Name: production of extracellular matrix fibers via sacrificial hollow fiber membrane cell culture
Uploaded: 2019-02-02T13:00:00
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この出版物で報告された研究は、国立研究所の関節炎、筋骨格系および受賞番号 R15AR064481、国立科学財団 (CMMI-1404716) の下で健康の国民の協会の皮膚疾患によって支えられただけでなく、アーカンソーの生物科学研究所。

1. いけにえの中空糸膜を用いた細胞外のマトリックスの生産
注意: N-メチル-2-ピロリドンは刺激性の溶媒と生殖毒性物質です。NMP への露出は皮膚、目、鼻、のどに炎症を引き起こす可能性があります。耐溶剤性の保護具は、NMP を処理するときに使用必要があります。NMP の使用は、ヒューム フード内で実行する必要があります。
<ol><li>中空糸膜のポリスルホン高?...

<ol>
	<li>Cobb, W. S., Kercher, K. W., Heniford, B. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+argument+for+lightweight+polypropylene+mesh+in+hernia+repair.">The argument for lightweight polypropylene mesh in hernia repair.</a> Surgical Innovation. 12 (1), 63-69 (2005).</li><li>Morais, J. M., Papadimitrakopoulos, F., Burgess, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomaterials/Tissue+Interactions:+Possible+Solutions+to+Overcome+Foreign+Body+Response.">Biomaterials/Tissue Interactions: Possible Solutions to Overcome Foreign Body Response.</a> The AAPS Journal. 12 (2), 188-196 (2010).</li><li>Simon, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+failure+of+the+tissue+engineered+porcine+heart+valve+SYNERGRAFT&#174;+in+pediatric+patients.">Early failure of the tissue engineered porcine heart valve SYNERGRAFT&#174; in pediatric patients.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery. 23 (6), 1002-1006 (2003).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> FDA strengthens requirements for surgical mesh for the transvaginal repair of pelvic organ prolapse to address safety risks. , (2016).</li><li>Kartus, J., Movin, T., Karlsson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Donor-site+morbidity+and+anterior+knee+problems+after+anterior+cruciate+ligament+reconstruction+using+autografts.">Donor-site morbidity and anterior knee problems after anterior cruciate ligament reconstruction using autografts.</a> Arthroscopy: The Journal of Arthroscopic &amp; Related Surgery. 17 (9), 971-980 (2001).</li><li>Lu, H., Hoshiba, T., Kawazoe, N., Chen, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+extracellular+matrix+scaffolds+for+tissue+engineering.">Autologous extracellular matrix scaffolds for tissue engineering.</a> Biomaterials. 32 (10), 2489-2499 (2011).</li><li>Wolchok, J. C., Tresco, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+isolation+of+cell+derived+extracellular+matrix+constructs+using+sacrificial+open-cell+foams.">The isolation of cell derived extracellular matrix constructs using sacrificial open-cell foams.</a> Biomaterials. 31 (36), 9595-9603 (2010).</li><li>Roberts, K., Schluns, J., Walker, A., Jones, J. D., Quinn, K. P., Hestekin, J., Wolchok, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+derived+extracellular+matrix+fibers+synthesized+using+sacrificial+hollow+fiber+membranes.">Cell derived extracellular matrix fibers synthesized using sacrificial hollow fiber membranes.</a> Biomedical Materials. 13 (1), (2017).</li><li>Hurd, S. A., Bhatti, N. M., Walker, A. M., Kasukonis, B. M., Wolchok, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+biological+scaffold+engineered+using+the+extracellular+matrix+secreted+by+skeletal+muscle+cells.">Development of a biological scaffold engineered using the extracellular matrix secreted by skeletal muscle cells.</a> Biomaterials. 49, 9-17 (2015).</li><li>Kasukonis, B. M., Kim, J. T., Washington, T. A., Wolchok, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+an+infusion+bioreactor+for+the+accelerated+preparation+of+decellularized+skeletal+muscle+scaffolds.">Development of an infusion bioreactor for the accelerated preparation of decellularized skeletal muscle scaffolds.</a> Biotechnology Progress. 32 (3), 745-755 (2016).</li><li>Murad, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+collagen+synthesis+by+ascorbic+acid.">Regulation of collagen synthesis by ascorbic acid.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 78 (5), 2879-2882 (1981).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue-specific+extracellular+matrix+coatings+for+the+promotion+of+cell+proliferation+and+maintenance+of+cell+phenotype.">Tissue-specific extracellular matrix coatings for the promotion of cell proliferation and maintenance of cell phenotype.</a> Biomaterials. 30 (23-24), 4021-4028 (2009).</li><li>Feng, C. Y., Khulbe, K. C., Matsuura, T., Ismail, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+progresses+in+polymeric+hollow+fiber+membrane+preparation,+characterization+and+applications.">Recent progresses in polymeric hollow fiber membrane preparation, characterization and applications.</a> Separation and Purification Technology. 111, 43-71 (2013).</li><li>Domb, A. J., Kost, J., Wiseman, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Handbook of Biodegradable Polymers. , (1998).</li></ol>

