Name: functional and physiological methods of evaluating median nerve regeneration in the rat
Uploaded: 2020-04-18T14:00:00
Duration: 12 min 9 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Functional and Physiological Methods of Evaluating Median Nerve Regeneration in the Rat at JoVE.com

حصل ديوغو كاسال على منحة من برنامج التعليم الطبي المتقدم، الذي يرعاه فونداساو كالوست غولبنكيان، وفونداساو شامباليود، ومينيسيريريو دا ساودي إي فونداساو بارا سيينسيا إي تكنولوغيا، البرتغال. ويعرب المؤلفان عن امتنانهما الشديد للسيد فيليبي فرانكو على الرسم التوضيحي في الشكل 1. ويود المؤلفان أن يشكرا المساعدة التقنية التي تقدم بها السيد ألبرتو سيفيرينو في تصوير الفيديو وتحريره. وأخيراً، يود صاحبا البلاغ أن يشكرا السيدة سارة ماركيز على مساعدتها في جميع الجوانب اللوجستية المتعلقة باقتناء الحيوانات وصيانتها.

وليس لدى أصحاب البلاغ ما يكشفون عنه.

تقدم هذه الورقة بروتوكولًا لإنشاء أنواع مختلفة من آفات MN وإصلاحها في الفئران. بالإضافة إلى ذلك ، فإنه يوضح كيفية تقييم الانتعاش الوظيفي لهذا العصب باستخدام العديد من الاختبارات السلوكية غير الغازية والقياسات الفسيولوجية.
وتجدر الإشارة إلى أن العديد من الاختبارات الوظيفية الموصوفة في هذه الورقة ، وهي اختبار تشغيل السلم واختبار الحبل ، تعتمد بشكل كبير على استعداد الجرذ لأداء المهمة مع توقع الحصول على مكافأة الغذاء51،52،53. تجدر الإشارة إلى أن سلالات الفئران معينة أكثر قابلية للتدريب وأداء استنساخي في هذا النوع من الاختبارات51،52،53. على سبيل المثال، لويس الفئران أداء ضعيف في هذه الاختبارات على حد سواء في مرحلة التدريب وبعد ذلك51،52،53.
يجب أن يسمح إسكان الفئران بحرية واسعة في الحركة بالاتفاق مع سلوكهم الاستكشافي الطبيعي ، بالإضافة إلى السماح للحيوانات التجريبية بالاطلاع على بعض العناصر الموجودة في الاختبارات الوظيفية19. ولذلك، تظهر أشكال مختلفة من السكن تسمح بحرية أعلى في التنقل. يتم تخصيص الأقفاص الكبيرة مع عناصر التخصيب التي يتم استخدامها لاحقًا في الاختبارات الوظيفية (على سبيل المثال ، الحبال والسلالم).
يمكن القول، هذه العناصر التخصيب وكذلك الأقفاص مع عجلات تشغيل مدمجة ومجالات التدريب الفردية توفير شكل من أشكال العلاج الطبيعي بعد الجراحة مماثلة لتلك المقدمة للمرضى الإنسان تعمل على الجهاز العصبي المحيطي10.
بشكل ملحوظ ، على الرغم من أن بعض المؤلفين يدعون إلى تشريح الأنسجة تحت الجلد واللفافة العضلية بصراحة أو عن طريق القطع النظيف مع مشرط رقم 15 ، يوصى باستخدام الحرارة عند تشريح هذه الهياكل لتقليل خطر ورم دموي بعد الجراحة.
تجدر الإشارة إلى أنه تم وضع العديد من الاختبارات لاختبار جوانب مختلفة من إصلاح الأعصاب الطرفية في الفئران ، وهي التجديد المحوري ، وإعادة الإحياء المستهدف ، والانتعاش الوظيفي ، وبعضها خارج نطاق هذه الدراسة29،54،5555،56. على سبيل المثال ، يتم استخدام التحليل الحركي29،36،55 والتقييم الهسمورمتر29،36،57 على نطاق واسع من قبل مؤلفين متعددين. بالإضافة إلى ذلك، العديد من هذه الاختبارات تنطوي على اختلافات لتحقيق أقصى قدر من الكفاءة و / أو الاستنساخ54. على سبيل المثال، يمكن تقييم علم الألزميد الميكانيكي (أي تقييم الاستجابات للمحفزات الميكانيكية المؤلمة) نوعياً باستخدام خيوط فون فراي معينة، كما هو موضح في هذه الورقة، أو باستخدام خيوط فون فراي الأقوى تباعاً، أو حتى استخدام الأجهزة الإلكترونية التي تطبق ضغوطاً متزايدة حتى يتم ملاحظة استجابة سحب30،,54.
وبالمثل، على الرغم من أن العديد من المؤلفين استخدام تحليل مسار المشي لتقييم إصلاح العصب الأمامي في الفئران، ويقول مؤلفون آخرون أن آفات MN واحد تفشل في كثير من الأحيان لإنتاج تغييرات قابلة للاستنساخ في pawprints10،58،59. وعلاوة على ذلك، ذكر البعض أن هذه التغييرات قد لا تكون متناسبة مع استعادة العضلات10,60. مع الأخذ في الاعتبار، دعا بعض الباحثين إلى استخدام تحليل مسار المشي في الالأمامية أساسا عند تقييم الانتعاش بعد سحق آفات نيف بدلا من بعد إعادة بناء الأعصاب مجزأة10،50،61.
يستخدم على نطاق واسع اختبار التمسك لتقييم استعادة المحرك للعضلات التي تسيطر عليها MN16,27. لضمان توحيد واستنساخ البيانات التي تم الحصول عليها مع هذا الاختبار، يوصى بتطبيق اختبار الاستيعاب باستخدام المنهجية الراسخة التي اقترحها برتيلي وآخرون16. ومع ذلك، يختلف البروتوكول الحالي في أنه لا شل بشكل روتيني مخلب كونترترافيل لمنع الإجهاد لا مبرر له11،27. تجدر الإشارة أيضا إلى أن المؤلفين الآخرين، بعد شل مخلب غير مصاب، تقييم كمي اختبار استيعاب باستخدام دينامومتر أو مقياس27،56. ومع ذلك ، قد يتأثر هذا التقييم الكمي بالقوة التي يطبقها الباحث على ذيل الجرذ26. وعلاوة على ذلك، فمن الصعب التمييز بين القوة التي تولدها العضلات المرن الرقمية (الداخلية فقط من قبل MN في الفئران والكائن من اختبار استيعاب9)من القوة التي تنتجها flexors المعصم، والتي تشمل الزنجار الفاتن الكارب الذي يتلقى innervation من العصب الزندي9،10،27. من أجل محاولة للتحايل على هذه التحيزات المحتملة، يستخدم هذا البروتوكول مقياس ترتيبي مشابه لمقياس مجلس البحوث الطبية المستخدمة عادة لتصنيف قوة العضلات في البشر10،11،62. بدلا من ذلك، وصف مؤلفون آخرون تقييمًا مفصلًا للفهم باستخدام تحليل الفيديو ونظام تسجيل يستند إلى الفيديو11،63.
