Name: a rat lung transplantation model of warm ischemia/reperfusion injury: optimizations to improve outcomes
Uploaded: 2021-10-28T14:00:00
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कोई नहीं।

नर स्प्राग-डॉवले चूहों (180-270 ग्राम शरीर का वजन) को व्यावसायिक रूप से खरीदा गया था (जैसे, एनविगो) और ओहियो स्टेट यूनिवर्सिटी एनिमल फैसिलिटी में रोगज़नक़-मुक्त परिस्थितियों में रखा गया था। सभी प्रक्रियाओं ...

<ol>
	<li>Mizuta, T., Kawaguchi, A., Nakahara, K., Kawashima, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+rat+lung+transplantation+using+a+cuff+technique.">Simplified rat lung transplantation using a cuff technique.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 97 (4), 578-581 (1989).</li><li>Zhai, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+rat+lung+transplantation+by+using+a+modified+cuff+technique.">Simplified rat lung transplantation by using a modified cuff technique.</a> Journal of Investigative Surgery. 21 (1), 33-37 (2008).</li><li>Goto, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+rat+lung+transplantation+using+a+new+cuff+technique.">Simplified rat lung transplantation using a new cuff technique.</a> Annals of Thoracic Surgery. 93 (6), 2078-2080 (2012).</li><li>Guo, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvements+of+surgical+techniques+in+a+rat+model+of+an+orthotopic+single+lung+transplant.">Improvements of surgical techniques in a rat model of an orthotopic single lung transplant.</a> European Journal of Medical Research. 18, 1 (2013).</li><li>Tian, D., Shiiya, H., Sato, M., Nakajima, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+lung+transplantation+model:+modifications+of+the+cuff+technique.">Rat lung transplantation model: modifications of the cuff technique.</a> Annals of Translational Medicine. 8 (6), 407 (2020).</li><li>Rajab, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anastomotic+techniques+for+rat+lung+transplantation.">Anastomotic techniques for rat lung transplantation.</a> World Journal of Transplantation. 8 (2), 38-43 (2018).</li><li>Reis, A., Giaid, A., Serrick, C., Shennib, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+outcome+of+rat+lung+transplantation+with+modification+of+the+nonsuture+external+cuff+technique.">Improved outcome of rat lung transplantation with modification of the nonsuture external cuff technique.</a> Journal of Heart and Lung Transplantation. 14 (2), 274-279 (1995).</li><li>Sugimoto, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+orthotopic+lung+transplantation+model+in+rats+with+cold+storage.">Experimental orthotopic lung transplantation model in rats with cold storage.</a> Surgery Today. 39 (7), 641-645 (2009).</li><li>Santana Rodriguez, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technical+modifications+of+the+orthotopic+lung+transplantation+model+in+rats+with+brain-dead+donors.">Technical modifications of the orthotopic lung transplantation model in rats with brain-dead donors.</a> Archivos de Bronconeumolog&#237;a. 47 (10), 488-494 (2011).</li><li>Gielis, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+lung+ischemia+and+reperfusion+injury:+tricks+of+the+trade.">A murine model of lung ischemia and reperfusion injury: tricks of the trade.</a> Journal of Surgical Research. 194 (2), 659-666 (2015).</li><li>Rajab, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Techniques+for+lung+transplantation+in+the+rat.">Techniques for lung transplantation in the rat.</a> Experimental Lung Research. 45 (9-10), 267-274 (2019).</li><li>Iskender, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+Warm+Versus+Cold+Ischemic+Donor+Lung+Preservation+on+the+Underlying+Mechanisms+of+Injuries+During+Ischemia+and+Reperfusion.">Effects of Warm Versus Cold Ischemic Donor Lung Preservation on the Underlying Mechanisms of Injuries During Ischemia and Reperfusion.</a> Transplantation. 102 (5), 760-768 (2018).</li><li>Lin, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Five-year+update+on+the+mouse+model+of+orthotopic+lung+transplantation:+Scientific+uses,+tricks+of+the+trade,+and+tips+for+success.">Five-year update on the mouse model of orthotopic lung transplantation: Scientific uses, tricks of the trade, and tips for success.</a> Journal of Thoracic Disease. 4 (3), 247-258 (2012).</li><li>Song, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardization+of+bronchoalveolar+lavage+method+based+on+suction+frequency+number+and+lavage+fraction+number+using+rats.">Standardization of bronchoalveolar lavage method based on suction frequency number and lavage fraction number using rats.</a> Toxicological Research. 26 (3), 203-208 (2010).</li><li>Chang, J. E., Kim, H. J., Yi, E., Jheon, S., Kim, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduction+of+ischemia-reperfusion+injury+in+a+rat+lung+transplantation+model+by+low-concentration+GV1001.">Reduction of ischemia-reperfusion injury in a rat lung transplantation model by low-concentration GV1001.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery. 50 (5), 972-979 (2016).</li><li>De Backer, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Study+of+the+variability+in+upper+and+lower+airway+morphology+in+Sprague-Dawley+rats+using+modern+micro-CT+scan-based+segmentation+techniques.">Study of the variability in upper and lower airway morphology in Sprague-Dawley rats using modern micro-CT scan-based segmentation techniques.</a> Anatomical Record. 292 (5), 720-727 (2009).</li><li>Nelson, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+of+isolated+ex+vivo+lung+perfusion+in+a+rat+model:+lessons+learned+from+developing+a+rat+EVLP+program.">Method of isolated ex vivo lung perfusion in a rat model: lessons learned from developing a rat EVLP program.</a> Journal of Visualized Experiments. (96), e52309 (2015).</li><li>Suzuki, H., Fan, L., Wilkes, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+obliterative+bronchiolitis+in+a+murine+model+of+orthotopic+lung+transplantation.">Development of obliterative bronchiolitis in a murine model of orthotopic lung transplantation.</a> Journal of Visualized Experiments. (65), e3947 (2012).</li><li>Jia, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+acute+lung+injury+by+targeting+MG53-mediated+cell+membrane+repair.">Treatment of acute lung injury by targeting MG53-mediated cell membrane repair.</a> Nature Communications. 5, 4387 (2014).</li><li>Kim, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pegylated-Catalase+Is+Protective+in+Lung+Ischemic+Injury+and+Oxidative+Stress.">Pegylated-Catalase Is Protective in Lung Ischemic Injury and Oxidative Stress.</a> Annals of Thoracic Surgery. , (2020).</li><li>Beal, E. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=D-Ala(2),+D-Leu(5)]+Enkephalin+Improves+Liver+Preservation+During+Normothermic+Ex+Vivo+Perfusion.">D-Ala(2), D-Leu(5)] Enkephalin Improves Liver Preservation During Normothermic Ex Vivo Perfusion.</a> Journal of Surgical Research. 241 (2), 323-335 (2019).</li><li>Akateh, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrahepatic+Delivery+of+Pegylated+Catalase+Is+Protective+in+a+Rat+Ischemia/Reperfusion+Injury+Model.">Intrahepatic Delivery of Pegylated Catalase Is Protective in a Rat Ischemia/Reperfusion Injury Model.</a> Journal of Surgical Research. 238, 152-163 (2019).</li></ol>

