Name: identification of transcription factor regulators using medium-throughput screening of arrayed libraries and a dual-luciferase-based reporter
Uploaded: 2020-03-27T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Identification of Transcription Factor Regulators using Medium-Throughput Screening of Arrayed Libraries and a Dual-Luciferase-Based Reporter at JoVE.com

Мы хотели бы поблагодарить Эмили Нортон и Микаэлан Куччарре-Стулигсу за помощь в подготовке векторов шРНК. Эта работа была частично поддержана Сьюзен Г. Komen Карьера Катализатор Грант, который присуждается JML (#CCR17477184).

ПРИМЕЧАНИЕ: Схематическое резюме этого протокола показано на рисунке 1.
1. Подготовка лентивирусной векторной библиотеки
ПРИМЕЧАНИЕ: На продемонстрированный экран использовался массивная библиотека shRNA, приобретенная в качестве глицерола ...

В этом исследовании мы демонстрируем подход к скринингу средней пропускной связи массивных вирусных библиотек в сочетании с анализом транскрипционного репортера на основе двойной люциферазы, который может быть использован для выявления и тестирования новых регуляторов транскрипци?...

Цель этого ассеса заключается в использовании вирусных библиотек для выявления регуляторов транскрипционных факторов относительно быстрым и недорогим способом. Аномальная транскрипционная активность связана с раком и метастазами1,,2,,3,,44,5,,6,поэтому таргетинг факторов транскрипции в раковых клетках является перспективным терапевтическим подходом. Тем не менее, транскрипционные факторы часто трудно ориентировать фармакологически7, и многие из них необходимы для нормальной клеточной функции во взрослых тканях88,9,,10. Ориентация на рак связанных путей, которые аберрантно активировать транскрипционные факторы для привода болезни является более осуществимым подходом с потенциалом иметь менее серьезные побочные эффекты. Коммерческая доступность массивных лентивирных и ретровирусных рнквирных РНК, CRISPR/CAS9, cDNA или ORF библиотек позволяет исследователям проверить важность многочисленных генов в одном эксперименте. Тем не менее, требуется надежное считывание для измененной транскрипционной активности.
Здесь мы описываем использование двойной люциферазы основе транскрипционного репортера анализ и массивные лентивирные библиотеки для выявления белков, которые регулируют транскрипционные факторы в раковых клетках. В этом исследовании, shRNAs, которые нацелены на рак связанных генов поставляются в клетки рака млекопитающих через лентивирусной трансдукции и клетки выбираются для стабильной интеграции с использованием пуромицина. Клетки следующий трансфицируется с репортером построить, что выражает светлячок luciferase управляется промоутер омрачается промоутер конкретных транскрипции фактор, который исследуется и контрольная конструкция, которая выражает Ренилья luciferase от constitutively активный промоутер, который не реагирует на транскрипции фактор исследуется. Мы демонстрируем этот подход с экраном доказательства концепции для регуляторов YAP и ТАЗ, критических эффекторов вниз по течению пути Гиппо8,10,11. Аномальная активность ЯП и ТАЗ способствует нескольким шагам метастатического каскада11 и наблюдается у многих видов рака11,,12,,13. Однако, как YAP и ТАЗ становятся аберантно активированы в некоторых раковых клетках еще не полностью понял. YAP и ТАЗ не связывают ДНК, но вместо этого набираются в промоутеров другими факторами транскрипции. Члены семейства факторов транскрипции TEA (TEAD) являются основными обязательными партнерами для YAP и ТАЗ, и имеют решающее значение для большинства функций, зависящих от YAP и ТАЗ. Наш репортер конструирует светлячок luciferase от YAP/ТАЗ-TEAD-реакционный промоутер и предыдущие изучения показали что оно верно обнаруживает изменения в YAP-TEAD и транскрипционной деятельности TA'-TEAD2,14,15.
Наш подход является быстрым, средней пропускной способностью и не требует скрининга, автоматизированных роботов или глубокого секвенирования объединенных библиотек. Затраты являются относительно низкими, и есть множество коммерчески доступных библиотек на выбор. Необходимое оборудование и реагенты также являются относительно стандартными в большинстве лабораторий. Он может быть использован для проверки для регуляторов практически любого фактора транскрипции, если luciferase основе репортер существует или генерируется. Мы используем этот подход для скрининга shRNAs в раковых клетках, но любая клеточная линия, которая может быть трансфицирована с разумной эффективностью, может быть использована с любым типом массивной библиотеки.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>2.0 ml 96-well deep well polypropylene plate</td>
			<td>USA Scientific</td>
			<td>1896-2000</td>
