتجنب رفض الابتزاز البشرية و...

لمفاوية بالطبيعة تؤدي دوراً رئيسيا في منأى عن المراقبة، واللمفاويات الاتجار خطوة حاسمة في تركيب مستضد حصانة محددة1،2. وتشمل هذه العملية الهجرة من السذاجة تي لمفاوية من الغدة الصعترية إلى مجرى الدم، ومن هناك إلى الأجهزة اللمفاوية الثانوية، بما في ذلك الغدد الليمفاوية أو بقع بير في الطحال، حيث يلتقي المستضدات المشابهة. الخلايا الليمفاوية ب التفريق في نخاع العظام وتهاجر كخلايا ساذجة في المسام من الأجهزة اللمفاوية الثانوية3. بعض من هذه الخلايا ب ربط مستضد مع مستقبلات بهم ويتم تفعيلها من خلال خلايا T معينة. انتشار وتمايز هذه الخلايا ب يدفع الخلايا السذاجة ب عدم تفعيلها، إلى منطقة عباءة المسام. يمكن أن تفرق في الذاكرة ب تنشيط الخلايا ثم الخلايا التي دوريات الهيئة، أو تنضج في الغلوبولين المناعي إفراز خلايا البلازما التي تهاجر إلى نخاع العظم4.
MCL عند لمفاوية السذاجة ب في منطقة عباءة تحويل إلى ورم. هذه الخلايا اللمفاوية الموجودة في المكروية الأجهزة اللمفاوية وتتكاثر مستقلة عن مراقبة محددة تي اللمفاويات. بيد أنه في مرحلة معينة من كثافة الهروب من هذا مكانة واوافيكم في مجرى الدم في البحث عن منافذ في الأجهزة الأخرى. نظراً للطابع المعقد لجزيئات الالتصاق والانفلات من المستقطبات وعلى المستقبلات، إليه هذا الخلوية الاتجار في فيفو هو غير مفهومة ويعوق ذلك العلاج. أساليب الرواية ضرورية لفعالية حظر هذا عملية الهجرة لمنع الخلايا اللمفاوية ب من الوصول إلى ميكرونفيرونمينتس جديدة.
MCL واحد من الأكثر صعوبة في علاج الأورام الخبيثة الخلية ب. تطوير النمط الظاهري الورمية ل MCL هو نتيجة لسلسلة متعددة الخطوات، تتميز باكتساب الخصائص البيولوجية الفريدة. وقت التشخيص، يقدم معظم المرضى (70 في المائة) الفعل مع مرض نشرها، مع غالبية الحالات العارضة مشاركة اكسترانودال في الطحال ونخاع العظام، و/أو الجهاز الهضمي5،6. في معالجة المرضى، والانتكاس بمقاومة الأورام في غضون سنوات قليلة شائع، على الرغم من أن العلاج الكيميائي التقليدي يدفع معدلات عالية مغفرة في المدى القصير7،8. هنا نقدم نموذجا أمراض جديدة التي يمكن أن تساعد على فهم نشر MCL وعن البيولوجيا الأساسية: قمنا بإنشاء نموذج ماوس xenograft MCL بشرية التي نشأت من الخلايا السرطانية الأولية للمرضى. ونأمل أن يساعد هذا النموذج وضع استراتيجيات علاجية ضد نشر MCL، وربما توفر منظورات جديدة السريرية للأمثل التشخيص والعلاج للمرضى الذين انتكست.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Ficoll-paque media</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>17-1440-02</td>
			<td>for separation of mononuclear cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI Medium 1640</td>
			<td>Gibco-Life technologies</td>
			<td>61870-010</td>
			<td>for dilution of blood sample</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline (PBS)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D8537</td>
			<td>washing of cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin (BSA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A8412</td>
			<td>for preparation of PBS with 1% BSA used in washing cells during isolation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD19-APC700</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>B49212</td>
			<td>human pan-B cell marker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD20-APC</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>A21693</td>
			<td>human pan-B cell marker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD20-ECD</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>IM3607</td>
			<td>human pan-B cell marker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD5-PC 5.5</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>PN A70203</td>
			<td>human T cell marker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD23-PE</td>
			<td>Pharmingen</td>
			<td>555711</td>
			<td>Cell surface protein typically absent in MCL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD45 KO</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>B36294</td>
			<td>Pan-leucocyte marker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD200-PE</td>
			<td>Pharmingen</td>
			<td>552475</td>
			<td>Cell surface protein typically absent in MCL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NOD scid gamma (NSG) mice</td>
			<td>Charles River Laboratories</td>
			<td>5557</td>
			<td>used to develop MCL xenografts in this study</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Easy sep Human B cell enrichment kit</td>
			<td>Stem cell technologies</td>
			<td>19054</td>
			<td>used to enrich B cells to obtain pure cells for injecting into mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACS</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>Navios</td>
			<td>used to characterize MCL sample and to study the organs for MCL engraftment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1X ammonium chloride potassium buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>red blood lysis buffer (NH4Cl 8,024 mg/l; KHCO3 1,001 mg/l; EDTA.Na2&#183;2H2O 3.722 mg/l )</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

