Name: in ovo feeding of commercial broiler eggs: an accurate and reproducible method to affect muscle development and growth
Uploaded: 2021-09-20T15:00:00
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저자는 계란을 기증하고 계란 부화에 대한 기술 지원을 제공 한 Cobb Vantress, Inc.에 감사하고 싶습니다. 저자는 니코틴아미드 리보시드 기술 지원에 대해 ChromaDex, Inc.에 감사하고 싶습니다.

모든 방법론은 조지아 대학 기관 동물 관리 및 사용위원회의 승인을 받았습니다.
1. 계란 배양 및 치료 투여
<ol><li>계란 조달 및 처리 과제<ol>
<li>배양되지 않은 수정 된 고수율 육계 알을 얻어 실험실로 운반하십시오.</li>
		<li>품질이 좋지 않은 것으로 간주되는 계란을 검사하고 폐기하십시오. 참고 : 잘못된 모양의 계란 (둥글고, 길쭉하고, 슬래브 면), 금이 가고, 더러워 지...

<ol>
	<li>Biressi, S., Molinaro, M., Cossu, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+heterogeneity+during+vertebrate+skeletal+muscle+development.">Cellular heterogeneity during vertebrate skeletal muscle development.</a> Developmental Biology. 308 (2), 281-293 (2007).</li><li>Chal, J., Pourquie, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Making+muscle:+Skeletal+myogenesis+in+vivo+and+in+vitro.">Making muscle: Skeletal myogenesis in vivo and in vitro.</a> Development. 144 (12), 2104-2122 (2017).</li><li>Sharma, J., Burmester, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resistance+of+Marek's+disease+at+hatching+in+chickens+vaccinated+as+embryos+with+the+Turkey+herpesvirus.">Resistance of Marek's disease at hatching in chickens vaccinated as embryos with the Turkey herpesvirus.</a> Avian Diseases. 26 (1), 134-149 (1982).</li><li>Al-Murrani, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+injecting+amino+acids+into+the+egg+on+embryonic+and+subsequent+growth+in+the+domestic+fowl.">Effect of injecting amino acids into the egg on embryonic and subsequent growth in the domestic fowl.</a> British Poultry Science. 23 (2), 171-174 (1982).</li><li>Ohta, Y., Kidd, M. T., Ishibashi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryo+growth+and+amino+acid+concentration+profiles+of+broiler+breeder+eggs,+embryos,+and+chicks+after+in+ovo+administration+of+amino+acids.">Embryo growth and amino acid concentration profiles of broiler breeder eggs, embryos, and chicks after in ovo administration of amino acids.</a> Poultry Science. 80 (10), 1430-1436 (2001).</li><li>Zhao, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+ovo+feeding+of+creatie+pyruvate+increases+hatching+weight,+growth+performance,+and+muscle+growth+but+has+no+effect+on+meat+quality+in+broiler+chickens.">In ovo feeding of creatie pyruvate increases hatching weight, growth performance, and muscle growth but has no effect on meat quality in broiler chickens.</a> Livestock Science. 206, 59-64 (2017).</li><li>Bieganowski, P., Brenner, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Discoveries+of+nicotinamide+riboside+as+a+nutrient+and+conserved+NRK+genes+establish+a+Preiss+Handler+independent+route+to+NAD1+in+fungi+and+humans.">Discoveries of nicotinamide riboside as a nutrient and conserved NRK genes establish a Preiss Handler independent route to NAD1 in fungi and humans.</a> Cell. 117 (4), 495-502 (2004).</li><li>Chi, Y., Sauve, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nicotinamide+riboside,+a+trace+nutrient+in+foods,+is+a+Vitamin+B3+with+effects+on+energy+metabolism+and+neuroprotection.">Nicotinamide riboside, a trace nutrient in foods, is a Vitamin B3 with effects on energy metabolism and neuroprotection.</a> Current Opinion in Clinical Nutrition and Metabolic Care. 16 (6), 657-661 (2013).</li><li>Gonzalez, J. M., Jackson, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+ovo+feeding+of+nicotinamide+riboside+affects+pectoralis+major+muscle+development.">In ovo feeding of nicotinamide riboside affects pectoralis major muscle development.</a> Translational Animal Science. 4 (3), 1-7 (2020).</li><li>Xu, X., Jackson, A. R., Gonzalez, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+in+ovo+nicotinamide+riboside+dose+on+broiler+myogenesis.">The effects of in ovo nicotinamide riboside dose on broiler myogenesis.</a> Poultry Science. 100 (3), 100926 (2021).</li></ol>

