Name: functional and physiological methods of evaluating median nerve regeneration in the rat
Uploaded: 2020-04-18T14:00:00
Duration: 12 min 9 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Functional and Physiological Methods of Evaluating Median Nerve Regeneration in the Rat at JoVE.com

Diogo Casal erhielt ein Stipendium des Programms für medizinische Weiterbildung, das von Fundaéo Calouste Gulbenkian, Fundaéo Champalimaud, Ministério da Saéde e Fundaéo para a Ciéncia e Tecnologia, Portugal, gesponsert wird. Die Autoren sind Herrn Filipe Franco sehr dankbar für die anschauliche Zeichnung in Abbildung 1. Die Autoren danken der technischen Hilfe von Herrn Alberto Severino bei der Dreh- und Bearbeitung des Videos. Abschließend möchten die Autoren Frau Sara Marques für ihre Hilfe in allen logistischen Aspekten des Tiererwerbs und der Tierpflege danken.

Die Autoren haben nichts zu verraten.

Dieses Papier stellt ein Protokoll vor, um verschiedene Arten von MN-Läsionen und Reparaturen in der Ratte zu erstellen. Darüber hinaus zeigt es, wie die funktionelle Erholung dieses Nervs mit mehreren nichtinvasiven Verhaltenstests und physiologischen Messungen zu bewerten.
Insbesondere sind einige der in diesem Papier beschriebenen Funktionstests, nämlich der Leiterlauftest und der Seiltest, erheblich von der Bereitschaft der Ratte abhängig, die Aufgabe mit der Erwartung zu erfüllen, die Futterbelohnung51,52,53zu erhalten. Es sei darauf hingewiesen, daß bestimmte Rattenstämme in dieser Art von Tests51,52,53für die Ausbildung und die reproduzierbare Reproduzierbare Durchführung besser geeignet sind. Zum Beispiel schneiden Lewis Ratten in diesen Tests sowohl in der Trainingsphase als auch in der Folge51,52,53schlecht ab.
Rattengehäuse sollten im Einvernehmen mit ihrem natürlichen Sondierungsverhalten eine ausreichende Bewegungsfreiheit ermöglichen und versuchstieren nicht auch ermöglichen, sich mit einigen der in den Funktionstests vorhandenen Elemente vertraut zu machen19. Daher werden verschiedene Wohnformen gezeigt, die eine höhere Bewegungsfreiheit ermöglichen. Die großen Käfige werden mit Anreicherungselementen personalisiert, die später in den Funktionstests (z.B. Seile und Leitern) verwendet werden.
Diese anreichernden Elemente sowie die Käfige mit eingebauten Laufrädern und die einzelnen Trainingssphären bieten eine Postoperative Physiotherapie ähnlich der, die menschlichen Patienten am peripheren Nervensystem10angeboten wird.
Bezeichnenderweise, obwohl einige Autoren befürworten, die subkutanen Gewebe und Muskelfaszien stumpf oder durch sauberes Schneiden mit einer Zahl 15 Skalpell zu sezieren, wird die Verwendung von Thermokauterie bei der Sezieren dieser Strukturen empfohlen, um das Risiko von postoperativen Hämatomen zu minimieren.
Es sei darauf hingewiesen, dass zahlreiche Tests entwickelt wurden, um verschiedene Aspekte der peripheren Nervenreparatur bei der Ratte zu testen, nämlich axonale Regeneration, Zielrenervation und funktionelle Erholung, von denen einige außerhalb des Rahmens dieser Studie liegen29,54,55,56. Beispielsweise werden die kinematische Analyse29,36,55 und die histomorphometrische Bewertung29,36,57 häufig von mehreren Autoren verwendet. Darüber hinaus beinhalten mehrere dieser Tests Variationen, um die Effizienz und/oder Reproduzierbarkeit zu maximieren54. Beispielsweise kann die mechanische Algismetrie (d. h. die Bewertung von Reaktionen auf mechanische schmerzhafte Reize) qualitativ anhand eines bestimmten von Frey-Filaments, wie in diesem Papier beschrieben, oder halbquantitativ mit sukzessiv stärkeren von Frey-Filamenten oder sogar quantitativ mit elektronischen Geräten, die steigende Drücke anwenden, bis eine Entzugsreaktion beobachtetwird, 30,54.
In ähnlicher Weise, obwohl mehrere Autoren Verwenden von Walking-Track-Analyse, um Forelimb Nervenreparatur in der Ratte zu bewerten, andere Autoren argumentieren, dass einzelne MN-Läsionen häufig nicht reproduzierbare Veränderungen in Pfotenabdrücken10,58,59produzieren. Darüber hinaus haben einige erklärt, dass diese Veränderungen möglicherweise nicht proportional zur Muskelerholung10,60sein. Vor diesem Hintergrund haben einige Forscher die Verwendung von Walking-Track-Analyse in der Vorderpfote vor allem bei der Beurteilung der Erholung nach dem Zerkleinern neve Läsionen statt nach segmentalen Nerven rekonstruktion10,50,61befürwortet.
Der Grasping Test ist weit verbreitet, um die motorische Erholung der muskeln durch die MN16gesteuert27entlassen. Um die Homogenität und Reproduzierbarkeit der mit diesem Test gewonnenen Daten zu gewährleisten, wird die Anwendung des Greiftests unter Verwendung der von Bertelli et al.16 vorgeschlagenen bewährten Methodik empfohlen. Das aktuelle Protokoll unterscheidet sich jedoch dadurch, dass es die kontralaterale Pfote nicht routinemäßig immobilisiert, um übermäßigen Stress zu vermeiden11,27. Es sollte auch beachtet werden, dass andere Autoren, nach dem Immobilisieren der unverletzten Pfote, den Greiftest mit einem Dynamometer oder einer Skala27,56quantitativ bewerten. Diese quantitative Bewertung kann jedoch durch die Stärke beeinflusst werden, die der Forscher auf den Schwanz der Ratte anwendet26. Darüber hinaus ist es schwierig, zwischen der Kraft, die von den digitalen Flexormuskeln erzeugt wird (ausschließlich durch das MN in der Ratte und dem Objekt des Grasping Test9)erzeugten Festigkeit von der Festigkeit der Handgelenkflexoren zu unterscheiden, zu denen auch der Flexor carpi ulnaris gehört, der seine Innervation vom Ulnarnerv9,10,27erhält. Um zu versuchen, diese potenziellen Verzerrungen zu umgehen, verwendet dieses Protokoll eine Ordinalskala ähnlich der Medical Research Council Scale, die häufig verwendet wird, um Muskelkraft beim Menschen zu gradieren10,11,62. Alternativ haben andere Autoren eine detaillierte Bewertung des Greifens mittels Videoanalyse und einem videobasierten Bewertungssystem11,63beschrieben.
