Name: a syngeneic orthotopic osteosarcoma sprague dawley rat model with amputation to control metastasis rate
Uploaded: 2021-05-03T13:00:00
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국립 암 연구소를 통해 NIH 자금 지원, 보조금 # CA228582. 이시야마 순은 현재 도레이 메디컬(주)으로부터 보조금을 받고 있습니다.

쥐와 관련된 모든 절차와 실험은 존스 홉킨스 동물 관리 및 사용위원회에 의해 승인 된 프로토콜에 따라 수행되었다.
1. SD 쥐 OS 세포주 UMR-106 세포 배양 프로토콜
<ol><li>DMEM에서 세포를 성장, 10% (v/v) FBS, 페니실린 (10 U/mL)-연쇄 절제술 (10 U/mL) 37°C에서 가습 5% CO2 대기. 2-812의구절을 가진 세포를 사용하여 실험을 수행합니다.</li>
</ol>2. O...

<ol>
	<li>Link, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+adjuvant+chemotherapy+on+relapse-free+survival+in+patients+with+osteosarcoma+of+the+extremity.">The effect of adjuvant chemotherapy on relapse-free survival in patients with osteosarcoma of the extremity.</a> New England Journal of Medicine. 314 (25), 1600-1606 (1986).</li><li>Bielack, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prognostic+factors+in+high-grade+osteosarcoma+of+the+extremities+or+trunk:+an+analysis+of+1,702+patients+treated+on+neoadjuvant+cooperative+osteosarcoma+study+group+protocols.">Prognostic factors in high-grade osteosarcoma of the extremities or trunk: an analysis of 1,702 patients treated on neoadjuvant cooperative osteosarcoma study group protocols.</a> Journal of Clinical Oncology. 20 (3), 776-790 (2002).</li><li>Botter, S. M., Neri, D., Fuchs, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+osteosarcoma.">Recent advances in osteosarcoma.</a> Current Opinion in Pharmacology. 16, 15-23 (2014).</li><li>Ek, E. T. H., Dass, C. R., Choong, P. F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Commonly+used+mouse+models+of+osteosarcoma.">Commonly used mouse models of osteosarcoma.</a> Critical Reviews in Oncology Hematology. 60 (1), 1-8 (2006).</li><li>Guijarro, M. V., Ghivizzani, S. C., Gibbs, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+in+osteosarcoma.">Animal models in osteosarcoma.</a> Frontiers Oncology. 4, 189 (2014).</li><li>Janeway, K. A., Walkley, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+human+osteosarcoma+in+the+mouse:+From+bedside+to+bench.">Modeling human osteosarcoma in the mouse: From bedside to bench.</a> Bone. 47 (5), 859-865 (2010).</li><li>Mohseny, A. B., Hogendoorn, P. C., Cleton-Jansen, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteosarcoma+models:+from+cell+lines+to+zebrafish.">Osteosarcoma models: from cell lines to zebrafish.</a> Sarcoma. 2012, 417271 (2012).</li><li>Khanna, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+orthotopic+model+of+murine+osteosarcoma+with+clonally+related+variants+differing+in+pulmonary+metastatic+potential.">An orthotopic model of murine osteosarcoma with clonally related variants differing in pulmonary metastatic potential.</a> Clinical &amp; Experimental Metastasis. 18 (3), 261-271 (2000).</li><li>Martin, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parathyroid+hormone-responsive+adenylate+cyclase+in+induced+transplantable+osteogenic+rat+sarcoma.">Parathyroid hormone-responsive adenylate cyclase in induced transplantable osteogenic rat sarcoma.</a> Nature. 260 (5550), 436-438 (1976).</li><li>Fisher, J. L., Mackie, P. S., Howard, M. L., Zhou, H., Choong, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+expression+of+the+urokinase+plasminogen+activator+system+in+metastatic+murine+osteosarcoma:+an+in+vivo+mouse+model.">The expression of the urokinase plasminogen activator system in metastatic murine osteosarcoma: an in vivo mouse model.