Name: tumor engraftment in a xenograft mouse model of human mantle cell lymphoma
Uploaded: 2018-03-30T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Tumor Engraftment in a Xenograft Mouse Model of Human Mantle Cell Lymphoma at JoVE.com

Bu eser Ligue Genevoise contre le kanser, tarafından desteklenen Fondation Dr Dubois Ferriere Dinu-Lipatti, Oncosuisse KPS-OCS, OCS-02260-08-2008 ve 2914-02-2012 ve İsviçre Ulusal Bilim Vakfı Hibe 31003A_156760 ve 310030-153456.

İnsan kanı örnekleri yerel etik ve insan deneme Komiteler Cenevre Üniversitesi Hastanesi tarafından onaylanmış yordamlara göre belirleme yapılacağı kullanılmıştır.
Hayvan yordamlar kurumsal Etik Komitesi hayvan bakımı Cenevre, İsviçre ve Kanton veteriner Office uygun olarak gerçekleştirilen (yetki numarası: GE/26/15).
1. birincil periferik kan mononükleer hücreler (PBMCs) yoğunluk Gradient ayırma tarafından hazırlanması
<p class="jove_...

<ol>
	<li>Baggiolini, M., Dewald, B., Moser, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+chemokines:+an+update.">Human chemokines: an update.</a> Annu Rev Immunol. 15, 675-705 (1997).</li><li>Baggiolini, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokines+and+leukocyte+traffic.">Chemokines and leukocyte traffic.</a> Nature. 392, 565-568 (1998).</li><li>Janeway, C. A., Travers, P., Walport, M., Shlomchik, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Immunobiology: The Immune System in Health and Disease. , (2001).</li><li>De Silva, N. S., Klein, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamics+of+B+cells+in+germinal+centres.">Dynamics of B cells in germinal centres.</a> Nat Rev Immunol. 15 (3), 137-148 (2015).</li><li>Cohen, P. L., Kurtin, P. J., Donovan, K. A., Hanson, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bone+marrow+and+peripheral+blood+involvement+in+mantle+cell+lymphoma.">Bone marrow and peripheral blood involvement in mantle cell lymphoma.</a> Br. J. Haematol. 101, 302-310 (1998).</li><li>Meusers, P., Hense, J., Brittinger, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mantle+cell+lymphoma:+diagnostic+criteria,+clinical+aspects+and+therapeutic+problems.">Mantle cell lymphoma: diagnostic criteria, clinical aspects and therapeutic problems.</a> Leukemia (Baltimore). 11 (Suppl 2), S60-S64 (1997).</li><li>Herrmann, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+of+overall+survival+in+advanced+stage+mantle+cell+lymphoma.">Improvement of overall survival in advanced stage mantle cell lymphoma.</a> J Clin Oncol. 27 (4), 511-518 (2008).</li><li>Martin, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intensive+treatment+strategies+may+not+provide+superior+outcomes+in+mantle+cell+lymphoma:+overall+survival+exceeding+7+years+with+standard+therapies.">Intensive treatment strategies may not provide superior outcomes in mantle cell lymphoma: overall survival exceeding 7 years with standard therapies.</a> Ann Oncol. 19 (7), 1327-1330 (2008).</li><li>Iyengar, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characteristics+of+human+primary+mantle+cell+lymphoma+engraftment+in+NSG+mice.">Characteristics of human primary mantle cell lymphoma engraftment in NSG mice.</a> Br J Haematol. 173 (1), 165-169 (2016).</li><li>Klco, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+heterogeneity+of+genetically+defined+subclones+in+acute+myeloid+leukemia.">Functional heterogeneity of genetically defined subclones in acute myeloid leukemia.</a> Cancer cell. 25 (3), 379-392 (2014).</li><li>Kerbel, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+tumor+xenografts+as+predictive+preclinical+models+for+anticancer+drug+activity+in+humans:+better+than+commonly+perceived-but+they+can+be+improved.">Human tumor xenografts as predictive preclinical models for anticancer drug activity in humans: better than commonly perceived-but they can be improved.</a> Cancer Biol Ther. 2 (4 Suppl 1), S134-S139 (2003).</li><li>Johnson, J. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationships+between+drug+activity+in+NCI+preclinical+in+vitro+and+in+vivo+models+and+early+clinical+trials.">Relationships between drug activity in NCI preclinical in vitro and in vivo models and early clinical trials.</a> Br. J. Cancer. 84, 1424-1431 (2001).</li><li>Scholz, C. C., Berger, D. P., Winterhalter, B. R., Henss, H., Fiebig, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+of+drug+response+in+patients+and+in+the+clonogenic+assay+with+solid+human+tumour+xenografts.">Correlation of drug response in patients and in the clonogenic assay with solid human tumour xenografts.</a> Eur. J. Cancer. 26, 901-905 (1990).</li><li>Do&#241;ate, C., Vijaya Kumar, A., Imhof, B. A., Matthes, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Frontline+Science:+Anti-JAM-C+therapy+eliminates+tumor+engraftment+in+a+xenograft+model+of+mantle+cell+lymphoma.">Frontline Science: Anti-JAM-C therapy eliminates tumor engraftment in a xenograft model of mantle cell lymphoma.</a> J Leukoc Biol. 100 (5), 843-853 (2016).</li></ol>

