Name: evaluating virulence and pathogenesis of aeromonas infection in a caenorhabditis elegans model
Uploaded: 2018-12-20T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Evaluating Virulence and Pathogenesis of Aeromonas Infection in a Caenorhabditis elegans Model at JoVE.com

ونحن ممتنون للمساعدة من مرفق الأساسية C. ايليجانس في تايوان والميكروبيولوجيا التشخيصية ويعزل "مضادات الميكروبات المقاومة المختبر من الوطني تشنغ الكونغ المستشفى الجامعي" لتقديم أيروموناس . ونعترف أيضا مركز علم الوراثة كاينورهابديتيس (كجك)، وفي وورمباسي. ونشكر أيضا مور سفانا لتحرير المخطوطة.
وأيد هذه الدراسة جزئيا المنح المقدمة من وزارة العلوم والتكنولوجيا من تايوان (آخر 105-2628-B-006-017-MY3) والمستشفى الوطني لجامعة الكونغ تشنغ (نكوه-10705001) بفضل تشن.

1-إعداد متوسطة الثقافة
ملاحظة: انظر الجدول 1 لإعداد الحل.
<ol><li>إعداد M9 المتوسطة12، حل 1.5 ز خ2ص4، ز 5.66 Na2هبو4و 2.5 g من كلوريد الصوديوم في 500 مل مياه.. انتظر حتى تبرد بدرجة حرارة الغرفة اﻷوتوكﻻف في 121 درجة مئوية عن 20 دقيقة ثم قم بإضافة 0.5 مل من 1 م MgSO...

<ol>
	<li>Parker, J. L., Shaw, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aeromonas+spp.+clinical+microbiology+and+disease.">Aeromonas spp. clinical microbiology and disease.</a> Journal of Infection. 62 (2), 109-118 (2011).</li><li>Chao, C. M., Lai, C. C., Tang, H. J., Ko, W. C., Hsueh, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skin+and+soft-tissue+infections+caused+by+Aeromonas+species.">Skin and soft-tissue infections caused by Aeromonas species.</a> European Journal of Clinical Microbiology &amp; Infectious Diseases. 32 (4), 543-547 (2013).</li><li>Chao, C. M., Lai, C. C., Tang, H. J., Ko, W. C., Hsueh, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biliary+tract+infections+caused+by+Aeromonas+species.">Biliary tract infections caused by Aeromonas species.</a> European Journal of Clinical Microbiology &amp; Infectious Diseases. 32 (2), 245-251 (2013).</li><li>Chuang, H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+clinical+characteristics+among+Aeromonas+hydrophila,+Aeromonas+veronii+biovar+sobria+and+Aeromonas+caviae+monomicrobial+bacteremia.">Different clinical characteristics among Aeromonas hydrophila, Aeromonas veronii biovar sobria and Aeromonas caviae monomicrobial bacteremia.</a> Journal of Korean Medical Science. 26 (11), 1415-1420 (2011).</li><li>Chao, C. M., Lai, C. C., Gau, S. J., Hsueh, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skin+and+soft+tissue+infection+caused+by+Aeromonas+species+in+cancer+patients.">Skin and soft tissue infection caused by Aeromonas species in cancer patients.</a> Journal of Microbiology, Immunology and Infection. 46 (2), 144-146 (2013).</li><li>Chen, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Disease+Model+of+Muscle+necrosis+caused+by+Aeromonas+dhakensis+infection+in+Caenorhabditis+elegans.">A Disease Model of Muscle necrosis caused by Aeromonas dhakensis infection in Caenorhabditis elegans.</a> Frontiers in Microbiology. 7, 2058 (2016).</li><li>Chen, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Virulence+diversity+among+bacteremic+Aeromonas+isolates:+ex+vivo,+animal,+and+clinical+evidences.">Virulence diversity among bacteremic Aeromonas isolates: ex vivo, animal, and clinical evidences.</a> PLoS One. 9 (11), 111213 (2014).</li><li>Saraceni, P. R., Romero, A., Figueras, A., Novoa, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+infection+models+in+zebrafish+larvae+(Danio+rerio)+to+study+the+pathogenesis+of+Aeromonas+hydrophila.">Establishment of infection models in zebrafish larvae (Danio rerio) to study the pathogenesis of Aeromonas hydrophila.</a> Frontiers in Microbiology. 7, 1219 (2016).</li><li>Chen, Y. W., Ko, W. C., Chen, C. S., Chen, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RIOK-1+Is+a+Suppressor+of+the+p38+MAPK+Innate+Immune+Pathway+in+Caenorhabditis+elegans.">RIOK-1 Is a Suppressor of the p38 MAPK Innate Immune Pathway in Caenorhabditis elegans.</a> Frontiers in Immunology. 9, 774 (2018).</li><li>Powell, J. R., Ausubel, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+of+Caenorhabditis+elegans+infection+by+bacterial+and+fungal+pathogens.">Models of Caenorhabditis elegans infection by bacterial and fungal pathogens.</a> Methods in Molecular Biology. 415, 403-427 (2008).</li><li>Chou, T. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enterohaemorrhagic+Escherichia+coli+O157:H7+Shiga-like+toxin+1+is+required+for+full+pathogenicity+and+activation+of+the+p38+mitogen-activated+protein+kinase+pathway+in+Caenorhabditis+elegans.">Enterohaemorrhagic Escherichia coli O157:H7 Shiga-like toxin 1 is required for full pathogenicity and activation of the p38 mitogen-activated protein kinase pathway in Caenorhabditis elegans.</a> Cellular Microbiology. 15 (1), 82-97 (2013).</li><li>Stiernagle, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maintenance+of+C.+elegans.">Maintenance of C. elegans.</a> WormBook. , 1-11 (2006).</li><li>Engelmann, I., Pujol, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Innate+immunity+in+C.+elegans.">Innate immunity in C. elegans.</a> Advances in Experimental Medicine and Biology. 708, 105-121 (2010).</li><li>Feinbaum, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome-wide+identification+of+Pseudomonas+aeruginosa+virulence-related+genes+using+a+Caenorhabditis+elegans+infection+model.">Genome-wide identification of Pseudomonas aeruginosa virulence-related genes using a Caenorhabditis elegans infection model.</a> PLoS Pathogens. 8 (7), 1002813 (2012).</li></ol>