Ein potenzieller Nachteil der Verwendung des MN im Vergleich zum Ischiasnerv ist, dass eine größere Menge an Informationen über den letzteren Nerv zur Verfügung steht. Dies wiederum kann den Vergleich der mit dem MN erhaltenen Daten mit denen früherer experimenteller Arbeiten erschweren46,48,64. Zusätzlich macht die kleinere Größe des MN im Vergleich zum8Ischiasnerv chirurgische Manipulation enerther 8,12,27,56,65.
Im Gegensatz zur in diesem Papier beschriebenen Methodik kann die Elektroneuromyographie-Auswertung mit transkutanen Monopolelektroden durchgeführt werden, die im Arm und in den Narregionen51platziert sind. Obwohl diese Methode weniger invasiv ist, birgt sie das Risiko einer möglichen Verwechslung aufgrund der Möglichkeit einer Kostimulation des Ulnarnervs im Armbereich9,51.
Die meisten Autoren sind sich einig, dass nicht alle Tests, die in der Ratte verwendet werden, konkordante Ergebnisse liefern, da die periphere Nervenreparatur von einer komplexen Reihe von Faktoren abhängt, die Neuronenüberleben, axonale Dehnung und Beschnitt, Synaptogenese, erfolgreiche Rückeroberung der denervierten Sinnesorgane und Motoreinheiten sowie die Hirnplastizität7,10,50,66,67umfassen.
Schließlich ist anzumerken, dass ein wesentlicher Vorbehalt der Nagetiermodelle darin besteht, dass die peripheren Nerven der Ratte viel näher an ihren Endorganen liegen und viel kleinere Querschnittsbereiche aufweisen als die homologen menschlichen Strukturen. Dieser Größenunterschied garantiert jedoch schnellere experimentelle Daten bei Nagetieren, und bessere Gesamtergebnisse bei Ratten im Vergleich zum Menschen sind zu erwarten68. Tatsächlich warnen mehrere Autoren, dass beim Versuch, experimentelle Daten, die bei der peripheren Nervenreparatur mit Nagetieren erhalten wurden, auf Menschen extrapolieren muss, Vorsicht walten muss7,69. Primatenmodelle gelten als vergleichbarer70. Dennoch ist ihre Verwendung mit ärgerlichen ethischen, logistischen und Budgetzwängen verbunden71.
Obwohl der Ischiasnerv der am häufigsten verwendete Nerv in der peripheren Nervenforschung ist, bietet die Ratte MN mehrere Vorteile. Beispielsweise sind MN-Läsionen mit einer geringeren Inzidenz von Gelenkkontrakturen und Automutilierung der betroffenen Pfote11,12,16,56verbunden. Bezeichnenderweise betrifft die Autotomie nach der ischiasischen Nerventransektion 11–70% der Ratten. Dies kann aktuelle Auswertungen wie den Ischiasindex unmöglich machen14. Dies wiederum macht die Schätzung der Anzahl der Tiere, die erforderlich sind, um eine bestimmte statistische Leistung zu erhalten, umständlich15.
Da der MN kürzer als der Ischiasnerv ist, wird die Nervenerholung früher beobachtet58,72,73,74,75,76. Darüber hinaus ist das MN nicht von Muskelmassen bedeckt, was seine Zerlegung technisch einfacher macht als die des Ischiasnervs16. Zusätzlich hat der MN einen parallelen Pfad zum Ulnarnerv im Arm. Daher kann der Ulnarnerv leicht als Nerventransplantat zur Reparatur von MN-Verletzungen verwendet werden. Schließlich treten beim Menschen die meisten peripheren Nervenläsionen in der oberen Extremität auf, was die Verwendung dieses Nervs bei der Ratte77,78weiter unterstützt.
Vermutlich sind Nagetiere die Versuchstiere, die am häufigsten im Bereich der peripheren Nervenreparatur48,79verwendet werden. Wie gezeigt, ist die Ratte MN ein praktisches Modell der peripheren Nervenläsion und Reparatur. Tatsächlich gibt es mehrere standardisierte Strategien zur Beurteilung der motorischen und sensorischen Erholung, was einen einfacheren Vergleich der Ergebnisse36,46,60,80,81,82ermöglicht. Viele dieser Methoden sind nicht invasiv und ermöglichen eine tägliche Bewertung.
Darüber hinaus gehört die Physiotherapie zum Standard der Versorgung von Patienten, die sich von peripheren Nervenverletzungen erholen. Wie in diesem Papier gezeigt, gibt es mehrere Strategien, um eine postoperative4physiotherapieähnliche Umgebung für Ratten zu bieten, die MN-Verletzungen 4,5. Daher ist dieses Modell besonders geeignet, um das klinische Szenario zu replizieren, was die Extrapolation der Ergebnisse auf die menschliche Spezies12,27,48,56,58,83erleichtert.
Wie in diesem Artikel gezeigt, stehen mehrere standardisierte Strategien zur Verfügung, um die motorische und sensorische Rückgewinnung im MN-Modell der Ratte zu bewerten. Die meisten davon sind nichtinvasive Verfahren, die eine häufige Bewertung ermöglichen. Da die meisten peripheren Nervenläsionen bei den menschlichen Spezies in der oberen Extremität auftreten, können die erwähnten experimentellen Physiotherapie-Einstellungen die Genesung im klinischen Kontext treffender nachahmen. Vermutlich kann dies die Extrapolation der Ergebnisse auf die menschliche Spezies erleichtern und die Verwendung dieses Nervs bei der Ratte weiter validieren.

Periphere Nervenläsionen treten regelmäßig als Folge von Trauma, Infektion, Vaskulitis, Autoimmunität, Malignität und/oder Strahlentherapie1,2auf. Leider stellt die periphere Nervenreparatur weiterhin klinisch unvorhersehbare und häufig enttäuschende Ergebnisse3,4dar. Es besteht ein breiter Konsens darüber, daß noch erhebliche Grundlagen- und Übersetzungsforschung erforderlich ist, um die Aussicht der Betroffenen zu verbessern4,5,6,7.
Die Ratte MN weist große Ähnlichkeiten mit denen von Menschen8,9 ( Abbildung1). Dieser Ausstoß aus dem Brachialplexus im Axillary-Bereich senkt sich in den medialen Aspekt des Arms, erreicht den Ellenbogen und verzweigt sich auf die Mehrheit der Muskeln im ventralen Unterteil des Unterarms. Das MN erreicht die Hand, wo es die Thenarmuskeln und die ersten beiden lumbricalen Muskeln sowie einen Teil der Handhaut der Ratte9 (Abbildung 1) innerviert.
Mit der Ratte MN ist es möglich, periphere Nervenläsionen beim Menschen angemessen zu replizieren10,11,12. Dieser Nerv hat mehrere potenzielle Forschungsvorteile im Vergleich zum üblicherweise verwendeten Ischiasnerv. Da sich das MN im Vorderglied von Ratten befindet (ähnlich wie die menschlichen oberen Gliedmaßen), kann es experimentell mit einem viel geringeren Einfluss auf das Wohlbefinden der Ratte geschädigt werden, verglichen mit dem Ischiasnerv, der einen wesentlichen Teil der Beckenglied13innerviert. Zusätzlich treten beim Menschen die meisten klinischen Läsionen in der oberen Extremität auf, was dem Vorderglied der Ratte10,11,12,14,15,16entspricht.
Dieses Papier zeigt, wie man verschiedene Arten von MN-Läsionen in der Ratte produziert. Darüber hinaus werden verschiedene Möglichkeiten zur Simulation der postoperativen Physiotherapie vorgestellt. Schließlich werden Tests zur Bewertung der funktionellen Wiederherstellung des MN beschrieben. Es stehen mehrere standardisierte Strategien zur Verfügung, um die motorische und sensorische Erholung mit einem MN-Modell der peripheren Nervenläsion und -reparatur zu bewerten, was einen einfachen Vergleich der Ergebnisse ermöglicht. Das MN-Modell eignet sich besonders, um das klinische Szenario zu replizieren und die Extrapolation der Ergebnisse auf die menschliche Spezies zu erleichtern.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetaminophen</td>
			<td>Amazon</td>
			<td></td>
			<td>https://www.amazon.com/Childrens-Tylenol-grape-flavor-ages/dp/B0051VVVZG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acland clamps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>00398 V</td>
			<td>http://www.merciansurgical.com/aclandclamps.pdf</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acland Single Clamps B-1V (Pair)</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>396</td>
			<td>http://www.merciansurgical.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biogel Surgical Gloves</td>
			<td>Medex Supply</td>
			<td>30465</td>
			<td>https://www.medexsupply.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSL Analysis</td>
			<td>BIOPAC Systems</td>
			<td></td>
			<td>https://www.biopac.com/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castroviejo needle holders</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12565-14</td>
			<td>http://s-and-t.ne</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clamp applicator</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>CAF-4</td>
			<td>http://www.merciansurgical.com/acland-clamps.pdf</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Constante voltage stimulator</td>
			<td>BIOPAC Systems</td>
			<td>STM200</td>
			<td>https://www.biopac.com/product/constant-voltage-stimulator-unipolar-pulse/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cutasept skin disinfectant</td>
			<td>Bode Chemie</td>
			<td></td>
			<td>http://www.productcatalogue.bode-chemie.com/products/skin/cutasept_f.php</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dafilon 10-0</td>
			<td></td>
			<td>G1118099</td>
			<td>http://www.bbraun.com/cps/rde/xchg/bbraun-com/hs.xsl/products.html?prid=PRID00000816</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Derf Needle Holders 12 cm TC</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>703DE12</td>
			<td>http://www.merciansurgical.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dry heat sterilizer</td>
			<td>Quirumed</td>
			<td>2432</td>
			<td>http://www.quirumed.com/pt/material-de-esterilizac-o/esterilizadores</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dynamometer</td>
			<td>SAUTER</td>
			<td>FH5</td>
			<td>https://www.sauter.eu/shop/en/measuring-instruments/force-measurement/FH-S/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electroneuromiography setup</td>
			<td>BIOPAC Systems</td>
			<td>MP36</td>
			<td>https://www.biopac.com/product/biopac-student-lab-basic-systems/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethilon 5-0</td>
			<td></td>
			<td>W1618</td>
			<td>http://www.farlamedical.co.uk/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FLIR Software</td>
			<td>FLIR</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graeffe forceps 0.8 mm tips curved</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11052-10</td>
			<td>http://www.finescience.de</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graph paper</td>
			<td>Ambar</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat Lamp HL-1</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>727562</td>
			<td>https://www.harvardapparatus.com/webapp/wcs/stores/servlet/haisku3_10001_11051_39108_-1_HAI_ProductDetail_N_37610_37611_37613</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin Sodium Solution (Heparin LEO 10000IU/ml)</td>
			<td>Universal Drugstore</td>
			<td></td>
			<td>http://www.universaldrugstore.com/medications/Heparin+LEO/10000IU%2Fml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High-Temperature Cautery</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>AA03</td>
			<td>http://www.boviemedical.com/products_aaroncauteries_high.asp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Homeothermic Blanket System with Flexible Probe</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>507220F</td>
			<td>https://www.harvardapparatus.com/webapp/wcs/stores/servlet/haisku3_10001_11051_39108_-1_HAI_ProductDetail_N_37610_37611_37613</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infrared camera</td>
			<td>FLIR</td>
			<td>E6</td>
			<td>http://www.flir.eu/instruments/e6-wifi/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Instrapac - Adson Toothed Forceps (Extra Fine)</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>7973</td>
			<td>http://www.millermedicalsupplies.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Scissors 11.5 cm Curves EASY-CUT</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>EA7613-11</td>
			<td>http://www.merciansurgical.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine hydrochloride/xylazine hydrochloride solution</td>
			<td>Sigma- Aldrich</td>
			<td>K113</td>
			<td>https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/k113?lang=pt&#38;region=PT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lacri-lube Eye Ointment 5g</td>
			<td>Express Chemist</td>
			<td>LAC101F</td>
			<td>http://www.expresschemist.co.uk/lacri-lube-eye-ointment-5g.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mayo Scissors 14 cm Straight Chamfered Blades EASY-CUT</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>EA7652-14</td>
			<td>http://www.merciansurgical.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam</td>
			<td>Recropharma</td>
			<td>Mobic</td>
			<td>https://www.recropharma.com/product-pipeline/meloxicam</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methylene Blue solution</td>
			<td>Sigma- Aldrich</td>
			<td></td>
			<td>https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Jewellers Forceps 11 cm straight 00108</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>JF-5</td>
			<td>http://www.merciansurgical.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Jewellers Forceps 11cm angulated 00109</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>JFA-5b</td>
			<td>http://www.merciansurgical.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro retractor</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>RS-6540</td>
			<td>http://www.finescience.de</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Scissors Round Handles 15 cm Straight</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>67</td>
			<td>http://www.merciansurgical.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-vessel dilators 11 cm 0.3 mm tips 00124</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>D-5a.2</td>
			<td>http://www.merciansurgical.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Monosyn 5-0</td>
			<td></td>
			<td>15423BR</td>
			<td>http://www.mcfarlanemedical.com.au/15423BR/SUTURE-MONOSYN-5_or_0-16MM-70CM-(C0023423)-BOX_or_36/pd.php</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal saline for irrigation</td>
			<td>Hospira, Inc.</td>
			<td>0409-6138-22</td>
			<td>http://www.hospira.com/en/search?q=sodium+chloride+irrigation%2C+usp&#38;fq=contentType%3AProducts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating microscope</td>
			<td>Leica Surgical Microsystems</td>
			<td></td>
			<td>http://www.leica-microsystems.com/products/surgical-microscopes/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Skin Skribe Surgical Skin Marker</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>31456</td>
			<td>https://www.mooremedical.com/index.cfm?/Skin-Skribe-Surgical-Skin-Marker/&#38;PG=CTL&#38;CS=HOM&#38;FN=ProductDetail&#38;PID=1740&#38;spx=1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Snacks</td>
			<td>Versele-Laga</td>
			<td>Complete Crock-Berry</td>
			<td>http://www.versele-laga.com/en/complete/products/complete-crock-berry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight mosquito forcep</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>91308-12</td>
			<td>http://www.finescience.de</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical drapes</td>
			<td>Barrier</td>
			<td>800430</td>
			<td>http://www.molnlycke.com/surgical-drapes/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veet Sensitive Skin Hair Removal Cream Aloe Vera and Vitamin E 100 ml</td>
			<td>Veet</td>
			<td></td>
			<td>http://www.veet.co.uk/products/creams/creams/veet-hair-removal-cream-sensitive-skin/</td>
		</tr>
	</tbody>
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functional and physiological methods of evaluating median nerve regeneration in the rat