			<td>For bacterial mini-prep</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin - 2.50%</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15090-046</td>
			<td>Component of trypsin-EDTA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 well flat bottom white assay plate</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3922</td>
			<td>For dual-luciferase assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ampicillin - 100 mg/ml</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>45-10835242001-EA</td>
			<td>For bacterial mini-prep</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bacto-tryptone - powder</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>95039</td>
			<td>Component of LB broth</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dual-luciferase reporter assay system, which include LAR II reagent (reagent A), Stop &#38; Glo substrate (reagent B substrate) and Stop &#38; Glo buffer (reagent B buffer) - Kit</td>
			<td>Promega</td>
			<td>E1960</td>
			<td>For dual-luciferase assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s phosphate buffered saline w/o calcium, magnesium and phenol red - 9.6 g/L</td>
			<td>Himedia</td>
			<td>TS1006</td>
			<td>For PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA - 0.5 M</td>
			<td>VWR</td>
			<td>97061-406</td>
			<td>Component of trypsin-EDTA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol - 100%</td>
			<td>Pharmco-AAPER</td>
			<td>111000200</td>
			<td>For bacterial mini-prep</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foetal Bovine Serum - 100%</td>
			<td>VWR</td>
			<td>97068-085</td>
			<td>Component of complete growth media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hexadimethrine bromide (Polybrene) - 8 mg/ml</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>45-H9268</td>
			<td>For virus infection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HyClone DMEM/High glucose - 4 mM L-Glutamine; 4500 mg/L glucose; sodium pyruvate</td>
			<td>GE Healthcare life sciences</td>
			<td>SH30243.01</td>
			<td>Component of complete growth media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>I3-P/i3 Multi-Mode Microplate/EA</td>
			<td>Molecular devices</td>
			<td></td>
			<td>For dual-luciferase assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine - 200 mM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25030-081</td>
			<td>Component of complete growth media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipofectamine 3000 (Transfection Reagent 2) - 100%</td>
			<td>Life technologies</td>
			<td>L3000008</td>
			<td>For transfections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Molecular Biology Water - 100%</td>
			<td>VWR</td>
			<td>02-0201-0500</td>
			<td>For dilution of shRNA vector for virus packaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl - powder</td>
			<td>BDH</td>
			<td>BDH9286</td>
			<td>Component of LB broth</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NanoDrop One Microvolume UV-Vis Spectrophotometer</td>
			<td>Thermo scientific</td>
			<td></td>
			<td>For measuring vector DNA concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opti-MEM (Transfection Buffer) - 100%</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>31985-062</td>
			<td>For transfections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin Streptomycin - 10,000 Unit/ml (Penicillin); 10,000 &#181;g/ml (Streptomycin)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td>Component of complete growth media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PureLink Quick Plasmid Miniprep Kit - Kit</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>K210010</td>
			<td>For bacterial mini-prep</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puromycin - 2.5 mg/ml</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>45-P7255</td>
			<td>For antibiotic selection after infection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TC20 automated cell counter</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td></td>
			<td>For cell counting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>X-tremeGENE 9 DNA transfection reagent (Transfection Reagent 1) - 100%</td>
			<td>Roche</td>
			<td>6365787001</td>
			<td>For virus packaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yeast extract - powder</td>
			<td>VWR</td>
			<td>J850</td>
			<td>Component of LB broth</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P3000 (Transfection Reagent 3) - 100%</td>
			<td>Life technologies</td>
			<td>L3000008</td>
			<td>For transfections</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

identification of transcription factor regulators using medium-throughput screening of arrayed libraries and a dual-luciferase-based reporter