C. ايليجانس ديدان أسطوانية باكتيريفوروس بطبيعة الحال أن مأخذ البكتيريا كغذاء، وقد وضعت حصانة فطرية تعقيداً للبكتريا أثناء عملية تطورية. اثنين من الأجهزة الرئيسية للحفاظ على ودعم الحصانة هي9،البشرة والأمعاء13. البشرة وعصابات من العضلات C. ايليجانس ...

مسببات الأمراض البشرية، Aeromonas، ثبت سريرياً يسبب التهاب المعدة والأمعاء، وعدوى الجرح، وتسمم الدم، والتهابات المسالك البولية1،2. أبلغ معظم الأمراض البشرية المرتبطة بها لتكون مرتبطة مع أربعة أنواع من البكتيريا: 2، دهاكينسيس أيروموناس، هيدروفيلا Aeromonasو بروني Aeromonasو كافي Aeromonas 3 , 4 , 5-من بين الأمراض المعدية أيروموناس ، يمكن أن يسبب التهابات الأنسجة اللينة حادة في معدلات الاعتلال والوفيات في البشر. ملاحظة، نخر العضلات هو أشد أشكال الأنسجة اللينة العدوى6. المراقبة للبقاء على قيد الحياة ونخر العضلات من ايليجانس كاينورهابديتيس بعد الإصابة أسلوب مناسب للتكهن بسمية Aeromonas.
فعلا طور العلماء الكائنات نموذج عديدة لدراسة حالات العدوى البكتيرية. في دراسات سابقة، استخدمت الفئران، زيبرافيشيس، والديدان الخيطية كنماذج حيوانية لدراسة الآلية المرضية وضراوة Aeromonas6،،من78. كل نموذج الحيوان في ' المزايا والتطبيقات. نموذج الكائن الحي، ايليجانس كاينورهابديتيس، هي ديدان أسطوانية باكتيريفوروس أي مأخذ البكتيريا فودناتورالي. C. ايليجانسطورت نظام المناعة فطرية معقدة ضد العدوى البكتيرية على مدى تطورها. وقد ثبت C. ايليجانس تحت ضغط العدوى البكتيرية، تكون نموذجا عدوى ممتازة لدراسة الآلية المرضية البكتيرية أيروموناس6،،من79 ومسببات الأمراض الأخرى مثل الفطريات10 واسشيريشيا الإشريكيّة القولونية O157:H711. ومع ذلك، لا يزال هناك لا المنشور يركز على المنهجية في استخدام C. ايليجانس كنموذج لدراسة ضراوة Aeromonas.
هنا، نحن نقدم ثلاث تجارب مختلفة لدراسة الإصابة Aeromonas استخدام C. ايليجانس كنموذج حيوان: فحوصات للبقاء على قيد الحياة وسمية سائلة ونخر العضلات. هذه الأساليب طريقة ملائمة لتقييم سمية فيما بين وداخل الأنواع Aeromonas وتحسين فهم الآلية المرضية أيروموناس.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:660px;" width="661">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Shaker incubator</td>
			<td style="width:119px;">YIH DER</td>
			<td style="width:119px;">LM-570R</td>
			<td style="width:207px;">Bacteria incubation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">K2HPO4</td>
			<td style="width:119px;">J.T.Baker</td>
			<td>MP021519455</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">KH2PO4</td>
			<td style="width:119px;">J.T.Baker</td>
			<td style="width:119px;">3246-05</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Na2HPO4</td>
			<td style="width:119px;">J.T.Baker</td>
			<td style="width:119px;">MP021914405</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">NaCl</td>
			<td style="width:119px;">SIGMA</td>
			<td style="width:119px;">31434</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">MgSO4</td>
			<td style="width:119px;">SIGMA</td>
			<td style="width:119px;">M7506</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">agar</td>
			<td style="width:119px;">Difco</td>
			<td style="width:119px;">214530</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">CaCl2</td>
			<td style="width:119px;">SIGMA</td>