tumor engraftment in a xenograft mouse model of human mantle cell lymphoma

من الفعاليات الرئيسية في التداول الخلايا المناعية وأنها موطن أساسا للخلايا الليمفاوية ب ويقيمون في الأجهزة اللمفاوية. بينما تتكاثر الخلايا العادية ب فقط عندما يحفزه لمفاوية T، النمطان ب الخلايا البقاء على قيد الحياة وتوسيع استقلالية في منافذ الجهاز غير معرف. عباءة الخلية اللمفاوية (MCL) أحد هذه الخلية باضطراب، وحيث معدل متوسط بقاء المرضى 4-5 سنوات. وهذا يدعو إلى حاجة الآليات الفعالة التي يتم حظرها بصاروخ موجه وانجرافتمينت من هذه الخلايا بغية زيادة البقاء على قيد الحياة وطول العمر للمرضى. ولذلك، بالجهود المبذولة لتطوير نموذج ماوس إكسينوجرافت لدراسة مدى فعالية العلاجات MCL بعرقلة صاروخ موجه إليه في فيفو أهمية قصوى. واتبعت طويلة التنمية الحيوانية المتلقين للسلالة البشرية الخلية لاختبار المخدرات المرحلة المبكرة، كنماذج الماوس السريرية ذات الصلة حاسمة بالنسبة للعوامل العلاجية الجديدة الشاشة. تم تطوير هذا النموذج الحيواني لتجنب رفض الابتزاز البشرية ووضع نموذج للأمراض التي تصيب الإنسان، وأنها قد تكون أداة مفيدة للغاية لدراسة تطور المرض لأنواع مختلفة من الأورام اللمفاوية، والقيام بالتجارب السريرية للمخدرات مرشح الأورام الخبيثة الدموية، مثل MCL. قمنا بإنشاء نموذج ماوس إكسينوجرافت التي ستكون بمثابة مصدرا ممتازا دراسة وتطوير نهج علاجية مبتكرة ل MCL.

ويصف المخطوط بروتوكولا أمثل للتنمية الناجحة لنموذج الماوس إكسينوجرافت engraftment الخلايا MCL. إعداد سكان خلية النقي (في هذه الحالة في خلايا MCL)، حرج للغاية لتطوير ناجح MCL تكثيفها. ويمثل الرقم 1 الخطوات التحضيرية لعزل الخلايا وحيدات النوى من دم المريض MCL بكثافة ا?...

Watch this Scientific Journal Video about Tumor Engraftment in a Xenograft Mouse Model of Human Mantle Cell Lymphoma at JoVE.com

Tumor Engraftment in a Xenograft Mouse Model of Human Mantle Cell Lymphoma

عباءة الخلية اللمفاوية (MCL) مهمة صعبة لعلاج اضطراب خلايا ب ويصعب وضع نموذج ماوس إكسينوجرافت من MCL الأولية دراسة وتطوير المداواة. هنا، يصف لنا النجاح في إقامة MCL تكثيفها في الفئران للمساعدة على فهم البيولوجيا الأساسية لها.