عيب محتمل من استخدام MN بالمقارنة مع العصب الوركي هو أن كمية أكبر من المعلومات المتاحة بشأن العصب الأخير. وهذا بدوره يمكن أن يجعل مقارنة البيانات التي تم الحصول عليها مع MN مع تلك التي من الأعمال التجريبية السابقة أكثر صعوبة46،48،64. بالإضافة إلى ذلك، أصغر حجم MN بالمقارنة مع العصب الوركي يجعل التلاعب الجراحي أكثر تحديا8،12،27،56،65.
على عكس المنهجية الموصوفة في هذه الورقة، يمكن إجراء تقييم الإلكترونيوروروميغرافيباستخدام أقطاب احتكارية عبر الجلد وضعت في الذراع ومناطق ثنار51. على الرغم من كونها أقل الغازية، وهذا الأسلوب يحمل خطر الارتباك المحتملة بسبب إمكانية تحفيز العصب الزندي في منطقة الذراع9،51.
يتفق معظم المؤلفين على أن ليس كل الاختبارات المستخدمة في الفئران توفر نتائج متوافقة ، حيث يعتمد إصلاح الأعصاب الطرفية على مجموعة معقدة من العوامل ، تتألف من بقاء الخلايا العصبية ، واستطالة المحاور والتقليم ، ومتشابك ، واستعادة ناجحة للأعضاء الحسية والوحدات الحركية ، ولدونة الدماغ7،10،50،66،67.
وأخيرا، تجدر الإشارة إلى أن التحذير الهام من نماذج القوارض هو أن الأعصاب الطرفية الفئران هي أقرب بكثير إلى أعضائها نهاية ولها مناطق أصغر بكثير عبر المقطع من الهياكل البشرية المتجانسة. ومع ذلك ، فإن هذا الفرق في الحجم يضمن بيانات تجريبية أسرع في القوارض ، ومن المتوقع أن تكون النتائج العامة الأفضل في الفئران بالمقارنة مع البشر68. في الواقع، العديد من المؤلفين يحذرون من أنه يجب استخدام الرعاية عند محاولة استقراء البيانات التجريبية التي تم الحصول عليها في إصلاح الأعصاب الطرفية باستخدام القوارض للبشر7,69. تعتبر نماذج الرئيسيات أكثر قابلية للمقارنة70. ومع ذلك، يرتبط استخدامها مع القيود الأخلاقية واللوجستية والميزانية المزعجة71.
على الرغم من أن العصب الوركي هو العصب الأكثر استخداما في أبحاث الأعصاب الطرفية، والفئران MN يقدم مزايا متعددة. على سبيل المثال ، ترتبط آفات MN بإصابة أصغر من الانقباضات المشتركة والتشويه التلقائي للمخلب المصاب11،12،16،56. بشكل ملحوظ، استئصال تلقائي بعد استئصال العصب الوركي يصيب 11-70٪ من الفئران. وهذا قد يجعل التقييمات الحالية مثل مؤشر الوركي المستحيل14. وهذا بدوره يجعل تقدير عدد الحيوانات المطلوبة للحصول على قوة إحصائية معينة مرهقة15.
وبالإضافة إلى ذلك، كما MN أقصر من العصب الوركي، لوحظ انتعاش الأعصاب عاجلا58،72،7373،74،75،76. وعلاوة على ذلك، لا تغطي MN من قبل الجماهير العضلية، مما يجعل تشريحها أسهل من الناحية الفنية من ذلك من العصب الوركي16. بالإضافة إلى ذلك، MN لديه مسار مواز للعصب الزندي في الذراع. وبالتالي، يمكن بسهولة استخدام العصب الزندي ككسب غير مشروع للأعصاب لإصلاح إصابات MN. وأخيرا ، في البشر ، تحدث معظم آفات الأعصاب الطرفية في الطرف العلوي ، مما يدعم استخدام هذا العصب في الفئران77،78.
يمكن القول، القوارض هي الحيوانات التجريبية الأكثر استخداما في عالم إصلاح الأعصاب الطرفية48،79. كما هو مبين، وMN الفئران هو نموذج مناسب من آفة الأعصاب الطرفية وإصلاح. في الواقع ، هناك استراتيجيات موحدة متعددة متاحة لتقييم الانتعاش الحركي والحسي ، مما يسمح بمقارنة أسهل للنتائج36،46،60،80،81،82. العديد من هذه الأساليب غير باضعة، مما يسمح للتقييم اليومي.
وعلاوة على ذلك، العلاج الطبيعي هو جزء من مستوى الرعاية للمرضى الذين يتعافون من إصابات الأعصاب الطرفية. كما هو موضح في هذه الورقة ، هناك استراتيجيات متعددة لتوفير بيئة تشبه العلاج الطبيعي بعد الجراحة للفئران المقدمة لإصابات MN4،5. وبالتالي ، فإن هذا النموذج مناسب بشكل خاص لتكرار السيناريو السريري ، مما يسهل استقراء النتائج للنوع البشري12،27،48،56،58،83.
كما هو مبين في هذه الورقة، تتوفر استراتيجيات موحدة متعددة لتقييم الانتعاش الحركي والحسي في نموذج MN للفأر. وغالبية هذه الإجراءات هي إجراءات غير باضعة، مما يسمح بإجراء تقييم متكرر. وعلاوة على ذلك، كما معظم الآفات العصبية المحيطية في الأنواع البشرية تحدث في الطرف العلوي، إعدادات العلاج الطبيعي التجريبيالمذكورة يمكن أن تحاكي على نحو أكثر ملاءمة الانتعاش في السياق السريري. يمكن القول إن هذا يمكن أن يسهل استقراء النتائج للنوع البشري ، مما يزيد من التحقق من استخدام هذا العصب في الفئران.