</a> Clinical Cancer Research. 7 (6), 1654-1660 (2001).</li><li>Yu, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+reproducible+osteosarcoma+rat+model+using+orthotopic+implantation+technique.">Establishment of reproducible osteosarcoma rat model using orthotopic implantation technique.</a> Oncology Reports. 21 (5), 1175-1180 (2009).</li><li>Zhang, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Homologous+mesenchymal+stem+cells+promote+the+emergence+and+growth+of+pulmonary+metastases+of+the+rat+osteosarcoma+cell+line+UMR-106.">Homologous mesenchymal stem cells promote the emergence and growth of pulmonary metastases of the rat osteosarcoma cell line UMR-106.</a> Oncology Letters. 8 (1), 127-132 (2014).</li><li>Gabrielson, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heat+shock+protein+90+and+ErbB2+in+the+cardiac+response+to+doxorubicin+injury.">Heat shock protein 90 and ErbB2 in the cardiac response to doxorubicin injury.</a> Cancer Research. 67 (4), 1436-1441 (2007).</li><li>Sysa-Shah, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bidirectional+cross-regulation+between+ErbB2+and+&#946;-adrenergic+signalling+pathways.">Bidirectional cross-regulation between ErbB2 and &#946;-adrenergic signalling pathways.</a> Cardiovascular Research. 109 (3), 358-373 (2016).</li><li>Wachtman, L. M., Browning, M. D., Bedja, D., Pin, S., Gabrielson, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+the+use+of+long-term+indwelling+jugular+catheters+in+a+rat+model+of+cardiotoxicity.">Validation of the use of long-term indwelling jugular catheters in a rat model of cardiotoxicity.</a> Journal of American Association Laboratory Animal Science. 45, 55-64 (2006).</li><li>Abdou, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Prognostic+role+of+Ezrin+and+HER2/neu+expression+in+osteosarcoma.">The Prognostic role of Ezrin and HER2/neu expression in osteosarcoma.</a> Applied Immunohistochemistry &amp; Molecular Morphology. 24 (5), 355-363 (2016).</li><li>Hughes, D. P., Thomas, D. G., Giordano, T. J., McDonagh, K. T., Baker, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Essential+erbB+family+phosphorylation+in+osteosarcoma+as+a+target+for+CI-1033+inhibition.">Essential erbB family phosphorylation in osteosarcoma as a target for CI-1033 inhibition.</a> Pediatric Blood &amp; Cancer. 46 (5), 614-623 (2006).</li><li>Wen, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidermal+growth+factor+receptor+in+osteosarcoma:+expression+and+mutational+analysis.">Epidermal growth factor receptor in osteosarcoma: expression and mutational analysis.</a> Human Pathology. 38 (8), 1184-1191 (2007).</li><li>Khanna, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toward+a+drug+development+path+that+targets+metastatic+progression+in+osteosarcoma.">Toward a drug development path that targets metastatic progression in osteosarcoma.</a> Clinical Cancer Research. 20 (16), 4200-4209 (2014).</li></ol>

OS 티비알 임플란트를 가진 쥐는 이식 후 3 주까지 측정 가능한 종양을 개발합니다. 종양을 가진 사지가 이식 후 3 주 절단되는 경우에, 폐 전이의 부각은 현저하게 감소됩니다. OS는 골연및 골세포학 둘 다입니다. 절단이 없는 쥐는 방사선 촬영또는 부검시 7주 까지 여러 가지 와 가변크기인 폐 전이를 개발합니다. EGFR, ErbB2 및 ErbB4는 인간OS16,17,<sup...

골육종 (OS)은 어린이, 청소년 및 젊은 성인에서 가장 흔한 1 차 적인 뼈 종양입니다. OS의 치료에 가장 최근의 사전은 다중 에이전트 화학 요법이 수술 혼자 에 비해 전반적인 생존을 개선하는 것으로 나타났다 때 1980 년대에 발생1. OS는 빠른 뼈 성장 도중 발전합니다, 일반적으로 대퇴골과 같은 긴 관 뼈에서 생기는, 경골, 및 상완골. 그들은 골연성, 골세포, 또는 주목할만한 periosteal 반응2와혼합 된 외관을 특징으로한다. 화학요법과 외과 절제술은 환자의 65%를 위한 5년 생존을 가진 환자를 위한 결과를 향상할 수있습니다2,3. 불행히도, 전이성 질환을 가진 고급 OS 환자는 20 %의 생존을 가지고 있습니다. OS는 지역적으로 침략하고 폐 또는 그밖 뼈에 주로 전이하고 남성에서 더 널리 퍼집니다. 이 젊은 환자를 위한 가장 강력한 필요는 먼 전이의 생존을 방지하고 제거하는 새로운 치료입니다.
OS 전임상 모델은4,5,6,7및 정형토피OS의 절단을 이용한 사용 가능한 면역능력모델이 거의 개발되었다. 2000년에는 정형소 성 합성 OS 및 절단8을가진 BALB/c 마우스를 사용하여 중요한 모델을 개발하였다. 이 마우스 모델에 비해, 쥐 모델은 유전적 근친교와 10 배 더 큰 동물을 기반으로 몇 가지 장점으로 이어지는. 쥐 UMR106 모델은 세포주9로파생된 스프라그 다울리(SD) 쥐에서 32P유도 OS로부터 개발되었다. 2001년, UMR106-01의 직교 이식은 인간에서 OS와 공통적으로 신속하고 일관된 1차 종양 발달 및 방사선학적, 조직학적 특징을 가진 아티믹 마우스의 이식된 티바이스에서 처음 기술되었다. 폐 전이개발 및 골 미세환경(10)에UMR106의 직교 배치에 의존했다. 2009년, Yu et al.11은 더 큰 수컷 SD 쥐에 UMR106 세포를 사용하여 재현 가능한 직교 대퇴골 OS 쥐 모델을 확립하였다. 절단없이 쥐에서 성공적인 종양 이식 및 폐 전이율은 여기에 제시 된 데이터와 유사했다. 이 연구에서는, 젊은 쥐를 사용하여 모델에 추가 절단이 수행되었다, 이는 1 차 종양 제거의 타이밍이 OS 모델링에 중요하다는 것을 시사, 특히 전이성 진행과 관련된. 이 세련미, 절단 및 생체 내 이미징은 OS에 대한 새로운 약물 평가를 위한 전임상 연구를 위한 이 모델을 향상시킵니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>AKT</td>
			<td>Cell Signaling TECHNOLOGY</td>
			<td>4685S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>absorbable suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>J214H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;-actin</td>
			<td>SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY</td>
			<td>sc-47778</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;2-AR antibody</td>
			<td>SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY</td>
			<td>sc-569</td>
			<td>replaced by &#946;2-AR (E-3): sc-271322</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bis&#8211;Tris gels</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>NP0321PK2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine SR Lab</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td>IZ-70000-201908</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD3 antibody</td>
			<td>Dako</td>
			<td>#A0452</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD68 antibody</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>#14-0688-82</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemiluminescent substrate</td>
			<td>cytiva</td>
			<td>RPN2232</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CL-Xposure film</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>34089</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Complete Anesthesia System</td>
			<td>EVETEQUIP</td>
			<td>922120</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>diaminobenzidine</td>
			<td>VECTOR LABORATORIES</td>
			<td>SK-4100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Doxorubicin</td>
			<td>Actavis</td>
			<td>NDC 45963-733-60</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGFR antibody</td>
			<td>SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY</td>
			<td>sc-03</td>
			<td>replaced by EGFR (A-10): sc-373746</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ERBB2 antibody</td>
			<td>SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY</td>
			<td>sc-284</td>
			<td>replaced by Neu (3B5): sc-33684</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ERBB4 antibody</td>
			<td>SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY</td>
			<td>sc-283</td>
			<td>replaced by ErbB4 (C-7): sc-8050</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ERK antibody</td>
			<td>SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY</td>
			<td>sc-514302</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>eye lubricant</td>
			<td>PHARMADERM</td>
			<td>NDC 0462-0211-38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hamilton syringe (100 &#181;L)</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>Model 1710 SN SYR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>horseradish peroxidase-linked secondary antibody</td>
			<td>cytiva</td>
			<td>NA934</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HRP polymer detection kit</td>
			<td>VECTOR LABORATORIES</td>
			<td>MP-7401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HRP polymer detection kit</td>
			<td>VECTOR LABORATORIES</td>
			<td>MP-7402</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isoflurane</td>
			<td>BUTLER SCHEIN</td>
			<td>NDC 11695-6776-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isoflurane vaporizer</td>
			<td>EVETEQUIP</td>
			<td>911103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UMR-106 cell</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CRL-1661</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>X-ray</td>
			<td>Faxitron</td>
			<td>UltraFocus</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>X-ray processor</td>
			<td>Hope X-Ray Peoducts Inc</td>
			<td>MicroMax X-ray Processor</td>
			<td>Hope Processors are not available in USA anymore</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>wound clips</td>
			<td>BECTON DICKINSON</td>
			<td>427631</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a syngeneic orthotopic osteosarcoma sprague dawley rat model with amputation to control metastasis rate