इस रिपोर्ट में, हमने प्रक्रिया को अनुकूलित करने के लिए चूहे फेफड़े के प्रत्यारोपण प्रोटोकॉल में कई महत्वपूर्ण चरणों में हस्तक्षेप किया है। जबकि चूहे के फेफड़ों के प्रत्यारोपण के लिए विभिन्न कफिंग<sup c...

तीन दशकों से, शोधकर्ता चूहे के फेफड़ों के प्रत्यारोपण मॉडल को संशोधित और सुधार रहे हैं ताकि उत्पन्न डेटा अधिक सुसंगत और वास्तविक नैदानिक स्थिति के अधिक प्रतिबिंबित हों। इस मॉडल को करने वाली हमारी प्रयोगशाला के समय में, हमने सुधार के चार क्षेत्रों को निर्धारित किया है: एनास्टोमोस के लिए कफिंग तकनीक, प्राप्तकर्ता के 4वें इंटरकोस्टल स्पेस की पहचान, प्राप्तकर्ता की प्रक्रिया के दौरान फेफड़ों की मुद्रास्फीति और घाव बंद करना, और विश्लेषण के लिए नमूनों की कटाई।
 एनास्टोमोस के लिए कफिंग तकनीक संशोधन दाता फेफड़ेके हैंडलिंग समय को कम करके और माइक्रोसर्जन के लिए एनास्टोमोसिस प्रक्रिया को तेज और तकनीकी रूप से आसान बनाकर पूरी प्रत्यारोपण प्रक्रिया में सुधार कर सकते हैं। जबकि प्रत्यारोपित फेफड़ों को आवश्यक रक्त और वायु प्रवाह की आपूर्ति के लिए उचित आकार के कफ का उपयोग करना महत्वपूर्ण है, इस बारे में सीमित मार्गदर्शन है कि फुफ्फुसीय नस (पीवी), फुफ्फुसीय धमनी (पीए), या ब्रोंकस (बीआर) 5,7,8,9 के लिए कफ का आकार कैसे चुनना चाहिए। चूंकि पीवी, पीए और बीआर के व्यास दाता और प्राप्तकर्ता चूहों के शरीर के वजन से संबंधित हैं, इसलिए हम प्रस्ताव करते हैं कि कफ का आकार शरीर के वजन पर आधारित होना चाहिए। यह रिपोर्ट चूहे के शरीर के वजन (180 ग्राम से 270 ग्राम से अधिक) के आधार पर कफ के लिए एक आकार मार्गदर्शिका प्रदान करती है जो प्रत्यारोपित फेफड़े को रक्त और हवा की आपूर्ति को अनुकूलित करने का कार्य करती है (तालिका 1)।
जबकि एक नया माइक्रोसर्जन दाता प्रक्रिया के दौरान सफलतापूर्वक और आसानी से दाता फेफड़े की खरीद कर सकता है, प्राप्तकर्ता की प्रक्रिया के दौरान फेफड़े का प्रत्यारोपण अधिक जटिल है और माइक्रोसर्जन के अनुभव पर निर्भर है। प्राप्तकर्ता के बाएं फेफड़े तक पहुंचने के लिए 4वें इंटरकोस्टल स्थान को खोजने का प्रयास अधिक कठिन चरणों में से एक है जो कुछ व्यक्तिपरकता रखता है और प्रक्रिया के समय को बढ़ा सकता है। इसलिए, हम छाती माप और हृदय की धड़कन का उपयोग करके 4 वें इंटरकोस्टल स्पेस लोकेशन की पहचान में सहायता करने के लिए एक सरल और उद्देश्यपूर्ण विधि पेश करते हैं ताकि 4,5,6,10,11,12 को विच्छेदित करने के लिए सही क्षेत्र छाती की दीवार मिल सके।
हम दाता फेफड़ों की मुद्रास्फीति में सुधार का भी प्रस्ताव करते हैं, जो अंग को चोट का एक संभावित स्रोत है। दाता फेफड़े को तब तक फुलाया जाता है जब तक कि रीपरफ्यूजन शुरू न हो जाए। 4वें इंटरकोस्टल स्पेस को मोड़ते समय, दाता फेफड़े को आमतौर पर 2 सेमीएच 2 ओ से 6 सेमीएच2ओ तक पीआईपी बढ़ाकर फुलाया जाता है। अतिमुद्रास्फीति से फेफड़ों की चोट को कम करने के लिए, हम एक ऐसी तकनीक का प्रस्ताव करते हैं जहां सरल डबल समुद्री मील केसाथ 5 वीं पसली से 4वीं पसली के चारों ओर तीन 6-0 नायलॉन सीवन रखे जाते हैं। जब घाव बंद होने का समय होता है, तो तीन सीवन के सिरों को दोनों हाथों में हेमोस्टैट्स के साथ रखा जाता है, घाव को प्रत्येक तरफ खींचकर एक बार में बंद कर दिया जाता है, और पीआईपी को तुरंत 2 सेमीएच2ओ तक कम कर दिया जाता है। इस तरह, फेफड़े को कम से कम समय के लिए विस्तार करने की अनुमति है।
एक प्रयोग के समापन पर, शोधकर्ता अक्सर प्रत्येक प्रत्यारोपण से कई प्रकार के विश्लेषण के लिए कई प्रकार के नमूने एकत्र करना चाहता है। उदाहरण के लिए, स्नैप जमे हुए ऊतक, फॉर्मेलिन निश्चित ऊतक, फुफ्फुसीय एडिमा निर्धारित करने के लिए गीले-से-सूखे वजन अनुपात के लिए ऊतक, और ब्रोन्कोएल्वेलर लैवेज (बीएएल) द्रव सभी का उपयोग यह आकलन करने के लिए किया जा सकता है कि प्रत्यारोपण कितनी अच्छी तरह चला गया। बीएएल द्रव एकत्र करने की पारंपरिक विधि प्राप्तकर्ता के मूल लोब और दाता के प्रत्यारोपित लोब13,14,15 दोनों से मिश्रित पूल किए गए नमूने की अनुमति देती है। इसे दूर करने के लिए, हम हिलर क्षेत्रों को दबाने की एक विधि प्रस्तुत करते हैं जो प्रत्यारोपित और देशी फेफड़ों की स्थिति में अधिक सटीक अंतर्दृष्टि प्राप्त कर सकता है। इसके अतिरिक्त, फेफड़ों के प्रत्येक तरफ से बीएएल द्रव एकत्र करने के लिए उपयोग किए जाने वाले पीबीएस की मात्रा पर विचार करना महत्वपूर्ण है क्योंकि बीएएल द्रव में साइटोकिन्स और केमोकाइन जैसे कई घुलनशील कारक होते हैं जो एकाग्रता द्वारा मापा जाता है। फेफड़ों की क्षमता की अनुमानित मात्रा में डाले गए तरल पदार्थ की मात्रा को सामान्य करने से तुलना में मदद मिल सकती है। दाईं ओर चार लोब और बाईं ओर एक लोब के साथ, चूहे के पांच लोबों में से प्रत्येक में एक अलग मात्रा और सतह क्षेत्र16 होता है। बैकर एट अल द्वारा फेफड़ों के लोब की मात्रा माप पर पिछले अध्ययन के अनुसार, पूरे फेफड़े की कुल मात्रा में से दाएं लोब की मात्रा 63% (4400 मिमी3) और बाएं लोब की मात्रा 37% (2500 मिमी3) है। इसलिए, हम अनुशंसा करते हैं कि बीएएल द्रव एकत्र करने के लिए उपयोग किए जाने वाले पीबीएस की मात्रा की गणना ज्वारीय मात्रा (7.2 एमएल / किग्रा) के दोगुने के रूप में की जानी चाहिए, जो दाएं फेफड़े के लिए 63% और बाएं फेफड़े के लिए 37% से गुणा की जानी चाहिए। इस दृष्टिकोण का उपयोग करके, कोई भी शरीर के वजन और समय10,16 जैसे चर के लिए बेहतर नियंत्रण कर सकता है।
कुल मिलाकर, इस रिपोर्ट में हम चूहे के फेफड़ों के प्रत्यारोपण के मानक प्रयोगात्मक मॉडल में कुछ संशोधनों का प्रदर्शन करेंगे जो प्रक्रिया को अधिक कुशल बना सकते हैं और प्रत्येक प्रयोग से अधिक सटीक और भरपूर डेटा उत्पन्न करने की क्षमता बढ़ा सकते हैं।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>12 Gauge angio-catheter</td>
