Name: taking the next step: a neural coaptation orthotopic hind limb transplant model to maximize functional recovery in rat
Uploaded: 2020-08-30T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Taking the Next Step: a Neural Coaptation Orthotopic Hind Limb Transplant Model to Maximize Functional Recovery in Rat at JoVE.com

この作品は、フランケル財団とノースウェスタン記念病院マコーミックグラント(オペレーション復元)によって資金提供されました。この出版物で報告された研究は、賞番号T32GM008152の下で国立衛生研究所の国立一般薬科学研究所によってサポートされました。この研究は、ノースウェスタン大学マイクロサージャストコアと行動フェノタイピングコアによって支えられていました。

すべての実験は、国立衛生研究所(NIH)の実験動物のケアと使用のためのガイドに従って行われ、ノースウェスタン大学動物ケアと使用委員会によって承認されました。具体的な手順は、プロトコル IS00001663 で実行されました。
注:2つのラット株、ルイスラットとアウグストコペンハーゲンxアイルランド(ACI)ラットが使用されました。動物は、免疫抑制のない同種移植(ACIか...

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	<li>Elliott, R. M., Tintle, S. M., Levin, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Upper+extremity+transplantation:+current+concepts+and+challenges+in+an+emerging+field.">Upper extremity transplantation: current concepts and challenges in an emerging field.</a> Current Reviews in Musculoskeletal Medicine. 7 (1), 83-88 (2014).</li><li>Petruzzo, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+International+Registry+on+Hand+and+Composite+Tissue+Transplantation.">The International Registry on Hand and Composite Tissue Transplantation.</a> Transplantation. 90 (12), 1590-1594 (2010).</li><li>Shapiro, R. I., Cerra, F. 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L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lessons+and+limits+of+mouse+models.">Lessons and limits of mouse models.</a> Cold Spring Harbor Perspectives in Medicine. 3 (12), 015495 (2013).</li><li>Sucher, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+hind+limb+transplantation:+a+new+composite+tissue+allotransplantation+model+using+nonsuture+supermicrosurgery.">Mouse hind limb transplantation: a new composite tissue allotransplantation model using nonsuture supermicrosurgery.</a> Transplantation. 90 (12), 1374-1380 (2010).</li><li>Tung, T. H., Mohanakumar, T., Mackinnon, S. 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四肢移植は、血管化成分同種移植(VCA)のより広範なカテゴリーの下で、まだ満たされていないとして広く適用可能な治療上の約束を有する。主な障害は、VCAと現在使用されている神経運動回復技術に特有の未解決の免疫学的問題にあります。新しい技術の開発は、柔軟で堅牢で再現性のある動物モデリングに依存します。
多くの動物モデルはVCAで確立されており、それぞ...

血管化複合同種移植(VCA)または複合組織同種移植(CTA)のより広範なカテゴリーの下での四肢移植は、まだその治療上の約束を果たしていない。1998年と1999年にケンタッキー州リヨン、フランス、ルイビルで初めてヒト手移植に成功して以来、厳選された患者1で世界中で100以上の上肢移植が行われてきた。より広い適用性は、実質的な免疫抑制および限られた機能的神経運動回復によって汚されている。現在の免疫抑制戦略は、日和見感染の77%の発生率に直面して急性拒絶反応の85%の発生率を生じる2。一方、手移植後の機能回復が起こる。平均腕肩と手の障害 (DASH) スコアは 71 から 43 に改善しますが、そのレベルの機能は障害2としてまだ資格があります。四肢移植の非生命保存の性質を考えると、現在の技術は、VCAの次のステップを踏むために動物モデルで洗練されなければなりません。
,12,13,141978年3月の初のラットモデルの四肢移植以来、VCA4の分野を進めるために多くの革新的な動物モデルが開発され、血管カフドアナストモーセを組み込んで手術時間,,5,5、6、異形性骨髄筋皮移植を行い、レシピエント動物77、8、9、10、11、および免疫学的アプローチを最小限に10,11抑える。,89ここで提示される直交右後肢中型移植のラットモデルは、現在のVCA制限の両方の側面を同時に調査するための堅牢で再現可能なモデルプラットフォームへの先行投資として、手縫い血管性アナストモーセや神経凝固などの細心の注意を払った時間テストされた微小外科的技術を強調しています:免疫抑制戦略と機能的神経運動回復。