تحدث آفات الأعصاب الطرفية بانتظام نتيجة للصدمة أو العدوى أو التهاب الأوعية الدموية أو المناعة الذاتية أو الأورام الخبيثة و/أو العلاج الإشعاعي1،2. لسوء الحظ، إصلاح الأعصاب الطرفية لا تزال تقدم نتائج لا يمكن التنبؤ بها سريريا ومخيبة للآمال في كثير من الأحيان3,4. هناك إجماع واسع النطاق على أن هناك حاجة إلى أبحاث أساسية ومترجمة كبيرة لتحسين احتمال المتضررين4،5،6،7.
يظهر الفئران MN أوجه تشابه كبيرة مع أن من البشر8,9 (الشكل 1). ينشأ هذا العصب من الضفيرة البشية في المنطقة الإبطية ، وينحدر إلى الجانب المتوسط من الذراع ، ويصل إلى الكوع ، وتفرع إلى غالبية العضلات في المقصورة البطنية للساعد. تصل MN إلى اليد ، حيث تُحَدَر عضلات thenar وأول عضلات ينشبى بالإضافة إلى جزء من جلد يد الجرذ9 (الشكل 1).
باستخدام الفئران MN، فمن الممكن لتكرار على نحو كاف الآفات العصبية الطرفية في البشر10،11،12. هذا العصب لديه العديد من المزايا البحثية المحتملة بالنسبة للعصب الوركي المستخدمة عادة. لأن MN يقع في الجزء الأمامي من الفئران (أقرب إلى الأطراف العليا البشرية)، يمكن أن تتلف تجريبيا مع تأثير أصغر بكثير على رفاهية الفئران، بالمقارنة مع العصب الوركي، الذي يبطن جزءا كبيرا من الطرف الحوضي13. بالإضافة إلى ذلك ، في البشر معظم الآفات السريرية تحدث في الطرف العلوي ، والذي يتوافق مع طرف الفأر الأمامي10،11،12،14،15،16.
هذه الورقة تبين كيفية إنتاج أنواع مختلفة من الآفات MN في الفئران. وعلاوة على ذلك، يتم تقديم طرق مختلفة لمحاكاة العلاج الطبيعي بعد الجراحة. وأخيراً، يتم وصف اختبارات لتقييم الانتعاش الوظيفي للMN. هناك العديد من الاستراتيجيات الموحدة المتاحة لتقييم الانتعاش الحركي والحسي باستخدام نموذج MN من آفة الأعصاب الطرفية وإصلاحها ، مما يسمح بمقارنة سهلة للنتائج. نموذج MN مناسب بشكل خاص لتكرار السيناريو السريري ، مما يسهل استقراء النتائج للنوع البشري.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetaminophen</td>
			<td>Amazon</td>
			<td></td>
			<td>https://www.amazon.com/Childrens-Tylenol-grape-flavor-ages/dp/B0051VVVZG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acland clamps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>00398 V</td>
			<td>http://www.merciansurgical.com/aclandclamps.pdf</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acland Single Clamps B-1V (Pair)</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>396</td>
			<td>http://www.merciansurgical.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biogel Surgical Gloves</td>
			<td>Medex Supply</td>
			<td>30465</td>
			<td>https://www.medexsupply.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSL Analysis</td>
			<td>BIOPAC Systems</td>
			<td></td>
			<td>https://www.biopac.com/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castroviejo needle holders</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12565-14</td>
			<td>http://s-and-t.ne</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clamp applicator</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>CAF-4</td>
			<td>http://www.merciansurgical.com/acland-clamps.pdf</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Constante voltage stimulator</td>
			<td>BIOPAC Systems</td>
			<td>STM200</td>
			<td>https://www.biopac.com/product/constant-voltage-stimulator-unipolar-pulse/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cutasept skin disinfectant</td>
			<td>Bode Chemie</td>
			<td></td>
			<td>http://www.productcatalogue.bode-chemie.com/products/skin/cutasept_f.php</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dafilon 10-0</td>
			<td></td>
			<td>G1118099</td>
			<td>http://www.bbraun.com/cps/rde/xchg/bbraun-com/hs.xsl/products.html?prid=PRID00000816</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Derf Needle Holders 12 cm TC</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>703DE12</td>
			<td>http://www.merciansurgical.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dry heat sterilizer</td>
			<td>Quirumed</td>
			<td>2432</td>
			<td>http://www.quirumed.com/pt/material-de-esterilizac-o/esterilizadores</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dynamometer</td>
			<td>SAUTER</td>
			<td>FH5</td>
			<td>https://www.sauter.eu/shop/en/measuring-instruments/force-measurement/FH-S/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electroneuromiography setup</td>
			<td>BIOPAC Systems</td>
			<td>MP36</td>
			<td>https://www.biopac.com/product/biopac-student-lab-basic-systems/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethilon 5-0</td>
			<td></td>
			<td>W1618</td>
			<td>http://www.farlamedical.co.uk/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FLIR Software</td>
			<td>FLIR</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graeffe forceps 0.8 mm tips curved</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11052-10</td>
			<td>http://www.finescience.de</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graph paper</td>
			<td>Ambar</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat Lamp HL-1</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>727562</td>