Klinik çalışmalar gelişmiş bir gelişme aşamasında olan, ancak ilaç keşfi için kullanılan ilaçlar için mümkündür. Hayvan insan hücre xenotransplantation alıcılarına erken sahne ilaçları test amacıyla geliştirmek için çabalarını uzun takip edilmiştir. Burada insan greft reddi önler ve MCL gibi insan hastalıkları için bir model oluşturabilir bir hayvan modeli mevcut. Bu şu anda insan tümör engraftment ve tümör büyüme mekanizmaları incelemek için bir sanat devlet xenograft modelidi...

Lenfositler doğası gereği immün gözetim içinde önemli bir rol oynamaktadır ve lenfosit kaçakçılığı antijen belirli bağışıklık1,2montaj kritik bir adımdır. Bu işlem geçiş saf T lenfositlerin kan akışına timus ve soydaş antijenleri buluştuğu orada ikincil lenfoid organlara, lenf düğümleri, Peyer's yamalar veya dalak, dahil olmak üzere içerir. B lenfositler kemik iliğinde ayırt etmek ve saf hücreler olarak ikincil lenfoid organlara3köklerinin geçirilir. Bazı bu B hücrelerinin antijen ile onların reseptör bağlamak ve belirli T hücreleri tarafından aktif hale gelir. Yayılması ve bu B hücrelerinin farklılaşma folikül manto bölgeye sigara-harekete geçirmek, naif B hücreleri iter. Aktif hücre sonra vücut devriye veya kemik iliği4' e göç plazma hücreleri salgılayan immünglobulin içine Olgun Hücreler içine bellek B ayırt edebilir.
Naif B lenfositler manto bölgedeki tümör dönüştürdüğünüzde MCL oluşur. Bu Lenfoma hücreleri lenfoid organlar microenvironment içinde bulunan ve belirli T lenfosit kontrol bağımsız olarak çoğalırlar. Ancak, yoğunluğu belirli bir aşamada onlar bu niş kaçış ve diğer organlarda nişler için arama kan recirculate. Adezyon molekülleri karmaşıklığı ve karışıklık kemokinler ve onların reseptörleri, göz önüne alındığında bu hücresel kaçakçılığı vivo içinde mekanizmasının kötü anlaşılmaktadır ve bu nedenle terapi engellemektedir. Roman yöntemleri etkili Lenfoma B hücreleri yeni microenvironments ulaşmasını önlemek için bu geçiş süreci engellemek için gereklidir.
MCL B hücre maligniteler tedavisi en zor biridir. MCL neoplastik bir fenotip biyolojik özellikleri benzersiz edinimi ile karakterize bir multistep çağlayan sonucu gelişmedir. Tanı zaman çoğu hasta (% 70) Dissemine hastalık ile çoğu durumda dalak, kemik iliği ve/veya gastrointestinal sistem5,6Ekstranodal tutulum sergilenmesi ile zaten var. Tedavi edilen hastalarda, konvansiyonel kemoterapi yüksek remisyon oranları kısa vadeli7,8indükler olsa bile bir kaç yıl içinde dayanıklı tümör tarafından nüks yaygındır. MCL yayılması ve onun temel Biyoloji anlamak yardımcı olabilir yeni bir hastalık modeli mevcut burada: hastaların birincil tümör hücreleri kökenli insan MCL xenograft fare modeli kurduk. Biz bu model MCL yayılması karşı tedavi stratejileri geliştirmek ve muhtemelen en iyi tanı ve Relaps hastaların tedavisi için yeni klinik Perspektifler sağlar yardımcı olacağını umuyoruz.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Ficoll-paque media</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>17-1440-02</td>
			<td>for separation of mononuclear cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI Medium 1640</td>
			<td>Gibco-Life technologies</td>
			<td>61870-010</td>
			<td>for dilution of blood sample</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline (PBS)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D8537</td>
			<td>washing of cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin (BSA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A8412</td>
			<td>for preparation of PBS with 1% BSA used in washing cells during isolation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD19-APC700</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>B49212</td>
			<td>human pan-B cell marker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD20-APC</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>A21693</td>
			<td>human pan-B cell marker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD20-ECD</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>IM3607</td>
			<td>human pan-B cell marker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD5-PC 5.5</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>PN A70203</td>
			<td>human T cell marker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD23-PE</td>
			<td>Pharmingen</td>
			<td>555711</td>
			<td>Cell surface protein typically absent in MCL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD45 KO</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>B36294</td>
			<td>Pan-leucocyte marker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD200-PE</td>
			<td>Pharmingen</td>
			<td>552475</td>
			<td>Cell surface protein typically absent in MCL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NOD scid gamma (NSG) mice</td>
			<td>Charles River Laboratories</td>
			<td>5557</td>
			<td>used to develop MCL xenografts in this study</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Easy sep Human B cell enrichment kit</td>
			<td>Stem cell technologies</td>
			<td>19054</td>
			<td>used to enrich B cells to obtain pure cells for injecting into mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACS</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>Navios</td>
			<td>used to characterize MCL sample and to study the organs for MCL engraftment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1X ammonium chloride potassium buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>red blood lysis buffer (NH4Cl 8,024 mg/l; KHCO3 1,001 mg/l; EDTA.Na2&#183;2H2O 3.722 mg/l )</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