			<td style="width:119px;">C1016</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">cholesterol</td>
			<td style="width:119px;">SIGMA</td>
			<td style="width:119px;">C8503</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">ethanol</td>
			<td style="width:119px;">SIGMA</td>
			<td style="width:119px;">32205</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">KOH</td>
			<td style="width:119px;">SIGMA</td>
			<td style="width:119px;">P5958</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">6 cm petri plate</td>
			<td style="width:119px;">ALPHA PLUS</td>
			<td style="width:119px;">46</td>
			<td>agar plate preparation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">96-well plate</td>
			<td style="width:119px;">FALCON</td>
			<td style="width:119px;">353072</td>
			<td>liquid assay</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">bacterial peptone</td>
			<td style="width:119px;">Affymetrix/USB</td>
			<td style="width:119px;">AAJ20048P2</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">yeast extract</td>
			<td style="width:119px;">SIGMA</td>
			<td style="width:119px;">92144</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">citric acid&#8226;H2O</td>
			<td style="width:119px;">SIGMA</td>
			<td style="width:119px;">C1909</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">tri-potassium citrate&#8226;H2O</td>
			<td style="width:119px;">SIGMA</td>
			<td style="width:119px;">104956</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">FudR&#160;</td>
			<td style="width:119px;">SIGMA</td>
			<td style="width:119px;">1271008</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">disodium EDTA</td>
			<td style="width:119px;">SIGMA</td>
			<td style="width:119px;">E1644</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">FeSO4&#8226;7 H2O</td>
			<td style="width:119px;">SIGMA</td>
			<td style="width:119px;">215422</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">MnCl2&#8226;4 H2O</td>
			<td style="width:119px;">SIGMA</td>
			<td style="width:119px;">221279</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">ZnSO4&#8226;7 H2O</td>
			<td style="width:119px;">SIGMA</td>
			<td style="width:119px;">204986</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">CuSO4&#8226;5 H2O</td>
			<td style="width:119px;">SIGMA</td>
			<td style="width:119px;">C8027</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">tryptone</td>
			<td style="width:119px;">SIGMA</td>
			<td style="width:119px;">16922</td>
			<td>Culture medium preparation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Microscope system</td>
			<td style="width:119px;">Nikon&#160;</td>
			<td style="width:119px;">Eclipase Ti inverted&#160;</td>
			<td>microscope imaging</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Scientific CCD Camera</td>
			<td style="width:119px;">QImaging&#160;</td>
			<td style="width:119px;">Retiga-2000R Fast 1394&#160;</td>
			<td>microscope imaging</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

evaluating virulence and pathogenesis of aeromonas infection in a caenorhabditis elegans model