Транскрипционные факторы могут изменить экспрессию многочисленных генов-мишеней, которые влияют на различные процессы вниз по течению, что делает их хорошими мишенями для противораковой терапии. Однако, непосредственно ориентации транскрипционных факторов часто трудно и может вызвать неблагоприятные побочные эффекты, если транскрипционный фактор необходим в одной или нескольких взрослых тканей. Выявление восходящих регуляторов, которые аберантно активируют транскрипционные факторы в раковых клетках, предлагает более осуществимую альтернативу, особенно если эти белки легко смягчены. Здесь мы описываем протокол, который может быть использован для объединения массивных среднесрочных лентивирных библиотек и двухлюциферазы основе транскрипционного репортера асссы для выявления новых регуляторов транскрипционных факторов в раковых клетках. Наш подход предлагает быстрый, простой и недорогой способ тестирования сотен генов в одном эксперименте. Чтобы продемонстрировать использование этого подхода, мы выполнили экран массивной лентивирусной библиотеки РНК, содержащей несколько регуляторов ассоциированного белка Yes (YAP) и транскрипционного со-активатора с pd'-связывающим мотивом (ТАЗ), двумя транскрипционными коактиваторами, которые являются эффекторами вниз по течению пути Гиппо. Однако этот подход можно было бы изменить для проверки для регуляторов практически любого фактора транскрипции или со-фактора, а также можно было бы использовать для проверки библиотек CRISPR/CAS9, cDNA или ORF.

Наша конструкция репортера YAP/TA'-TEAD (pGL3-5xMCAT (SV)-492,14,,15) содержит минимальный промоутер SV-49 с 5 повторами канонического связывающего элемента TEAD (MCAT)15 за рулем гена светлячком luciferase(рисунок 1). О?...

Watch this Scientific Journal Video about Identification of Transcription Factor Regulators using Medium-Throughput Screening of Arrayed Libraries and a Dual-Luciferase-Based Reporter at JoVE.com

Identification of Transcription Factor Regulators using Medium-Throughput Screening of Arrayed Libraries and a Dual-Luciferase-Based Reporter

Для выявления новых регуляторов транскрипционных факторов, мы разработали подход к экрану массивных лентивирных или ретровирусных рнки библиотек с помощью двойной люциферазы основе транскрипционного репортера ассс. Такой подход предлагает быстрый и относительно недорогой способ проверки сотен кандидатов в одном эксперименте.

Идентификация регуляторов транскрипционных факторов с использованием средне-пролимчатого скрининга архиерейных библиотек и репортера на основе двойной люциферазы

Transcription factors can alter the expression of numerous target genes that influence a variety of downstream processes making them good targets for ...