Das Hauptziel dieser Untersuchung ist es, zu zeigen, wie verschiedene Arten von Mediannerven (MN) Läsionen in der Ratte zu erstellen und zu reparieren. Darüber hinaus werden verschiedene Methoden zur Simulation der postoperativen Physiotherapie vorgestellt. Mehrere standardisierte Strategien werden verwendet, um die motorische und sensorische Erholung mit einem MN-Modell der peripheren Nervenläsion und -reparatur zu bewerten, was einen einfachen Vergleich der Ergebnisse ermöglicht. Mehrere Optionen sind enthalten, um Ratten, die MN-Verletzungen erlitten haben, eine postoperative physiotherapeutische Umgebung zur Verfügung zu stellen. Schließlich bietet das Papier eine Methode zur Bewertung der Erholung des MN mit mehreren nichtinvasiven Tests (z. B. Greifprüfung, Nadelstichtest, Leiterstufen-Walking-Test, Seilklettertest und Walking-Track-Analyse) und physiologischen Messungen (Infrarot-Thermographie, Elektroneneuromyographie, Flexionsfestigkeitsauswertung und Flexor-Carpi-Radialis Muskelgewichtsbestimmung). Daher scheint dieses Modell besonders geeignet, ein klinisches Szenario zu replizieren, was die Extrapolation der Ergebnisse auf die menschliche Spezies erleichtert.
Obwohl der Ischiasnerv der am meisten untersuchte Nerv in der peripheren Nervenforschung ist, bietet die Analyse der Ratte MN verschiedene Vorteile. So gibt es beispielsweise eine geringere Inzidenz von Gelenkkontrakturen und Automutilierung der betroffenen Gliedmaße in MN-Läsionsstudien. Darüber hinaus ist das MN nicht von Muskelmassen bedeckt, was seine Zerlegung einfacher macht als die des Ischiasnervs. Darüber hinaus wird die MN-Erholung früher beobachtet, da der MN kürzer ist als der Ischiasnerv. Außerdem hat der MN einen parallelen Pfad zum Ulnarnerv im Arm. Daher kann der Ulnarnerv leicht als Nerventransplantat zur Reparatur von MN-Verletzungen verwendet werden. Schließlich befindet sich das MN bei Ratten im Vorderglied, ähnlich dem menschlichen oberen Glied; beim Menschen ist die obere Extremität der Ort der meisten peripheren Nervenläsionen.