tumor engraftment in a xenograft mouse model of human mantle cell lymphoma

B lenfositler anahtar oyuncular bağışıklık hücre dolaşım ve onlar çoğunlukla ev sahipliği ve lenfoid organlarda bulunan. Normal B hücreleri yalnızca T lenfositler tarafından uyardığında çoğalırlar, oncogenic B hücreleri hayatta kalmak ve özerk olarak tanımlanmamış organ niş genişletin. Mantle hücreli Lenfoma (MCL) bir tür B hücresi, hastalarin medyan sağkalım oranı 4-5 yıl nerede hastalıktır. Bu etkili mekanizmalar tarafından posta ve bu hücrelerin engraftment hayatta kalma artırmak için engellenen ihtiyacı ve uzun ömürlü hastalar için çağırır. Bu nedenle, izleme mekanizması içinde vivo engelleyerek MCL tedavi etkinliğinin çalışmaya xenograft fare modeli geliştirmek için çaba son derece önemlidir. Erken sahne uyuşturucu test etmek için insan hücre xenotransplantation hayvan alıcılarına gelişimi uzun takip, ilgili preklinik fare modelleri ekran yeni terapötik ajanlar için çok önemli olduğu gibi. Bu hayvan modeli insan greft reddi önlemek ve insan hastalıkları için bir model kurmak için geliştirilen ve hastalık ilerleme farklı Lenfoma türlerinden çalışmaya ve preklinik için aday ilaçların test gerçekleştirmek için son derece yararlı bir araç olabilir hematolojik maligniteler, MCL gibi. Çalışma ve MCL için yeni tedavi yaklaşımları geliştirmek için mükemmel bir kaynak olarak görev yapacak bir xenograft fare modeli kurduk.

El yazması bir xenograft fare modeli engraftment MCL hücre için başarılı gelişimi için en iyi duruma getirilmiş bir protokolünü açıklar. Hazırlık nüfusun bir saf hücre (Bu durumda MCL hücreleri), başarılı MCL xenografts geliştirmek için çok önemlidir. Şekil 1 MCL hastanın kan mononükleer hücre izolasyon için partiye hazırlık adımları yoğunluk gradient ayırma tarafından temsil eder. Mononükleer hücreler daha da saf hücre...

Watch this Scientific Journal Video about Tumor Engraftment in a Xenograft Mouse Model of Human Mantle Cell Lymphoma at JoVE.com

Tumor Engraftment in a Xenograft Mouse Model of Human Mantle Cell Lymphoma

Mantle hücreli Lenfoma (MCL) bir B hücre bozukluğu tedavi etmek zordur ve eşit bir xenograft fare modeli eğitim ve tedavi geliştirmek için birincil MCL kurmak zordur. Burada, onun temel Biyoloji anlamak farelerde MCL xenografts başarılı kurulması açıklayın.

