Determination (in silico) of the ANS and SERCA N‐Domain Interaction
3:09
Expression and Purification of the Recombinant N‐Domain
3:39
Monitor the Formation of the ANS‐N‐Domain Complex Based on ANS and N‐Domain Fluorescence Intensity Changes
7:38
N‐Domain Intrinsic Fluorescence Titration by Trp Chemical Modification with NBS
8:43
Titrate the NBS Modified N‐Domain with ANS by Recording Fluorescence Spectra at 25°C
9:37
Evidence of ANS Binding to the Chemically Modified N‐Domain by Excitation at λ = 370 nm
10:32
Results Overview
11:30
Conclusions
Transcript
Dessa analyser kan bidra till att klargöra rollen av tryptofanrester i proteiner när man utför ANS bindande studier. ANS fluorescens ökar vid bindning till specifika strukturella platser i proteiner. Ibland ans bindning webbplats lokaliserar nära
Sign in or start your free trial to access this content
ANS binder till ca2+-ATPase rekombinant N-domän. Fluorescensspektra visar ett FRET-liknande mönster vid excitation vid en våglängd på 295 nm. NBS-medierad kemisk modifiering av Trp släcker N-domänens fluorescens, vilket leder till avsaknad av energiöverföring (FRET) mellan Trp-resterna och ANS.