현재까지 조지아 대학의 곤잘레스 연구소는 가슴 핵 주요 근육 발달 및 성장에 대한 오보 먹이에서 니코틴 아미드 리보시드의 긍정적 인 효과를 입증 한 유일한 그룹입니다. 첫 번째 연구는 250 mM 니코틴아미드 리보시드의 난소 공급에서 노른자 낭9에 주사 할 때 근육량과 치수를 증가 시킨다는 것을 발견했습니다. 후속 연구에서, 현재 연구에서 테스트 된 용?...

1960 년 이래로 미국의 가금류로 인한 육류의 일인당 소비량은 놀라운 속도로 증가한 반면, 다른 주요 단백질 공급원은 정체, 감소 또는 최소 증가로 유지되었습니다. 가금류 산업은 수요를 따라 잡을 수있는 효율적인 새를 생산하기 위해 영양과 유전학을 최적화하는 데 상당한 시간과 연구 노력을 투자했습니다. 가금류 산업의 주요 목표는 고기로의 전환을위한 근육을 생산하는 것이기 때문에 그들의 노력은 수확시 새의 궁극적 인 근육 질량을 크게 변화 시켰습니다.
대부분의 종과 마찬가지로, 가금류는 이분법 방식으로 근육을 발달시킵니다. 원발성 근형성은 중간엽 줄기 세포를 이용하여 일차 근섬유를 생산하며, 이는 근섬유 발달의 두 번째 파동을 위한 스캐폴드 역할을 한다1. 가금류에서 일차 근형성은 배아 3 일에서 8 일 사이에 발생하고 2 차 근 형성은 8 일에서 21 일2 일까지 발생합니다. 일단 개발되면, 일차 및 이차 근육 섬유는 세포 비대를 통한 모든 미래 근육 성장의 기초가됩니다. 따라서 과학자들과 산업계는 육류 수확량을 극대화하기 위해 모든 육류 생산 종에서 일차 및 이차 근형성을 조작하려고 상당한 노력을 기울였습니다.
가금류에서 탐구 된 한 가지 기술은 난소 먹이기라고 불리며 주사를 통해 화합물을 공급하는 것입니다. 거의 40 년 동안 가금류 산업에서 채택 된 기술 인 ovo feeding에서 처음에는 백신 투여를 위해 개발되었습니다3. 문헌은 난자 내의 다른 발달 기간과 위치에서 다양한 화합물과 영양소의 난소 먹이가 난소 근육 발달 및 성장에 긍정적 인 영향을 미친다는 것을 문서화합니다 4,5,6. 현재까지 조지아 대학의 곤잘레스 연구소는 가금류 근육 발달을 조작하기 위해 난소 먹이에서 니코틴 아미드 리보시드를 활용하는 선구자입니다.
비타민 B3의 피리딘-뉴클레오시드 유사체인 니코틴아미드 리보시드는 구조 경로7을 통해 NAD+를 생산합니다. 이 경로는 NAD +를 생산하기 위해 더 적은 효소 단계를 활용하기 때문에 생산이 가장 효율적입니다8. 곤잘레스와 잭슨9 은 니코틴아미드 리보시드를 사용한 육계 배아 노른자 낭을 보충하면 부화 병아리 가슴 뼈가 주요 근육 무게와 근육 섬유 밀도를 증가시킨다는 것을 입증했다. 이것은 나중에 Xu et al.10에 의해 확인되었는데, 그는 니코틴 아미드 리보시드 복용량이 증가하면 근육 무게가 증가하고 근육 섬유 밀도가 증가한다는 것을 발견했습니다. 이 처음 두 연구는 상업적 수확량 육계에서 수행되었습니다. 고수율 육계는 궁극적 인 근육 질량 크기에 대한보다 중요한 유전 적 잠재력을 가지고 있기 때문에이 연구의 목적은 고수율 육계가 부화 한 병아리 가슴 뼈 발달 및 부화시 성장에 대한 니코틴 아미드 리보시드 용량의 효과를 결정하는 것이 었습니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Air-Tite&#8482; Sterile Hypodermic Needles- 20 G; 1 inch</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-817-208</td>
			<td>https://www.fishersci.com/shop/products/sterile-hypodermic-needles-32/p-7182916#?keyword=</td>
		</tr>
		<tr>
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			<td>VWR</td>
			<td>VWR-214B2</td>
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		</tr>
		<tr>
			<td>Complete Dissection Set</td>
			<td>DOCAZON</td>
			<td>DK1001</td>
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		</tr>
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		</tr>
		<tr>
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			<td>14-955-464</td>
			<td>https://www.fishersci.com/shop/products/sterile-syringes-single-use-12/p-7114739#?keyword=</td>
		</tr>
		<tr>
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		</tr>
		<tr>
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		</tr>
		<tr>
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			<td></td>
		</tr>
		<tr>
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			<td>Neiko Tools</td>
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		</tr>
		<tr>
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			&#38;rt=rud</td>
		</tr>
		<tr>
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		</tr>
		<tr>
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		</tr>
		<tr>
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			<td>https://www.gqfmfg.com/item/1502-digital-sportsman/</td>
		</tr>
		<tr>
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			<td>ChromaDex, Inc.</td>
			<td>N/A</td>
			<td>https://www.truniagen.com/truniagen-300mg/ - note, contact company for pure product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wood Craft Sticks</td>
			<td>Creatology</td>
			<td>M20001547</td>
			<td>https://www.michaels.com/wood-craft-sticks-by-creatology/M20001547.html</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in ovo feeding of commercial broiler eggs: an accurate and reproducible method to affect muscle development and growth

