3.0K Views
•
09:41 min
•
September 3rd, 2021
DOI :
September 3rd, 2021
•0:04
Introduction
1:09
Computer Setup
2:10
Anesthesia Preparation and Maintenance
2:48
Evaluation of In Vivo Isometric Torque
5:44
Torque-Joint Angle, Torque-Frequency, and Data Analysis
6:54
Results: Evaluation and Interpretation of Hindlimb Dorsiflexor Isometric Torque from Pig
8:55
Conclusion
Transcript
Esta técnica representa um método não invasivo para avaliar o ganho ou perda da função muscular em um ambiente fisiológico. Também pode ser usado para avaliar longitudinalmente a função no mesmo sujeito durante a progressão da doença ou antes, durante ou após a estratégia de tratamento. Este método fornece um verdadeiro teste de força máxima porque as contrações musculares são evocadas de forma controlada quantificável, independente da motivação do sujeito.
Todas as questões de pesquisa que avaliam o músculo esquelético podem ser amplificadas por essa metodologia, pois fornecem dados valiosos sobre a função primária do músculo. Indivíduos normalmente requerem de dois a 300 experimentos antes de aperfeiçoar uma abordagem animal de pequeno porte semelhante. Em nossa experiência, essa grande técnica animal requer menos tempo.
O posicionamento do joelho, a colocação de eletrodos, sujeitos na maca e altura da placa do pé exigem prática. Para começar, ligue o computador, o estimulador, o sistema transdutor e a interface digital analógica cerca de 30 minutos antes do teste para permitir a estabilização de alterações de material relacionadas ao calor que podem impactar propriedades elétricas. Em seguida, selecione o dispositivo de aquisição de dados apropriado e conectado.
Em seguida, para otimizar a colocação do eletrodo, clique em preparar o experimento quando estiver pronto para começar o estudo. Abra o monitor de dados ao vivo para permitir a investigação em tempo real ou visualização das contrações. Em seguida, clique em Instant Sim para entregar contrações repetidas.
Alternativamente, pressione o botão de acionamento manual na unidade estimuladora para dar manualmente uma contração. Clique no experimento de execução quando estiver preparado para iniciar o experimento. Uma vez que o porco esteja totalmente anestesiado, limpe os membros traseiros direito e esquerdo com água e sabão para remover quaisquer detritos e raspar o cabelo da pele prestando muita atenção à área lateral do joelho que mais tarde será usada para colocação de eletrodos.
Em seguida, transporte o porco para uma mesa cirúrgica e coloque-o com segurança na posição supina com o porco em direção ao pé da mesa e os músculos glúteos na ou ligeiramente sobre a extremidade da mesa. Para avaliar o torque isométrico in vivo, coloque o pé na placa do pé do transdutor de força, em seguida, usando um curativo coeso flexível, coloque o pé na placa do pé. Mantenha o pé em posição na placa do pé com o tornozelo no neutro, em seguida, fixar o pé na placa, envolvendo o curativo coeso ao redor do pé e da placa do pé no estilo de uma cesta fechada de toque no tornozelo.
Uma vez que o pé esteja preso à placa do pé, posicione o tornozelo em um ângulo reto, definido como zero graus ou neutro para referência de graus de plantadeira ou deflexão da porta. Após estabilizar o joelho e o tornozelo em um ângulo reto, posicione as barras de fixação do membro perto dos locais necessários. E quando estiver pronto, a partir do aspecto medial do membro, alinhe a barra de fixação do membro em cerca do platô tibial.
Em seguida, alinhe a barra lateral de fixação do membro na cabeça distal do fêmur e estabilize as barras firmemente usando os parafusos do polegar de bloqueio. Em seguida, aplique 70% de álcool e usando gauss limpo, limpe a pele ao redor da cabeça fibular em círculos concêntricos começando no centro da colocação pretendida de eletrodos e movendo-se para fora. Em seguida, coloque os eletromídes estilo de agulha percutânea estéril através do nervo perineal e implante os eletrodos subdermicamente a uma profundidade de aproximadamente cinco a 10 milímetros.
