Name: optogenetic phase transition of tdp-43 in spinal motor neurons of zebrafish larvae
Uploaded: 2022-02-25T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Optogenetic Phase Transition of TDP-43 in Spinal Motor Neurons of Zebrafish Larvae at JoVE.com

इस काम को SERIKA FUND (KA), KAKENHI Grant Numbers JP19K06933 (KA) और JP20H05345 (KA) द्वारा समर्थित किया गया था।

सभी मछली कार्य राष्ट्रीय आनुवंशिकी संस्थान (जापान) की संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति (अनुमोदन पहचान संख्या 24-2) के प्रयोगशाला जानवरों की देखभाल और उपयोग के लिए गाइड के अनुसार आयोजित किए गए थे, जिसमें...

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	<li>Brangwynne, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phase+transitions+and+size+scaling+of+membrane-less+organelles.">Phase transitions and size scaling of membrane-less organelles.</a> Journal of Cell Biology. 203 (6), 875-881 (2013).</li><li>Hyman, A. A., Weber, C. A., Julicher, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liquid-liquid+phase+separation+in+biology.">Liquid-liquid phase separation in biology.</a> Annual Review of Cell and Developmental Biology. 30, 39-58 (2014).</li><li>Lennox, A. 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A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optogenetic+regulation+of+endogenous+proteins.">Optogenetic regulation of endogenous proteins.</a> Nature Communications. 11 (1), 605 (2020).</li></ol>

ज़ेब्राफ़िश में opTDP-43h और EGFP-TDP-43z की mnr2b-BAC-मध्यस्थता अभिव्यक्ति रीढ़ की हड्डी के मोटर न्यूरॉन्स में TDP-43 चरण संक्रमण की लाइव इमेजिंग के लिए एक अनूठा अवसर प्रदान करती है। ज़ेब्राफ़िश लार्वा के शरीर के ऊतकों ?...

