Name: a simple microfluidic chip for long-term growth and imaging of caenorhabditis elegans
Uploaded: 2022-04-11T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Simple Microfluidic Chip for Long-Term Growth and Imaging of Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Vi takker CIFF imaging facility, NCBS for bruk av konfokale mikroskoper støttet av DST - Senter for nanoteknologi (No. SR/55/NM-36-2005). Vi takker forskningsfinansiering fra DBT (SPK), CSIR-UGC (JD), DST (SM), DBT (SM), spinning disc støttet av DAE-PRISM 12-R&D-IMS-5.02.0202 (SPK og Gautam Menon), og HHMI-IECS grant number 55007425 (SPK). HB101, PS3239 og wdIs51 stammer ble levert av Caenorhabditis Genetics Center (CGC), som er finansiert av NIH Office of Research Infrastructure Programs (P40 OD010440). S.P.K. laget jsIs609 i Mike Nonets laboratorium.

1. Fabrikasjon av vekst- og bildebehandlingsenhet
<ol><li>SU8 mugg fabrikasjon<ol><li>Design mønstre 1 (flytlag) og 2 (kontrolllag) ved hjelp av rektangulære former i et tekstbehandlingsprogram (eller en datamaskinstøttet design CAD-programvare) og skriv ut fotomaskene ved hjelp av en laserplotter med en minimum funksjonsstørrelse på 8 μm på polyesterbasert film (figur 1).</li>
		<li>Skjær silikonskiver i 2,5 cm × 2,5 cm stykker og rengjør dem med 20% KOH i 1 min...

<ol>
	<li>Doitsidou, M., Poole, R. J., Sarin, S., Bigelow, H., Hobert, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=C.+elegans+Mutant+Identification+with+a+One-Step+Whole-Genome-Sequencing+and+SNP+Mapping+Strategy.">C. elegans Mutant Identification with a One-Step Whole-Genome-Sequencing and SNP Mapping Strategy.</a> PloS One. 5 (11), 15435 (2010).</li><li>Hobert, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurogenesis+in+the+nematode+Caenorhabditis+elegans.">Neurogenesis in the nematode Caenorhabditis elegans.</a> WormBook. The C. elegans. Research Community, WormBook. , (2010).</li><li>Mondal, S., Ahlawat, S., Rau, K., Venkataraman, V., Koushika, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+in+vivo+neuronal+transport+in+genetic+model+organisms+using+microfluidic+devices.">Imaging in vivo neuronal transport in genetic model organisms using microfluidic devices.</a> Traffic. 12 (4), 372-385 (2011).</li><li>Steele, L. M., Sedensky, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Approaches+to+Anesthetic+Mechanisms:+The+C.+elegans+Model.">Approaches to Anesthetic Mechanisms: The C. elegans Model.</a> Methods in Enzymology. 602, 133-151 (2018).</li><li>San-Miguel, A., Lu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidics+as+a+tool+for+C.+elegans+research.">Microfluidics as a tool for C. elegans research.</a> WormBook. The C. elegans. Research Community, WormBook. , (2013).</li><li>C&#225;ceres, I. C., Valmas, N., Hilliard, M. A., Lu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laterally+orienting+C.+elegans+using+geometry+at+microscale+for+high-throughput+visual+screens+in+neurodegeneration+and+neuronal+development+studies.">Laterally orienting C. elegans using geometry at microscale for high-throughput visual screens in neurodegeneration and neuronal development studies.</a> PloS One. 7 (4), 35037 (2012).</li><li>Ai, X., Zhuo, W., Liang, Q., McGrath, P. T., Lu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-throughput+device+for+size+based+separation+of+C.+elegans+developmental+stages.">A high-throughput device for size based separation of C. elegans developmental stages.</a> Lab on a Chip. 14 (10), 1746-1752 (2014).</li><li>Chung, K., Crane, M. M., Lu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+on-chip+rapid+microscopy,+phenotyping+and+sorting+of+C.+elegans.">Automated on-chip rapid microscopy, phenotyping and sorting of C. elegans.</a> Nature Methods. 5 (7), 637-643 (2008).</li><li>Desta, I. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detecting+and+Trapping+of+a+Single+C.+elegans+Worm+in+a+Microfluidic+Chip+for+Automated+Microplate+Dispensing.">Detecting and Trapping of a Single C. elegans Worm in a Microfluidic Chip for Automated Microplate Dispensing.</a> SLAS Technology. 22 (4), 431-436 (2017).</li><li>Ben-Yakar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-Content+and+High-Throughput+In+Vivo+Drug+Screening+Platforms+Using+Microfluidics.">High-Content and High-Throughput In Vivo Drug Screening Platforms Using Microfluidics.</a> Assay and Drug Development Technologies. 17 (1), 8-13 (2019).