Этот протокол может быть использован для проверки массивных лентивирусных или ретровирусных библиотек анализа для выявления новых регуляторов транскрипционных факторов в раковых клетках. Основными преимуществами этой техники является то, что она является быстрой, средней пропускной способностью и недорогой, и что она использует оборудование и реагенты, широко доступные для большинства исследователей. Чтобы расширить и очистить каждый лентивирусный вектор в библиотеке, сначала добавьте 1,3 миллилитров бульона Luria, дополненного 100 микрограммами на миллилитр ампициллина в каждую колодец 96-ну глубокой пластины.Прививать каждую колодец двумя микролитерами глицеролов для ночной инкубации при 37 градусах По Цельсию и 225 оборотов в минуту. На следующий день, передача каждой культуры бактерий в отдельных 1,5 миллилитров микроцентрифуг трубки для центрифугации. Очистить каждый вектор соответствующим набором бактериального минипрепа в соответствии с инструкциями производителя.Для каждого вектора в подготовленной библиотеке, семена один колодец 24-хорошо пластины с 1 раз от 10 до пятого 293FT клеток и инкубировать клетки при 37 градусов по Цельсию и 5%углекислого газа в течение 24 часов. Для подготовки трансфектной смеси, которая будет создана для каждого вектора в библиотеке, сначала утелите каждый лентивирусный вектор до конечной концентрации 50 нанограмм на микролитер с нуклеазной водой. Перенесите пять микролитров каждого разбавления в отдельные скважины из 96-хорошо ПЦР пластины.Сделайте трансфекцию супер микс, смешивая 1,25 микролитера раз х трансфекции реагент один с 23,75 микролитров раз х предварительно раз нагревается трансфекции буфера. Инкубировать трансфекции супер смесь при комнатной температуре в течение пяти минут. Затем добавьте 125 нанограмм х psPAX2 и 125 нанограмм раз х VSVG в супер смесь с нежной пипетки.Немедленно aliquot супер смешивание в каждую трубку полосы PCR и используйте многоканальный пипетку для передачи 25 микролитров смеси в каждую колодец разбавленного вирусного вектора. После 20-минутной инкубации при комнатной температуре используйте многоканальный пипетку для переноса 30 микролитров каждой трансфекции смеси из каждой хорошо в соответствующий колодец из 293FT-клеток в ранее подготовленной 24-хорошой пластине. Инкубировать клетки в течение 24 часов, прежде чем заменить средний в каждой хорошо с 500 микролитров свежей полной среды роста еще 24-часовой инкубации в инкубаторе клеточной культуры.На следующий день используйте многоканальный пипетку для сбора вирусного супернатанта из каждой скважины и aliquot 220 микролитров каждого супернатанта в две скважины в новой пластине 96 скважин для создания массивируемой вирусной супернатантной пластины. Чтобы подготовить клетки A375 к инфекции, семя один раз от 10 до пятой клетки в 24-хорошо пластины в 0,5 миллилитров полного роста среды на колодец для каждого вирусного вектора в библиотеке. Включите дополнительный колодец, который не будет заражен, чтобы служить в качестве контроля для выбора наркотиков.После 24-часовой инкубации в инкубаторе клеточной культуры, оттепель замороженных массивных лентивирусных супернатант установлен на комнатную температуру, прежде чем заменить рост среды из каждой хорошо подготовленной пластины клеточной культуры с 200 микролитров роста среды дополняется 20 микрограмм на миллилитр полибрения. Используя многоканальный пипетку, перенесите 200 микролитров вирусного супернатанта с каждой 96 хорошо в каждую колодец 24-хорошо пластины. Верните клетки в инкубатор клеточной культуры на 24-48 часов.В конце инкубации замените среду в каждой из них 500 микролитров среды роста, дополненных пуромицином, и верните клетки в инкубатор клеточной культуры еще на 48 часов. После 48-часового отбора пуромицина, сортировать клетки на три или четыре группы, так что все скважины в одной группе имеют аналогичную плотность клеток и добавить 200 микролитров трипсина-ЭДТА к одному представителю хорошо из каждой группы для пятиминутной инкубации при 37 градусах по Цельсию. После того, как клетки отделились, нейтрализовать трипсина с 400 микролитров среднего роста дополняется пуромицин и подсчитать количество клеток из каждого трипсинизированного хорошо.