Otimize a colocação do eletrodo utilizando amplitudes de corrente crescentes ajustadas no estimulador, começando em 100 miliamperes e aumentando conforme necessário. Visualize a magnitude do torque do contração na visualização de dados ao vivo e sobre o compartimento interno do porco. Os cascos podem jogar e mover-se para cima também.
Certifique-se de que o compartimento posterior através do nervo da tíbia não seja ativado durante a estimulação. Inspecione visualmente e palpe a contração posterior do compartimento e o movimento descendente dos cascos durante a estimulação. Inspecione a região do planalto da contração tetanic a partir do rastreamento do tempo de torque ao vivo nas etapas seguintes por falta de recrutamento muscular antagonista.
Uma vez otimizadas as amplitudes de colocação e estimulação do eletrodo, o torque tetanico isométrico isométrico ilícito utiliza os parâmetros de estimulação descritos no manuscrito do texto. Para a análise do ângulo da articulação do torque, meça o torque tetanico isométrico máximo em uma gama de posições do tornozelo que vão desde neutras até as faixas próximas de flexão do plantador ou zero a 50 graus de flexão vegetal. Após a medição, comece a afrouxar os parafusos de bloqueio do estágio goniômetro para se mover entre os ângulos das articulações e certifique-se de que ambos os parafusos de bloqueio sejam apertados antes da próxima contração.
Para análise da frequência de torque, posicione o tornozelo no ângulo articular desejado e, em seguida, meça o torque isométrico máximo sobre uma gama de frequências de estimulação que induzem trens não fundidos de contrações até e além daquelas que induzem tétano totalmente fundido. Para analisar os dados, abra o programa de análise. Em seguida, usando uma plataforma de dados automatizada, calcule as diferentes variáveis na análise de formas individuais de ondas isométricas.
Durante a avaliação in vivo, a visualização da forma de onda de torque é necessária em tempo real para garantir a ativação do compartimento anterior adequado. As formas de onda devem apenas refletir a dose de reflexão e ter uma aparência arredondada suave e um planalto tetanic aparente. Inconsistências ou perturbações da forma de onda podem indicar estimulação inadequada ou colocação inadequada de eletrodos.
Aqui mostrado é torque de contração e traçado de torque tetanic com torque máximo de 50%. As barras tracejadas nos membros ascendentes e descendentes do traçado do tempo de torque tetanic representam uma faixa de torque máximo de 30 a 70% que pode determinar a taxa média de contração ou relaxamento. São mostrados valores representativos para o ângulo da articulação do torque e as relações de frequência de torque para membros não segurados.
O torque isométrico simultâneo e as gravações emG foram feitas em frequências de estimulação de 20, 60 e 100 Hertz. O número de pulsos estimuladores reflete o quociente da duração da estimulação e do tempo entre os pulsos. Uma frequência de estimulação de 20 Hertz significa um pulso a cada 50 milissegundos, portanto uma duração de estimulação de 400 milissegundos dividida por 50 milissegundos entre pulsos é igual a oito pulsos entregues.
Gravações emG cruas são convertidas através de análise quadrada de meios radiculares para visualizar a atividade muscular total com crescente frequência de estimulação. Ao avaliar o torque isométrico, o alinhamento anatômico adequado, a colocação adequada do eletro e a confirmação de que a contração provocada é para o compartimento anterior são apenas chaves para um procedimento bem sucedido. Por se trata de um procedimento não terminal, pode ser combinado com vários resultados de estudo suplementares.
Por exemplo, no grande modelo animal, a avaliação da marcha e da mobilidade pode ser testada no mesmo dia, juntamente com dados de força máxima para entender melhor como a função neuromuscular influencia a ambulação.
O presente protocolo descreve detalhes experimentais concisos sobre a avaliação e interpretação dos dados de torque in vivo obtidos por estimulação elétrica do nervo peroneal comum em suínos anestesiados.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved