Name: tumor engraftment in a xenograft mouse model of human mantle cell lymphoma
Uploaded: 2018-03-30T12:30:00
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この作品はリーグ Genevoise contre le 癌によって支えられた財団博士デュボワ Ferriere ディヌ ・ リパッティ、OCS-02260-08-2008、2914-02-2012 KPS OCS Oncosuisse スイス国立科学財団・ グラント 31003A_156760 および 310030 153456。

ヒトの血液サンプルは、ローカル倫理とジュネーブ大学病院の人体実験委員会によって承認された手続きに従って使用されました。
動物の手術は、機関倫理委員会動物ケアのジュネーブ、スイス連邦共和国のカントンの獣医のオフィスに従って (承認番号: GE/26/15)。
1. 主な末梢血単核球 (PBMCs) 密度勾配分離の準備
注: 3-5 mL 末梢血?...

<ol>
	<li>Baggiolini, M., Dewald, B., Moser, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+chemokines:+an+update.">Human chemokines: an update.</a> Annu Rev Immunol. 15, 675-705 (1997).</li><li>Baggiolini, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokines+and+leukocyte+traffic.">Chemokines and leukocyte traffic.</a> Nature. 392, 565-568 (1998).</li><li>Janeway, C. A., Travers, P., Walport, M., Shlomchik, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Immunobiology: The Immune System in Health and Disease. , (2001).</li><li>De Silva, N. 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Haematol. 101, 302-310 (1998).</li><li>Meusers, P., Hense, J., Brittinger, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mantle+cell+lymphoma:+diagnostic+criteria,+clinical+aspects+and+therapeutic+problems.">Mantle cell lymphoma: diagnostic criteria, clinical aspects and therapeutic problems.</a> Leukemia (Baltimore). 11 (Suppl 2), S60-S64 (1997).</li><li>Herrmann, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+of+overall+survival+in+advanced+stage+mantle+cell+lymphoma.">Improvement of overall survival in advanced stage mantle cell lymphoma.</a> J Clin Oncol. 27 (4), 511-518 (2008).</li><li>Martin, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intensive+treatment+strategies+may+not+provide+superior+outcomes+in+mantle+cell+lymphoma:+overall+survival+exceeding+7+years+with+standard+therapies.">Intensive treatment strategies may not provide superior outcomes in mantle cell lymphoma: overall survival exceeding 7 years with standard therapies.</a> Ann Oncol. 19 (7), 1327-1330 (2008).</li><li>Iyengar, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characteristics+of+human+primary+mantle+cell+lymphoma+engraftment+in+NSG+mice.">Characteristics of human primary mantle cell lymphoma engraftment in NSG mice.</a> Br J Haematol. 173 (1), 165-169 (2016).</li><li>Klco, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+heterogeneity+of+genetically+defined+subclones+in+acute+myeloid+leukemia.">Functional heterogeneity of genetically defined subclones in acute myeloid leukemia.</a> Cancer cell. 25 (3), 379-392 (2014).</li><li>Kerbel, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+tumor+xenografts+as+predictive+preclinical+models+for+anticancer+drug+activity+in+humans:+better+than+commonly+perceived-but+they+can+be+improved.">Human tumor xenografts as predictive preclinical models for anticancer drug activity in humans: better than commonly perceived-but they can be improved.</a> Cancer Biol Ther. 2 (4 Suppl 1), S134-S139 (2003).</li><li>Johnson, J. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationships+between+drug+activity+in+NCI+preclinical+in+vitro+and+in+vivo+models+and+early+clinical+trials.">Relationships between drug activity in NCI preclinical in vitro and in vivo models and early clinical trials.</a> Br. J. Cancer. 84, 1424-1431 (2001).</li><li>Scholz, C. C., Berger, D. P., Winterhalter, B. R., Henss, H., Fiebig, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+of+drug+response+in+patients+and+in+the+clonogenic+assay+with+solid+human+tumour+xenografts.">Correlation of drug response in patients and in the clonogenic assay with solid human tumour xenografts.</a> Eur. J. Cancer. 26, 901-905 (1990).</li><li>Do&#241;ate, C., Vijaya Kumar, A., Imhof, B. A., Matthes, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Frontline+Science:+Anti-JAM-C+therapy+eliminates+tumor+engraftment+in+a+xenograft+model+of+mantle+cell+lymphoma.">Frontline Science: Anti-JAM-C therapy eliminates tumor engraftment in a xenograft model of mantle cell lymphoma.</a> J Leukoc Biol. 100 (5), 843-853 (2016).</li></ol>

臨床試験、医薬品開発の先進的な段階で、創には使用できません。初期段階の薬をテストするためにひと細胞の異種移植の受信者を動物を開発する努力を追求されている長い間。人間拒絶反応を回避し、MCL など、人間の病気のためのモデルを確立することができます動物のモデルをご紹介します。これは現時点ではひと腫瘍生着と腫瘍成長のメカニズムを研究する最先端の異種移植モデルで...