골육종 (OS)의 치료에 가장 최근의 사전은 다중 에이전트 화학 요법이 수술 에 비해 전반적인 생존을 개선하는 것으로 나타났을 때 1980 년대에 발생했습니다. 이 문제를 해결하기 위해, 연구의 목적은 생존을 연장 포괄적 인 히스토마이트, 이미징, 생물학적, 이식 및 절단 수술 접근으로 쥐에서 OS의 덜 알려진 모델을 정제하는 것입니다. 우리는 면역 능력, 근친근 Sprague-Dawley (SD), 이식 UMR106 OS 세포주 (SD 쥐에서 유래)와 시너지 쥐 모델을 사용 (SD 쥐에서 유래) 3 주 된 남성과 여성 쥐에 3 주 된 남성과 여성 쥐 소아 OS를 모델링. 우리는 쥐가 재현 가능한 1 차및 전이성 폐 종양을 개발하고, 3 주 이식 후 이식 후 사지 절단이 폐 전이의 발생률을 현저히 감소시키고 예기치 않은 죽음을 방지하는 것을 발견했습니다. 조직학적으로, 쥐의 1차 및 전이성 OS는 인간 OS와 매우 유사하였다. 면역 조직 화학 방법을 사용하여, 연구 결과는 쥐 OS가 대식세포및 T 세포로 침투한다는 것을 보여줍니다. OS 세포의 단백질 발현 조사는 이 종양이 ErbB 가족 키나아제표현을 한다는 것을 밝힙니다. 이 키나아제는 또한 대부분의 인간 적인 OSs에서 높게 표현되기 때문에, 이 쥐 모형은 치료를 위한 ErbB 통로 억제제를 시험하기 위하여 이용될 수 있었습니다.

면역 능력 SD 근친쥐는 이러한 OS 연구에 사용되며, 이는 그대로 면역 체계를 가진 동물 모델을 제공합니다. 우리는 ATCC에서 UMR106 세포줄을 사용했습니다, SD 쥐에서 처음에 OS에서 격리된 세포에서 개발된. 우리는 SD 쥐에 세포를 이식, 따라서 OS에 대한 동기화 모델을 제공. UMR106 세포는 소아 OS 모델을 시뮬레이션, 3 주 된 남성과 여성 SD 쥐의 경골에 이식된다. 더욱이, 경골 대사/설사로 직접 UMR106 세?...

