Name: is my mouse pregnant? high-frequency ultrasound assessment
Uploaded: 2021-03-18T14:00:00
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이 프로토콜의 모든 단계는 건강의 국가 학회에 의해 간행된 실험실 동물의 배려 그리고 사용을 위한 지도를 따르고 뉴욕 대학 그로스만 의과 대학의 기관 동물 관리 및 사용 위원회에 의해 승인되었습니다.
1. 시간 제임신을 위한 마우스의 짝짓기
<ol><li>적절한 여성 마우스(보통 이종고테)를 케이지에 페어링하여 야간 짝짓기용 적절한 수컷 마우스(보통 이테로지고테)를 결?...

<ol>
	<li>Bogue, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+Phenome+Database:+an+integrative+database+and+analysis+suite+for+curated+empirical+phenotype+data+from+laboratory+mice.">Mouse Phenome Database: an integrative database and analysis suite for curated empirical phenotype data from laboratory mice.</a> Nucleic Acids Research. 46, 843-850 (2018).</li><li>Ito, R., Takahashi, T., Ito, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+mouse+models:+Application+to+human+diseases.">Humanized mouse models: Application to human diseases.</a> Journal of Cellular Physiology. 233 (5), 3723-3728 (2018).</li><li>Law, M., Shaw, D. 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L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+localization+of+nuclear+factor+of+activated+T+cells+c1-/-+mouse+embryos+by+ultrasound+biomicroscopy-Doppler+allows+genotype-phenotype+correlation.">Noninvasive localization of nuclear factor of activated T cells c1-/- mouse embryos by ultrasound biomicroscopy-Doppler allows genotype-phenotype correlation.</a> Journal of the American Society of Echocardiography. 18 (12), 1415-1421 (2005).</li><li>Kulandavelu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+and+neonatal+phenotyping+of+genetically+engineered+mice.">Embryonic and neonatal phenotyping of genetically engineered mice.</a> ILAR Journal. 47 (2), 103-117 (2006).</li><li>Mu, J., Slevin, J. C., Qu, D., McCormick, S., Adamson, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+quantification+of+embryonic+and+placental+growth+during+gestation+in+mice+using+micro-ultrasound.">In vivo quantification of embryonic and placental growth during gestation in mice using micro-ultrasound.</a> Reproductive Biology and Endocrinology. 6, 34 (2008).</li><li>Phoon, C. K. L., Turnbull, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+imaging+in+mice.">Cardiovascular imaging in mice.</a> Current Protocols in Mouse Biology. 6 (1), 15-38 (2016).</li><li>Phoon, C. K. L., Turnbull, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasound+biomicroscopy-Doppler+in+mouse+cardiovascular+development.">Ultrasound biomicroscopy-Doppler in mouse cardiovascular development.</a> Physiological Genomics. 14 (1), 3-15 (2003).</li><li>Peavey, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+use+of+three-dimensional+high-frequency+ultrasonography+for+early+pregnancy+characterization+in+the+mouse.">A novel use of three-dimensional high-frequency ultrasonography for early pregnancy characterization in the mouse.</a> Journal of Visualized Experiments. (128), e56207 (2017).</li><li>Greco, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+frequency+ultrasound+for+in+vivo+pregnancy+diagnosis+and+staging+of+placental+and+fetal+development+in+mice.">High frequency ultrasound for in vivo pregnancy diagnosis and staging of placental and fetal development in mice.</a> PLoS One. 8 (10), 77205 (2013).</li><li>Flores, L. E., Hildebrandt, T. B., K&#252;hl, A. A., Drews, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+detection+and+staging+of+spontaneous+embryo+resorption+by+ultrasound+biomicroscopy+in+murine+pregnancy.">Early detection and staging of spontaneous embryo resorption by ultrasound biomicroscopy in murine pregnancy.</a> Reproductive Biology and Endocrinology. 12, 38 (2014).</li><li>Norton, W. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Refinements+for+embryo+implantation+surgery+in+the+mouse:+comparison+of+injectable+and+inhalant+anesthesias+-+tribromoethanol,+ketamine+and+isoflurane+-+on+pregnancy+and+pup+survival.">Refinements for embryo implantation surgery in the mouse: comparison of injectable and inhalant anesthesias - tribromoethanol, ketamine and isoflurane - on pregnancy and pup survival.</a> Laboratory Animal. 50 (5), 335-343 (2016).</li><li>Thaete, L. G., Levin, S. I., Dudley, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+anaesthetics+and+analgesics+on+fetal+growth+in+the+mouse.">Impact of anaesthetics and analgesics on fetal growth in the mouse.</a> Laboratory Animal. 47 (3), 175-183 (2013).</li><li>Phoon, C. K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tafazzin+knockdown+in+mice+leads+to+a+developmental+cardiomyopathy+with+early+diastolic+dysfunction+preceding+myocardial+noncompaction.">Tafazzin knockdown in mice leads to a developmental cardiomyopathy with early diastolic dysfunction preceding myocardial noncompaction.</a> Journal of the American Heart Association. 1 (2), (2012).</li></ol>

이미징의 가장 중요한 첫 번째 단계는 질을 식별한 다음 왼쪽과 오른쪽으로 자궁 뿔의 분기를 결정하는 것입니다. 각 자궁 경적을 따라, 이미저는 자궁으로 창자의 루프를 잘못 식별 할 가능성이 적습니다. 더욱이, 창자의 외관에 있는 변이를 이해하는 것은 (대변 의 유무에 관계없이) 자궁에서 이들을 구별하는 것이 중요합니다; 때때로, 배설물 "공" 창 자 루프에 중력을 모방할 수 있습니다 (임신)...