自然にリンパ球が免疫監視に大きな役割を果たすし、抗原特異免疫1,2をマウントの重要なステップは、リンパ球が人身売買します。このプロセスには、血流に胸腺から、二次リンパ器官、リンパ節、パイエル板、脾臓など同種抗原を満たす彼らそこからナイーブ T リンパ球の移行が含まれます。B リンパ球は骨髄で分化し、二次リンパ器官3包にナイーブ細胞として移行します。これらの B 細胞の一部は受容器の抗原をバインドし、特定の T 細胞によってアクティブ化されます。これらの B 細胞の増殖と分化は、卵胞のマントル層に非活性化、ナイーブ B 細胞をプッシュします。活性化細胞が、パトロール、体や免疫グロブリン分泌形質細胞骨髄4に移行するに成熟細胞のメモリ B に分化します。
MCL は、マントル層でナイーブ B リンパ球が腫瘍に変換するときに発生します。これらのリンパ腫細胞は、リンパ器官の微小環境に存在し、特定の T リンパ球のコントロールとは独立して増殖します。ただし、密度のある特定の段階で彼らはこのニッチから脱出し、他の臓器でのニッチを求めて血流に循環させます。接着分子の複雑さとケモカインとその受容体の混乱を考えるこの細胞人身売買体内のメカニズムはよくわかっていない、したがって治療を妨げます。新しい微小に達することからリンパ腫 B 細胞を防ぐためには、この移行プロセスを効果的にブロックする手法が必要です。
MCL は、B 細胞の悪性腫瘍を治療するために最も困難の一つです。MCL の腫瘍の表現型の開発は、ユニークな生物学的特性の獲得によって特徴付けられる多段カスケードの結果です。診断時に、ほとんどの患者 (70%) 既に存在脾臓、骨髄、および/または消化管5,6舌癌の関与を示す場合の大半の播種性疾患。にもかかわらず、従来の化学療法短期7,8で高い寛解率を誘導する治療を受けた患者の耐性腫瘍によって数年以内の再発は、一般的です。MCL の普及とその基盤となる生物学の理解を助けることができる新しい疾患モデルの紹介: 我々 は患者の腫瘍細胞に由来するひと MCL 異種移植マウス モデルを確立します。我々 は、このモデルは MCL 普及に対する治療戦略を開発し、おそらく再発患者の最適な診断と治療の新しい臨床的視点を提供を助けることを望みます。

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Ficoll-paque media</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>17-1440-02</td>
			<td>for separation of mononuclear cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI Medium 1640</td>
			<td>Gibco-Life technologies</td>
			<td>61870-010</td>
			<td>for dilution of blood sample</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline (PBS)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D8537</td>
			<td>washing of cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin (BSA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A8412</td>
			<td>for preparation of PBS with 1% BSA used in washing cells during isolation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD19-APC700</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>B49212</td>
			<td>human pan-B cell marker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD20-APC</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>A21693</td>
			<td>human pan-B cell marker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD20-ECD</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>IM3607</td>
			<td>human pan-B cell marker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD5-PC 5.5</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>PN A70203</td>
			<td>human T cell marker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD23-PE</td>
			<td>Pharmingen</td>
			<td>555711</td>
			<td>Cell surface protein typically absent in MCL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD45 KO</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>B36294</td>
			<td>Pan-leucocyte marker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD200-PE</td>
			<td>Pharmingen</td>
			<td>552475</td>
			<td>Cell surface protein typically absent in MCL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NOD scid gamma (NSG) mice</td>
			<td>Charles River Laboratories</td>
			<td>5557</td>
			<td>used to develop MCL xenografts in this study</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Easy sep Human B cell enrichment kit</td>
			<td>Stem cell technologies</td>
			<td>19054</td>
			<td>used to enrich B cells to obtain pure cells for injecting into mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACS</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>Navios</td>
			<td>used to characterize MCL sample and to study the organs for MCL engraftment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1X ammonium chloride potassium buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>red blood lysis buffer (NH4Cl 8,024 mg/l; KHCO3 1,001 mg/l; EDTA.Na2&#183;2H2O 3.722 mg/l )</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

tumor engraftment in a xenograft mouse model of human mantle cell lymphoma

B リンパ球は主に家に免疫細胞の循環と彼らのキー ・ プレイヤー、リンパ器官に存在します。正常 B 細胞は、T リンパ球が刺激されるときのみ増殖、発癌性 B 細胞生き残るため、未定義のオルガンのニッチの自律的展開します。マントル細胞リンパ腫 (MCL) はそのような 1 つの B 細胞障害患者の生存率が 4-5 年。これは効果的なメカニズムが、ホーミングとこれらの細胞の生着は生存率を高めるためにブロックの必要性と患者の長寿のために呼び出します。したがって、体内ホーミング機構ブロックによる MCL 治療の有効性を検討する異種移植マウス モデルを開発するための努力は非常に重要です。ひと細胞の異種移植の初期段階の薬をテストするための受信者動物の開発は長い間、関連するマウスの前臨床モデルに欠かせない画面の新しい治療薬として追求されています。この動物モデルの開発人間の移植片拒絶反応を回避し、ひと疾患モデルの確立し、の候補薬の臨床テストを実行する別のリンパ腫型の病気の進行を研究する非常に便利なツールがあります。造血器腫瘍、MCL のよう。私たちは研究し、MCL の新規治療法を開発するための優秀な資源となる異種移植マウス モデルを確立しました。

原稿では、MCL 細胞の生着の異種移植腫瘍モデルマウスの開発に成功のための最適化されたプロトコルについて説明します。(このケース MCL 細胞で)、純粋な細胞集団の準備は成功した MCL 異種移植片を開発する非常に重要です。図 1は、密度勾配分離法による MCL 患者の血液から単核のセル隔離のため分取の手順を表します。単核細胞は、さらに?...