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A Syngeneic Orthotopic Osteosarcoma Sprague Dawley Rat Model with Amputation to Control Metastasis Rate

여기서, 전이 생물학의 전임상 조사에 사용될 수 있는 자발적인 폐 전이와 함께 골육종의 절단 절차를 따르는 회제 성 직소 이식이 기술되고 새로운 치료법의 개발이 설명된다.

전이율을 제어하는 절단을 가진 신제닉 직소 성 골육종 스프라그 Dawley 쥐 모델

The most recent advance in the treatment of osteosarcoma (OS) occurred in the 1980s when multi-agent chemotherapy was shown to improve overall survival ...

경골 미세 환경 내부에 골육종 세포를 이식하는 것은 폐 전이를 촉진합니다. 이 모형은 또한 그대로 면역 계통을 요구하는 폐 전이 또는 새로운 암 치료의 기계장치를 공부하기 위하여 유용할 수 있습니다. 일단 종양이 설치되면, 절단은 장기 생존 연구에서 전이의 비율을 통제하기 위하여 필요합니다.우리는 정맥 약물 전달의 시각화를 허용하기 위해 경정맥 주사를 사용합니다. 경정맥 주사는 정확한 약물 전달이 필요한 다른 많은 질병 모델에 유용합니다. 우리는 생체 내 이미징을 위해 나노 입자와 방사성 라벨 리간을 제공하기 위해이 방법을 사용했습니다.우리는 혈액 손실없이 사지 절단의 역학을 마스터하는 실험을 시도하기 전에 5에서 10 안락사 쥐에서 사지를 제거하는 연습을 새로운 사용자를 조언한다. 음경 반사에 대한 반응의 부족을 확인 한 후, supine 위치에 낮은 열 설정 열 패드에 노세네에 마취 된 쥐를 확보. 복부와 등쪽 하복부까지 오른쪽 다리의 머리카락을 제거합니다.거즈 나 스프레이를 사용하여 70 %의 에탄올과 적절한 희석 된 살균제로 수술 영역을 소독하고 동물의 눈에 연고를 바르습니다. 드릴과 같은 동작을 사용하여 10mm 라고 표시된 22 게이지 바늘을 티비알 고원 한가운데에 있는 경골 의 다이아피시스에 삽입하여 다이아피시스로 바늘을 확장합니다. 바늘을 제거한 후, 상질세포 현탁액을 얻기 위해 관심 있는 종양 세포 현탁액을 부드럽게 혼합하고, PBS의 20 마이크로리터에서 세포의 4분의 4에 7.5 x 10을 로드하여 해밀턴 주사기로 한다.바늘 끝에서 10 밀리미터 의 세포로 해밀턴 주사기를 표시하고 22 게이지 바늘에 의해 만들어진 구멍에 10 밀리미터 마크에 바늘을 삽입합니다. 그런 다음 전체 양의 세포를 골수 구멍으로 부드럽게 배출하고 쥐를 가열 패드에 케이지에 넣고 전체 재복이 있을 때까지 모니터링합니다. 정맥 내 독소 루비신 투여의 경우 마취 확인 후 신중한 해부를 사용하여 오른쪽 또는 왼쪽 경정맥을 시각화하고 바늘을 과측 근육 조직에 삽입하십시오.바늘을 경정맥 루멘으로 향하게 하고, 경정맥 전방에서 펙토랄리스 근육에 시각화되고, 정확한 삽입을 확인하기 위해 바늘 끝에 소량의 혈액을 끌어들입니다. 바늘이 제자리에있을 때, 천천히 1 분 동안 킬로그램 독소루비신 당 2 밀리그램의 100 ~ 150 마이크로 리터를 주입하십시오. 솔루션은 납품 중에 정맥 내에서 표시되어야 합니다.