説明するプロセスは、一括 ECM バイオマテリアル体外膜として標準的な細胞培養器具の安価な大量生産を可能にするドライ ジェット湿式紡糸システムによってキャスト中空糸膜を使用しての生産を有効にします。説明システムが分離を目的として、細孔サイズ分布と中空ファイバーの寸法を変えることによって可変の膜の生産のため対応も可能このプロトコルで作製した膜は、細胞培?...

植込み手術足場は、注入世界的腹壁修復だけで1年以上 100 万の合成高分子メッシュの傷の修復の治具です。ただし、移植後これらの足場の作製で合成材料ポリマーが伝統的に使用する異物反応、インプラントの機能に有害な炎症の結果と2 組織の瘢痕化を引き起こす傾向があります。.さらに、優勢な合成メッシュ素材 (ポリプロピレンなど) が体内にかなり改造されないと一般的に適用される、瘢痕は容認することができます、組織の治療に対する臨床的有用性を制限すること筋肉などの高次機能を持つ組織。最近メーカー リコール合成手術の臨床成功と適用されている多くの手術用メッシュ製品中は、メッシュと種間組織インプラントの合併症インプラントを最大化することの重要性を強調生体適合性、手術に関する規制を強化する FDA を求めるメッシュ メーカー3,4。患者の組織から派生した足場の注入この免疫反応を抑えるが重要なドナーサイト罹患率5があります。細胞外マトリックス (ECM) 足場生成体外は、可能な代替脱 ECM 足場を示す優れた生体適合性と自己の ECM の場合は特にインプラント6。
収穫自家移植患者組織の限られた可用性とドナーのサイトで機能に支障を及ぼすリスクのための in vitroひと細胞の培養から骨格の ECM を生産する能力や、可能であれば、患者さんの独自のセルは魅力的な代替手段です。体外ECM のかなりの量の製造に主な課題は、これら捕獲困難の分子の隔離です。ECM を ECM 分泌線維芽細胞注入7,の ECM 脱できる等の収量に培養期間後に溶け込んでいるいけにえの高分子発泡体を培養によって作り出すことが、できた前作、8,9,10。ECM が産発泡体発泡体の内部アーキテクチャを採用する傾向がある、中空糸膜 (HFMs) は ECM のスレッドの生産のためのいけにえの足場として検討しました。記載方法使命を帯びているラボ スケール細胞培養品質中空糸膜と同じ次の間の線維芽細胞培養からの一括細胞外マトリックス繊維の抽出の製造のため。この静置培養方法は、標準的な哺乳類の細胞培養関連装置を含む研究所によって容易に採用可能なです。このアプローチによって生成される ECM は、さまざまな臨床応用に向けて適用でした。