Tümör Engraftment insan Mantle hücreli lenfoma, Xenograft fare modeli

B lymphocytes are key players in immune cell circulation and they mainly home to and reside in lymphoid organs. While normal B cells only proliferate when ...

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Development and Maintenance of a Preclinical Patient Derived Tumor Xenograft Model for the Investigation of Novel Anti-Cancer Therapies

Bir Klinik öncesi Hasta Türetilmiş Tümör Roman Anti-Kanser Tedaviler Soruşturma Xenograftlarında Modeli Geliştirilmesi ve Bakımı

Patient derived tumor xenograft (PDTX) models provide a necessary platform in facilitating anti-cancer drug development prior to human trials. Human tumor ...

Isolation of Circulating Tumor Cells in an Orthotopic Mouse Model of Colorectal Cancer

Kolorektal kanserli bir Ortotopik Fare Modelinde Dolaşan Tümör Hücrelerinin İzolasyonu

Despite the advantages of easy applicability and cost-effectiveness, subcutaneous mouse models have severe limitations and do not accurately simulate ...

A Syngeneic Mouse B-Cell Lymphoma Model for Pre-Clinical Evaluation of CD19 CAR T Cells

Syngeneic fare B hücreli lenfoma manken CD19 araba T hücrelerinin önceden klinik değerlendirme için

The astonishing clinical success of CD19 chimeric antigen receptor (CAR) T-cell therapy has led to the approval of two second generation chimeric antigen ...

Patient-derived Orthotopic Xenograft Models for Human Urothelial Cell Carcinoma and Colorectal Cancer Tumor Growth and Spontaneous Metastasis

Insan Üromotorial Hücre Karsinomu ve kolorektal kanser tümörü büyüme ve spontan Metasrik için hasta türevi Ortootopik xenograft modelleri

Cancer patients have poor prognoses when lymph node (LN) involvement is present in both high-grade urothelial cell carcinoma (HG-UCC) of the bladder and ...

A Melanoma Patient-Derived Xenograft Model

Bir melanom hasta-türetilen xenograft model

Accumulating evidence suggests that molecular and biological properties differ in melanoma cells grown in traditional two-dimensional tissue culture ...

A Human Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC) Engrafted Humanized Xenograft Model for Translational Immuno-oncology (I-O) Research

A Human Peripheral Blood Mononuclear Cell PBMC Engrafted Humanized Xenograft Model for Translational Immuno-oncology I-O Research

Çevirisel İmmüno-onkoloji (I-O) Araştırma için İnsani Periferik Kan Mononükleer Hücre (PBMC) Engrafted Humanized Xenograft Modeli

The discovery and development of immuno-oncology (I-O) therapy in recent years represents a milestone in the treatment of cancer. However, treatment ...

Establishment of Gastric Cancer Patient-derived Xenograft Models and Primary Cell Lines

Mide kanseri hasta-türetilen xenograft modelleri ve primer hücre hatları kurulması

The use of preclinical models to advance our understanding of tumor biology and investigate the efficacy of therapeutic agents is key to cancer research. ...

Generation of a Liver Orthotopic Human Uveal Melanoma Xenograft Platform in Immunodeficient Mice

İmmünficient Farelerde Karaciğer Ortotopik İnsan Uveal Melanom Xenograft Platformu Üretimi

In recent decades, subcutaneously implanted patient-derived xenograft tumors or cultured human cell lines have been increasingly recognized as more ...

A Mouse Model to Investigate the Role of Cancer-Associated Fibroblasts in Tumor Growth

Kanserle İlişkili Fibroblastların Tümör Büyümesindeki Rolünü Araştırmak İçin Bir Fare Modeli

Cancer-associated fibroblasts (CAFs) can play an important role in tumor growth by creating a tumor-promoting microenvironment. Models to study the role ...

A Murine Ommaya Xenograft Model to Study Direct-Targeted Therapy of Leptomeningeal Disease

Leptomeningeal Hastalığın Doğrudan Hedefli Tedavisini Incelemek için Bir Murine Ommaya Xenograft Modeli

Leptomeningeal disease (LMD) is an uncommon type of central nervous system (CNS) metastasis to the cerebral spinal fluid (CSF). The most common cancers ...