			<td>BD</td>
			<td>382277</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>14 Gauge angio-catheter</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>4251717-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>16 Gauge angio-catheter</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>4252586-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18 Gauge angio-catheter</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>4251679-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 Gauge angio-catheter</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>4252527-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 silk suture</td>
			<td>Surgical Specialties Corp.</td>
			<td>SP116</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 nylon suture</td>
			<td>AD Surgical</td>
			<td>S-N618R13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>7-0 nylon suture</td>
			<td>AD Surgical</td>
			<td>S-N718SP13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8-0 nylon suture</td>
			<td>AD Surgical</td>
			<td>XXS-N807T6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine Spray</td>
			<td>Avrio Health L.P</td>
			<td>UPC 367618160039</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clippers</td>
			<td>VWR</td>
			<td>MSPP-023326</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castroviejo micro dissecting spring scissors</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co</td>
			<td>RS-5668</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5 - Fine Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11254-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrocautery</td>
			<td>Macan</td>
			<td>MV-7A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endotracheal intubation kit</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>ETI-MSE</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11027-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsted-mosquito hemostat</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co</td>
			<td>RS-7112</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Fresnius Medical Care</td>
			<td>C504701</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringe</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>B328446</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal Critical Care</td>
			<td>NDC 66794-017-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropyl Alcohol Swabs</td>
			<td>BD</td>
			<td>326895</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Hikma Pharmaceuticals PLC</td>
			<td>NDC 0413-9505-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dieffenbach Bulldog Clamp</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>WPI14117</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder/Forceps, Curved</td>
			<td>Micrins</td>
			<td>MI1542</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder/Forceps, Straight</td>
			<td>Micrins</td>
			<td>MI1540</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perfadex Plus (Organ Preservation Solution)</td>
			<td>XVIVO Perfusion AB</td>
			<td>REF# 19950</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PhysioSuite</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>PS-MSTAT-RT</td>
			<td>Used to check SpO2 and heartbeat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractor</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co</td>
			<td>RS-6560</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline</td>
			<td>PP Pharmaceuticals LLC</td>
			<td>NDC 63323-186-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14090-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SomnoSuite Small Animal Anesthesia System</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>SS-MVG-Module</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile&#160; Cotton Gauze Pad</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>22-415-469</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>M500-N w/ OHS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 5mL</td>
			<td>BD</td>
			<td>309646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas-Tubingen Spring Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15008-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Korn Pharmaceuticals Corp</td>
			<td>NDC 59399-110-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yasargil Clamp</td>
			<td>Aesculap, Inc</td>
			<td>FT351T</td>
			<td>Used to clamp bronchus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yasargil Clamp</td>
			<td>Aesculap, Inc</td>
			<td>FT261T</td>
			<td>Used to clamp hilum</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yasargil Clamp Applicator</td>
			<td>Aesculap, Inc</td>
			<td>FT484T</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a rat lung transplantation model of warm ischemia/reperfusion injury: optimizations to improve outcomes