Insgesamt 34 Ratten wurden nach dem Zufallsprinzip in folgende Gruppen eingeteilt: Schein (n = 17), Exzision (n = 17) und Nerve Graft (n = 10) für die Operation. Alle Ratten überlebten die Operation und die postoperative Periode ereignislos. Eine Woche nach der Operation und für die folgenden 100 Tage wurden alle Tiere einmal pro Woche den oben beschriebenen Funktionstests unterzogen. Die repräsentativen Ergebnisse jedes dieser Tests werden im Folgenden beschrieben.
Grasping-Test
Der Prozentsatz der Ratten mit einer positiven Reaktion im Greiftest war für die Sham-Gruppe am höchsten. Dieser Wert stieg im Laufe der Zeit bei Ratten aus den Gruppen Crush und Nerve Graft allmählich an (Abbildung 3).
Pin Prick Test
Ratten aus der Sham-Gruppe hatten die besten Werte im kumulativen Nadelstichtest im Vergleich zu Ratten aus der Nerve Graft-Gruppe. Beide hatten bessere Ergebnisse als die Ratten in der Exzisionsgruppe (Abbildung 4).
Leiterlauftest
Die Geschwindigkeit der Ratten im Leiterlauftest war in der Sham-Gruppe am höchsten als bei den Ratten, die der MN-Läsion unterzogen wurden. Bei letzteren verringerte sich die Zeit für den Betrieb der Leiter im Laufe der Zeit, parallel zur MN-Erholung(Abbildung 5).
Seilprüfung
Wie beim Leiterlauftest war die Zeit, die die Ratten brauchten, um das Seil zu erklimmen, in der Sham-Gruppe kürzer als in den Gruppen, in denen die MN verletzt wurde. Die Geschwindigkeit der Ratten in diesem Test erhöhte sich, als die MN sich erholen durfte (Abbildung 6).
Walking Track Analyse
Die Analyse von Wanderwegen zeigte tendenziell Veränderungen in der Morphologie der Pfotenabdrücke (Abbildung 7). Diese Veränderungen waren bei zerquetschenden Verletzungen oft stärker ausgeprägt als bei segmentalen Nervenläsionen50.
Infrarot-Thermographie
Die Thermographie war nützlich, um Temperaturunterschiede zwischen den Vorpaws in den ersten 30 Tagen nach der Operation zu untersuchen. Die Temperaturunterschiede waren bei Ratten mit schwerer verletzten MN stärker zu beobachten, z. B. bei Ratten aus der Exzisionsgruppe (Abbildung 8 und Abbildung 9).
Elektroneuromyographie
Tabelle 1 fasst die biologische Bedeutung der elektroneneuromyographischen Messungen zusammen und liefert repräsentative Ergebnisse für die verschiedenen Versuchsgruppen. Verschiedene Muster wurden mit der Elektroeuromyographie beobachtet. Ein normaler CMAP war typisch für eine Ratte aus der Sham-Gruppe, während ein polyphasischer CMAP mit einem variablen Läsionsgrad des MN assoziiert war, wie in der Crush und in den Nerve Graft-Gruppen (Abbildung 10). Sham In der Excision-Gruppe wurden keine CMAPs beobachtet.
Handgelenk Flexion Stärke
Da die Handgelenkbeugung hauptsächlich vom MN abhängt, wurde dieser Test zur Bewertung der motorischen Erholung im Gebiet dieses Nervs verwendet. Die Biegefestigkeit des Handgelenks war der Normalität am nächsten, als die Erholung maximal war (Abbildung 11).
Muskelgewicht und Morphologie
Das Gewicht und die Morphologie des Flexor carpis radialis Muskels waren abhängig von der MN-Erholung, da dieser Muskel ausschließlich durch die MN9,10innerviert wird. So wurden Normalgewicht und Morphologie in der Sham-Gruppe beobachtet. Ein Gewichtsverlust und Muskeltrophism wurde in den Crush, Nerve Graft, und Excision Gruppen beobachtet (Abbildung 12).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59767/59767fig01.jpg"> Abbildung 1: Schematische Darstellung der Anatomie des Mediannervs der Ratte. (1) Ursprung und Beendigung des Mediannervs im Rattenhirn (grüner Bereich = primärer Motorbereich; blauer Bereich = primärer Sinnesbereich). (2) Querteil des Rückenmarks auf C7-Segmentebene; (3) Axillärnerv; (4) Muskel-Skelett-Nerven; (5) Radialnerv; (6) Mediannerv; (7) Ulnarnerv; (8) Medialer Kutanzweig des Arms; (9) Medialer Kutanzweig des Unterarms; (10) Axillary Arterie; (11) Brachialarterie; (12) Medianarterie; (13) Oberflächliche radiale Arterie; (14) Ulnararterie; (15) Motorzweig des Mediannervs zum Pronatortermuskel; (16) Motorzweig des Mediannervs zum Flexor carpis radialis Muskel; (17) Motorzweig des Mediannervs zum Flexor digitorum superficialis Muskel; (18) Motorzweig des Mediannervs zum Flexor digitorum profundus Muskel; (19) Sensorischer Zweig des Mediannervs zur Thenarregion; (20) Gemeinsame Palmarterie des ersten interossischen Raumes; (21) Radiale palmar digitale Arterie der ersten Ziffer; (22) Motorzweig des Mediannervs zu den Thenarmuskeln; (23) Palmar Arterienbogen; (24) Radial palmar digitaler Nerv der ersten Ziffer; (25) Ulnar palmar digitaler Nerv der ersten Ziffer; (26) Gemeinsame Palmarterie des dritten interossischen Raumes; (27) Motorzweige der Terminaldivisionen des Mediannervs zu den ersten drei lumbricalen Muskeln; (28) Ulnar palmar digitale Nerven der zweiten, dritten und vierten Ziffer; (29) Ulnar palmar digitale Arterien auf die vierte und fünfte Stelle; (30) Radiale palmar digitale Nerven der zweiten, dritten und vierten Ziffer; (31) Radiale palmar digitale Arterie der fünften Stelle; (32) Hautgebiet des Mediannervs in der Vorderpfote (blau schattierte Region). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59767/59767fig01large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59767/59767fig02.jpg"> Abbildung 2: Foto des rechten Vorderbeins der Ratte, das die chirurgische Anatomie des Mediannervs in den Arm- und Achselbereichen zeigt. Cr, kranial; Ich, medial <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59767/59767fig02large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59767/59767fig03.jpg"> Abbildung 3: Prozentsatz der Ratten mit einem positiven Greiftest in der verschiedenen Versuchsgruppe über einen Zeitraum von 100 Tagen nach der Operation. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59767/59767fig03large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59767/59767fig04.jpg"> Abbildung 4: Nociception-Auswertung mit kumulativen Pin-Prick-Testergebnissen in der operierten Vorpaw normalisiert auf die kontralaterale Pfote in den verschiedenen experimentellen Gruppen. Vertikale Balken stellen 95 % Konfidenzintervalle dar. Horizontale Linien im oberen Teil der Abbildung zeigen statistisch signifikante Unterschiede zwischen experimentellen Gruppen, ***p<0.001. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59767/59767fig04large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59767/59767fig05.jpg"> Abbildung 5: Durchschnittliche Geschwindigkeit im Leiterlauftest in den verschiedenen Versuchsgruppen. Vertikale Balken stellen 95 % Konfidenzintervalle dar. Sternchen im oberen Teil der Abbildung zeigen statistisch signifikante Unterschiede zwischen den Gruppen, *p<0.001. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59767/59767fig05large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59767/59767fig06.jpg"> Abbildung 6: Durchschnittliche Klettergeschwindigkeit im Seiltest in den Schein- und Exzisionsgruppen. Vertikale Balken stellen 95 % Konfidenzintervalle dar. Sternchen im oberen Teil der Abbildung zeigen statistisch signifikante Unterschiede zwischen den Gruppen, *p<0.05; **p<0.01. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59767/59767fig06large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59767/59767fig07.jpg"> Abbildung 7: Walking-Track-Parameter in den verschiedenen experimentellen Gruppen. Die Werte an der operierten Gliedmaße werden als Prozentsätze der mittels der normalisierten Mittel zur kontralateralen Extremität ausgedrückt. (A) Stance-Faktor; (B) Drucklänge; (C) Fingerstreufaktor; (D) Zwischenfingerstreufaktor; (E) Schrittlänge; (F) Basis der Unterstützung. Vertikale Balken stellen 95 % Konfidenzintervalle dar. Horizontale Linien im oberen Teil der Abbildung zeigen statistisch signifikante Unterschiede zwischen experimentellen Gruppen an. D30, D60, D90 = 30, 60 und 90 Tage nach der Operation, *p<0.05; **p<0.01; p<0.001. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59767/59767fig07large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59767/59767fig08.jpg"> Abbildung 8: Mittlere Rinnswerttemperaturdifferenz, die durch Infrarotthermographie erfasst wird. Die Box-Plots stellen den Temperaturunterschied zwischen dem Palmar-Bereich des Mediannervs auf der operierten Seite (rechts) und der kontralateralen Seite (links) in den Gruppen Schein (n = 17) und Exzision (n = 17) *p<0,05 dar; **p<0.01. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59767/59767fig08large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 9" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59767/59767fig09.jpg"> Abbildung 9: Typisches Infrarot-Thermographiemuster eines Tieres aus der Exzisionsgruppe in den ersten 45 Tagen nach der Operation. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59767/59767fig09large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 10" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59767/59767fig10.jpg"> Abbildung 10: Typische Muster von Compound Muscle Action Potentials (CMAPs) von einem Tier aus den Gruppen Sham und Nerve Graft 90 Tage nach der Operation. Bitte klicken Sie <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59767/59767fig10large.jpg" target="_blank">hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 11" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59767/59767fig11.jpg"> Abbildung 11: Bewertung der Handgelenksflexionsfestigkeit an beiden Vorpaws 90 Tage postoperativ in verschiedenen Versuchsgruppen. Die Handgelenkflexionsfestigkeit wurde anhand des Bereichs unter der Kurve (AUC) über einen Zeitraum von 30 s und unter Verwendung supratetanischer Stimulation bewertet. Vertikale Linien bezeichnen 95% Konfidenzintervalle. Horizontale Linien im oberen Teil der Abbildung weisen auf statistisch signifikante Unterschiede zwischen Gruppen,*p<0,01 hervor. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59767/59767fig11large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 12" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59767/59767fig12.jpg"> Abbildung 12: Flexor carpi radialis Muskelgewicht und makroskopisches Aussehen 100 Tage nach der Operation. (A) Boxplots, die das normalisierte Flexor carpi radialis Muskelgewicht in verschiedenen Versuchsgruppen darstellen, **p<0.01; p<0.001. (B) Fotografien der Muskeln auf der rechten und linken Seite in den Versuchsgruppen Schein und Exzission. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59767/59767fig12large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>Parameter</td>
			<td>Parametersignifikus</td>
			<td>Scheingruppe</td>
			<td>Exzisionsgruppe</td>
			<td>NG-Gruppe</td>
		</tr>
<tr>
<td>Neurologische Stimulationsschwelle (%)</td>
			<td>Bewertung der Nervenregeneration, da eine minimale Anzahl von Nervenfasern erforderlich ist, um entweder einen CMAP oder eine sichtbare Muskelkontraktion zu erzeugen12
</td>
			<td>281,63 € 271,65</td>
			<td>5359,98 bei 3466,52</td>
			<td>2108,12 € 2115,13</td>
		</tr>
<tr>
<td>Motorstimulationsschwelle (%)</td>
			<td>Bewertung der Nervenregeneration, da eine minimale Anzahl von Nervenfasern erforderlich ist, um entweder einen CMAP oder eine sichtbare Muskelkontraktion zu erzeugen12
</td>
			<td>462,52 € 118,91</td>
			<td>1694,10 bei 503,24</td>
			<td>1249,50 bei 503,24</td>
		</tr>
<tr>
<td>Latenz (%)</td>
			<td>Beurteilung der Nervenleitungsgeschwindigkeit in den schnellsten Nervenfasern, d.h. den größten myelinierten Fasern44
</td>
			<td>113,55 € 25,04</td>
			<td>N/A</td>
			<td>132,80 bei 69,95</td>
		</tr>
<tr>
<td>Neuromuskuläre Transduktionsgeschwindigkeit (%)</td>
			<td>Beurteilung der Nervenleitungsgeschwindigkeit in den schnellsten Nervenfasern, d.h. den größten myelinierten Fasern44
</td>
			<td>92,01 € 20,88</td>
			<td>N/A</td>
			<td>91,30 € 26,51</td>
		</tr>
<tr>
<td>AMPlitude von CMAPs (%)</td>
			<td>Auswertung der Anzahl der wiederbeauferten Motoreinheiten34
</td>
			<td>110,63 € 45,66</td>
			<td>N/A</td>
			<td>41,60 € 24,84</td>
		</tr>
<tr>
<td>CMAPs-Dauer (%)</td>
			<td>Beurteilung der Synchronität der Muskelinnervation, die vom Grad der Muskelreinnervation und Myelinisierung der inneraufvierenden Motorfasern abhängt44,45
</td>
			<td>101,12 € 23,92</td>
			<td>N/A</td>
			<td>151,06 € 54,52</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="5">
NG, Nerventransplantat CMAPs, zusammengesetzte Muskel-Wirkungspotenzial. N/A, nicht anwendbar Alle Parameter werden als Prozentsätze der durchschnittlichen kontralateralen Werte ausgedrückt. Numerische Variablen werden als durchschnittliche Standardabweichung ausgedrückt.</td>
		</tr>
</tbody></table>Tabelle 1: Elektroneneuromyographische Bewertung am Ende des Experiments.