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1/32 inch thick silicone rubber</td>
			<td>Grainger</td>
			<td>B01LXJULOM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 mL Scintillation Vials, Borosilicate glass, Disposable - VWR</td>
			<td>VWR</td>
			<td>66022-004</td>
			<td>With attached white urea cap and cork foil liner</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3 inch by 1 inch microscopy slides</td>
			<td>VWR</td>
			<td>75799-268</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4C refrigerator</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>FRGG2304D</td>
			<td>Any commercial 4C refrigerator will suffice.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>21008-178</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well cell culture plates</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10062-892</td>
			<td>Alternative brands may be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>VWR</td>
			<td>E646</td>
			<td>Alternative brands may be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bore vessel</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>89785K867</td>
			<td>6 ft 316 steel tubing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Plasma Fibronectin</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>33010018</td>
			<td>Comes as 1 mg of lyophilized protein</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>VWR/Amresco</td>
			<td>97062-590</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Culture Incubator w/ CO2</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Any appropriate CO2-supplied mammalian cell incubator will suffice.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable Serological Pipets, Glass - Kimble Chase</td>
			<td>VWR</td>
			<td>14673-208</td>
			<td>Alternative brands may be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/F-12, HEPES</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>11330032</td>
			<td>Warm in water bath at 37&#176;C for 30 minutes prior to use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNase I</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>DN25-10MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dope vessel</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>89785K867</td>
			<td>6 ft 316 steel tubing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BDH1160</td>
			<td>Dilute to 70% for sterilization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum, qualified, US origin - Gibco</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>26140079</td>
			<td>Mix with growth media at 10% concentration (50mL in 500mL media)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Four 1/4-inch to 1&#34; reducing unions</td>
			<td>Swagelok</td>
			<td>SS-1610-6-4</td>
			<td>One reducing union for each inlet and outlet of each vessel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freeze-dryer/lyophilizer</td>
			<td>Labconco</td>
			<td>117 (A65312906)</td>
			<td>Any lyophilizer will suffice.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hexagonal Antistatic Polystyrene Weighing Dishes - VWR</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89106-752</td>
			<td>Any weigh boat will suffice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hollow fiber membrane immersion bath</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>34L polypropylene tubs may be used or large bath containers can be fabricated from welded steel sheets</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hollow Fiber Membrane Spinneret</td>
			<td>AEI</td>
			<td>http://www.aei-spinnerets.com/specifications.html</td>
			<td>Made to order. Inner diameter = 0.8 mm, outer diameter = 1.6 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hot plate/stirrer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>97042-634</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human TGF-&#946;1</td>
			<td>PeproTech</td>
			<td>100-21</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Ascorbic acid</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A4544-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Ascorbic acid 2-phosphate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A8960-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamine (200 mM) - Gibco</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>25030081</td>
			<td>Mix with growth media at 1% concentration (5mL in 500mL media)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2</td>
			<td>VWR/Alfa Aesar</td>
			<td>AA12315-A1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Minus 80 Freezer</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>UXF40086A</td>
			<td>Any commercial -80C freezer will suffice.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N2 gas cylinders (two)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NIH/3T3 cells</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CRL-1658</td>
			<td>Alternative fibrogenic cell lines may be used.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-methyl-2-pyrrolidone</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BDH1141</td>
			<td>Alternative brands may be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin Solution - Gibco</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>15140122</td>
			<td>Mix with growth media at 0.1% concentration (0.5 mL in 500mL media)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polysulfone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>428302</td>
			<td>Any polysulfone with an average Mw of 35,000 daltons may be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Portable Pipet-Aid Pipetting Device - Drummond</td>
			<td>VWR</td>
			<td>53498-103</td>
			<td>Alternative brands may be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PTFE tubing (1/4-inch inner diameter)</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>52315K24</td>
			<td>Alternative brands may be used.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat skeletal muscle fibroblasts</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Independently isolated from rat skeletal muscle. Alternative fibrogenic cell lines may be used.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNase A</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>R4642</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone sheet</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>1460N28</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Take-up motor</td>
			<td>Greartisan</td>
			<td>B071GTTSV3</td>
			<td>200 RPM DC Motor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris HCl</td>
			<td>VWR/Amresco</td>
			<td>97063-756</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Two needle valves</td>
			<td>Swagelok</td>
			<td>SS-1RS4</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

production of extracellular matrix fibers via sacrificial hollow fiber membrane cell culture

細胞外マトリックス (ECM) から派生した組み換え足場創傷閉鎖と癒しを迅速にその潜在的な医学の駆動の重要な興味があります。人間・潜在的患者固有細胞、臨床を妨げ、異種抗原の存在を最小限に抑えることから ECM の世代の線維形成性細胞培養体外からの細胞外マトリックスの抽出を秘めてください。いくつかの既存の ECM 製品の成功。ECM 注入に適したの体外生産の重要な課題は、細胞培養による ECM 生産が通常比較的低い収率であります。この作品でいけにえの中空糸膜足場内培養細胞による ECM の生産のためのプロトコルを説明します。中空糸膜は従来セル中で線維芽細胞を培養、ECM の継続的なスレッドを生成する細胞培養後、解散しました。このメソッドによって生成される結果の ECM 繊維を脱し、凍結乾燥できるストレージと着床に適したレンダリングします。

いけにえの足場からの細胞外マトリックスの成功した生産は、適切な足場の作製、細胞培養および溶剤洗浄手順に偶発的です。市販のスチールのアニュラスを通じて高分子溶液の押出しを使用してドライ ジェット湿式紡糸システム市販コンポーネント (図 1) から組み立てを用いて中空糸膜の作製スピナレット (内径 0.8 mm の外径を = = 1.6 mm) 水浴?...