مسببات الأمراض البشرية Aeromonas ثبت سريرياً يسبب التهاب المعدة والأمعاء، وعدوى الجرح، وتسمم الدم، والتهابات المسالك البولية. قد أبلغ معظم البشرية من الأمراض تترافق مع أربعة أنواع من البكتيريا: Aeromonas دهاكينسيس هيدروفيلا Aeromonasو بروني Aeromonasو كافي أيروموناس. نموذج الكائن الحي ايليجانس كاينورهابديتيس هو باكتيريفوري الذي يوفر نموذج عدوى ممتازة لدراسة الآلية المرضية البكتيرية من أيروموناس. وهنا، نحن نقدم ثلاث تجارب مختلفة لدراسة الإصابة أيروموناس باستخدام نموذج C. ايليجانس ، بما في ذلك البقاء على قيد الحياة وسمية سائلة وفحوصات نخر العضلات. وكانت نتائج ثلاثة أساليب تحديد ضراوة Aeromonas متسقة. وأبدى دهاكينسيس (أ) أن تكون الأكثر سمية بين 4 أهم الأنواع Aeromonas تسبب العدوى السريرية. وترد هذه الأساليب لتكون وسيلة مريحة لتقييم سمية فيما بين وداخل الأنواع Aeromonas وتسهم في فهمنا للآلية المرضية للإصابة أيروموناس .

عن طريق اتباع البروتوكولات المذكورة أعلاه، فمن السهل للتفريق بين السمية من أربع سلالات أيروموناس . ويرد في الشكل 1مقايسة البقاء على قيد الحياة من C. ايليجانس . كانت معدلات البقاء على قيد الحياة من C. ايليجانس المصابين بالأنواع Aeromonas ، سيظ...

Watch this Scientific Journal Video about Evaluating Virulence and Pathogenesis of Aeromonas Infection in a Caenorhabditis elegans Model at JoVE.com

Evaluating Virulence and Pathogenesis of Aeromonas Infection in a Caenorhabditis elegans Model

هنا، نحن نقدم ثلاث تجارب مختلفة لدراسة الإصابة Aeromonas في C. ايليجانس. باستخدام هذه الأساليب ملائمة، فمن السهل تقييم سمية فيما بين وداخل الأنواع Aeromonas .

تقييم الفوعة والمرضية للعدوى أيروموناس في نموذج ايليجانس كاينورهابديتيس

The human pathogen Aeromonas has been clinically shown to cause gastroenteritis, wound infections, septicemia, and urinary tract infections. Most human ...

يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال التفاعل بين المضيف والمسببات مثل الإمراضية ووعة العدوى البكتيرية. والميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكننا تقييم السمية بين الأنواع Aeromonas وداخلها والمساهمة في فهمنا للأمراض من عدوى Aeromonas. لبدء غسل ما يقرب من 2،000 الديدان الكبار غرافيد مع المياه المعقمة deionized.كرر الغسيل ثلاث مرات مع الحفاظ على الديدان في الجزء السفلي من الأنبوب. بعد الطرد المركزي الديدان إزالة ناطورة والحفاظ على الديدان في 3.5 ملليلتر من المياه الأيونية. إضافة ملليلتر واحد من هيبوكلوريت الصوديوم و 0.5 ملليلتر من هيدروكسيد البوتاسيوم إلى الأنبوب.ثم يهز الأنبوب لمدة ست دقائق لزعزعة الهيئات الدودة. بعد أن يتم تحرير البيض ، أضف 10 ملليلتر من الماء الأيوني لوقف التحلل. ثم الطرد المركزي أنبوب لسحب أسفل البيض وإزالة أكبر قدر من افرانير ممكن.اغسل البيض بـ 15 ملليلتر من M9 متوسطة ثلاث مرات على الأقل. نقل البيض إلى طبق 3.5 سنتيمتر، واحتضان لهم في 20 درجة مئوية لليلة واحدة. بعد هذا إزالة 10 ميكروليتر من الديدان L1 ومتوسطة M9 من لوحة.عد الديدان والحصول على تركيز الديدان L1 في المتوسط M9. باستخدام ماصة تأخذ 0.5 ملليلتر من مرق E.coli OP50 LB ونشرها على لوحة ENGM. ثم احتضان لوحة في 37 درجة مئوية لمدة 16 إلى 18 ساعة.تبريد ENGM إلى درجة حرارة الغرفة. ثم البذور المحتضنة L1 الديدان على لوحة ENGM مع E.coli OP50. احتضان الديدان في 20 درجة مئوية حتى تصل إلى مرحلة L4.أولاً، حدد مستعمرة واحدة لكل من سلالات Aeromonas الأربعة وثقافتها وفقًا لبروتوكول النص. ثم قياس امتصاص 600 OD من مرق البكتيرية وضبطه حتى امتصاص يساوي 2.0. بقعة المقبل وانتشار 30 ميكرولترات من مرق البكتيرية من كل سلالة في لوحات NGM.عشوائيا اختيار ونقل الديدان L4 أعدت سابقا إلى لوحات NGM مع سلالات Aeromonas. ثم احتضان لوحات في 20 درجة مئوية حتى اكتمال الفحص. كل يوم نقل كل من الديدان الحية إلى لوحة NGM جديدة مع البكتيريا.عد أعداد الديدان الحية والأموات وأجهزة الاستشعار كل يوم حتى تموت الدودة الأخيرة. بعد زراعة سلالات Aeromonas وقياس امتصاصها كما هو موضح سابقًا ، تقوم أجهزة الطرد المركزي بالمرق البكتيري في 3500 جرام لمدة 15 دقيقة. ضبط مرق البكتيرية مع S المتوسطة.وإضافة 195 ميكرولترات من مرق بكتيري في S المتوسطة إلى ثمانية آبار من لوحة 96 جيدا. غسل الديدان قبالة من لوحة ENGM معهم M9 المتوسطة. ثم ضبط تركيز حل الدودة إلى خمسة الديدان لكل ميكرولتر.إضافة خمسة ميكرولترات من حل دودة إلى كل من الآبار من لوحة 96-جيدا. احتضان لوحة على شاكر، وفرز عدد الديدان الحية في 24 و 48 و 72 ساعة. بعد زراعة سلالات Aeromonas وضبط الامتصاص وفقا لبروتوكول النص بقعة ونشر مرق البكتيرية على لوحات NGM.بعد ذلك، نقل 50 الديدان L4 إلى كل لوحة NGM. كل 24 ساعة تنقل الديدان إلى لوحات NGM جديدة. اختر عشوائيا 10 ديدان ونقلها إلى هلام agarose 2 ٪في M9 المتوسطة على شريحة.وأخيرا وضع غطاء على هلام والتقاط الصور العضلية مع مرشح البروتين الفلورسنت الأخضر على مجهر الفلورسنت مجهزة كاميرا. في هذا البروتوكول تم تقييم سمية أربع سلالات Aeromonas. وكان معدل البقاء على قيد الحياة من C.elegans المصابة بأنواع Aeromonas أعلى في المقايسات باستخدام A.caviae، وأدنى في المقايسات باستخدام A.dhakensis.في اختبار السمية السائلة البقاء على قيد الحياة من C.elegans انخفض بشكل ملحوظ عندما المصابين ب A.dhakensis أو A.hydrophilia. في العضلات نخر درجة من الضرر العضلات متفاوتة بين الأنواع Aeromonas. تسبب الكافافي في أقل تلف عضلي، في حين أن A.dhakensis أنتجت معظم تلف العضلات.توفر الطرق الموصوفة في هذا الفيديو طريقة مريحة للتمييز بين تنوع الفوعة بين الأنواع Aeromonas وداخلها. بالإضافة إلى ذلك ، هو أيضا نموذج موثوق به لدراسة التفاعل بين مسببات الأمراض والمضيف.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Evaluating Virulence and Pathogenesis of Aeromonas Infection in a Caenorhabditis elegans Model

In vitro Biofilm Formation in an 8-well Chamber Slide

In vitro Biofilm Formation in an 8-well Chamber Slide

تشكيل بيوفيلم في المختبر في غرفة الشرائح 8 جيد

The chronic nature of many diseases is attributed to the formation of bacterial biofilms which are recalcitrant to traditional antibiotic therapy. ...