चूहे के फेफड़ों के प्रत्यारोपण के साथ हमारे अनुभव से, हमें सुधार के लिए कई क्षेत्र मिले हैं। फुफ्फुसीय नस (पीवी), फुफ्फुसीय धमनी (पीए), या ब्रोन्कस (बीआर) के लिए उपयुक्त कफ आकार चुनने के तरीकों के बारे में मौजूदा साहित्य में जानकारी विविध है, इस प्रकार चूहे के फेफड़ों के प्रत्यारोपण के दौरान उचित कफ आकार का निर्धारण परीक्षण और त्रुटि का अभ्यास है। पोत या ब्रोन्कस के आकार के लिए उपयुक्त सबसे छोटे प्रभावी कफ का उपयोग करने के लिए कफिंग तकनीक को मानकीकृत करके, कोई प्रत्यारोपण प्रक्रिया को सुरक्षित, तेज और अधिक सफल बना सकता है। चूंकि पीवी, पीए और बीआर के व्यास चूहे के शरीर के वजन से संबंधित हैं, इसलिए हम वजन-आधारित गाइड का उपयोग करके उचित आकार चुनने के लिए एक रणनीति प्रस्तुत करते हैं। चूंकि फेफड़ों की मात्रा शरीर के वजन से भी संबंधित है, इसलिए हम अनुशंसा करते हैं कि गर्म इस्किमिया के दौरान दाता फेफड़ों की मुद्रास्फीति के लिए हवा की उचित मात्रा चुनते समय और साथ ही ब्रोंकोएल्वोलर लैवेज (बीएएल) द्रव संग्रह के दौरान पीबीएस की उचित मात्रा का चयन करते समय इस संबंध पर भी विचार किया जाना चाहिए। हम देशी और प्रत्यारोपित दोनों लोब से 4वें इंटरकोस्टल स्पेस विच्छेदन, घाव बंद करने और नमूना संग्रह के तरीकों का भी वर्णन करते हैं।