राइबोन्यूक्लियोप्रोटीन (आरएनपी) ग्रैन्यूल्स तरल-तरल चरण पृथक्करण (एलएलपीएस) के माध्यम से झिल्ली-कम विभाजन को इकट्ठा करके नाभिक और साइटोप्लाज्म में सेलुलर गतिविधियों के असंख्य को नियंत्रित करते हैं, एक घटना जिसमें एक सजातीय तरल पदार्थ दो अलग-अलग तरल चरणों में डीमिक्स करता है1,2। आरएनए-बाइंडिंग प्रोटीन के डिस्रेगुलेटेड एलएलपीएस जो आमतौर पर आरएनपी ग्रेन्युल घटकों के रूप में कार्य करते हैं, असामान्य चरण संक्रमण को बढ़ावा देते हैं, जिससे प्रोटीन एकत्रीकरण होता है। इस प्रक्रिया को न्यूरोडेवलपमेंटल और न्यूरोडीजेनेरेटिव बीमारियों 3,4,5 में फंसाया गया है। आरएनए-बाध्यकारी प्रोटीन और रोग रोगजनन के अनियमित एलएलपीएस के बीच एक कारण संबंध का सटीक मूल्यांकन यह निर्धारित करने के लिए महत्वपूर्ण है कि क्या और कैसे एलएलपीएस को एक प्रभावी चिकित्सीय लक्ष्य के रूप में शोषण किया जा सकता है। आरएनए-बाइंडिंग प्रोटीन के एलएलपीएस को विट्रो और एककोशिकीय मॉडल में अध्ययन करना अपेक्षाकृत आसान है, लेकिन बहुकोशिकीय जीवों में मुश्किल है, खासकर कशेरुकियों में। एक ऊतक वातावरण के भीतर व्यक्तिगत कोशिकाओं में इस तरह के एलएलपीएस का विश्लेषण करने के लिए एक महत्वपूर्ण आवश्यकता एक रोग-कमजोर सेल प्रकार के ब्याज में एलएलपीएस की इमेजिंग और हेरफेर के लिए एक जांच को स्थिर रूप से व्यक्त करना है।
एमियोट्रोफिक लेटरल स्केलेरोसिस (एएलएस) एक अंततः घातक न्यूरोलॉजिकल विकार है जिसमें मस्तिष्क और रीढ़ की हड्डी के मोटर न्यूरॉन्स चुनिंदा और उत्तरोत्तर अपघटन के कारण खो जाते हैं। आज तक, 25 से अधिक जीनों में उत्परिवर्तन एएलएस के वंशानुगत (या पारिवारिक) रूप से जुड़े हुए हैं, जो कुल एएलएस मामलों के 5% -10% के लिए जिम्मेदार है, और इनमें से कुछ एएलएस-कारण जीन आरएनए-बाध्यकारी प्रोटीन को एन्कोड करते हैं, जिसमें आरएनपी शामिल हैं, जैसे कि एचएनआरएनपीए 1, टीडीपी -43, और एफयूएस 6, 7। इसके अलावा, एएलएस का छिटपुट रूप, जो कुल एएलएस मामलों का 90% -95% है, को टीडीपी -43 के साइटोप्लाज्मिक एकत्रीकरण की विशेषता है जो मोटर न्यूरॉन्स में जमा होता है। इन एएलएस-संबद्ध आरएनए-बाइंडिंग प्रोटीन की एक प्रमुख विशेषता उनके आंतरिक रूप से अव्यवस्थित क्षेत्र (आईडीआर) या कम जटिलता वाले डोमेन हैं जिनमें आदेशित तीन आयामी संरचनाओं की कमी है और कई अलग-अलग प्रोटीनों के साथ कमजोर प्रोटीन-प्रोटीन इंटरैक्शन की मध्यस्थता करते हैं जो एलएलपीएस 7,8 चलाते हैं। तथ्य यह है कि एएलएस-कारण उत्परिवर्तन अक्सर आईडीआर में होते हैं, इस विचार को जन्म दिया है कि इन एएलएस से संबंधित प्रोटीनों के एलएलपीएस और चरण संक्रमण एएलएस रोगजनन 9,10 को रेखांकित कर सकते हैं।
हाल ही में, ऑप्टोड्रॉपलेट विधि, एक क्रिप्टोक्रोम 2-आधारित ऑप्टोजेनेटिक तकनीक जो प्रकाश द्वारा प्रोटीन-प्रोटीन इंटरैक्शन के मॉडुलन की अनुमति देती है, को आईडीआर 11 के साथ प्रोटीन के चरण संक्रमण को प्रेरित करने के लिए विकसित किया गया था। चूंकि इस तकनीक को सफलतापूर्वक टीडीपी -43 तक विस्तारित किया गया है, इसने टीडीपी -43 और इसके संबंधित साइटोटॉक्सिसिटी 12,13,14,15 के पैथोलॉजिकल चरण संक्रमण के अंतर्निहित तंत्र को उजागर करना शुरू कर दिया है। इस प्रोटोकॉल में, हम एएलएस-कमजोर सेल प्रकारों को एक ऑप्टोजेनेटिक टीडीपी -43 देने के लिए एक आनुवंशिक विधि की रूपरेखा तैयार करते हैं, अर्थात्, ज़ेब्राफ़िश में स्पाइनल मोटर न्यूरॉन्स mnr2b / mnx2b जीन के लिए बीएसी का उपयोग करके मोटर न्यूरॉन विनिर्देश 16,17 के लिए एक होमोडोमेन प्रोटीन एन्कोडिंग। ज़ेब्राफ़िश लार्वा की उच्च पारभासी ऑप्टोजेनेटिक टीडीपी -43 के सरल, noninvasive प्रकाश उत्तेजना के लिए अनुमति देता है जो रीढ़ की हड्डी के मोटर न्यूरॉन्स में