Using Luciferase to Image Bacterial Infections in Mice

Luciferase به لالتهابات جرثومية في صورة الفئران

Imaging is a valuable technique that can be used to monitor biological processes.  In particular, the presence of cancer cells, stem cells, specific ...

The Insect Galleria mellonella as a Powerful Infection Model to Investigate Bacterial Pathogenesis

The Insect Galleria mellonella as a Powerful Infection Model to Investigate Bacterial Pathogenesis

والحشرات<em&gt; جاليريا mellonella</em&gt; نموذجا عدوى قوية المعنية بالتحقيق في إمراض البكتيرية

The study of bacterial virulence often requires a suitable animal model. Mammalian models of infection are costly and may raise ethical issues. The use of ...

Following in Real Time the Impact of Pneumococcal Virulence Factors in an Acute Mouse Pneumonia Model Using Bioluminescent Bacteria

التالية في الوقت الحقيقي تأثير العوامل الالتهاب الرئوي الحاد الفوعة في نموذج الفأر الالتهاب الرئوي عن طريق البكتيريا للإضاءة الحيوية

Pneumonia is one of the major health care problems in developing and industrialized countries and is associated with considerable morbidity and mortality. ...

A Protocol to Infect Caenorhabditis elegans with Salmonella typhimurium

A Protocol to Infect Caenorhabditis elegans with Salmonella typhimurium

بروتوكول لتصيب<em&gt; انواع معينة ايليجانس</em&gt; مع<em&gt; السالمونيلا التيفية الفأرية</em

In the last decade, C. elegans has emerged as an invertebrate organism to study interactions between hosts and pathogens, including the host defense ...

The Madagascar Hissing Cockroach as an Alternative Non-mammalian Animal Model to Investigate Virulence, Pathogenesis, and Drug Efficacy

أن مدغشقر الهسهسة الصرصور كنموذج بديل غير الثدييات حيوانية للتحقيق في الفوعة، والمرضية، وفعالية المخدرات

Many aspects of innate immunity are conserved between mammals and insects. An insect, the Madagascar hissing cockroach from the genus Gromphadorhina, can ...

Oral Intubation of Adult Zebrafish: A Model for Evaluating Intestinal Uptake of Bioactive Compounds

تنبيب الشفوي من الزرد الكبار: نموذج لتقييم امتصاص الأمعاء للمركبات النشطة بيولوجيا

Most pathogens invade organisms through their mucosa. This is particularly true in fish as they are continuously exposed to a microbial-rich water ...

Establishment of the Dual Humanized TK-NOG Mouse Model for HIV-associated Liver Pathogenesis

إنشاء نموذج الماوس ثنائي الأنسنة TK-NOG لمسببات أمراض الكبد المرتبطة بفيروس نقص المناعة البشرية

Despite the increased life expectancy of patients infected with human immunodeficiency virus-1 (HIV-1), liver disease has emerged as a common cause of ...

Stem Cell-Derived Viral Ag-Specific T Lymphocytes Suppress HBV Replication in Mice

الخلايا الجذعية المشتقة الفيروسية Ag محددة T الخلايا الليمفاوية قمع النسخ المتماثل HBV في الفئران

Hepatitis B virus (HBV) infection is a global health issue. With over 350 million people affected worldwide, HBV infection remains the leading cause of ...

Generation of In-Frame Gene Deletion Mutants in Pseudomonas aeruginosa and Testing for Virulence Attenuation in a Simple Mouse Model of Infection

Generation of In-Frame Gene Deletion Mutants in Pseudomonas aeruginosa and Testing for Virulence Attenuation in a Simple Mouse Model of Infection

جيل من المتحولين في الإطار الجينات الحذف في الزائفة الزنجاريه واختبار لتوهين ضراوة في نموذج الماوس بسيطه من العدوى

Microorganisms are genetically versatile and diverse and have become a major source of many commercial products and biopharmaceuticals. Though some of ...