지난 삼십 년 동안 붉은 고기와 가금류 과학자들은 배아 및 태아 발달 중에 근육 발달을 조작하기위한 전략과 기술을 개발하는 데 중점을 두었습니다. 이 영역은 근육 섬유 수가이 시간 동안 확립되고 모든 미래 성장을위한 기초를 결정하기 때문에 계속 초점 영역이됩니다. 가금류에서는 성장 인자, 비타민 또는 기타 영양소의 난소 먹이에서 병아리 배아 근육과 장 발달을 개선 한 수많은 연구가 입증되었습니다. 난소 근육 발달의 개선은 육류 수확량, 성장 속도 또는 근병증 조건에 영향을 미침으로써 가금류 산업에 도움이 될 수 있습니다. 지난 다섯 년 동안 조지아 대학의 곤잘레스 연구소는 육계-닭 배아 에 대한 난소 먹이 방법론에서 니코틴아미드 리보시드를 개발하여 근육 발달을 변화시켰습니다. 발달중인 배아의 노른자 주머니에 주입했을 때, 니코틴 아미드 리보시드는 부화시 가슴 근육 무게와 근육 섬유 밀도 를 증가 시켰습니다. 이 프로토콜은 상업적 표준 및 고수율 육계 배아를 활용하여 난소 수유 연구에서 정확하고 재현 가능하게 수행하는 방법론을 입증 할 것입니다. 이러한 데이터와 방법을 통해 다른 연구 그룹은 많은 성공과 재현성을 갖춘 난소 수유 연구를 수행 할 수 있습니다.

18일째 배아 및 부화한 병아리의 체중에 대한 DOS 효과는 없었다(P> 0.52; 그림 2). 하루 종일 DOS 효과는 없었다-18 배아 가슴 결핵 주요 근육 측정값 (P > 0.24; 그림 3). 부화 병아리 가슴 뼈 주요 근육 길이 및 폭 측정에 대한 DOS 효과는 없었다 (P > 0.26); 그러나, DOS는 근육 무게와 깊이에 영향을 미쳤다 (P < 0.03; <strong class=...

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In Ovo Feeding of Commercial Broiler Eggs: An Accurate and Reproducible Method to Affect Muscle Development and Growth

인큐베이션되지 않은 상업용 육계 알을 활용하여 근육 발달과 성장에 영향을 미치는 천연 및 합성 화합물, 이 경우 니코틴 아미드 리보시드의 능력을 테스트하기 위해 난소 수유 연구 시험을 수행하기 위해 강력한 방법론이 개발되었습니다.

오보에서 상업용 육계 달걀 먹이기 : 근육 발달과 성장에 영향을 미치는 정확하고 재현 가능한 방법

Within the past three decades, red meat and poultry scientists focused on developing strategies and technologies to manipulate muscle development during ...

포유류, 근육 섬유 수와 마찬가지로, 궁극적 인 근육 질량의 주요 결정 인자는 가금류 배아 발생 중에 확립됩니다. 이 방법을 통해 연구자들은 ovo 근형성과 근육 섬유 과형성의 조작에서 가금류를 연구 할 수 있습니다. 이 기술은 장비에 대한 투자가 거의 필요하지 않으며 근형성 조작을 연구하는 쉽고 상대적으로 저렴한 방법입니다.이 기술을 처음 접하는 연구자들은 알을 제대로 배양하는 데 어려움을 겪을 수 있습니다. 이 기술을 시연하는 것은 나 자신과 모건 그레이블리, 우리 실험실의 과학 대학원생 둘 다 될 것입니다. 실험을 시작하기 전에 품질이 좋지 않은 알을 검사하고 버리십시오.선택한 계란에 개별 계란 번호를 할당하고 기록 한 다음 계란의 무게를 측정하십시오. 다음으로, 적절한 인큐베이션 트레이에 알을 넣고 섭씨 26.6도에서 상대 습도 40 %로 6 시간 동안 미리 배양하십시오. 인큐베이션 후, 인큐베이션 18일까지 인큐베이터 온도를 섭씨 37도에서 40% 상대 습도로 증가시키고 유지한다.열 표면 온도계로 인큐베이터 전체에서 하루에 두 번 여러 알의 표면 온도를 측정하여 계란의 표면 온도가 섭씨 37도가되도록하십시오. 매 시간마다 회전하여 달걀의 위치를 계속 유지하십시오. 10 % ~ 12.5 %의 계란 체중 감소를 보장하려면 배양 첫 18.5 일 동안 매일 달걀 무게를 기록하십시오.인큐베이션 10일째에, 원고에 기재된 바와 같이 오보 주사 처리에서 각 100 마이크로리터에 필요한 니코틴아미드 리보시드 용액을 준비하고 수조에서 섭씨 37도에서 용액을 유지한다. 인큐베이터에서 한 번에 하나의 트레이로 달걀을 제거하고 따뜻한 수건으로 덮은 후 각 달걀을 양초로 촛불로 만들어 노른자 주머니를 찾습니다. 달걀 껍질 깊숙이 1 센티미터 깊이에 멸균 20 게이지 2.54 센티미터 피하 주사 바늘을 삽입하기 전에 70 % 에탄올로 주사 부위를 청소하여 100 마이크로 리터의 멸균 식염수로 니코틴 아미드 리보시드 처리의 할당 된 용량을 노른자 주머니에 주입하십시오.