फुफ्फुसीय एडिमा को मापने के लिए, गीले-से-सूखे वजन अनुपात की गणना की गई थी। दाता के मूल लोब, प्रत्यारोपित लोब, और प्राप्तकर्ता के मूल लोब को प्रोटोकॉल में वर्णित के रूप में एकत्र किया गया था और ?...

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यहां, हम एक चूहे के फेफड़े के प्रत्यारोपण मॉडल के लिए अनुकूलन प्रस्तुत करते हैं जो परिणामों में सुधार करने के लिए काम करते हैं। हम शरीर के वजन के आधार पर कफ के लिए एक आकार मार्गदर्शिका प्रदान करते हैं, 4वें इंटरकोस्टल स्थान का पता लगाने के लिए एक माप रणनीति, और घाव बंद करने और बीएएल (ब्रोन्कोएल्वोलर लैवेज) द्रव और ऊतक संग्रह के तरीके।

गर्म इस्केमिया / रीपरफ्यूजन चोट का एक चूहा फेफड़े प्रत्यारोपण मॉडल: परिणामों में सुधार के लिए अनुकूलन

From our experience with rat lung transplantation, we have found several areas for improvement. Information in the existing literature regarding methods ...

यह प्रोटोकॉल कार्यप्रणाली को बेहतर बनाने में मदद करने के लिए चार प्रमुख क्षेत्रों की पहचान करता है और विश्वसनीय फेफड़ों के प्रत्यारोपण है। सबसे पहले एक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य कफिंग तकनीक है। दूसरा सटीक और पुन: सटीक रूप से चौथे इंटरकोस्टल स्पेस की पहचान करना, घाव का पूरी तरह से बंद होना, और फिर विश्लेषण के लिए नमूने कैसे पुनर्प्राप्त करना और प्राप्त करना है।ये तकनीक आणविक तंत्र पर काम करने और चिकित्सीय हस्तक्षेप विकसित करने के लिए फेफड़ों के प्रत्यारोपण की एक विश्वसनीय विधि विकसित करने में मदद करती हैं। ऑक्सीजन संतृप्ति निगरानी उपकरण को चालू करके और बोर्ड को 42 डिग्री सेल्सियस तक गर्म करके सर्जिकल डिवाइस सेटअप से शुरू करें। इसके अलावा, आइसोफ्लुरेन बाष्पीकरणकर्ता को पूर्वप्राप्त करने के लिए वेंटिलेशन और संज्ञाहरण मशीन चालू करें।10 मिलीलीटर तरल आइसोफ्लुरेन के साथ एक संज्ञाहरण सिरिंज भरें और सिरिंज को वेंटिलेशन और संज्ञाहरण मशीन पर माउंट करें। इसके बाद, ऊंचाई के साथ सर्जिकल माइक्रोस्कोप चालू करें और प्राथमिकताओं पर ध्यान केंद्रित करें और इलेक्ट्रोकेटरी डिवाइस शुरू करें। इसी तरह, सर्जिकल उपकरण तैयार करें और बिछाएं।तालिका एक का उल्लेख करके चूहे के शरीर के वजन के आधार पर कफ बनाने के लिए उपयोग किए जाने वाले एंजियो-कैथेटर के सही गेज आकार का निर्धारण करें। फुफ्फुसीय धमनी, ब्रोन्कस और फुफ्फुसीय नस के लिए कफ तैयार करने के बाद, सर्जिकल माइक्रोस्कोप के तहत बाँझ सतह पर उचित आकार के एंजियो-कैथेटर रखें। फिर, एंजियो-कैथेटर को 90 डिग्री कोण तक काटने के लिए एक रिब-बैक सर्जिकल ब्लेड नंबर 11 का उपयोग करें ताकि कफ बॉडी के शीर्ष पर एक मिलीमीटर चौड़ाई और ऊंचाई के साथ दो मिलीमीटर लंबा कफ बॉडी बनाया जा सके।