अपने चरण संक्रमण को ट्रिगर करता है। हम ज़ेब्राफ़िश स्पाइनल मोटर न्यूरॉन्स की लाइव इमेजिंग के लिए एक बुनियादी वर्कफ़्लो भी प्रस्तुत करते हैं और स्वतंत्र रूप से उपलब्ध फिजी / इमेजजे सॉफ़्टवेयर का उपयोग करके छवि विश्लेषण प्रकाश उत्तेजना के लिए ऑप्टोजेनेटिक टीडीपी -43 की प्रतिक्रियाओं को चिह्नित करते हैं। ये तरीके एक एएलएस-कमजोर सेलुलर वातावरण में टीडीपी -43 चरण संक्रमण की जांच के लिए अनुमति देते हैं और सेलुलर और व्यवहारिक स्तरों पर इसके रोग संबंधी परिणामों का पता लगाने में मदद करनी चाहिए।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Confocal microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>FV1200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epifluorescence microscope</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td>Axioimager Z1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence stereomicroscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MZ16FA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass base dish</td>
			<td>IWAKI</td>
			<td>3910-035</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>MEE</td>
			<td>CN-25C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LED panel</td>
			<td>Nanoleaf Limited</td>
			<td>Nanoleaf AURORA smarter kit</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mupid-2plus</td>
			<td>TAKARA</td>
			<td>AD110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NucleoBond BAC100</td>
			<td>MACHEREY-NAGEL</td>
			<td>740579</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NuSieve GTG Agarose</td>
			<td>LONZA</td>
			<td>50181</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Objective lens</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>XLUMPlanFL N 20&#215;/1.00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Objective lens</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td>Plan-Neofluar 5x/0.15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical power meter</td>
			<td>HIOKI</td>
			<td>3664</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical sensor</td>
			<td>HIOKI</td>
			<td>9742-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenol red solution 0.5%</td>
			<td>Merck</td>
			<td>P0290-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PrimeSTAR GXL DNA Polymerase</td>
			<td>TAKARA</td>
			<td>R050A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>QIAquick Gel Extraction Kit</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>28704</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Six-well dish</td>
			<td>FALCON</td>
			<td>353046</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectrometer probe BLUE-Wave</td>
			<td>StellerNet Inc.</td>
			<td>VIS-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe needle</td>
			<td>TERUMO</td>
			<td>NN-2725R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TaKaRa Ex Taq</td>
			<td>TAKARA</td>
			<td>RR001A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tricane</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A5040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zebrafish BAC clone CH211-172N16</td>
			<td>BACPAC Genomics</td>
			<td>CH211-172N16</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