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Functional and Physiological Methods of Evaluating Median Nerve Regeneration in the Rat

Präsentiert wird ein Protokoll, um verschiedene Arten von Mediannerven (MN) Läsionen und Reparatur in der Ratte zu produzieren. Darüber hinaus zeigt das Protokoll, wie die funktionelle Erholung des Nervs anhand mehrerer nichtinvasiver Verhaltenstests und physiologischer Messungen bewertet werden kann.

Funktionelle und physiologische Methoden zur Beurteilung der medianen Nervenregeneration in der Ratte

The main goal of this investigation is to show how to create and repair different types of median nerve (MN) lesions in the rat. Moreover, different ...

Mit dem Mediannerv der Ratte ist es möglich, periphere Nervenläsionen beim Menschen angemessen zu replizieren. Klinisch treten die meisten dieser Läsionen auf, in der oberen Extremität, die die Verwendung dieses experimentellen Modells unterstützt. In diesem Beitrag zeigen wir, wie man verschiedene Arten von medianen Nervenläsionen in der Ratte produziert.Darüber hinaus werden wir veranschaulichen, wie die funktionelle Wiederherstellung dieses Nervs mit mehreren Tests zu bewerten. Der Mediannerv stammt aus den Rückenmarkssegmenten C6 bis T1. Der Mediannerv ist grün hervorgehoben. In diesem Video werden chirurgische Vorhänge nicht zu Demonstrationszwecken verwendet.Bitte fügen Sie während der Operation einen Vorhang bei. Die Haut im medialen Aspekt des rechten Arms und der Brustbereich ist bis zur tiefen Faszienebene eingeschnitten. Blutgefäße werden sorgfältig geligiert.Als nächstes wird die Brachialfaszie sorgfältig geschnitten, wobei darauf geachtet wird, die Gefäß- und Nervenstrukturen im medialen Aspekt des Arms nicht zu beschädigen. Eine Schere öffnet sich unverblümt darunter, die terminale Einfügung des Hauptmuskels pectoralis, um diesen Muskel zu necken, weg von der zugrunde liegenden Axillary Arterie und Vene, sowie von den Endzweigen des Brachialplexus. Das Einsetzen von pectoralis Hauptmuskel, wird dann mit einem elektrischen Kauter geteilt.Der brusttoralis kleinere Muskel wird dann ausgesetzt und geschnitten. Der mediale Nerv wird dann unverblümt von den Brachialgefäßen und vom Ulnarnerv bis zum Ellenbogenbereich seziert. Es ist nun möglich, die verschiedenen Endzweige des Brachialplexus zu beobachten, nämlich den Median, den Ulnar, den Radial, den Axillary und die Musculocutaneous Nerven.Mit dem Median können exponierte und isolierte verschiedene mechanische Verletzungen induziert werden. Eine Scheingruppe kann erstellt werden, indem nur der Mediannerv sezierte. In der Brechgruppe wird der Mediannerv komprimiert, indem mikrochirurgische Zangen für 15 Sekunden verwendet werden.Die Exzisionsgruppe ergibt sich aus der Entfernung eines 10 Millimeter langen Segments des Mediannervs. Der proximale Stumpf des Mediannervs wird mit dem 8-0 Nylon-Nähte, um axonales Wachstum zu verhindern. Alternativ ist es möglich, das ausgeschnittene Segment um 180 Grad zu drehen und als autologes Nerventransplantat zu verwenden.In diesem Fall werden die proximalen und distalen Stümpfe des Abschnitts im Mediennerv mit 10-0 Nylonstichen an das Nerventransplantat genäht. Physiotherapie ist Teil des Standards der Versorgung von Patienten, die sich von peripheren Nervenverletzungen erholen. Es gibt mehrere Strategien, um Ratten postoperative Physiotherapie anzubieten, die medianen Nervenverletzungen unterzogen wurden.Es ist wichtig, junge Ratten zu wählen und ihnen vor der Operation den Kontakt mit den Physiotherapieinstrumenten zu ermöglichen. Dadurch wird eine einfachere und schnellere Anpassung an die Übungseinstellungen sichergestellt. Darüber hinaus sollten die Physiotherapie-Instrumente den Ratten ein gewisses Maß an Freiheit ermöglichen und idealerweise feine Bewegungen mit den Vorpaws durchführen können.Es gibt mehrere Möglichkeiten, Physiotherapie durchzuführen. Beispielsweise können einzelne Kugeln verwendet werden. Legen Sie die Ratte in die Kugel und legen Sie sie dann in einen Raum mit wenigen Hindernissen.Lassen Sie es den Raum für eine halbe Stunde erkunden. Tun Sie dies einmal täglich. Ratten können auch in einzelnen Käfigen untergebracht werden.Mit eingebauten Laufrädern. Auf diese Weise können Ratten trainieren, so viel sie wollen und wann immer sie es wollen. Eine andere Möglichkeit ist die Aufnahme, die Ratten in Gruppen in größeren Käfigen.Personalisieren Sie die Käfige mit Ledern, Seilen, Laufrädern und anderen Umweltanreicherungselementen. Diese ermöglichen ihnen eine ausreichende Bewegungsfreiheit, in Übereinstimmung mit ihrem natürlichen Sondierungsverhalten und ermöglichen es den Ratten, sich mit einigen der vorhandenen Elemente in den Funktionstests vertraut zu machen. Bevor Sie die Funktionstests durchführen, machen Sie die Ratten mit den Nahrungsbehandelten vertraut, die Sie als positive Verstärkung verwendet haben.Führen Sie die Tests am Abend durch, wenn die Ratten natürlich aktiver sind. Beginnen Sie mit einem Grasping-Test. Legen Sie die Ratte auf das Gitter und heben Sie sie durch ihren Schwanz, so dass sie das Gitter greifen.Wenn die Ratte in der Lage ist, das Gitter zu greifen, mit ähnlicher Stärke mit beiden Vorpaws. Es bedeutet, dass der Mediannerv funktioniert und der Grasping-Test als positiv betrachtet wird. Wenn er das Gitter nicht mit der verletzten Pfote greifen kann, gilt der Grasping-Test als negativ.Für den Pin-Prick-Test, legen Sie die Ratte auf der Plattform und warten Sie ein paar Minuten, bis explorative und große Pflegeaktivitäten nachlassen. Beginnen Sie, wenn die Ratte stationär ist und auf den Vorpaws steht. Mit Hilfe des Spiegels, legen Sie die Von Frey Haare durch das Netz, um den palmar Aspekt der Vorpaw zu poke.Wiederholen Sie dies fünfmal auf jedem Vorderpaw, alternativ, warten Sie ein paar Sekunden nach jeder Auswertung. Notieren Sie die Rückzugsantwort wie folgt, Null für keine Entzugsreaktion, wenn die Ratte langsam die Pfote aus dem Filament entfernt und zwei, wenn die Ratte schnell auf den Reiz reagiert und die Pfote entfernt oder die Pfote leckt. Legen Sie die Ratte an der Unterseite der Leiter und berühren Sie sanft den Schwanz der Ratte.Starten Sie den Timer, sobald die Ratte zu Fuß beginnt, und stoppen Sie ihn, sobald ihre Schnarbe den Eingang der Boxen überqueren. Zeichnen Sie die Zeit auf, und wiederholen Sie den Test dreimal. Legen Sie die Ratte an den Boden des Seils und überreden Sie sie, sie zu klettern, indem Sie sanft ihren Schwanz berühren.Halten Sie den Test gültig, wenn das Tier nicht zögert während der Aufgabe oder hört auf zu klettern. Starten Sie den Timer, sobald das Tier das Klettern initiiert, und stoppen