모든 용액이 전달되면 멸균 거즈를 사용하여 정맥에 부드러운 압력을 가하고 3~4개의 상처 클립을 사용하여 절개를 닫습니다. 퇴적을 확인한 후 오른쪽 다리의 머리카락을 복부와 등쪽 하복부까지 제거하고 가열 패드에 쥐를 척추 위치에 놓습니다. 종아리 의 중간에서 오른쪽 아래 복부의 엉덩이 관절 바로 위에 피부를 문질러 동물의 눈에 연고를 적용합니다.멸균 장갑과 악기를 사용하여, 멸균 수술 커튼의 통풍구를 통해 다리를 당기고, 단지 질식에 근위균 을 할례 적인 분리 절개를합니다. 뒷다리를 장갑을 끼고 뒷사지의 복부 내측 표면에 대퇴 동맥과 정맥을 노출시키고 4-0 흡수 가능한 봉합사를 사용하여 중간 대퇴골 및 트랜스펙트 의 수준에서 혈관을 소송합니다. 정맥을 해부 하는 동안 누출을 줄이기 위해 해동 하 고 측면 외부 회전으로 엉덩이 관절을 납치 하는 무딘 해부를 사용 하 여.대퇴골의 머리를 염분에서 찾아 분해하고 남은 조직을 제거하여 다리에 부착된 다리를 유지합니다. 로피바카인 킬로그램당 약 6밀리그램의 아세타불룸및 시스틱 신경에 스플래시 블록을 투여하고, 간단한 중단된 4-0 흡수성 봉합사를 사용하여 아세타부를 통해 근육을 닫습니다. 그런 다음 5~10밀리미터 에 배치된 상처 클립을 사용하여 피부의 가장자리를 닫습니다.종양 감시를 위한 엑스레이 화상 진찰은 뼈 종양 침략의 확인을 허용하고 최근에 절단한 또는 포르말린 고정 사지에 수행될 수 있습니다. 엑스레이 화상 진찰은 또한 전이의 유무에 관계없이 폐의 방사선 학적 형태에 대한 평가를 허용하고, 불필요한 자발적인 죽음을 방지하기 위해 안락사에 대한 필요성을 결정하는 빠르고 쉬운 방법을 제공합니다. 쥐 골육종에서, 골분해성 및 골성 세포 종양 형태는 절단된 사지의 조직병리학에 의해 확인될 수 있다.피질 뼈는 이 예에서 결석하고 인접한 뼈가 피질의 기존 샤프트에 수직으로 지향되는 새로운 직조 뼈로 대체되거나 강화되었다는 점에 유의하십시오. 미숙한 골골의 섬은 또한 종양 내에서 확인할 수 있습니다. 이들 심상에서는, 대표적인 폐 전이의 현미경 형태, 광물화된 뼈 및 종양 혈관 색전증을 가진 몇몇은 관찰될 수 있다.1 차적인 골육종 종양의 면역 염색은 CD68 양성 대식세포 또는 CD3 양성 T 세포와 같은 면역 세포 집단에 의한 종양의 침투를 드러낼 수 있습니다. 종양 세포 단백질 용해의 서양 얼룩은 단백질 키나아제, 단백질 키나아제 수용체 및 이러한 경로와 상호 작용하는 다른 단백질의 발현을 결정하는 데 사용될 수 있다. 티비알 이식의 경우, 첫 번째 티비알 구멍이 만들어지면, 해밀턴 바늘 삽입을 쉽게 하기 위해 피부와 뼈 구멍이 줄지어 있는 것과 같은 각도로 비 지배적인 손에 다리를 계속 고정합니다.경정맥 주사의 경우 바늘을 근육에 삽입하지만 바늘을 너무 많이 각도로 각도로 각도를 두지 마십시오. 절단을 위해, 먼저 안락사 쥐에 대한 반자 연습을.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Fluorescent Orthotopic Mouse Model of Pancreatic Cancer

췌장암의 형광 동소 이식 마우스 모델

Pancreatic cancer remains one of the cancers for which survival has not improved substantially in the last few decades. Only 7% of diagnosed patients will ...