optogenetic phase transition of tdp-43 in spinal motor neurons of zebrafish larvae

असामान्य प्रोटीन एकत्रीकरण और चयनात्मक न्यूरोनल भेद्यता न्यूरोडीजेनेरेटिव बीमारियों के दो प्रमुख लक्षण हैं। इन विशेषताओं के बीच कारण संबंधों को एक कमजोर सेल प्रकार में एक बीमारी से जुड़े प्रोटीन के चरण संक्रमण को नियंत्रित करके पूछताछ की जा सकती है, हालांकि यह प्रयोगात्मक दृष्टिकोण अब तक सीमित है। यहां, हम एमियोट्रोफिक लेटरल स्केलेरोसिस (एएलएस) में मोटर न्यूरॉन्स को विघटित करने वाले टीडीपी -43 के साइटोप्लाज्मिक एकत्रीकरण के लिए जेब्राफ़िश लार्वा के स्पाइनल मोटर न्यूरॉन्स में आरएनए / डीएनए-बाइंडिंग प्रोटीन टीडीपी -43 के चरण संक्रमण को प्रेरित करने के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन करते हैं। हम एक जीवाणु कृत्रिम गुणसूत्र (बीएसी) -आधारित आनुवंशिक विधि का वर्णन करते हैं जो ज़ेब्राफ़िश के स्पाइनल मोटर न्यूरॉन्स को चुनिंदा रूप से एक ऑप्टोजेनेटिक टीडीपी -43 संस्करण प्रदान करता है। ज़ेब्राफ़िश लार्वा की उच्च पारभासी अनियंत्रित मछली के खिलाफ एक प्रकाश उत्सर्जक डायोड (एलईडी) का उपयोग करके एक साधारण बाहरी रोशनी द्वारा स्पाइनल मोटर न्यूरॉन्स में ऑप्टोजेनेटिक टीडीपी -43 के चरण संक्रमण की अनुमति देती है। हम ज़ेब्राफ़िश स्पाइनल मोटर न्यूरॉन्स के लाइव इमेजिंग का एक बुनियादी वर्कफ़्लो भी प्रस्तुत करते हैं और स्वतंत्र रूप से उपलब्ध फिजी / इमेजजे सॉफ़्टवेयर के साथ छवि विश्लेषण प्रकाश रोशनी के लिए ऑप्टोजेनेटिक टीडीपी -43 की प्रतिक्रियाओं को चिह्नित करते हैं। यह प्रोटोकॉल टीडीपी -43 चरण संक्रमण के लक्षण वर्णन और एएलएस-कमजोर सेलुलर वातावरण में कुल गठन को सक्षम बनाता है, जो इसके सेलुलर और व्यवहारिक परिणामों की जांच की सुविधा प्रदान करना चाहिए।