			<td>https://www.harvardapparatus.com/webapp/wcs/stores/servlet/haisku3_10001_11051_39108_-1_HAI_ProductDetail_N_37610_37611_37613</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin Sodium Solution (Heparin LEO 10000IU/ml)</td>
			<td>Universal Drugstore</td>
			<td></td>
			<td>http://www.universaldrugstore.com/medications/Heparin+LEO/10000IU%2Fml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High-Temperature Cautery</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>AA03</td>
			<td>http://www.boviemedical.com/products_aaroncauteries_high.asp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Homeothermic Blanket System with Flexible Probe</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>507220F</td>
			<td>https://www.harvardapparatus.com/webapp/wcs/stores/servlet/haisku3_10001_11051_39108_-1_HAI_ProductDetail_N_37610_37611_37613</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infrared camera</td>
			<td>FLIR</td>
			<td>E6</td>
			<td>http://www.flir.eu/instruments/e6-wifi/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Instrapac - Adson Toothed Forceps (Extra Fine)</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>7973</td>
			<td>http://www.millermedicalsupplies.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Scissors 11.5 cm Curves EASY-CUT</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>EA7613-11</td>
			<td>http://www.merciansurgical.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine hydrochloride/xylazine hydrochloride solution</td>
			<td>Sigma- Aldrich</td>
			<td>K113</td>
			<td>https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/k113?lang=pt&#38;region=PT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lacri-lube Eye Ointment 5g</td>
			<td>Express Chemist</td>
			<td>LAC101F</td>
			<td>http://www.expresschemist.co.uk/lacri-lube-eye-ointment-5g.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mayo Scissors 14 cm Straight Chamfered Blades EASY-CUT</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>EA7652-14</td>
			<td>http://www.merciansurgical.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam</td>
			<td>Recropharma</td>
			<td>Mobic</td>
			<td>https://www.recropharma.com/product-pipeline/meloxicam</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methylene Blue solution</td>
			<td>Sigma- Aldrich</td>
			<td></td>
			<td>https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Jewellers Forceps 11 cm straight 00108</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>JF-5</td>
			<td>http://www.merciansurgical.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Jewellers Forceps 11cm angulated 00109</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>JFA-5b</td>
			<td>http://www.merciansurgical.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro retractor</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>RS-6540</td>
			<td>http://www.finescience.de</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Scissors Round Handles 15 cm Straight</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>67</td>
			<td>http://www.merciansurgical.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-vessel dilators 11 cm 0.3 mm tips 00124</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>D-5a.2</td>
			<td>http://www.merciansurgical.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Monosyn 5-0</td>
			<td></td>
			<td>15423BR</td>
			<td>http://www.mcfarlanemedical.com.au/15423BR/SUTURE-MONOSYN-5_or_0-16MM-70CM-(C0023423)-BOX_or_36/pd.php</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal saline for irrigation</td>
			<td>Hospira, Inc.</td>
			<td>0409-6138-22</td>
			<td>http://www.hospira.com/en/search?q=sodium+chloride+irrigation%2C+usp&#38;fq=contentType%3AProducts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating microscope</td>
			<td>Leica Surgical Microsystems</td>
			<td></td>
			<td>http://www.leica-microsystems.com/products/surgical-microscopes/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Skin Skribe Surgical Skin Marker</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>31456</td>
			<td>https://www.mooremedical.com/index.cfm?/Skin-Skribe-Surgical-Skin-Marker/&#38;PG=CTL&#38;CS=HOM&#38;FN=ProductDetail&#38;PID=1740&#38;spx=1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Snacks</td>
			<td>Versele-Laga</td>
			<td>Complete Crock-Berry</td>
			<td>http://www.versele-laga.com/en/complete/products/complete-crock-berry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight mosquito forcep</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>91308-12</td>
			<td>http://www.finescience.de</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical drapes</td>
			<td>Barrier</td>
			<td>800430</td>
			<td>http://www.molnlycke.com/surgical-drapes/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veet Sensitive Skin Hair Removal Cream Aloe Vera and Vitamin E 100 ml</td>
			<td>Veet</td>
			<td></td>
			<td>http://www.veet.co.uk/products/creams/creams/veet-hair-removal-cream-sensitive-skin/</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