마우스는 많은 인간 질환 및 생물학적 과정에 바람직한 포유류모델1,2,3,4이다. 발달 생물학 연구는 종종 다양한 시점에서 진화 하는 과정을 결정 하기 위해 단계적 임신 마우스 필요5,6,7,8. 더욱이, 모형 마우스의 최적이고 효과적인 사육은 특히 조사자가 발달에 유전자 돌연변이의 효력을 공부하는 때, 시간 조정한 임신의 평가가 요구합니다. 전형적으로, 수사관은 하룻밤 사이에 이종수 마우스를 짝짓고, 다음날 아침 일찍 질 플러그를 찾고, 임신이9가되기를 바란다. 자궁 내 손실을 결정하는 것은 전형이 유전자형의 Mendelian 비율을 위해 신생아 쓰레기를 검사한 다음 다양한 임신 단계에서 임신 한 마우스를 희생하고 배아를 회복하여 거꾸로 작업하는 것으로 시작됩니다. 조사자는 양성 임신의 메트릭으로 체중 증가를 결정할 수 있습니다10,11; 그러나, 특히 유전자 조작 마우스의 경우, 체중 증가가 분명하지 않을 수 있기 때문에 자궁 내 손실이있을 때 쓰레기는 매우 작고 이후에 resorbed 될 수 있습니다 (특히 임신 초기에, ~E6.5-8.5). 마우스는 양성 복부 종양에 예를 들면, 때문에 거짓 임신으로 나타날 수 있습니다. 본질적으로, 하나는 "블라인드"작동합니다.
고해상도 초음파 생체 현미경 검사는 중력 자궁의 직접 시각화 및 개발 마우스 배아(12,13,14,15,16)를할 수 있습니다. 우리는 처음에 배아 마우스 심혈관 생리학을 평가하는 방법을 개발했지만16,17,우리는 우리의 마우스 사육을 간소화하기 위해이 이미징 양식의 유용성을 인식. 특히, 우리는 더 이상 마우스가 임신 한 경우 "보기"를 기다릴 필요가 없었다, 명백한 체중 증가 또는 쓰레기의 배달 중 하나에 따라; 우리는 댐이 임신하지 않은 경우 중력 상태를 결정하고 신속하게 마우스를 재메이트 할 수 있습니다. 또한, 자궁 내 손실도 쉽게 이미지화될 수 있으며, 손실 의 타임라인은 마우스를 희생하지 않고 결정할 수 있습니다(회로도 1 참조). 따라서 시간, 귀중한 모델 마우스 및 자금을 절약 할 수 있습니다.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Depilatory cream</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, 70%</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fur clippers</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze or KimWipes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical oxygen (optional)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical tape</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse imaging system (including anesthesia set-up and imaging platform)</td>
			<td>Fujifilm Visual Sonics</td>
			<td>Various</td>
			<td>Any system with 40 MHz center-frequency ultrasound transducer probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Razor blade (not a safety razor)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scale (to weigh mouse)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound gel</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

is my mouse pregnant? high-frequency ultrasound assessment

마우스는 많은 인간 질병 및 생물학적 과정에 대한 선택의 포유류 동물 모델입니다. 발달 생물학은 수시로 각종 시점에서 진화하는 프로세스를 결정하기 위하여 단계적 임신 마우스를 요구합니다. 더욱이, 모형 마우스의 최적이고 능률적인 사육은 시간 시간 임신의 평가가 필요합니다. 가장 일반적으로, 마우스는 하룻밤 짝짓기되고, 질 플러그의 존재가 결정된다; 그러나 이 기술의 긍정적 예측 값은 최적이 지 않으며 마우스가 진정으로 임신했는지 알기 위해 기다려야 합니다. 고해상도 초음파 생체 현미경 검사는 이미징을위한 효과적이고 효율적인 도구입니다 : 1) 마우스가 임신했는지 여부; 2) 마우스가 도달 한 임신 단계; 및 3) 자궁 내 손실이 있는지 여부. 배아와 태아 이외에, 조사관은 또한 중력 자궁을 위해 이것을 착각하지 않도록 복강에 있는 일반적인 유물을 인식해야 합니다. 이 문서에서는 예시 예제와 함께 이미징을 위한 프로토콜을 제공합니다.