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anesthesia machine</td>
			<td>Vet Equip</td>
			<td>911103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.5cc syringe</td>
			<td>Exel</td>
			<td>26018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18-gauge needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305196</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1cc syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>22-gauge needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305156</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24-gauge angiocatheter</td>
			<td>Sur-Vet</td>
			<td>SROX2419V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25-gauge needle</td>
			<td>Exel</td>
			<td>26403</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3 cc syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309657</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5cc syringe</td>
			<td>Exel</td>
			<td>26230</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>HC-600-1GAL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia induction chamber</td>
			<td>Vet Equip</td>
			<td>941443</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthetic gas scavenger system</td>
			<td>Vet Equip</td>
			<td>931401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bipolar electrocautery</td>
			<td>Aura</td>
			<td>26-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bitter Spray Mist</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>5553</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bone wax</td>
			<td>CP Medical</td>
			<td>CPB31A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Breathing circuit</td>
			<td>Vet Equip</td>
			<td>921413</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenophine</td>
			<td>Reckitt Benckiser</td>
			<td>12496075705</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castro-Viejos needle drivers</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-6416</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cordless rotary saw</td>
			<td>Dremel</td>
			<td>8050-N/18</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swab stick</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>23-400-101</td>
			<td>For hemostasis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DigiGait Appparatus and Software</td>
			<td>Mouse Specifics</td>
			<td>MSI-DIG, DIG-SOFT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont forceps (#4)</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-4972</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont forceps (#5)</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5035</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Enrofloxacin</td>
			<td>Norbrook</td>
			<td>ANADA 200-495</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FK-506</td>
			<td>Astellas</td>
			<td>301601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze</td>
			<td>Kendall</td>
			<td>1903</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>8044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gloves</td>
			<td>Microflex</td>
			<td>DGP-350-M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair clippers</td>
			<td>Oster</td>
			<td>078005-010-003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Handheld monopolar electrocautery</td>
			<td>Bovie</td>
			<td>AA00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hargreaves Apparatus</td>
			<td>Ugo Basile S.R.L. Gemonio, Italy</td>
			<td>37370</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Walgreens</td>
			<td>126987</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Fresenius Kabi</td>
			<td>42592K</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hot plate</td>
			<td>Corning</td>
			<td>PC-351</td>
			<td>For warming resusscitation fluid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>29405</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lactated ringers</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>2B2074</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large petri dish</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>FB0875713</td>
			<td>For donor graft while in chilled saline</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>49755</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>micro Collin Hartmann retractor</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro dissecting scissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5841</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microfibrillar collagen powder</td>
			<td>BD</td>
			<td>1010590</td>
			<td>For hemostasis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microvascular clips</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5420</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal saline</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>2F7124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opthalmic lube</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>IS4398</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rapmycin</td>
			<td>MedChem Express</td>
			<td>HY-10219</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small petri dish</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>FB0875713A</td>
			<td>For warmed resusscitation fluid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile drapes</td>
			<td>ProAdvantage</td>
			<td>N207100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical gown</td>
			<td>Cardinal Health</td>
			<td>9511</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical mask</td>
			<td>3M</td>
			<td>1805</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical microscope, optic model OPMIMD</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>169756</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical microscope, Universal S3</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>243188</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture 10-0 nylon</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>N2512</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture 5-0 vicryl</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>J213H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture 7-0 silk tie</td>
			<td>Teleflex</td>
			<td>103-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tape</td>
			<td>3M</td>
			<td>1530-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasonic instrument cleaner</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-9911</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vessel dilation forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5047</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

taking the next step: a neural coaptation orthotopic hind limb transplant model to maximize functional recovery in rat