functional and physiological methods of evaluating median nerve regeneration in the rat

الهدف الرئيسي من هذا التحقيق هو إظهار كيفية إنشاء وإصلاح أنواع مختلفة من آفات العصب المتوسط (MN) في الفئران. وعلاوة على ذلك، يتم تقديم طرق مختلفة لمحاكاة العلاج الطبيعي بعد الجراحة. يتم استخدام استراتيجيات موحدة متعددة لتقييم الانتعاش الحركي والحسي باستخدام نموذج MN من آفة الأعصاب الطرفية وإصلاحها ، مما يسمح بمقارنة سهلة للنتائج. يتم تضمين العديد من الخيارات لتوفير بيئة تشبه العلاج الطبيعي بعد الجراحة للفئران التي خضعت لإصابات MN. وأخيرا، توفر الورقة طريقة لتقييم استرداد MN باستخدام العديد من الاختبارات غير الغازية (أي اختبار استيعاب، اختبار وخز دبوس، اختبار المشي سلم درجة، اختبار تسلق الحبل، وتحليل مسار المشي)، والقياسات الفسيولوجية (التصوير الشعاعي بالأشعة تحت الحمراء، الإلكترونيوروروميغرافيا، تقييم قوة المرن، والمرن كاربي شعاعي تحديد الوزن العضلي). ومن ثم، يبدو هذا النموذج مناسبا بشكل خاص لتكرار سيناريو سريري، مما يسهل استقراء النتائج للنوع البشري.
على الرغم من أن العصب الوركي هو العصب الأكثر دراسة في أبحاث الأعصاب الطرفية، وتحليل الفئران MN يقدم مزايا مختلفة. على سبيل المثال ، هناك انخفاض في حدوث الانقباضات المشتركة والتشويه التلقائي للأطراف المصابة في دراسات الآفات MN. وعلاوة على ذلك، لا تغطي MN من قبل الجماهير العضلية، مما يجعل تشريحها أسهل من ذلك من العصب الوركي. بالإضافة إلى ذلك ، لوحظ انتعاش MN في وقت أقرب ، لأن MN أقصر من العصب الوركي. أيضا، MN لديه مسار مواز للعصب الزندي في الذراع. وبالتالي ، يمكن استخدام العصب الزندي بسهولة كالكسب غير المشروع للأعصاب لإصلاح إصابات MN. وأخيرا، يقع MN في الفئران في الطرف الأمامي، أقرب إلى الطرف العلوي البشري. في البشر ، والطرف العلوي هو موقع معظم الآفات العصبية الطرفية.

Watch this Scientific Journal Video about Functional and Physiological Methods of Evaluating Median Nerve Regeneration in the Rat at JoVE.com

Functional and Physiological Methods of Evaluating Median Nerve Regeneration in the Rat

عرض هو بروتوكول لإنتاج أنواع مختلفة من الآفات العصب المتوسط (MN) وإصلاح في الفئران. بالإضافة إلى ذلك، يوضح البروتوكول كيفية تقييم الانتعاش الوظيفي للعصب باستخدام العديد من الاختبارات السلوكية غير الباضعة والقياسات الفسيولوجية.

الطرق الوظيفية والفسيولوجية لتقييم متوسط تجديد الأعصاب في الفئران

The main goal of this investigation is to show how to create and repair different types of median nerve (MN) lesions in the rat. Moreover, different ...