सर्जरी के लिए रैप तैयार करने के बाद, कैंची के साथ तीन से चार सेंटीमीटर लंबी मध्यरेखा त्वचा चीरा, मध्य गर्दन बनाएं, और बल का उपयोग करके चमड़े के नीचे के ऊतकों और मांसपेशियों को सावधानीपूर्वक विच्छेदित करें। एंडोट्राचेल इंटुबैशन के लिए, श्वासनली के चारों ओर 4-0 रेशम सीवन पिरोएं। फिर, श्वासनली में 16 गेज एंजियो-कैथेटर डालें और श्वासनली के चारों ओर सीवन को एक डबल गाँठ के साथ कसकर बांधें, इसके बाद एंजियो-कैथेटर को पकड़ने के लिए एक एकल गाँठ के साथ।एंजियो-कैथेटर को वेंटिलेटर से कनेक्ट करें ताकि 1 से 2% आइसोफ्लुरेन के साथ चूहे में एनेस्थीसिया के सर्जिकल प्लेन को बनाए रखा जा सके। कैंची का उपयोग एक संयुक्त मध्य रेखा और अनुप्रस्थ चीरा के रूप में लैपरो-स्टर्नोटॉमी करने के लिए करें। फिर, अवर वेना कावा, या आईवीसी के माध्यम से इंसुलिन सिरिंज के साथ हेपरिन के प्रति किलोग्राम 1,000 इकाइयों को इंजेक्ट करें, और प्रणालीगत परिसंचरण के लिए 10 मिनट की अनुमति दें।जब फेफड़े हवादार होते हैं, तो माइक्रो विच्छेदन स्प्रिंग कैंची के साथ दाएं और बाएं ऑरिकल्स को काट लें और फिर फुफ्फुसीय धमनी के माध्यम से 18 गेज एंजियो-कैथेटर पेश करें ताकि फेफड़ों को 28 सेंटीमीटर पानी में लटकने वाली सिरिंज में 20 मिलीलीटर संरक्षण समाधान के साथ फ्लश किया जा सके, जो ट्यूबिंग और एंजियो-कैथेटर से जुड़ा हुआ है। शरीर के वजन के आधार पर हवा की उचित मात्रा से भरे पांच मिलीलीटर सिरिंज से जुड़ने के लिए एंडोट्राचेल ट्यूब से वेंटिलेटर को डिस्कनेक्ट करें। गर्म इस्किमिया के एक घंटे के बाद, दिल-फेफड़ों के ब्लॉक को माइक्रो विच्छेदन स्प्रिंग कैंची और फोर्सप्स के साथ एक्साइज करें और बर्फ पर बाँझ पेट्री डिश पर बर्फ ठंडे पीबीएस के साथ एक बाँझ धुंध पर रखें।वन्नास-ट्यूबिंगन स्प्रिंग कैंची के साथ बाएं फेफड़े के हिलर क्षेत्र को सावधानीपूर्वक ट्रिम करें और बाएं फुफ्फुसीय नस, फुफ्फुसीय धमनी और ब्रोंकस प्राप्त करें। कफ टैब को पकड़ने के लिए मच्छर हेमोस्टैट का उपयोग करें। फिर, फुफ्फुसीय नस, फुफ्फुसीय धमनी, या ब्रोंकस के बाहर के छोर को उपयुक्त कफ शरीर के माध्यम से लें और 8-0 के साथ सुरक्षित करने से पहले कफ के चारों ओर अतिरिक्त ऊतक को आगे बढ़ाएं नायलॉन सीवन।एक बार ऐसा करने के बाद, कफ शरीर के चारों ओर अतिरिक्त ऊतक और कफ को ट्रिम करने के लिए वन्नास-ट्यूबिंगन स्प्रिंग कैंची का उपयोग करें। प्राप्तकर्ता चूहे को तैयार करने के लिए, सुपरस्टर्नल नॉच से xiphoid प्रक्रिया तक चूहे की छाती पर एक रेखा खींचें। इस रेखा के मध्य में, छाती के बाईं ओर एक रेखा खींचें जो सुप्रास्टर्नल नॉच से एक्सिफॉइड प्रक्रिया तक माप के आधे हिस्से को मापता है।