ज़ेब्राफ़िश लार्वा के mnr2b+ स्पाइनल मोटर न्यूरॉन्स में ऑप्टोजेनेटिक और गैर-ऑप्टोजेनेटिक TDP-43 प्रोटीन की लाइव इमेजिंग जेब्राफ़िश में स्पाइनल मोटर न्यूरॉन्स में TDP-43 चरण संक्रमण को ...

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Optogenetic Phase Transition of TDP-43 in Spinal Motor Neurons of Zebrafish Larvae

हम एक मॉडल के रूप में ज़ेब्राफ़िश का उपयोग करके स्पाइनल मोटर न्यूरॉन्स में प्रकाश द्वारा टीएआर डीएनए-बाइंडिंग प्रोटीन 43 (टीडीपी -43) के चरण संक्रमण को प्रेरित करने के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन करते हैं।

Zebrafish लार्वा के स्पाइनल मोटर न्यूरॉन्स में TDP-43 के ऑप्टोजेनेटिक चरण संक्रमण

Abnormal protein aggregation and selective neuronal vulnerability are two major hallmarks of neurodegenerative diseases. Causal relationships between ...

तो यह प्रोटोकॉल हमें टीडीपी -43 के पैथोलॉजिकल चरण संक्रमण को प्रेरित करने और विवो में स्पाइनल मोटर न्यूरॉन्स में उनके सेलुलर परिणाम को संबोधित करने में सक्षम बनाता है, जो यह समझने के लिए प्रासंगिक है कि मोटर न्यूरॉन्स एएलएस में पतित क्यों होते हैं। ज़ेब्राफ़िश लार्वा की उच्च पारदर्शिता के कारण, रीढ़ की हड्डी में मोटर न्यूरॉन्स सीधे दिखाई देते हैं। तो कोई भी एकल रीढ़ की हड्डी मोटर न्यूरॉन्स में चरण संक्रमण से गुजरने वाले टीडीपी -43 के गतिशील व्यवहार की कल्पना कर सकता है।यह विधि एएलएस का एक उपन्यास पशु मॉडल प्रदान करती है। हमारा मानना है कि कोई भी विधि जो इस एएलएस मॉडल में प्रकाश प्रेरित TDP-43 चरण संक्रमण और एकत्रीकरण को रोक सकती है, एएलएस थेरेपी के लिए एक संभावित उम्मीदवार हो सकती है। आंतरिक रूप से अव्यवस्थित क्षेत्रों के साथ अन्य एएलएस से संबंधित प्रोटीन को असामान्य चरण संक्रमण से जुड़े न्यूरोटॉक्सिसिटी का पता लगाने के लिए व्यक्त किया जा सकता है।इस दृष्टिकोण में सफलता की कुंजी nontoxic स्तर पर रीढ़ की हड्डी मोटर न्यूरॉन्स में optogenetic TDP-43 व्यक्त करने के लिए है। बीएसी ट्रांसजेनेसिस एक समय लेने वाला कदम है, लेकिन एक बार जब आप एक उचित ट्रांसजेनिक मछली बनाते हैं, तो निम्नलिखित चरण अपेक्षाकृत आसान और सरल होते हैं। प्रारंभ करने के लिए, किसी टैबलेट या फ़ोन पर स्थापित संबद्ध अनुप्रयोग का उपयोग करके प्रकाश उत्सर्जक डायोड, या LED पैनल को चालू करें.इसके बाद, स्पेक्ट्रोमीटर जांच को 6-अच्छी तरह से पकवान के खाली कुएं में रखें। फिर आवेदन का उपयोग करते हुए, एलईडी प्रकाश को 456 एनएम पर एक तरंग दैर्ध्य चोटी पर समायोजित करें। एक ऑप्टिकल पावर मीटर के ऑप्टिकल सेंसर को खाली कुएं में रखें और एलईडी लाइट की शक्ति को समायोजित करें।फिर एलईडी पैनल के साथ डिश को 28 C पर इनक्यूबेटर में सेट करने के लिए ऑप्टोजेनेटिक टीडीपी -43 को व्यक्त करने वाले ज़ेबरा मछली लार्वा की इमेजिंग के लिए, डबल-ट्रांसजेनिक मछली को डिकोरियोनेट करें और उन्हें E3 बफर में एनेस्थेटाइज़ करें जिसमें 250 ग्राम / एमएल ट्राइकेन शामिल है। इसके बाद, 1% कम पिघलने वाले तापमान agarose preheat जिसमें 42 C. पर एथिल 3-aminobenzoate मीथेनसल्फोनेट के 250 g / mL शामिल हैं। कांच के पकवान पर गुंबद के आकार के एगरोज ड्रॉप का व्यास 8 से 10 मिमी होना चाहिए।अगला, एक पाश्चर पिपेट का उपयोग करके, कांच आधारित पकवान पर एगरोज में एनेस्थेटिक मछली जोड़ें। मछली के साथ agarose करने के लिए जोड़ा E3 बफर की मात्रा को कम से कम. फिर, कुछ बार पिपेट करके मिलाएं।