과도한 수분 손실을 피하기 위해 주사 부위를 절대 방수 테이프의 작은 조각으로 즉시 덮었습니다. 모든 계란이 치료를 받으면 트레이를 인큐베이터에 다시 넣으십시오. 잠복기 18 일에 쟁반에서 알을 꺼내 처리에 따라 할당 된 부화 상자에 넣은 다음 부화 상자를 모든 알이 부화 할 때까지 또는 부화 23 일까지 습도가 60 %로 증가하여 인큐베이터에 놓습니다.샘플 수집 전에 머리를 아래로 집어 넣고 몸 아래에 다리를 얹은 병아리를 옆으로 놓고 머리 꼭대기에서 꼬리까지의 길이를 측정 한 다음 부리 뒤쪽에서 두개골 뒤쪽까지 머리 길이의 한쪽 귀 구멍에서 다른 귀 구멍까지의 머리 너비를 측정하여 안락사 된 병아리의 엉덩이를 엉덩이로 만듭니다. 머리 둘레를 평가하려면 한쪽 귀 구멍에서 다른 귀 구멍으로 두개골 주위에 비 탄성 끈을 감싼 다음 메트릭 눈금자로 문자열의 측정을 구하십시오. 같은 방식으로, 측정을 획득하기 위해 미터법 통치자에 끈을 놓기 전에 날개가 신체와 접촉하는 곳 아래에 가슴 주위에 끈을 감싸서 가슴 둘레를 결정하십시오.병아리의 가슴에 70 % 에탄올을 뿌리고 손가락으로 깃털과 피부를 당겨 가슴 근육을 드러내고 디지털 캘리퍼로 측정하십시오. 날개가 몸에 닿는 가슴을 가로 질러 가슴 너비를 측정하고 쇄골 바닥에서 뚱뚱한 패드 상단까지의 가슴 길이를 측정하십시오. 오른쪽 가슴 뼈 주요 근육을 추출하려면 외과 용 가위 또는 메스와 포셉을 사용하여 용골 뼈를 따라 자르고 체벽에서 근육을 방출하십시오.가슴 주요근육을 제거한 후 Popsicle 스틱에 근육을 평평하게 놓아 디지털 캘리퍼를 사용하여 측정값을 수집합니다. 두개골에서 근육의 꼬리 부분까지의 근육 길이와 근육의 두개골 부분의 가장 넓은 부분에서 근육 너비를 찾으십시오. 근육 두께를 결정하려면 포셉으로 유방을 집어 들고 근육의 두개골 부분의 가장 두꺼운 부분을 측정하십시오.측정으로 완료되면, 오른쪽 및 왼쪽 가슴 가슴 주요 근육은 영하 80도에서 최대 일 년 동안 추가 분석을 위해 저장 될 수 있습니다. 배아에 네 개의 니코틴아미드 리보시드 투여량 또는 용량을 주사하여 난소 공급에서의 효과를 연구하였다. 18일째 배아와 부화한 병아리의 체중에 대한 투여 효과가 없는 것으로 관찰되었다.유사하게, 하루 종일 18개의 배아에 대한 가슴 결핵 주요 근육 측정에서 용량 효과는 검출되지 않았다. 부화 한 병아리의 경우, 가슴의 주요 근육 길이 및 너비 측정에 대한 용량 영향은 없었습니다. 그러나 복용량은 근육 무게와 깊이에 영향을 미쳤습니다.니코틴아미드 리보시드를 주입하지 않은 배아에서 발달된 병아리는 501, 000 밀리몰 니코틴아미드 리보시드를 주입한 배아의 병아리보다 무게가 적은 가슴 근육을 가지고 있었다. 0 및 250 밀리몰 니코틴아미드 리보시드를 주입한 배아의 병아리는 501, 000 밀리몰 니코틴아미드 리보시드를 주입한 배아의 병아리보다 펙토랄리스 주요 깊이가 적었다. 강력한 실험을 수행하는 열쇠는 결함이없고 균일 한 알을 선택하는 것입니다.이것은 모든 효과가 치료를 촉매한다는 것을 보장 할 것입니다. 가슴 주요 근육의 수확으로 조직학을 사용하여 근육 섬유 형태 측정을 측정 할 수 있으며 유전자 및 단백질 발현 분석을 위해 총 RNA 및 단백질을 추출 할 수 있습니다. 우리는 현재이 기술이 처리 된 새의 신선한 육질의 성장 성과에 미치는 영향을 연구하고 있습니다.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