एंडोट्राचेल इंट्यूबेशन किट से एलईडी लाइट से जुड़े फाइबर ऑप्टिक केबल का उपयोग करके, प्राप्तकर्ता को 16 गेज एंजियो-कैथेटर के साथ कल्पना और इंट्यूबेट करें। एक बार फेफड़े बाहर खींच लिए जाने के बाद, बाएं फेफड़े के चारों ओर एक बाँझ धुंध रखें, जबकि इसे डिफेनबैक बुलडॉग क्लैंप के साथ पकड़ें और बाएं फेफड़े के हिलर क्षेत्र पर यथासंभव समीपस्थ रूप से यासरगिल क्लैंप लागू करें। जब चूहा तैयार हो जाता है, तो प्राप्तकर्ता की फुफ्फुसीय नस के चारों ओर 7-0 नायलॉन सीवन रखकर फुफ्फुसीय नस एनास्टोमोसिस के लिए आगे बढ़ें।वाननास-ट्यूबिंगन स्प्रिंग कैंची का उपयोग करके प्राप्तकर्ता की फुफ्फुसीय नस को ऊपरी और निचले खंड यी नसों को यथासंभव दूर से काटकर इंजेक्ट करें, और इंसुलिन सिरिंज का उपयोग करके प्रति मिलीलीटर हेपरिनाइज्ड खारा के 0.2 मिलीलीटर के साथ रक्त को बाहर निकालें। दाता फेफड़े को बर्फ-ठंडे, गीले, बाँझ धुंध के साथ लपेटकर वक्ष गुहा में रखें, और 7-0 नायलॉन सीवन के साथ एनास्टोमोसिस को सुरक्षित करने से पहले दाता की कफ फुफ्फुसीय नस को प्राप्तकर्ता की फुफ्फुसीय नस में डालें। ब्रोन्कियल या ब्रोन्कस एनास्टोमोसिस के लिए, प्राप्तकर्ता के ब्रोन्कस के चारों ओर 7-0 नायलॉन सीवन रखें, इससे पहले कि प्राप्तकर्ता के ब्रोन्कस को ऊपरी और निचले खंडीय वायुमार्ग को यथासंभव दूर से काटकर इंजेक्शन दिया जाए।प्राप्तकर्ता के ब्रोंकस में दाता के कफ ब्रोंकस डालने के बाद, एनास्टोमोसिस को प्रीपोजिशन 7-0 नायलॉन सीवन के साथ सुरक्षित करें। इसके बाद, फुफ्फुसीय धमनी एनास्टोमोसिस करें जैसा कि पहले वर्णित है। प्रत्यारोपित दाता फेफड़े के पुन: प्रसार और वेंटिलेशन की अनुमति देने के लिए, हिलम पर यासरगिल क्लैंप को हटा दें, इसके बाद थोराकोटॉमी चीरा को 6-0 नायलॉन सीवन के साथ बंद करें।देशी या प्रत्यारोपित फेफड़ों से बीएएल द्रव को इच्छानुसार एकत्र करें। फुफ्फुसीय एडिमा को मापने के लिए लोब के गीले से सूखे वजन अनुपात की गणना की गई थी। प्रत्यारोपित लोब ने दाता या प्राप्तकर्ता के मूल लोब की तुलना में गीले से सूखे वजन अनुपात में उल्लेखनीय वृद्धि दिखाई, जो कोई फुफ्फुसीय एडिमा का संकेत नहीं देती है।हमारी राय में, इस प्रक्रिया के दो महत्वपूर्ण चरण एक हैं, चौथे इंटरकोस्टल स्पेस की पहचान करने के लिए एनाटॉमिक लैंडमार्क का सटीक रूप से उपयोग करें, और फिर दो, प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य कफिंग तकनीक के लिए कफ का चयन करें और उचित रूप से उपयोग करें। एक चूहे के फेफड़े प्रत्यारोपण मॉडल जो प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य और सुसंगत दोनों है, सामान्य रूप से इस्किमिया रिप्रोफ्यूजन और प्रत्यारोपण में आणविक जांच के लिए एक आधार है।