Разбавить каждую часть клетки подвески в два раза от 10 до пятой клетки на миллилитр концентрации с ростом среды дополняется пуромицином и семян 500 микролитров клеток из каждого хорошо в том же положении хорошо в новой 24-хорошо пластины. После использования подсчетов от каждого представителя хорошо оценить количество клеток в каждой оставшейся хорошо в каждой группе, добавить соответствующий объем трипсина-ЭДТА к каждой хорошо для достижения один раз от 10 до шестой клетки на миллилитр концентрации. Во время трипсинизации используйте многоканальный пипетку, чтобы добавить 400 микролитров среды роста, дополненных пуромицином, к соответствующим скважинам в новой пластине из 24 скважин.После того, как клетки отсоединились, аккуратно смешайте содержимое каждой колодец и перенесите 100 микролитров каждой клеточной подвески на соответствующую хорошо в новой 24-хорошой пластине. Затем верните клетки в инкубатор культуры клеток в течение 24 часов. Для того чтобы transfect клетки с двойным-luciferase репортер строит, подготовляют смесь разбавления transfection как показано в таблице.Для подготовки репортер разбавления смеси, смешать объемы каждого реагента умножается на общее количество трансфекций плюс несколько дополнительных томов. Затем смешайте смесь разбавления трансфекции смесью разбавления репортера и инкубировать полученный раствор при комнатной температуре в течение 15 минут, чтобы произвести смесь трансфекции. Во время инкубации, промыть каждый колодец пластины клеточной культуры с 250 микролитров PBS и добавить 447 микролитров свежей полной среды роста к каждой хорошо.Затем используйте многоканальный пипетку для распределения 53 микролитров трансфектной смеси для каждого колодец пластины клеточной культуры. Поместите пластину при 37 градусах по Цельсию и 5%углекислом газе в течение 24 часов. Для измерения активности люциферазы разбавьте 5X пассивный буфер лиза из набора активности люциферазы при разбавлении разбавляемой водой и оттаив необходимые объемы буфера реагента А и реагента B из комплекта.Когда реагенты будут готовы, замените супернатант в каждом хорошо с 75 микролитров пассивного буфера лиза и инкубировать пластину в течение 30 минут при комнатной температуре с редким встряхивания. Во время инкубации разбавьте субстрат 50X реагент B из комплекта в концентрацию от одного до 50 с размороженным буфером реагента B. В конце инкубации добавьте 30 микролитров пассивного буфера лиза в четыре пустые контрольные скважины и перенесите 30 микролитров лизата из каждой скважины в дублирующие скважины 96-ну плоской нижней белой анализа пластины.Когда все лизат был поцаращен, используйте многоканальный пипетку, чтобы добавить 50 микролитров реагента А к каждой хорошо и прочитать сигнал светлячка люциферазы с считывателем пластины. Затем используйте многоканарновую пипетку, чтобы добавить 50 микролитров реагента B к каждому колодец и прочитать сигнал Renilla luciferase с считывателем пластин. Как и ожидалось, YAP2SA увеличивает активность светлячков люциферазы, но не активность рениллы люциферазы по сравнению с вектором контроля.В отличие от этого, YAP2SA S94A не увеличивает активность светлячков люциферазы. Важно отметить, что YAP2SA не изменяет активность минимальной конструкции промоутера, в котором отсутствуют обязательные элементы MCAT TEAD. В клетках, трансфицированных с yaP-ТАЗ-TEAD репортер построить, тандем YAP и ТАЗ короткие шпильки значительно снизили уровень светлячка люциферазы, но контроль короткий шпильки не ориентации контроля нет.В отличие от этого, в клетках, трансфицированных с минимальной конструкцией репортера, ЯП-ТАЗ короткие шпильки РНК не существенно изменить уровень светлячка люциферазы. Сигнал Renilla в каждой хорошо также не существенно изменены короткой шпильки не-целевой контроль или YAP-ТАЗ короткие шпильки РНК. Как и ожидалось, короткие ДНК, ориентированные на YAP и ТАЗ, SARC или PI3 kinase, значительно снижают активность YAP-ТАЗ-TEAD.Короткие РНК, нацеленные на банкоматы, CDH1, CSK, ERBB2 и гелсолин, увеличили нормализованный уровень люциферазы светлячков в соответствии с опубликованными исследованиями, показывающими, что эти белки были YAP и/или ТАЗ. Несмотря на установленные роли для ATR, CCNE2 и ERBB4 в других типах клеток, короткие РНК шпильки, нацеленные на эти гены, не существенно меняют нормализованные уровни люциферазы светлячков в клетках A375. После этого экрана, идентифицирование регуляторов должны быть проверены с помощью других считывания для их транскрипции фактор деятельности.Следует также подтвердить эффективный нокдаун выявленного регулятора. Не забудьте соблюдать осторожность и следовать рекомендациям по безопасности при работе с инфекционными лентивирусами, особенно если вирусы являются инфекционными для человека.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Sectioning Mammary Gland Whole Mounts for Lesion Identification