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Production of Extracellular Matrix Fibers via Sacrificial Hollow Fiber Membrane Cell Culture

このプロトコルの目的は傷の修復のために目標として再生足場インプラントの臨床評価のために適している全体細胞外マトリックス繊維の生産。これらの繊維は中空糸膜の線維芽細胞の培養による生産、膜の分解によって抽出されました。

いけにえの中空糸膜細胞培養による細胞外マトリックス繊維の生産

Engineered scaffolds derived from extracellular matrix (ECM) have driven significant interest in medicine for their potential in expediting wound closure ...

このプロトコルは、培養細胞株からバルク細胞外マトリックスのフィラメントを製造することを可能にし、細胞マトリックス相互作用の研究と、創傷修復のためのこの生体材料の可能性に関する研究を可能にする。これらの合成繊維は、繊維製造技術の豊富なレパートリーから引き出しながら、合成材料に対する異物応答を避け、幅広い織物埋め込み物を作成することができます。この手順のデモンストレーションは、私の研究室の大学院生であるカサンドラ・リードです。細胞を播種する前に、中空の繊維膜を摂氏121度で30分間オートクレーブし、続いてPBSで50ミリリットルのウシ血漿フィブロネクチンを5%摂氏5%の二酸化炭素で1時間処理する。インキュベーションの最後に、滅菌マイクロハサミを使用して繊維を6センチメートル以下に切断し、21ゲージ針を装備した1ミリリットルのシリンジを使用して、5番目の線維芽細胞を中空繊維膜のルミナに直接10回播種します。6本の種を直径6個のペトリ皿に入れ、5%の二酸化炭素で37°Cで種の繊維を簡単にインキュベートします。5分後、インキュベーターから、L-アスコルビン酸、L-アスコルビン酸2リン酸を添加した線維芽細胞培養培地を含む新しい6センチメートルのペトリ皿に繊維を移し、細胞培養インキュベーターで最大3週間の成長因子β1を変換する。インキュベーションの最後に、培養繊維を個々のシンチレーションバイアルに移す鉗子を使用し、各バイアルを傾けて、バイアルの側面に最大5ミリリットルのN-メチル-2-ピロリドンを添加できるようにします。次に、血清ピペットを使用して各繊維からN-メチル-2-ピロリドンをゆっくりと吸引し、繊維を新しいシンチレーションバイアルに移して新鮮なN-メチル-2-ピロリドンに2回目の浸漬を行います。3回目の浸漬後、得られた細胞外マトリックス糸を同様の方法で脱イオン水に3回リンスし、中央の8 x 4ミリメートルの長方形モールドを持つ3インチの長さ、1インチ幅の1/23インチの厚さのシリコーンゴムを標準的な3 x 1インチガラス顕微鏡スライドに置きます。オートクレーブ処理後、各細胞外マトリックス繊維を8x4ミリのシリコーンモールドに並べて、目に見えるオープンスペースがなくなるまで置きます。金型を50ミリリットルの円錐形チューブに入れ、繊維を80°Cのマイナスで完全に凍らせるまで凍らせます。脱細胞化のために、穏やかな攪拌でロッカー上の室温で24時間、1%ドデシル硫酸ナトリウムで金型をインキュベートします。翌日、抽出した細胞外マトリックスを3ミリリットルのPBSで洗浄して洗浄し、作りたてのドナ/RNA消化バッファーを摂氏4度で6時間培養します。消化の終了時に、消化液を吸引し、示したように滅菌PBSで金型を3回リンスする。3回目の洗浄後、PBSの10%ペニシリン・ストレプトマイシンの足場を摂氏4度で一晩4度でインキュベートし、50ミリリットルの円錐管でマイナス80°Cで約1時間凍結します。網が完全に凍結したら、一晩、または完全に乾燥するまで、細胞外メッシュを凍結乾燥し、凍結乾燥した足場をバイオセーフティフード内の滅菌容器に移し、使用するまで摂氏4度で貯蔵する。ここでは、このプロトコルを用いて作製したポリスルホン中空糸膜の横断断面が示され、非対称膜の特徴的な指状細孔の外側および内側の層を示す。線維芽細胞の播種および培養後、N-メチル-2-ピロリドンリンスが実証されるように、細胞外マトリックスの半透明の糸が生成される。細胞外マトリックス産生細胞は、3週間培養期間全体を通して中空糸膜の内部で生存可能なままである。抽出されたマトリックスは、水和時に半透明の外観を有し、メッシュアセンブリおよび凍結乾燥時に総縦方向アライメントを有するオフホワイト色と繊維状の外観を呈する。最も重要な工程は、培養中の中空糸膜をN-メチル-2-ピロリドン溶媒に溶解して細胞外マトリックスを抽出することである。この方法によって製造される材料は前臨床試験でティッシュの修理を調査するためにティッシュ工学されたインプラントを作製するために使用することができる。このプロトコルで使用されるN-メチル-2-ピロリドンは皮膚および眼刺激物であり、したがってニトリル手袋、ゴーグル、ラボコートを使用して化学薬品を扱い、ヒュームフード内で処理することを推奨する。