باستخدام العصب المتوسط للجرذ ، من الممكن تكرار آفات الأعصاب الطرفية في البشر بشكل كاف. سريريا، تحدث معظم هذه الآفات، في الطرف العلوي الذي يقدم الدعم لاستخدام هذا النموذج التجريبي. في هذه الورقة سوف نظهر، كيفية إنتاج أنواع مختلفة من الآفات العصبية المتوسطة في الفئران.بالإضافة إلى ذلك، سوف نوضح، كيفية تقييم الانتعاش الوظيفي لهذا العصب باستخدام عدة اختبارات. ينبع العصب الوسيط من شرائح الحبل الشوكي C6 إلى T1. يتم تمييز العصب المتوسط باللون الأخضر. في هذا الفيديو، لا تستخدم الستائر الجراحية لأغراض العرض التوضيحي.يرجى تضمين الستائر أثناء إجراء الجراحة. يتم قطع الجلد في الجانب الأوسط من الذراع اليمنى والمنطقة الصدرية حتى الطائرة الفيشية العميقة. الأوعية النازفة مُتَرَكَفة بعناية.المقبل، يتم قطع اللفافة العضدي بعناية، مع الحرص على عدم تلف هياكل الأوعية والأعصاب، في الجانب الوسط من الذراع. زوج من مقص مفتوح بصراحة تحت, الإدراج محطة من العضلات الرئيسية الصدرية, من أجل ندف هذه العضلات, بعيدا عن الشريان الإبطين الكامنة والوريد, وكذلك من الفروع الطرفية من الضفيرة العضلي. يتم تقسيم إدخال العضلات الرئيسية الصدرية ، ثم مع الكيوتري الكهربائي.ثم يتم كشف العضلات الصغيرة الصدرية وقطع. ثم يتم تشريح العصب المتوسط بصراحة من الأوعية العضدية ومن عصب الزندي حتى منطقة الكوع. فمن الممكن الآن أن نلاحظ، وفروع المحطة المختلفة من الضفيرة العضدي، وهي الوسيط، الزندي، الشعاعي، الإبط، والأعصاب Musculocutane.مع العصب المتوسط المكشوفة والمعزولة يمكن أن يسبب إصابات ميكانيكية مختلفة. يمكن إنشاء مجموعة شام، من خلال تشريح العصب المتوسط فقط. في مجموعة سحق، يتم ضغط العصب المتوسط، وذلك باستخدام ملقط الجراحة الدقيقة لمدة 15 ثانية.ينتج المجموعة ختان من الإزالة, 10 ملليمتر قطعة طويلة من العصب المتوسط. الجذع القريب من العصب المتوسط هو ربط مع 8-0 خياطة النايلون لمنع نمو محور عصبي. بدلا من ذلك، فمن الممكن لتدوير الجزء 180 درجة استئصال واستخدامه ككسب غير مشروع العصب الذاتية.في هذه الحالة ، يتم خياطة جذوعها القريبة والهية للقسم في العصب الإعلامي إلى الكسب غير المشروع العصبي باستخدام 10-0 غرز النايلون. العلاج الطبيعي هو جزء من مستوى رعاية المرضى الذين يتعافون من إصابات الأعصاب المحيطية. هناك استراتيجيات متعددة لتوفير العلاج الطبيعي بعد الجراحة للفئران، والتي تم تقديمها لإصابات الأعصاب المتوسطة.من المهم اختيار الجرذان الصغيرة والسماح لهم بالاتصال بأدوات العلاج الطبيعي قبل الجراحة. هذه تضمن سهولة وسرعة التكيف مع إعدادات ممارسة. وعلاوة على ذلك، ينبغي أن تسمح أدوات العلاج الطبيعي للفئران أن يكون لها درجة من الحرية وتمكنها من القيام بالحركات الدقيقة مع الجرذان.هناك عدة طرق لأداء العلاج الطبيعي. على سبيل المثال، يمكن استخدام المجالات الفردية. وضع الفئران داخل الكرة ومن ثم وضعه في غرفة مع بعض العقبات.دعه يستكشف الغرفة لمدة نصف ساعة. افعل هذا مرة واحدة في اليوم. كما يمكن أن تكون الفئران في أقفاص فردية.مع المدمجة تشغيل العجلات. بهذه الطريقة، يمكن للفئران ممارسة الرياضة، بقدر ما يريدون ومتى يريدون ذلك. احتمال آخر هو استيعاب، والجرذان في مجموعات في أقفاص أكبر.تخصيص الأقفاص باستخدام الجلود والحبال، وعجلات الجري، وغيرها من عناصر الإثراء البيئي. هذه تمكنهم من حرية الحركة وافرة، بالاتفاق مع سلوكهم الاستكشافي الطبيعي ويسمح للفئران للحصول على الإطلاع، مع بعض العناصر الموجودة، في الاختبارات الوظيفية. قبل إجراء الاختبارات الوظيفية، تعريف الفئران مع يعامل الطعام اخترت لاستخدامها كتعزيز إيجابي.إجراء الاختبارات في المساء، عندما تكون الفئران بشكل طبيعي أكثر نشاطا. ابدأ باختبار المسك. وضع الفئران على الشبكة ورفعه من ذيله السماح لها الاستيلاء على الشبكة.عندما يكون الجرذ قادرا على الاستيلاء على الشبكة، مع قوة مماثلة مع كل forepaws. وهذا يعني أن العصب الوسيط يعمل ويعتبر اختبار المسك إيجابيًا. إذا لم تتمكن من الاستيلاء على الشبكة مع مخلب المصاب، ويعتبر اختبار التمسك سلبية.لاختبار دبوس وخز، وضع الفئران على منصة وانتظر بضع دقائق حتى أنشطة الاستمالة الاستكشافية والكبرى تهدأ. تبدأ عندما يكون الجرذ ثابتة والوقوف على forepaws. مع مساعدة من المرآة، إدراج الشعر فون فراي من خلال شبكة لكزة الجانب بالمار من forepaw.كرر هذا خمس مرات على كل forepaw ، بدلا من ذلك ، في انتظار بضع ثوان بعد كل تقييم. تسجيل استجابة سحب على النحو التالي، صفر لأي استجابة الانسحاب، إذا كان الجرذ يزيل ببطء مخلب من خيوط واثنين إذا كان الجرذ يستجيب بسرعة إلى التحفيز ويزيل مخلب أو يلعق مخلب. وضع الفئران في الجزء السفلي من سلم وتلمس بلطف ذيل الفئران.بدء الموقت مرة واحدة يبدأ الجرذ المشي ووقفه مرة واحدة في خطم يعبر خانات مدخل. سجل الوقت وكرر الاختبار ثلاث مرات. وضع الفئران في الجزء السفلي من الحبل وإقناعه لتسلقه عن طريق لمس ذيله بلطف.اعتبر الاختبار صحيحاً إذا لم يكن الحيوان، أو يتردد أثناء المهمة أو يتوقف عن التسلق. بدء الموقت مرة واحدة الحيوان يبدأ التسلق ووقفه في اللحظة التي خطم الفئران يعبر مدخل المنصة. إعطاء الجرذ وجبة خفيفة بعد أداء، والمهام بشكل صحيح والسماح لها، بعض دقائق من الراحة قبل تكرار ذلك.ضع قطعة من ورق الرسم البياني على أرضية الممرات. ثم، والاستيلاء على الفئران من ذيله والسماح لها عقد فرشاة اللوحة، مشربة في الميثيلين الأزرق. وضعه عند مدخل الممر لجعله يمشي داخل الصندوق.