Разделение молочных желез всех мест для идентификации поражения

Normal mammary gland development may be altered by exposure to environmental toxicants and pharmaceutical products, excessive exposure to hormones, and ...

Flow Cytometry-based Drug Screening System for the Identification of Small Molecules That Promote Cellular Differentiation of Glioblastoma Stem Cells

Потока на основе цитометрии наркотиков скрининг системы для идентификации малых молекул, которые способствуют клеточной дифференцировки стволовых клеток глиобластомы

Glioblastoma (GBM) is the most common and most lethal primary brain tumor in adults, causing roughly 14,000 deaths each year in the U.S. alone. Median ...

Live Cell Imaging of the TGF-	&beta;/Smad3 Signaling Pathway In Vitro and In Vivo Using an Adenovirus Reporter System

Live Cell Imaging of the TGF-	ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â²/Smad3 Signaling Pathway In Vitro and In Vivo Using an Adenovirus Reporter System

Живой клетки изображений TGF-β/Smad3 сигнализируя Pathway In Vitro и In Vivo с помощью системы репортер аденовирус

Transforming Growth Factor &#946; (TGF-&#946;) signaling regulates many important functions required for cellular homeostasis and is commonly found ...

Analysis of Cancer Cell Invasion and Anti-metastatic Drug Screening Using Hydrogel Micro-chamber Array (HMCA)-based Plates

Analysis of Cancer Cell Invasion and Anti-metastatic Drug Screening Using Hydrogel Micro-chamber Array HMCA-based Plates

Анализ вторжения клеток рака и борьбы с метастатическим наркотиков Скрининг с использованием массива гидрогеля микро камеры (HMCA)-на основе плиты

Cancer metastasis is known to cause 90% of cancer lethality. Metastasis is a multistage process which initiates with the penetration/invasion of tumor ...

Isolation of Exosome-Enriched Extracellular Vesicles Carrying Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor from Embryonic Stem Cells

Выделение экзосомных внеклеточных везикул, несущих гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор, из эмбриональных стволовых клеток

Embryonic stem cells (ESCs) are pluripotent stem cells capable of self-renewal and differentiation into all types of embryonic cells. Like many other cell ...

Establishment and Characterization of Small Bowel Neuroendocrine Tumor Spheroids

Создание и характеристика малого кишечника нейроэндокринных опухолевых сфероидов

Small bowel neuroendocrine tumors (SBNETs) are rare cancers originating from enterochromaffin cells of the gut. Research in this field has been limited ...

Mapping the Structure-Function Relationships of Disordered Oncogenic Transcription Factors Using Transcriptomic Analysis

Отображение структурно-функциональных отношений неупорядоченных онкогенных факторов транскрипции с использованием транскриптомного анализа

Many cancers are characterized by chromosomal translocations which result in the expression of oncogenic fusion transcription factors. Typically, these ...

Identification of EGFR and RAS Inhibitors using Caenorhabditis elegans

Identification of EGFR and RAS Inhibitors using Caenorhabditis elegans

Идентификация ингибиторов EGFR и RAS с использованием Caenorhabditis elegans

The changes in the plasma membrane localization of the epidermal growth factor receptor (EGFR) and its downstream effector RAS have been implicated in ...

Discovery of Metastatic Regulators using a Rapid and Quantitative Intravital Chick Chorioallantoic Membrane Model

Открытие метастатических регуляторов с использованием быстрой и количественной прижизальной модели хориоаллантоической мембраны цыпленка

Recent advances in cancer research has illustrated the highly complex nature of cancer metastasis. Multiple genes or genes networks have been found to be ...

A Rapid Screening Workflow to Identify Potential Combination Therapy for GBM using Patient-Derived Glioma Stem Cells

Быстрый процесс скрининга для определения потенциальной комбинированной терапии GBM с использованием стволовых клеток глиомы, полученных от пациента

The glioma stem cells (GSCs) are a small fraction of cancer cells which play essential roles in tumor initiation, angiogenesis, and drug resistance in ...