एगारोज़ के ठोसीकरण के दौरान, एक सिरिंज सुई का उपयोग करके मछली को अपनी तरफ बनाए रखें, जैसे कि रीढ़ की हड्डी एक उपयुक्त क्षैतिज स्थिति में हो। agarose solidified है के बाद, गुंबद के आकार के agarose घुड़सवार मछली पर E3 बफर की एक जोड़ी बूँदें जोड़ें. एक confocal माइक्रोस्कोप का उपयोग कर एक 20 बार पानी विसर्जन उद्देश्य लेंस के साथ सुसज्जित, रीढ़ की हड्डी के सीरियल confocal z-वर्गों का अधिग्रहण.समय बिंदुओं में रीढ़ की हड्डी के खंडों की पहचान करने और तुलना करने के लिए एक संदर्भ के रूप में ब्याज के क्षेत्रों में मछली के वेंट्रल पक्ष पर क्लोआका शामिल करें। जैसे ही इमेजिंग पूरी हो जाती है, एगारोज़ को सावधानीपूर्वक क्रैक करने और एगारोज़ से मछली को हटाने के लिए एक सिरिंज सुई का उपयोग करें। मछली को जितना संभव हो उतना कम समय तक एगारोज़ में एम्बेडेड रखने की मात्रा रखें, हालांकि 30 मिनट से कम समय के लिए एगरोज एम्बेडिंग मछली की व्यवहार्यता को प्रभावित नहीं करती है।6-अच्छी तरह से पकवान के एक कुएं में E3 बफर के 7.5 मिलीलीटर जोड़ें और उस अच्छी तरह से छवि डबल-ट्रांसजेनिक मछली को रखें। फिर, डिश को एलईडी पैनल पर रखें, डिश और एलईडी पैनल को स्पेसर के साथ 5 मिमी अलग रखें, और नीली एलईडी लाइट चालू करें। एक अलग 6-अच्छी तरह से पकवान unilluminated नियंत्रण मछली के लिए एल्यूमीनियम पन्नी के साथ कवर में कुछ डबल ट्रांसजेनिक मछली रखें.वांछित रोशनी के समय के बाद, प्रबुद्ध मछली की रीढ़ की हड्डी को चित्रित किया गया जैसा कि पहले प्रदर्शित किया गया था। एकल स्पाइनल मोटर न्यूरॉन्स में opTDP-43h के साइटोप्लाज्मिक स्थानांतरण को 48 पर अधिग्रहित z-श्रृंखला छवियों को अलग करके कल्पना की गई थी। और प्रत्येक EGFP-TDP-43z और opTDP-43h चैनल में निषेचन के बाद 72 घंटे।EGFP-TDP-43z की अधिकतम तीव्रता प्रक्षेपण छवियों से, दोनों 48 पर एक एकल अलग रीढ़ की हड्डी न्यूरॉन पहचानयोग्य। और 72 घंटे के बाद निषेचन का चयन किया गया था। मोटर न्यूरॉन्स के सोमास को कवर करने वाले ब्याज के क्षेत्रों को 48 पर ईजीएफपी सिग्नल के किनारे का पता लगाकर सेट किया गया था।और निषेचन के बाद 72 घंटे। सोमा के प्रमुख अक्ष के साथ सामान्यीकृत फ्लोरोसेंट तीव्रता को प्लॉट किया गया था। और निषेचन के बाद 48 घंटों में, दोनों संकेतों के पैटर्न काफी हद तक एक-दूसरे को ओवरलैप करते हैं।इसके विपरीत, 72 घंटों में, opTDP-43h सिग्नल के लिए चोटी उस क्षेत्र में पाई गई थी जहां EGFP-TDP-43z सिग्नल कम था, जो opTDP-43h के साइटोप्लाज्मिक स्थानांतरण का संकेत देता है। नीली रोशनी उत्तेजना से पहले और बाद में opTDP-43h और EGFP-TDP-43z संकेतों को मापने के लिए, एक ही z-श्रृंखला छवियों के प्रत्येक चैनल के लिए कुछ स्लाइस प्रक्षेपण छवियों का उत्पादन 48 पर किया गया था। और निषेचन के बाद 72 घंटे।जांच की गई चार mnr2b + कोशिकाओं में से, सेल 1, विशेष रूप से एक संतृप्त EGFP-TDP-43z सिग्नल प्रदर्शित करता है। EGFP-TDP-43z के लिए opTDP-43h की सापेक्ष मात्रा GFP मान द्वारा RFP मान को विभाजित करके परिकलित की गई थी। सेल 2 से 4 नीली रोशनी रोशनी के बाद opTDP-43h स्तरों को कम करने का प्रदर्शन किया।मछली को स्वस्थ रखने के लिए एगारोज़ में एम्बेडेड होने के समय को कम करना महत्वपूर्ण है। एलईडी रोशनी की तीव्रता और अवधि को समायोजित करके, हम एक अस्थायी विनियमित तरीके से टीडीपी -43 चरण संक्रमण को नियंत्रित करते हैं, जो मोटर न्यूरॉन में पैथोलॉजिकल टीडीपी -43 चरण संक्रमण की प्रगति को विच्छेदित करने में मदद कर सकता है।