إزالة ورقة الرسم البياني من أرضية الممرات وتكرار الاختبارات حتى تحصل على جيدة، انطباع تمثيلي من كلا forepaws. من المطبوعات التي تم الحصول عليها، حدد واحدة مع طباعة جيدة من forepaws المتعاقبة وقياس المعلمات التالية. طول الطباعة، وانتشار الإصبع، وانتشار الإصبع المتوسط وعامل الموقف.أخيرا قياس المسافة بين الاصبع الثاني من اثنين من الطبعات المتعاقبة ، وطول خطوة. لتنفيذ التقييم الحراري، ضع قطعة من الغراء الجانبي المزدوج على الإسفنج. وضع الفئران على ذلك والغراء forepaws كما هو مبين.انتظر دقيقة لتبديد تبادل الحرارة من التعامل مع الكفوف الفئران. الاستيلاء على الكاميرا في زاوية 90 درجة وحوالي 30 سنتيمترا بعيدا عن الفئران. قم بعمل استحواذين.أولاً، صورة حرارية كاملة الجسم، ثم، تقريب الكاميرا إلى الجزء العلوي من جسم الجرذ، جعل الثانية. من ثيرمجرام التي تم الحصول عليها، نجد منطقة ذات فائدة المقابلة لمنطقة بالمار من forepaws. قياس متوسط، الحد الأدنى والقيم القصوى لدرجة الحرارة من تلك المنطقة على حد سواء الكفوف وحساب الاختلافات درجة الحرارة.لإجراء التقييم التالي، كشف العصب الوسيط على كلا الجانبين كما هو موضح من قبل. تبدأ بوضع الفئران على ظهرها ووضع القطب فقط هو مبين في الجلد. الأقطاب الأرضية على فخذ الجرذ والأقطاب التحفيزية والتسجيلية، على الطرف العلوي الأيسر.وضع قطب تسجيل، على البطن العضلات ضعف فليكسور digitorum، وأقطاب التحفيز، تقريبا في العصب المتوسط. بدء عملية الاستحواذ مع سعة التحفيز من 10 ملليفولت وزيادته تدريجيا، في 10 خطوات millivolt حتى تصل إلى اثنين فولت. أثناء عملية الاستحواذ، تسجيل سعة التحفيز لأول إنثناء الأصابع المرئية.هذه هي عتبة التحفيز الحركي الحد الأدنى من سعة التحفيز، المطلوبة للحصول على إمكانية عمل العضلات المركبة، C.M.A.P.is عتبة التحفيز العصبي. وأخيراً، اختر ممثل C.M.A.P، استجابة لحافز سوبرماكسيمال وقياس المعلمات التالية، الكمون، السعة، والمدة.لتنفيذ تقييم قوة الإنثناء، أولاً تمرير حلقة خياطة الحرير خمسة أو ستة من خلال منطقة بالمار من كل forepaw واتركها مع خمسة سنتيمترات من الطول. ضع الفأر على ظهره تبدأ مع forepaw اليسار، وربط خط خياطة في هوك دينامومتر ومحاذاة forepaw مع دينامومتر، دون وضع الكثير من الضغط على هوك.عقد الأقطاب المحفزة، تقريبا في العصب المتوسط. ضبط سعة التحفيز إلى 1.5 فولت وسجل قوة فورية لمدة 30 ثانية. من المؤامرة التي تم الحصول عليها، قم بتحليل قيم القوة القصوى والدنيا واليعنية والمساحة تحت المنحنى.يتم إزالة راديات الكربي Flexor ، الذي يتم ازنه بالعصب المتوسط ، ثنائيًا ويزن في مقياس دقيق. فيما يتعلق ببعض النتائج التمثيلية، في اختبار المسك، فإن النسبة المئوية للفئران التي لديها استجابة إيجابية، هي الأعلى في مجموعة الشام ويزداد تدريجيا مع مرور الوقت، في الفئران من مجموعة الكسب غير المشروع العصبي. نتائج اختبار دبوس وخز أعلى، في مجموعة الشام بالمقارنة مع تلك التي من الكسب غير المشروع أو مجموعات الختان.سرعة الفئران في اختبار تشغيل السلم، هي الأعلى في مجموعة الشام، من الجرذ المقدمة إلى آفة مختبر الوسيط. بين أخف وزنا، والوقت لتشغيل سلم، يميل إلى الانخفاض مع مرور الوقت التكافؤ متوسط الانتعاش العصبي. على نحو مماثل لما لوحظ في اختبار تشغيل السلم، فإن الوقت الذي تستغرقه الفئران لتسلق الحبل، أقل شأناً في مجموعة الشام، مقارنة بالمجموعات التي يصاب فيها العصب الوسيط.سرعة الفئران، في هذا الاختبار، يزيد في الفئران، حيث يسمح العصب المتوسط لاسترداد. كما هو مبين في هذه الرسوم البيانية شريط، تحليل الفئران المشي، يميل إلى إظهار التغيرات في مورفولوجيا مطبوعات مخلب. وغالبا ما تكون هذه التغييرات أكثر وضوحا، في سحق الإصابات مما كانت عليه في الآفات العصبية القطاعية.يوضح هذا الرسم البياني أن الرسم البياني يبدو أنه أداة مفيدة للبحث عن اختلافات في درجات الحرارة بين الوصافات في أول 30 يومًا بعد الجراحة. هذه الاختلافات في درجة الحرارة هي أكثر وضوحا، في الفئران مع العصب المتوسط المصاب أكثر خطورة، كما هو الحال في تلك التي من مجموعة الختان. قوة مرنة الفئران يرتبط مباشرة، مع درجة من الانتعاش العصبي.يجري الأقرب إلى وضع طبيعي عندما الانتعاش هو أقصى، كما يمكن أن ينظر إليه في هذه الرسوم البيانية شريط مقارنة القوة، في كل من الكفوف في الختان ومجموعات الكسب غير المشروع العصبي. فيما يتعلق بـ"التصوير الإلكتروني للالكترونات"، يمكن ملاحظة أنماط مختلفة. A C.M الطبيعي، هو نموذجي من الفئران من مجموعة الشام.في حين C.M.A.P.is متعددة الphasic المرتبطة، مع درجة متغيرة من آفة العصب المتوسط، كما يحدث في سحق وفي مجموعات الكسب غير المشروع العصبي. في مجموعة الختان، لا توجد موجة C.M.A.P.The والمورفولوجيا من الشعاعات الكربي Flexor تعتمد على الانتعاش العصبي المتوسط. تظهر هاتان الصورتان هذه العضلات، في مجموعتي الشام والاستئصال.كما هو مبين في هذه الورقة، فإن العصب المتوسط الفئران نموذج مناسب للآفات العصبية المحيطية وإصلاح. تتوفر استراتيجيات متعددة موحدة لتقييم التعافي الحركي والحي. العديد من هذه غير الغازية، مما يسمح للتقييم اليومي.وأخيراً، يمكن أن تحاكي ظروف العلاج الطبيعي التجريبية الانتعاش في السياق السريري، مما يسهل اشتراط النتائج على الجنس البشري.