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Tumor Engraftment in a Xenograft Mouse Model of Human Mantle Cell Lymphoma

マントル細胞リンパ腫 (MCL) は B 細胞の障害を治療することは困難と同様に研究および治療法を開発するプライマリ MCL の異種移植マウス モデルを確立することは困難です。ここでは、その基盤となる生物学を理解するためにマウスの MCL を異種移植片の成功確立について述べる。

人間マントル細胞リンパ腫の異種移植マウス モデルにおける腫瘍生着

B lymphocytes are key players in immune cell circulation and they mainly home to and reside in lymphoid organs. While normal B cells only proliferate when ...

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Development and Maintenance of a Preclinical Patient Derived Tumor Xenograft Model for the Investigation of Novel Anti-Cancer Therapies

前臨床患者由来の腫瘍新規抗がん療法の調査のための異種移植モデルの開発とメンテナンス

Patient derived tumor xenograft (PDTX) models provide a necessary platform in facilitating anti-cancer drug development prior to human trials. Human tumor ...

Isolation of Circulating Tumor Cells in an Orthotopic Mouse Model of Colorectal Cancer

結腸直腸癌モデルマウスにおける循環腫瘍細胞の単離

Despite the advantages of easy applicability and cost-effectiveness, subcutaneous mouse models have severe limitations and do not accurately simulate ...

A Syngeneic Mouse B-Cell Lymphoma Model for Pre-Clinical Evaluation of CD19 CAR T Cells

同系マウス B 細胞リンパ腫モデル CD19 車 T 細胞の前臨床評価

The astonishing clinical success of CD19 chimeric antigen receptor (CAR) T-cell therapy has led to the approval of two second generation chimeric antigen ...

Patient-derived Orthotopic Xenograft Models for Human Urothelial Cell Carcinoma and Colorectal Cancer Tumor Growth and Spontaneous Metastasis

ヒト尿路上皮細胞癌および大腸癌腫瘍増殖および自発性転移に対する患者由来の眼科医異所性Xenograft移植片モデル

Cancer patients have poor prognoses when lymph node (LN) involvement is present in both high-grade urothelial cell carcinoma (HG-UCC) of the bladder and ...

A Melanoma Patient-Derived Xenograft Model

黒色腫患者由来異種移植片モデル

Accumulating evidence suggests that molecular and biological properties differ in melanoma cells grown in traditional two-dimensional tissue culture ...

A Human Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC) Engrafted Humanized Xenograft Model for Translational Immuno-oncology (I-O) Research

A Human Peripheral Blood Mononuclear Cell PBMC Engrafted Humanized Xenograft Model for Translational Immuno-oncology I-O Research

ヒト末梢血単核細胞(PBMC)移植型ヒト型異物移植モデル翻訳免疫腫瘍学(I-O)研究

The discovery and development of immuno-oncology (I-O) therapy in recent years represents a milestone in the treatment of cancer. However, treatment ...

Establishment of Gastric Cancer Patient-derived Xenograft Models and Primary Cell Lines

胃癌患者由来異種移植片モデルおよび原発細胞株の確立

The use of preclinical models to advance our understanding of tumor biology and investigate the efficacy of therapeutic agents is key to cancer research. ...

Generation of a Liver Orthotopic Human Uveal Melanoma Xenograft Platform in Immunodeficient Mice

免疫不全マウスにおける肝直交細胞性ヒトうveal黒色腫異種移植プラットフォームの生成

In recent decades, subcutaneously implanted patient-derived xenograft tumors or cultured human cell lines have been increasingly recognized as more ...

A Mouse Model to Investigate the Role of Cancer-Associated Fibroblasts in Tumor Growth

腫瘍増殖における癌関連線維芽細胞の役割を調べるためのマウスモデル

Cancer-associated fibroblasts (CAFs) can play an important role in tumor growth by creating a tumor-promoting microenvironment. Models to study the role ...

A Murine Ommaya Xenograft Model to Study Direct-Targeted Therapy of Leptomeningeal Disease

レプトメニンゲレス病の直接標的療法を研究するマウス・オンマヤ異種移植片モデル

Leptomeningeal disease (LMD) is an uncommon type of central nervous system (CNS) metastasis to the cerebral spinal fluid (CSF). The most common cancers ...

人間マントル細胞リンパ腫の異種移植マウス モデルにおける腫瘍生着

人間マントル細胞リンパ腫の異種移植マウスモデルにおける腫瘍生着