特に、四肢移植および血管化複合同種移植(VCA)は、免疫抑制および機能性神経運動回復における現在の制限によって汚されてきた広い治療上の約束を有する。VCAのユニークな特徴を研究するために多くの動物モデルが開発されていますが、ここでは現在のVCA制限の両方の側面を同時に調査するように設計されたラットの直交性後肢移植の堅牢な再現性モデルを提示します:免疫抑制戦略と機能的神経運動回復。モデルの中核には、手縫いの血管性アナストモーセや大腿神経と坐骨神経の手縫い神経凝集などの細心の注意を払った、時間テストされた微小外科的技術へのコミットメントがあります。このアプローチは、リハビリテーション、日常活動の再開、および機能テストを可能にする長生き動物を可能にする耐久性のある四肢再建をもたらす。従来の免疫抑制剤の短期治療により、同種移植動物は移植後70日間生存し、同位移植動物は術後200日を超える長生きコントロールを提供する。神経学的機能回復の証拠は、手術後30日までに存在する。このモデルはVCAおよび神経再生に特有の免疫学的質問を尋問するための有用なプラットホームを提供するだけでなく、VCAのためにとりわけ合わせる新しい治療戦略のインビボのテストを可能にする。

生存と回復は、細心の注意を払った外科技術に依存します。血管のアナストモーゼと神経のアナストモーゼへの注意、ならびに上記のような骨の凝集は、このモデルの成功を最大化する重要である。手術設計と代表的な解剖学的結果を 図1に示す。
全体的な死亡率は免疫抑制戦略に依存しており、等移植された動物の大半は 図2</stron...

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Taking the Next Step: a Neural Coaptation Orthotopic Hind Limb Transplant Model to Maximize Functional Recovery in Rat

このプロトコルは、免疫学と機能回復の同時研究に向けた血管化複合同種移植(VCA)の堅牢で再現可能なモデルを提示します。手縫い血管アナストモーセと神経凝集を伴う右大腿後肢整形移植に細心の注意を払った技術に投資した時間は、機能的回復を研究する能力をもたらす。

次のステップを踏む:ラットの機能回復を最大化するための神経凝集整体交位後肢移植モデル

Limb transplant in particular and vascularized composite allotransplant (VCA) in general have wide therapeutic promise that have been stymied by current ...