Research

JoVE Journal

Medicine

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

احتشاء عضلة القلب وتقييم نتائج وظيفية في الخنازير

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

طريقة معزولة<em&gt; فيفو السابقين</em&gt; الإرواء الرئة في الفئران نموذج: الدروس المستفادة من تطوير برنامج EVLP الجرذ

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Evaluating the Effectiveness of Cancer Drug Sensitization In Vitro and In Vivo

Evaluating the Effectiveness of Cancer Drug Sensitization In Vitro and In Vivo

تقييم فعالية سرطان المخدرات توعية<em&gt; في المختبر</em&gt; و<em&gt; في فيفو</em

Due to the high level of heterogeneity and mutations inherent in human cancers, single agent therapies, or combination regimens which target the same ...

Utilizing Murine Inducible Telomerase Alleles in the Studies of Tissue Degeneration/Regeneration and Cancer

استخدام الفئران محرض التيلوميراز الأليلات في الدراسات التي أجريت على الأنسجة تنكس / التجديد والسرطان

Telomere dysfunction-induced loss of genome integrity and its associated DNA damage signaling and checkpoint responses are well-established drivers that ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

طريقة التسليم المباشر القطاعي البينية الكبد باستخدام نموذج الفأر الكبد نقيري المشبك

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Longitudinal In Vivo Imaging of the Cerebrovasculature: Relevance to CNS Diseases

Longitudinal In Vivo Imaging of the Cerebrovasculature: Relevance to CNS Diseases

طولي<em&gt; في فيفو</em&gt; التصوير من Cerebrovasculature: الأقرب للأمراض الجهاز العصبي المركزي

Remodeling of the brain vasculature is a common trait of brain pathologies. In vivo imaging techniques are fundamental to detect cerebrovascular ...

Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction (NeMO) in Female Small Rodents

Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction NeMO in Female Small Rodents

التي تقتصد في العصب منتصف الإحليلية إعاقة (نيمو) في أنثى القوارض الصغيرة

Partial bladder outlet obstruction (pBOO) has a high prevalence, causes significant patient burden, and immense health care costs. The most common animal ...

Cavernous Nerve Stimulation and Recording of Intracavernous Pressure in a Rat

تسجيل للضغط إينتراكافيرنوس في الفئران وتحفيز العصب الكهفي

The stimulation of the cavernous nerve (CN) and measurement of intracavernous pressure (ICP) have been used extensively to test and evaluate therapies for ...

Taking the Next Step: a Neural Coaptation Orthotopic Hind Limb Transplant Model to Maximize Functional Recovery in Rat

اتخاذ الخطوة التالية: تقويم العظام العصبية هند نموذج لزرع الأطراف لتعظيم الانتعاش الوظيفي في الفئران

Limb transplant in particular and vascularized composite allotransplant (VCA) in general have wide therapeutic promise that have been stymied by current ...

A Rat Lung Transplantation Model of Warm Ischemia/Reperfusion Injury: Optimizations to Improve Outcomes

نموذج زرع رئة الفئران لإصابة نقص التروية / التروية الدافئة: تحسينات لتحسين النتائج

From our experience with rat lung transplantation, we have found several areas for improvement. Information in the existing literature regarding methods ...