Research

JoVE Journal

Medicine

A Rat Lung Transplantation Model of Warm Ischemia/Reperfusion Injury: Optimizations to Improve Outcomes

Normothermic Cardiac Arrest and Cardiopulmonary Resuscitation: A Mouse Model of Ischemia-Reperfusion Injury

Normothermic Cardiac Arrest and Cardiopulmonary Resuscitation: A Mouse Model of Ischemia-Reperfusion Injury Video (Video) | JoVE

Normothermic कार्डिएक गिरफ्तार और कार्डियोपल्मोनरी resuscitation: Ischemia reperfusion चोट के एक माउस मॉडल

Acute Kidney Injury (AKI) is a common, highly lethal, complication of critical illness which has a high mortality1-4 and which is most 
frequently caused ...

Stem Cell Transplantation in an in vitro Simulated Ischemia/Reperfusion Model

Stem Cell Transplantation in an in vitro Simulated Ischemia/Reperfusion Model Video (Video) | JoVE

एक में स्टेम सेल प्रत्यारोपण इन विट्रो में नकली मॉडल / Ischemia reperfusion

Stem cell transplantation protocols are finding their way into clinical practice1,2,3. Getting better results, making the protocols more robust, and ...

In situ Transverse Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A Rat Model of Myocutaneous Ischemia Reperfusion Injury

In situ Transverse Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A Rat Model of Myocutaneous Ischemia Reperfusion Injury Video (Video) | JoVE

Myocutaneous ischemia reperfusion चोट का एक चूहा आदर्श: सीटू अनुप्रस्थ rectus abdominis Myocutaneous प्रालंब में

Free tissue transfer is the gold standard of reconstructive surgery to repair complex defects not amenable to local options or those requiring composite ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice Video (Video) | JoVE

चूहे में तीव्र गुर्दे की चोट और पोस्ट चोट फाइब्रोसिस की ischemia-reperfusion मॉडल

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery Video (Video) | JoVE

वाम पूर्वकाल अवरोही धमनी की ligation के माध्यम से myocardial ischemia-reperfusion चोट के एक murine मॉडल

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program Video (Video) | JoVE

पृथक करने की विधि<em&gt; पूर्व vivo</emएक चूहे मॉडल में&gt; फेफड़े छिड़काव: एक चूहा EVLP कार्यक्रम के विकास से सबक सीखा

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts

Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts Video (Video) | JoVE

Langendorff-perfused चूहा दिल में प्रेरण और ischemia-reperfusion की चोट का आकलन

The biochemical events surrounding ischemia reperfusion injury in the acute setting are of great importance to furthering novel treatment options for ...

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury Video (Video) | JoVE

आंतों ischemia-reperfusion की चोट के murine मॉडल

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

A Mouse Model of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury Through Elevation of Intraocular Pressure

A Mouse Model of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury Through Elevation of Intraocular Pressure Video (Video) | JoVE

Intraocular दबाव की ऊंचाई के माध्यम से रेटिना ischemia-reperfusion चोट का एक माउस मॉडल

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, ...

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats Video (Video) | JoVE

चूहों में मायोकार्डियल इस्कीमिया रिपरफ्यूजन के बाद कोरोनरी फ्लो रिजर्व का मूल्यांकन

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...