Sie ihn, sobald die Schnarbe der Ratte den Eingang der Plattform überquert. Geben Sie der Ratte einen Snack nach der Durchführung, die Aufgaben richtig und lassen Sie es, einige Minuten Ruhe, bevor Sie es wiederholen.Legen Sie ein Stück Graphpapier auf den Flurboden. Dann greifen Sie die Ratte an ihrem Schwanz und lassen Sie sie die Malbürste halten, in Methylenblau imprägniert. Platzieren Sie es am Eingang des Korridors, damit er in den Kasten geht.Entfernen Sie das Graphenpapier aus dem Flurboden und wiederholen Sie die Tests, bis Sie einen guten, repräsentativen Eindruck von beiden Vorpaws erhalten. Wählen Sie aus den erhaltenen Drucken einen mit einem guten Druck von aufeinanderfolgenden Vorpaws aus und messen Sie die folgenden Parameter. Print-Länge, Finger-Spread, Zwischenfinger-Spread und Stance-Faktor.Messen Sie schließlich den Abstand zwischen dem zweiten Finger von zwei aufeinanderfolgenden Drucken, der Schrittlänge. Um die thermographische Auswertung durchzuführen, legen Sie ein Stück doppelten Seitenkleber auf den Schwamm. Legen Sie die Ratte darauf und kleben Sie die Vorpaws wie gezeigt.Warten Sie eine Minute, um den Wärmeaustausch vom Umgang mit den Pfoten der Ratte abzuleiten. Schnappen Sie sich die Kamera in einem Winkel von 90 Grad und etwa 30 Zentimeter von den Ratten entfernt. Machen Sie zwei Akquisitionen.Zuerst, ein Ganzkörper-Thermogramm, dann, Annäherung der Kamera an den Oberkörper der Ratte, machen die zweite. Aus dem erhaltenen Thermogramm finden wir eine Interessensregion, die dem Palmarbereich der Vorpaws entspricht. Messen Sie die mittleren, minimalen und maximalen Temperaturwerte dieses Bereichs auf beiden Pfoten und berechnen Sie die Temperaturunterschiede.Um die folgende Auswertung durchzuführen, setzen Sie den Mediannerv auf beiden Seiten wie zuvor erläutert aus. Beginnen Sie, indem Sie die Ratte auf den Rücken legen und legen Sie die Elektrode gerade in der Haut gezeigt. Die Bodenelektroden am Oberschenkel der Ratte und die Stimulations- und Aufnahmeelektroden am linken oberen Teil.Legen Sie eine Aufnahmeelektrode auf den Flexor digitorum sublimis Muskelbauch, und die Stimulation elektroden, etwa in den Mediannerv. Beginnen Sie die Erfassung mit einer Stimulus-Amplitude von 10 Millivolt und erhöhen Sie sie schrittweise in 10 Millivolt-Schritten bis zu zwei Volt. Registrieren Sie während der Erfassung die Stimulus-Amplitude für die erste sichtbare Fingerbeugung.Das ist die Motorstimulationsschwelle. Die minimale Stimulus-Amplitude, die erforderlich ist, um ein zusammengesetztes Muskelaktionspotenzial zu erhalten, C.M.A.P.is eine neurologische Stimulationsschwelle. Wählen Sie schließlich eine repräsentative C.M.A.P als Reaktion auf einen Supramaximal-Stimulus aus und messen Sie die folgenden Parameter, Latenz, Amplitude und Dauer.Um die Flexion Strength Evaluation durchzuführen, durchlaufen Sie zunächst eine fünf oder sechs Seidennahtschleife durch den Palmarbereich jedes Vorpaws und lassen Sie ihn mit fünf Zentimetern Länge. Positionieren Sie die Ratte auf dem Rücken. Beginnen Sie mit der linken Vorderpfote, haken Sie die Nahtlinie in den Dynamometerhaken und richten Sie den Vorderpfomit mit dem Dynamometer aus, ohne den Haken zu stark zu belasten.Halten Sie die Stimulierenden Elektroden etwa im Mediannerv. Stellen Sie die Stimulus-Amplitude auf 1,5 Volt ein und nehmen Sie die Sofortige Kraft 30 Sekunden lang auf. Analysieren Sie aus dem erhaltenen Diagramm die maximalen, minimalen und mittleren Kraftwerte sowie die Fläche unter der Kurve.Der Flexor carpi radialis, der durch den Mediannerv innerviert wird, wird bilateral entfernt und in einer Präzisionsskala gewogen. In Bezug auf einige repräsentative Ergebnisse ist im Grasping-Test der Prozentsatz der Ratten mit einer positiven Reaktion in der Sham-Gruppe am höchsten und nimmt im Laufe der Zeit allmählich zu, bei Ratten aus der Nerve Graft-Gruppe. Pin Prick Testergebnisse sind höher, in der Sham-Gruppe im Vergleich zu denen der Graft oder der Exzisionsgruppen.Rattengeschwindigkeit im Ladder Running-Test ist in der Sham-Gruppe am höchsten als die der Ratte, die der medialen Laborläsion unterzogen wird. Unter den leichteren, die Zeit, um die Leiter laufen, neigt dazu, im Laufe der Zeit Paring Median Nervenerholung zu verringern. Analog zu dem, was im Ladder Running Test beobachtet wird, ist die Zeit, die Ratten nehmen, um das Seil zu erklimmen, in der Sham-Gruppe schlechter als in den Gruppen, in denen der Mediannerv verletzt ist.Rattengeschwindigkeit, in diesem Test, erhöht sich bei den Ratten, in denen ein Mediannerv sich erholen darf. Wie in diesen Balkendiagrammen gezeigt, zeigt die Analyse von Wanderratten tendenziell Veränderungen in der Morphologie von Pfotenabdrücken. Diese Veränderungen sind oft ausgeprägter, bei erdrückenden Verletzungen als bei segmentalen Nervenläsionen.Diese Grafik zeigt, dass die Thermographie ein nützliches Werkzeug zu sein scheint, um nach Temperaturunterschieden zwischen den Vorderpfoten in den ersten 30 Tagen nach der Operation zu suchen. Diese Temperaturunterschiede sind deutlicher, bei Ratten mit dem schwerer verletzten Mediannerv, wie bei ratten aus der Exzisionsgruppe. Die Flexionsstärke der Ratte ist direkt mit dem Grad der Nervenerholung korreliert.Am nächsten an der Normalität, wenn die Erholung maximal ist, wie in diesen Balkendiagrammen gesehen werden kann, die Stärke vergleichen, sowohl in den Pfoten in Excision als auch in den Nerve Graft Gruppen. In Bezug auf die Elektrotonmyographie können verschiedene Muster beobachtet werden. Ein normales C.M.A.P.Potential, ist typisch für eine Ratte aus der Sham-Gruppe.Während die polyphasische C.M.A.P.is assoziiert, mit einem variablen Grad der Läsion des Mediannervs, wie es in der Zerkleinerung und in den Nerve Graft Gruppen geschieht. In der Exzisionsgruppe gibt es keine C.M.A.P.Die Welle und Morphologie der Flexor carpi radialis sind abhängig von der medialen Nervenregeneration. Diese beiden Bilder zeigen diese Muskeln, in den Schein- und Exzisionsgruppen.Wie in diesem Papier gezeigt, ist der Ratten-Mediannerv ein praktisches Modell der peripheren Nervenläsion und -reparatur. Zur Beurteilung der Motor- und Sensor-Recovery stehen mehrere standardisierte Strategien zur Verfügung. Viele davon sind nicht-invasiv und ermöglichen eine tägliche Bewertung.Schließlich können experimentelle Physiotherapie-Einstellungen, kann Die Genesung im klinischen Kontext simulieren, die Bestimmung der Ergebnisse für die menschliche Spezies zu erleichtern.

Research

JoVE Journal

Medicine

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Forschung

Medizin

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