このビデオでは、直交性右後肢、大腿中型移植ラットの実行方法について詳しく説明します。ドナーラット右後肢は、大腿中レベルで切断され、その後、氷の上に保存されます。レシピエントラット右後肢も中腿レベルで切断される。ドナーラットの四肢は、その後、レシピエントラットに取り付けられます。骨、動脈、静脈、神経、筋肉、皮膚系を再結合する方法について説明します。四肢移植は、より具体的には、血管化複合同種移植、VCA、広い治療上の約束を有する。しかし、それは現在、技術によって制限されています, 免疫抑制, そして、機能性神経運動回復不良.私たちのモデルは、手縫い血管吻合や神経凝集など、時間テストされた細心の注意を払った微小外科的技術を強調しています。私たちは1年以上でこれらの手術の200以上を行いました。最初のマイクロ外科医への最初の学習曲線がありますが、このビデオを使用して私たちの方法と専用の練習へのコミットを学ぶことによって、マイクロサージェントはこのモデルを習得することができます。すべての実験は、NIH国立衛生研究所の実験動物のケアと使用のためのガイドに従って行われ、ノースウェスタン大学動物ケアと使用委員会によって承認されました。具体的な手順は、プロトコル IS 00001663 で実行されました。手術時に体重が8~16週齢のラットを選ぶ。ラットの後肢の毛皮をトリミングする前に気化器を通して5%イモルランで全身麻酔を誘発する。2〜2.5%の間の麻酔を維持するために鼻コーンを使用して、下にヒーターを持つ手術台の上にラットを配置します。70%の擦過アルコールで無毛の皮膚を消毒し、滅菌ガーゼで外科分野を保護します。適切なマイクロ外科顕微鏡とここに示す微小手術器具を使用して、簡単にアクセスできる双極性および単極電気コーサリーと共に、解剖を開始する準備が整います。はさみを使用して、右後肢の周りを周回および皮膚切開します。りぎざりの折り目を、直ちに、歯の靱帯とほぼ同じレベルで開始し、周切開を完了するために横方向に後部を伸ばす。そして、切開の真下の筋肉層を露出させ、筋肉層からちょうど作成された近位皮膚フラップにつながる表面上皮管を解剖し、焼灼した。近位フラップを膝に対して下皮的に皮膜靱帯に反射し、遠位皮膚フラップを膝に対して下線で折る。ワイヤリトラクタまたはロールガーゼを使用して、フィールドを露出させます。ラットの脳の血管の解剖は人間に似ており、横から内側へ、神経、動脈、静脈が見られる。大腿神経を解剖し、可能であれば分岐に近いインジナル靭帯で鋭く分割する。分裂した神経を劣って引き込み、湿ったガーゼの下に覆われて安全に邪魔をし続ける。大腿動脈と静脈に注意を向けると、血管を直接扱う代わりに、4センチメートルの長さ7-0シルクのネクタイを使用して、外傷を負って引き込みます。今細心の注意を払うことは、あなたの最終的なアナストモティックな結果を向上させます.7-0シルクのネクタイで大腿骨の容器のすべての枝をリゲート。ネクタイの間で枝を分割します。分裂を必要とする動脈および静脈枝には、表面的な眼屈の回腸および筋肉の血管が含まれる。表面的なサーカムフレックス腸骨は通常最も大きく、人間のプロファンダ大腿骨と同様に深く潜るように見えるが、プロファンダはラットに存在しない。最も高い属性および伏在枝のような大腿血管のより遠位の枝は、通常分裂を必要としない。今、可能な限り、結び手靭帯に近い7-0シルクのネクタイを持つ大腿動脈をリゲートし、ネクタイ間で分割します。動脈と同様に、大腿静脈をリゲートして分ける。動脈と静脈の両方を劣った、安全に邪魔して、以前に覆われた大腿神経と一緒に湿ったガーゼの下で覆われた。腹側筋群を解剖し、発生する目に見える血管を焼灼するように注意する。止血症への注意は、後で再拡散中のレシピエント失血を最小限に抑えます。腹側筋群の深部では、坐骨神経の近位をその枝に識別し、鋭く分ける。3つの坐骨枝はすべて通常、目に見える、脛骨、腹膜およびsuralである。3つすべてがドナーの四肢に保存されるべきです。第4の皮枝は、典型的には、この解剖では見られない。細心の止まり止めで中腿レベルで残りの腹側と後筋群を分割終了します。筋肉を完全に分割するために、四肢の内側を引っ込める必要があるかもしれません。ハンドヘルドコードレスロータリーソーを使用して、シャフトの中に大腿骨の骨をトランセクトします。手足はドナーから解放されるようになりました。ドナーから四肢移植片を取り除いた後、シルクの結ばれた端を移植片側の大腿動脈および静脈切り株から切断し、それによって血管を再び開ける。24ゲージの血管カテーテルを移植片動脈の切り株に挿入し、5ミリリットルの氷冷正常生理食塩水で希釈した250の国際単位のヘパリンで移植片を洗い流し、開いた静脈から流れ出るのを注意深く見守る。ゆっくりと、約3分間、移植片を静かに洗い流します。過剰な強引な洗い流しは、内皮を損傷する可能性があります。移植まで氷バケツに入れ子にした冷たい生理食い皿に移植片を入れます。両側性乳房間術でドナーラットを安楽死させる。受付側の手術はドナー手術と同様に始まり、ラットを麻酔し、毛皮をトリミングし、皮膚のフラップを反射して、大腿神経、動脈、静脈を解剖して、うつねりの周切開を行う。そして、先に述べたように同じ分岐容器を連結する。しかし、この手術中、大腿神経はドナーよりも遠方に分割するが、可能であれば分岐に近い。大腿動脈と静脈を分裂して解放し、マイクロサージカルブルドッグクランプでそれぞれインギナル靭帯のレベルでそれらを補間する。前に説明したように手術を続け、必要に応じて四肢の内側を引き込みながら、太ももの腹側の筋肉を細心の注意を払って細心の止まりで大腿部の腹側の内腹筋を分割する。