In Ovo Feeding of Commercial Broiler Eggs: An Accurate and Reproducible Method to Affect Muscle Development and Growth

Optimized Ex-ovo Culturing of Chick Embryos to Advanced Stages of Development

Optimized Ex-ovo Culturing of Chick Embryos to Advanced Stages of Development

최적화<em&gt; 전 비켜</em&gt; 개발의 고급 단계에 병아리 배아의 배양

Research in anatomy, embryology, and developmental biology has largely relied on the use of model organisms. In order to study development in live embryos ...

연구

발생학

Analysis of Zebrafish Larvae Skeletal Muscle Integrity with Evans Blue Dye

에반스 블루 염료와 Zebrafish의 애벌레 골격 근육 무결성 분석

The zebrafish model is an emerging system for the study of neuromuscular disorders.  In the study of neuromuscular diseases, the integrity of the muscle ...

The Complete and Updated "Rotifer Polyculture Method" for Rearing First Feeding Zebrafish

양육 먼저 먹이 제브라 피쉬의 전체 및 업데이트 &quot;로티퍼 다종 양식 방법&quot;

The zebrafish (Danio rerio) is a model organism of increasing importance in many fields of science.  One of the most demanding technical aspects of ...

A Novel Ex Ovo Banding Technique to Alter Intracardiac Hemodynamics in an Embryonic Chicken System

A Novel Ex Ovo Banding Technique to Alter Intracardiac Hemodynamics in an Embryonic Chicken System

소설<em&gt; 예 비켜</em&gt; 밴딩 기법 닭 배아 시스템에서 심장 내 혈류를 변경할

The new model presented here can be used to understand the influence of hemodynamics on specific cardiac developmental processes, at the cellular and ...

In Ovo Electroporation in the Chicken Auditory Brainstem

In Ovo Electroporation in the Chicken Auditory Brainstem

닭 오라클 Brainstem의 Ovo Electroporation에서

Electroporation is a method that introduces genes of interest into biologically relevant organisms like the chicken embryo. It is long established that ...

In Vitro Growth of Mouse Preantral Follicles Under Simulated Microgravity

In Vitro Growth of Mouse Preantral Follicles Under Simulated Microgravity

생체 외에서 마우스 시뮬레이션된 Microgravity에서 Preantral 모 낭의 성장

14 day-old mouse ovarian tissue and preantral follicles isolated from same-aged mice were incubated in a simulated microgravity culture system. We ...

Application of Chronic Stimulation to Study Contractile Activity-induced Rat Skeletal Muscle Phenotypic Adaptations

수축 성 활동 유도 된 쥐 골격 근육 Phenotypic 적응 연구 만성 자극에의 응용

Skeletal muscle is a highly adaptable tissue, as its biochemical and physiological properties are greatly altered in response to chronic exercise. To ...

Development of an In Vitro Assay to Quantitate Hematopoietic Stem and Progenitor Cells (HSPCs) in Developing Zebrafish Embryos

Development of an In Vitro Assay to Quantitate Hematopoietic Stem and Progenitor Cells HSPCs in Developing Zebrafish Embryos

조 혈 줄기와 뿌리를 Quantitate를 생체 외에서 시험의 개발 세포 (HSPCs) Zebrafish 태아를 개발

Hematopoiesis is an essential cellular process in which hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs) differentiate into the multitude of different cell ...