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Non-contact, Label-free Monitoring of Cells and Extracellular Matrix using Raman Spectroscopy

ラマン分光法を用いた細胞と細胞外マトリックスの非接触、ラベルフリーの監視

Non-destructive, non-contact and label-free technologies to monitor cell and tissue cultures are needed in the field of biomedical research.1-5 However, ...

Epithelial Cell Repopulation and Preparation of Rodent Extracellular Matrix Scaffolds for Renal Tissue Development

上皮細胞の再増殖および腎組織の開発のための齧歯類細胞外マトリックスの足場の調製

This protocol details the generation of acellular, yet biofunctional, renal extracellular matrix (ECM) scaffolds that are useful as small-scale model ...

Hollow Fiber Bioreactors for In Vivo-like Mammalian Tissue Culture

Hollow Fiber Bioreactors for In Vivo-like Mammalian Tissue Culture

用中空糸バイオリアクター<em&gt;インビボ</em&gt;哺乳動物の組織培養様

Tissue culture has been used for over 100 years to study cells and responses ex vivo. The convention of this technique is the growth of anchorage ...

Engineering Three-dimensional Epithelial Tissues Embedded within Extracellular Matrix

細胞外マトリックス内に埋め込まれたエンジニアリング三次元上皮組織

The architecture of branched organs such as the lungs, kidneys, and mammary glands arises through the developmental process of branching morphogenesis, ...

Preparation of Extracellular Matrix Protein Fibers for Brillouin Spectroscopy

ブリルアン分光法のための細胞外マトリックスのタンパク質繊維の調製

Brillouin spectroscopy is an emerging technique in the biomedical field. It probes the mechanical properties of a sample through the interaction of ...

Tunable Hydrogels from Pulmonary Extracellular Matrix for 3D Cell Culture

3D細胞培養のための肺細胞外マトリックスから調整可能なヒドロゲル

Here we present a method for establishing multiple component cell culture hydrogels for in vitro lung cell culture. Beginning with healthy en bloc lung ...

Fabrication of Extracellular Matrix-derived Foams and Microcarriers as Tissue-specific Cell Culture and Delivery Platforms

組織特異的細胞培養および配信プラットフォームとして、細胞外マトリックス由来のフォームおよびマイクロキャリアの作製

Cell function is mediated by interactions with the extracellular matrix (ECM), which has complex tissue-specific composition and architecture. The focus ...

Fabricating a Kidney Cortex Extracellular Matrix-Derived Hydrogel

腎臓皮質細胞外マトリックス由来ハイドロゲルを製造

Extracellular matrix (ECM) provides important biophysical and biochemical cues to maintain tissue homeostasis. Current synthetic hydrogels offer robust ...

Pancreatic Tissue-Derived Extracellular Matrix Bioink for Printing 3D Cell-Laden Pancreatic Tissue Constructs

3D細胞-細胞-膵組織コンストラクトを印刷するための膵組織由来細胞外マトリックスバイオインク

The transplantation of pancreatic islets is a promising treatment for patients who suffer from type 1 diabetes accompanied by hypoglycemia and secondary ...

A Human 3D Extracellular Matrix-Adipocyte Culture Model for Studying Matrix-Cell Metabolic Crosstalk

マトリックス細胞代謝クロストークを研究するためのヒト3D細胞外マトリックス-脂肪細胞培養モデル

The extracellular matrix (ECM) plays a central role in regulating tissue homeostasis, engaging in crosstalk with cells and regulating multiple aspects of ...