坐骨神経の近位を分岐点に識別して分割し、回転鋸を使用してシャフトの中間で大腿骨をトランセクトする。受け身の右後肢を取り除き、地元の動物管理および使用委員会のガイドラインに従って適切に処分してください。この段階では、鼻コーンを通してイオブルランを1〜1.5%に下げるのは非常に重要です。この痛みの少ない部分の間にあまりにも多くの麻酔は、ラットの死につながるでしょう。骨を一緒に凝集する時が過大な時間です。ハンドヘルドロータリーソーを使用して、ドナーとレシピエント大腿骨のカットエンドの両方からの不規則性を削ります。大腿骨内髄腔ロッドになる18ゲージ針のハブ端を切り落とします。骨を操作する前に、少量の骨ワックスを大腿骨の切り取り側の端に塗布して、リーミングプロセス中の骨髄出血を軽減する。18ゲージの針を髄腔内ロッドとして使用してドナーおよびレシピエント大腿骨をcoaptする。何らかの力が必要であるが、皮質を破壊する限り、どちらの骨もリームしないでください。必要に応じて、針を取り除き、両方の骨が針の上に滑らかにフィットするように、針を不適切な長さにトリミングし、針が骨の間に現れないようにします。ガーゼのパッドや小さな岩やドナーの手足の下に粘土をモデリングするなど、小さなサポートを配置して緊張を防ぐ。8~10の単純な中断5-0ポリグラクチン縫合糸で腹側筋群を再近似し、移植片が大腿骨針の周りを回転しないようにする。これは、アナストモーゼのための四肢の安定性を与えます.今、アナストモーセを開始します。より良い視覚化と虚血性再灌流傷害を減らすために、定期的に氷冷生理食糸で移植片および外科分野を灌漑する。ドナーとレシピエントの大腿動脈と吻合を、緊張とループの両方を避け、シンプルな中断された10-0ナイロン縫合糸を使用してエンドツーエンドの方法で整列させます。動脈は平均6本の縫合糸を必要とする。動脈と同様に、ドナーとレシピエント大腿静脈をエンドツーエンドの方法で吻合する。静脈は6〜8縫合糸を必要とする。寛大な冷たい生理学灌漑、非外傷性血管取扱技術、および血管の後退のための滞在縫合糸として役立つ長い尾を残すことは、効果的な微小外科的アナストモーセのための重要なツールである。両アナストモーゼに適量の止血セルロース粉末を置き、その後、静脈と動脈の近位微小外科的ブルドッグクランプを取り除く。両方のアナストモーゼが良好な愛臭と流れを検査します。綿棒を使用して静脈を優しく突き出し、両方のアナストモーゼで良好な止頭症がないか検査します。両方のアナストモーセが満足のいくものが確認されたら、残りの長い滞在縫合尾尾を他の部分に合わせてトリミングします。ラットを左横型の脱cubitus位置に再配置し、リベラルな電気焼灼を使用して、あらゆる再灌流筋肉出血の細心の注意を払って止血を行う。筋肉の止まりが保証されると、神経の筋肉の筋肉に注意が向きます。単純に中断された5-0ポリグラクチン縫合糸で坐骨神経の真下にある後筋群を再近似する。ぼろぼろに見える神経切り取り端をトリミングします。エピニューラル咬傷を目指す10-0ナイロン縫合糸で坐骨神経を再近似する。8〜10の単純な中断縫合糸は通常十分です。残りの後筋群を5-0ポリグラクチン縫合糸で再近似する。次に、4-0ポリグラクチン連続走行縫合糸で後頭皮膚を閉じます。ラットを位置を上に位置合わせし直し、10-0ナイロン縫合糸で大腿神経を再近似し、再び、エピニューラル咬傷に努める。2~3本の単純な中断縫合糸で十分です。残りの腹側皮膚を、後側の皮膚と同じ方法で閉じます。余分な縫合糸尾を避けます, 一度目を覚ますネズミに刺激することができます.動物が即時術後のウィンドウから出ると、彼らは神経運動回復のためにテストすることができます。ハーグリーブス試験は熱感覚をテストするために使用される。ラットを試験容器に入れ、20分間順応させた。装置ガラスがクリーンであることが確認され、熱源が調査員の指で働いているのが確認される。テストの前に、ラットが目を覚ましており、テストされた足が赤外線運動検出器の上に配置されていることを確認してください。強度レベル90で熱エネルギーを送信します。熱源から足を離れて移動する動物の時間遅延が記録されます。20 秒以内に動きが発生しない場合は、損傷を防ぐためにテストが中止されます。各動物の平均離脱待ち時間を計算する前に、最高値と最低値を除いて、試験された四肢ごとに5回の試験を得る。ここでは、漫画形式の操作的なデザインを描いています。ドナーとレシピエントラットの両方の右後肢は、坐骨断断面として中腿レベルで切断される。大腿動脈、静脈、神経、坐骨神経および大腿骨は、レシピエント手術で再接続されなければならない。このモデルは、免疫抑制と移植戦略の差動生存効果を示すために使用することができる。この技術により、長期生存が達成可能である。このモデルは感覚神経回復を調査するために使用することができ、これは術後4週間で明らかである可能性がある。運動機能は、歩行分析プラットフォームを使用して尋問することもできます。ここでは、進行図に示すように感覚と運動回復をプローブするために使用する良好な生存特性を持つラットモデルプラットフォームを発表しました。VCAのより広いカテゴリーの下での四肢移植は、血管化された成分同種移植が広く適用可能な治療上の約束を有していないまだ満たされていない。主な障害ライン現在の免疫抑制および神経運動回復技術。新しい技術の開発は、柔軟で堅牢で再現性の高い動物モデリングに依存します。このプラットフォームを使用して、研究者が四肢移植の複数のファセットを進めることができるようにしたいと考えています。あなたの次のステップで見て、幸運をありがとう。