연구

암 연구학

Murine Experimental Model of Original Tumor Development and Peritoneal Metastasis via Orthotopic Inoculation with Ovarian Carcinoma Cells

Murine Experimental Model of Original Tumor Development and Peritoneal Metastasis via Orthotopic Inoculation with Ovarian Carcinoma Cells

원래 종양 개발의 쥐 실험 모델 및 복막 전이<em&gt;를 통해</em난소 암 세포에&gt; 동소 이식 접종

Epithelial ovarian carcinoma (EOC) is associated with a poor prognosis because it shows peritoneal dissemination. To improve the prognosis, it is ...

A Portal Vein Injection Model to Study Liver Metastasis of Breast Cancer

포탈 정맥 주입 모델 간 전이 유방암의 공부를

Breast cancer is the leading cause of cancer-related mortality in women worldwide. Liver metastasis is involved in upwards of 30% of cases with breast ...

Practical Considerations in Studying Metastatic Lung Colonization in Osteosarcoma Using the Pulmonary Metastasis Assay

폐 전이 분석 결과 사용 하 여 다리에 전이성 폐 식민지 공부에서 실용적인 고려 사항

The pulmonary metastasis assay (PuMA) is an ex vivo lung explant and closed cell culture system that permits researchers to study the biology of lung ...

A Syngeneic Pancreatic Cancer Mouse Model to Study the Effects of Irreversible Electroporation

돌이킬 수 없는 Electroporation의 효과 공부 하는 Syngeneic 췌 장 암 마우스 모델

Pancreatic cancer (PC), a disease which kills approximately 40,000 patients each year in the US, has successfully evaded several therapeutic approaches ...

A Bioluminescent and Fluorescent Orthotopic Syngeneic Murine Model of Androgen-dependent and Castration-resistant Prostate Cancer

발광 및 형광 Orthotopic Syngeneic Murine 모델 Androgen 종속 및 거세 내성 전립선 암

Orthotopic tumor modeling is a valuable tool for pre-clinical prostate cancer research, as it has multiple advantages over both subcutaneous and ...

Immunophenotyping of Orthotopic Homograft (Syngeneic) of Murine Primary KPC Pancreatic Ductal Adenocarcinoma by Flow Cytometry

Immunophenotyping of Orthotopic Homograft Syngeneic of Murine Primary KPC Pancreatic Ductal Adenocarcinoma by Flow Cytometry

Immunophenotyping Orthotopic Homograft (Syngeneic) Murine 기본 KPC 췌 장 Ductal 선 암의 Cytometry로의

Homograft (syngeneic) tumors are the workhorse of today&#39;s immuno-oncology (I/O) preclinical research. The tumor microenvironment (TME), particularly ...

Orthotopic Transplantation of Syngeneic Lung Adenocarcinoma Cells to Study PD-L1 Expression

Orthotopic PD L1 식 공부 Syngeneic 폐 선 암 세포의 이식

The use of mouse models is indispensable for studying the pathophysiology of various diseases. With respect to lung cancer, several models are available, ...

Patient-derived Orthotopic Xenograft Models for Human Urothelial Cell Carcinoma and Colorectal Cancer Tumor Growth and Spontaneous Metastasis

인간 비뇨기과 세포 암 및 대장암 종양 성장 및 자발적 전이를 위한 환자 유래 직교 이종이식 모델

Cancer patients have poor prognoses when lymph node (LN) involvement is present in both high-grade urothelial cell carcinoma (HG-UCC) of the bladder and ...

Three-Dimensional Bone Extracellular Matrix Model for Osteosarcoma

다리에 대 한 3 차원 뼈 세포 외 매트릭스 모델

Osteosarcoma (OS) is the most common and a highly aggressive primary bone tumor. It is characterized with anatomic and histologic variations along with ...