이 프로토콜은 조사관이 마우스가 임신 한 임신 여부를 자신있게 결정할 수 있게 합니다, 초기 단계 동안을 포함하여 및 임신한 댐을 희생할 필요 없이 명백한 산전 배아 또는 태아 손실이 있는지 여부를 결정하기 위하여. 이 프로토콜은 유전자 조작 된 마우스를 사육 할 때 특히 유용합니다. 전형적으로, 이종수구스 x 이종구스는 동종자 자손을 산출하기 위해 십자가를 지게 하여 산전 치사증을 ?...

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Is My Mouse Pregnant? High-Frequency Ultrasound Assessment

고해상도 초음파는 임신 상태, 임신 연령 및 임신 손실을 결정하여 임신 시간 임신 마우스를 요구하는 실험을 간소화하는 데 도움이 될 수 있습니다. 여기에 제시된 것은 임신을 모방할 수 있는 잠재적인 함정 (이미지 아티팩트)뿐만 아니라 마우스 임신을 평가하는 방법을 설명하는 프로토콜입니다.

내 마우스가 임신? 고주파 초음파 평가

The mouse is the mammalian animal model of choice for many human diseases and biological processes. Developmental biology often requires staged-pregnant ...

고해상도 초음파는 임신 상태, 임신 연령 및 임신 손실을 결정하여 시간 조정된 임신 마우스를 요구하는 실험을 간소화하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 프로토콜은 마우스 임신을 평가하고 임신을 모방 할 수있는 잠재적 인 이미지 아티팩트를 식별하는 방법을 보여줍니다. 시작하려면 화면에 방광을 식별합니다.방광에서 caudally 스캔, 질을 식별. 초음파 트랜스듀서가 중간선에 위치되고 복부에 낮을 때 방광과 질이 보입니다. 그런 다음 두개골 방향으로 천천히 부드럽게 스캔하여 질의 분기를 왼쪽과 오른쪽 자궁 뿔로 식별합니다.왼쪽과 오른쪽 자궁 뿔을 조사합니다. 임신 중반까지 마우스 배아는 오른쪽과 왼쪽 주변을 따라 배치됩니다. 그(것)들이 성장할 때, 자궁과 그들의 상응하는 태아의 더 단상 부분은 바깥쪽으로 그리고 등등으로 돌것입니다.이 프로토콜은 유전자 조작 된 마우스를 사육 할 때 특히 유용합니다. 전형적으로, 이종고우스를 가진 이종화구스는 동종자 자손을 산출하기 위하여 적당한 발달의 실패로 이끌어 내고, 산전 치사증을 일으키는 원인이 됩니다. 다양한 발달 단계에서 마우스 배아가 여기에 표시됩니다.초기 단계 마우스 배아, 죽은 배아, 또는 수근 배아는 창자에 있는 복부 또는 대변에 있는 그밖 기관을 닮을 수 있습니다, 창자 루프는 비 중력 자궁을 모방할 수 있는 동안. 몇몇 연구원은 이 심상에 표시된 것과 같은 단계 장착된 트랜스듀서를 사용하는 것을 선호합니다, 그러나 우리는 복부를 통해 빠르고 능률적인 화상 진찰을 허용하기 때문에, 주사의 휴대용 방법을 선호합니다.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Comprehensive Assessment of Germline Chemical Toxicity Using the Nematode Caenorhabditis elegans

Comprehensive Assessment of Germline Chemical Toxicity Using the Nematode Caenorhabditis elegans

선충을 사용하여 생식선 화학 독성의 종합 평가<em&gt; 예쁜 꼬마 선충</em

Identifying the reproductive toxicity of the thousands of chemicals present in our environment has been one of the most tantalizing challenges in the ...

연구

발생학

Contrast Imaging in Mouse Embryos Using High-frequency Ultrasound

고주파 초음파를 사용하여 마우스 태아에 대비 이미징

Ultrasound contrast-enhanced imaging can convey essential quantitative information regarding tissue vascularity and perfusion and, in targeted ...

Assessment of Endothelial Cell Migration After Exposure to Toxic Chemicals

유해 화학 물질에 노출 된 후 내피 세포 이동의 평가

Exposure to chemical substances (including alkylating chemical warfare agents like sulfur and nitrogen mustards) cause a plethora of clinical symptoms ...

Assessment of Maternal Vascular Remodeling During Pregnancy in the Mouse Uterus

마우스 자궁에서 임신 기간 동안 산모의 혈관 재 평가

The placenta mediates the exchange of factors such as gases and nutrients between mother and fetus and has specific demands for supply of blood from the ...

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마우스에서 초기 임신 특성에 대 한 3 차원 높은-주파수 초음파의 새로운 사용

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Fetal Mouse Cardiovascular Imaging Using a High-frequency Ultrasound 30/45MHZ System

태아 마우스 심장 혈관 이미징 높은 주파수 초음파 (30/45 m h Z) 시스템을 사용 하 여

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High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

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평가의 개발 쥐의 뇌와 척수의 Utero 변환 후 Ultrastructural Neuroplasticity 매개 변수

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자외선-C (UV-C) 손상에 응하여 1 차 마우스 안구 표면 세포/줄기 세포에 있는 산화 손상의 평가

The ocular surface is subjected to regular wear and tear due to various environmental factors. Exposure to UV-C radiation constitutes an occupational ...