Research

JoVE Journal

Medicine

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

同所性大動脈移植：慢性血管障害の発生研究のラットモデル

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) Research

A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation VCA Research

トランスレーショナル血管柄コンポジット同種移植（VCA）研究用に修正異豚後肢移植モデル

Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) such as hand and face transplants represent a viable treatment option for complex musculoskeletal trauma ...

Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model

ラット虚血皮膚創傷モデルの実証

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and ...

Functional Human Liver Preservation and Recovery by Means of Subnormothermic Machine Perfusion

Subnormothermicマシン灌流によって機能的なヒト肝臓保全と回復

There is currently a severe shortage of liver grafts available for transplantation.  Novel organ preservation techniques are needed to expand the pool of ...

Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse

マウスで同所後肢移植

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and ...

Heterotopic Renal Autotransplantation in a Porcine Model: A Step-by-Step Protocol

ブタモデルにおける異自家腎移植：ステップバイステップのプロトコル

Kidney transplantation is the treatment of choice for patients suffering from end-stage renal disease. It offers better life expectancy and higher quality ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

ラット肝臓肝門部クランプモデルを用いたダイレクトセグメント別肝臓内送達方法

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits

糖尿病性ウサギにおける後肢虚血の前臨床モデル

Peripheral vascular disease is a widespread clinical problem that affects millions of patients worldwide. A major consequence of peripheral vascular ...

A Cryoinjury Model to Study Myocardial Infarction in the Mouse

マウスの心筋梗塞を研究する凍結傷害モデル

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

ラット型異形肝移植モデルにおける動脈リコネクション後の合併症の減少

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...