ورم انجرافتمينت في نموذج الفأر إكسينوجرافت من عباءة البشرية الخلية اللمفاوية

B lymphocytes are key players in immune cell circulation and they mainly home to and reside in lymphoid organs. While normal B cells only proliferate when ...

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Development and Maintenance of a Preclinical Patient Derived Tumor Xenograft Model for the Investigation of Novel Anti-Cancer Therapies

تطوير وصيانة للورم المريض قبل السريرية المستمدة طعم أجنبي نموذج للتحقيق في رواية مكافحة السرطان العلاج

Patient derived tumor xenograft (PDTX) models provide a necessary platform in facilitating anti-cancer drug development prior to human trials. Human tumor ...

Isolation of Circulating Tumor Cells in an Orthotopic Mouse Model of Colorectal Cancer

عزل الخلايا السرطانية المتداولة في نموذج الفأر المثلي لسرطان القولون والمستقيم

Despite the advantages of easy applicability and cost-effectiveness, subcutaneous mouse models have severe limitations and do not accurately simulate ...

A Syngeneic Mouse B-Cell Lymphoma Model for Pre-Clinical Evaluation of CD19 CAR T Cells

نموذج ماوس سينجينيك اللمفاوية ب-خلية للتقييم قبل الإكلينيكية لخلايا تي سيارة CD19

The astonishing clinical success of CD19 chimeric antigen receptor (CAR) T-cell therapy has led to the approval of two second generation chimeric antigen ...

Patient-derived Orthotopic Xenograft Models for Human Urothelial Cell Carcinoma and Colorectal Cancer Tumor Growth and Spontaneous Metastasis

نماذج Xenograft المتوارثية المستمدة من المريض لسرطان الخلايا البولية البشرية ونمو ورم سرطان القولون والمستقيم وورم الانبثاث العفوي

Cancer patients have poor prognoses when lymph node (LN) involvement is present in both high-grade urothelial cell carcinoma (HG-UCC) of the bladder and ...

A Melanoma Patient-Derived Xenograft Model

نموذج Xenograft مشتق من سرطان الجلد

Accumulating evidence suggests that molecular and biological properties differ in melanoma cells grown in traditional two-dimensional tissue culture ...

A Human Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC) Engrafted Humanized Xenograft Model for Translational Immuno-oncology (I-O) Research

A Human Peripheral Blood Mononuclear Cell PBMC Engrafted Humanized Xenograft Model for Translational Immuno-oncology I-O Research

نموذج الأوناوجراف ة الدم المحيطي البشري (PBMC) غير المشروع لأبحاث الأورام المناعية المترجمة (I-O)

The discovery and development of immuno-oncology (I-O) therapy in recent years represents a milestone in the treatment of cancer. However, treatment ...

Establishment of Gastric Cancer Patient-derived Xenograft Models and Primary Cell Lines

إنشاء نماذج Xenograft المستمدة من سرطان المعدة وخطوط الخلايا الأولية

The use of preclinical models to advance our understanding of tumor biology and investigate the efficacy of therapeutic agents is key to cancer research. ...

Generation of a Liver Orthotopic Human Uveal Melanoma Xenograft Platform in Immunodeficient Mice

جيل من الكبد البشرية العظام الإنسان الجلد البقري النظام الأساسي في الفئران نقص المناعة

In recent decades, subcutaneously implanted patient-derived xenograft tumors or cultured human cell lines have been increasingly recognized as more ...

A Mouse Model to Investigate the Role of Cancer-Associated Fibroblasts in Tumor Growth

نموذج فأر للتحقيق في دور الخلايا الليفية المرتبطة بالسرطان في نمو الورم

Cancer-associated fibroblasts (CAFs) can play an important role in tumor growth by creating a tumor-promoting microenvironment. Models to study the role ...

A Murine Ommaya Xenograft Model to Study Direct-Targeted Therapy of Leptomeningeal Disease

نموذج مورين أومايا زينوغرافت لدراسة العلاج المباشر المستهدف لمرض اللبتومينينجال

Leptomeningeal disease (LMD) is an uncommon type of central nervous system (CNS) metastasis to the cerebral spinal fluid (CSF). The most common cancers ...