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Dissection and Culture of Commissural Neurons from Embryonic Spinal Cord

Dissection and Culture of Commissural Neurons from Embryonic Spinal Cord Video (Video) | JoVE

विच्छेदन और भ्रूणीय स्पाइनल कॉर्ड से Commissural न्यूरॉन्स की संस्कृति

Commissural neurons have been widely used to investigate the mechanisms underlying axon guidance during embryonic spinal cord development. The cell bodies ...

Optogenetic Activation of Zebrafish Somatosensory Neurons using ChEF-tdTomato

Optogenetic Activation of Zebrafish Somatosensory Neurons using ChEF-tdTomato Video (Video) | JoVE

Zebrafish somatosensory महाराज tdTomato का उपयोग न्यूरॉन्स की Optogenetic सक्रियकरण

Larval  zebrafish are emerging as a model for describing the development and function  of simple neural circuits. Due to their  external fertilization, ...

Extracellularly Identifying Motor Neurons for a Muscle Motor Pool in Aplysia californica

Extracellularly Identifying Motor Neurons for a Muscle Motor Pool in Aplysia californica Video (Video) | JoVE

एक स्नायु मोटर पूल के लिए Extracellularly मोटर न्यूरॉन्स की पहचान<em&gt; Aplysia californica</em

In animals with large  identified neurons (e.g. mollusks), analysis of motor pools is done using  intracellular techniques1,2,3,4. Recently,  we developed ...

Optogenetic Perturbation of Neural Activity with Laser Illumination in Semi-intact Drosophila Larvae in Motion

Optogenetic Perturbation of Neural Activity with Laser Illumination in Semi-intact Drosophila Larvae in Motion Video (Video) | JoVE

अर्ध अक्षुण्ण में लेजर रोशनी के साथ तंत्रिका गतिविधि के optogenetic गड़बड़ी<em&gt; ड्रोसोफिला</emप्रस्ताव में&gt; लार्वा

Drosophila larval locomotion is a splendid model system in developmental and physiological neuroscience, by virtue of the genetic accessibility of the ...

Zebrafish In Situ Spinal Cord Preparation for Electrophysiological Recordings from Spinal Sensory and Motor Neurons

Zebrafish In Situ Spinal Cord Preparation for Electrophysiological Recordings from Spinal Sensory and Motor Neurons

zebrafish<em&gt; सीटू</em&gt; रीढ़ की हड्डी रीढ़ की हड्डी में संवेदी और मोटर न्यूरॉन्स से electrophysiological रिकॉर्डिंग के लिए तैयारी

Zebrafish, first introduced as a developmental model, have gained popularity in many other fields. The ease of rearing large numbers of rapidly developing ...

Retrograde Neuroanatomical Tracing of Phrenic Motor Neurons in Mice

Phrenic मोटर न्यूरॉन्स के चूहों में प्रतिगामी Neuroanatomical अनुरेखण

Phrenic motor neurons are cervical motor neurons originating from C3 to C6 levels in most mammalian species. Axonal projections converge into phrenic ...

Tracking Drosophila Larval Behavior in Response to Optogenetic Stimulation of Olfactory Neurons

Tracking Drosophila Larval Behavior in Response to Optogenetic Stimulation of Olfactory Neurons

घ्राण न्यूरॉन्स की Optogenetic उत्तेजना के जवाब में ट्रैकिंग Drosophila लार्वा व्यवहार

The ability of insects to navigate toward odor sources is based on the activities of their first-order olfactory receptor neurons (ORNs). While a ...

Isolation and Culture of Oculomotor, Trochlear, and Spinal Motor Neurons from Prenatal Islmn:GFP Transgenic Mice

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जन्म के पूर्व Isl मिलियन से ओकुलोमोटर, ट्रोक्लोर और स्पाइनल मोटर न्यूरॉन्स की अलगाव और संस्कृति: जीएफपी ट्रांसजेनिक चूहे

Oculomotor neurons (CN3s) and trochlear neurons (CN4s) exhibit remarkable resistance to degenerative motor neuron diseases such as amyotrophic lateral ...

Measuring Glucose Uptake in Drosophila Models of TDP-43 Proteinopathy

Measuring Glucose Uptake in Drosophila Models of TDP-43 Proteinopathy

टीडीपी-43 प्रोटीनोपैथी के ड्रोसोफिला मॉडल में ग्लूकोज तेज मापना

Amyotrophic lateral sclerosis is a neurodegenerative disorder causing progressive muscle weakness and death within 2-5 years following diagnosis. Clinical ...

In Vivo Wireless Optogenetic Control of Skilled Motor Behavior

In Vivo Wireless Optogenetic Control of Skilled Motor Behavior

Vivo में वायरलेस Optogenetic कुशल मोटर व्यवहार के नियंत्रण

Fine motor skills are essential in everyday life and can be compromised in several nervous system disorders. The acquisition and performance of these ...