</li><li>Mondal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large-scale+microfluidics+providing+high-resolution+and+high-throughput+screening+of+Caenorhabditis+elegans+poly-glutamine+aggregation+model.">Large-scale microfluidics providing high-resolution and high-throughput screening of Caenorhabditis elegans poly-glutamine aggregation model.</a> Nature Communications. 7, 13023 (2016).</li><li>Fehlauer, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+a+Microfluidics+Device+for+Mechanical+Stimulation+and+High+Resolution+Imaging+of+C.+Elegant.">Using a Microfluidics Device for Mechanical Stimulation and High Resolution Imaging of C. Elegant.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (132), e56530 (2018).</li><li>Saberi-Bosari, S., Huayta, J., San-Miguel, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+microfluidic+platform+for+lifelong+high-resolution+and+high+throughput+imaging+of+subtle+aging+phenotypes+in+C.+elegans.">A microfluidic platform for lifelong high-resolution and high throughput imaging of subtle aging phenotypes in C. elegans.</a> Lab on a Chip. 18 (20), 3090-3100 (2018).</li><li>Cornaglia, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+automated+microfluidic+platform+for+C.+elegans+embryo+arraying,+phenotyping,+and+long-term+live+imaging.">An automated microfluidic platform for C. elegans embryo arraying, phenotyping, and long-term live imaging.</a> Scientific Reports. 5, 10192 (2015).</li><li>Suzuki, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+ultra-thin+chips+for+immobilization+of+Caenorhabditis+elegans+in+microfluidic+channels+during+irradiation+and+selection+of+buffer+solution+to+prevent+dehydration.">Development of ultra-thin chips for immobilization of Caenorhabditis elegans in microfluidic channels during irradiation and selection of buffer solution to prevent dehydration.</a> Journal of Neuroscience Methods. 306, 32-37 (2018).</li><li>Hulme, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lifespan-on-a-chip:+microfluidic+chambers+for+performing+lifelong+observation+of+C.+elegans.">Lifespan-on-a-chip: microfluidic chambers for performing lifelong observation of C. elegans.</a> Lab on a Chip. 10 (5), 589-597 (2010).</li><li>Chronis, N., Zimmer, M., Bargmann, C. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidics+for+in+vivo+imaging+of+neuronal+and+behavioral+activity+in+Caenorhabditis+elegans.">Microfluidics for in vivo imaging of neuronal and behavioral activity in Caenorhabditis elegans.</a> Nature Methods. 4 (9), 727-731 (2007).</li><li>Lagoy, R. C., Albrecht, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+Devices+for+Behavioral+Analysis,+Microscopy,+and+Neuronal+Imaging+in+Caenorhabditis+Elegans.">Microfluidic Devices for Behavioral Analysis, Microscopy, and Neuronal Imaging in Caenorhabditis Elegans.</a> Methods in Molecular Biology. 1327, 159-179 (2015).</li><li>Levine, E., Lee, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+approaches+for+Caenorhabditis+elegans+research.">Microfluidic approaches for Caenorhabditis elegans research.</a> Animal Cells and Systems. 24 (6), 311-320 (2020).</li><li>Rahman, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NemaLife+chip:+a+micropillar-based+microfluidic+culture+device+optimized+for+aging+studies+in+crawling+C.+elegans.">NemaLife chip: a micropillar-based microfluidic culture device optimized for aging studies in crawling C. elegans.</a> Scientific Reports. 10 (1), 16190 (2020).</li><li>Allen, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-synapse+ablation+and+long-term+imaging+in+live+C.+elegans.">Single-synapse ablation and long-term imaging in live C. elegans.</a> Journal of Neuroscience Methods. 173 (1), 20-26 (2008).</li><li>Guo, S. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Femtosecond+laser+nanoaxotomy+lab-on-a-chip+for+in+vivo+nerve+regeneration+studies.">Femtosecond laser nanoaxotomy lab-on-a-chip for in vivo nerve regeneration studies.</a> Nature Methods. 5 (6), 531-533 (2008).</li><li>Mondal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracking+Mitochondrial+Density+and+Positioning+along+a+Growing+Neuronal+Process+in+Individual+C.+elegans+Neuron+Using+a+Long-Term+Growth+and+Imaging+Microfluidic+Device.">Tracking Mitochondrial Density and Positioning along a Growing Neuronal Process in Individual C. elegans Neuron Using a Long-Term Growth and Imaging Microfluidic Device.</a> eNeuro. 8 (4), (2021).</li><li>Keil, W., Kutscher, L. M., Shaham, S., Siggia, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-Term+High-Resolution+Imaging+of+Developing+C.+elegans+Larvae+with+Microfluidics.">Long-Term High-Resolution Imaging of Developing C. elegans Larvae with Microfluidics.</a> Developmental Cell. 40 (2), 202-214 (2017).</li><li>Gritti, N., Kienle, S., Filina, O., Van Zon, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+time-lapse+microscopy+of+C.+Elegans+post-embryonic+development.">Long-term time-lapse microscopy of C. Elegans post-embryonic development.</a> Nature Communications. 7, 12500 (2016).</li><li>Kim, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+biostable,+anti-fouling+zwitterionic+polyurethane-urea+based+on+PDMS+for+use+in+blood-contacting+medical+devices.">A biostable, anti-fouling zwitterionic polyurethane-urea based on PDMS for use in blood-contacting medical devices.</a> Journal of materials chemistry B. 8 (36), 8305-8314 (2020).</li><li>Peterson, S. L., McDonald, A., Gourley, P. L., Sasaki, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Poly(dimethylsiloxane)+thin+films+as+biocompatible+coatings+for+microfluidic+devices:+cell+culture+and+flow+studies+with+glial+cells.">Poly(dimethylsiloxane) thin films as biocompatible coatings for microfluidic devices: cell culture and flow studies with glial cells.</a> Journal of Biomedical Materials ResearchPart A. 72 (1), 10-18 (2005).</li><li>Folch, A., Toner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+micropatterns+on+biocompatible+materials.">Cellular micropatterns on biocompatible materials.</a> Biotechnology Progress. 14 (3), 388-392 (1998).</li><li>Leclerc, E., Sakai, Y., Fujii, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+PDMS+(polydimethylsiloxane)+bioreactor+for+large-scale+culture+of+hepatocytes.">Microfluidic PDMS (polydimethylsiloxane) bioreactor for large-scale culture of hepatocytes.</a> Biotechnology Progress. 20 (3), 750-755 (2004).</li><li>Mehta, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+measurement+and+control+of+oxygen+levels+in+microfluidic+poly(dimethylsiloxane)+bioreactors+during+cell+culture.">Quantitative measurement and control of oxygen levels in microfluidic poly(dimethylsiloxane) bioreactors during cell culture.</a> Biomedical Microdevices. 9 (2), 123-134 (2007).</li><li>Palchesko, R. N., Zhang, L., Sun, Y., Feinberg, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+polydimethylsiloxane+substrates+with+tunable+elastic+modulus+to+study+cell+mechanobiology+in+muscle+and+nerve.">Development of polydimethylsiloxane substrates with tunable elastic modulus to study cell mechanobiology in muscle and nerve.</a> PloS One. 7 (12), 51499 (2012).</li><li>Inoue, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+expression+markers+for+Caenorhabditis+elegans+vulval+cells.">Gene expression markers for Caenorhabditis elegans vulval cells.</a> Mechanisms of Development. 119, 203-209 (2002).</li><li>Fatouros, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+Tau+aggregation+in+a+novel+caenorhabditis+elegans+model+of+tauopathy+mitigates+proteotoxicity.">Inhibition of Tau aggregation in a novel caenorhabditis elegans model of tauopathy mitigates proteotoxicity.</a> Human Molecular Genetics. 21 (16), 3587-3603 (2012).</li><li>Smith, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time-lapse+imaging+and+cell-speci+fi+c+expression+pro+fi+ling+reveal+dynamic+branching+and+molecular+determinants+of+a+multi-dendritic+nociceptor+in+C.+elegans.">Time-lapse imaging and cell-speci fi c expression pro fi ling reveal dynamic branching and molecular determinants of a multi-dendritic nociceptor in C. elegans.</a> Developmental Biology. 345 (1), 18-33 (2010).</li><li>Brenner, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+genetics+of+Caenorhabditis+elegans.">The genetics of Caenorhabditis elegans.</a> Genetics. 77 (1), 71-94 (1974).</li><li>Oren-Suissa, M., Hall, D. H., Treinin, M., Shemer, G., Podbilewicz, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+fusogen+EFF-I+controls+sculpting+of+mechanosensory+dendrites.">The fusogen EFF-I controls sculpting of mechanosensory dendrites.</a> Science. 328 (5983), 1285-1288 (2010).</li><li>Smith, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensory+neuron+fates+are+distinguished+by+a+transcriptional+switch+that+regulates+dendrite+branch+stabilization.">Sensory neuron fates are distinguished by a transcriptional switch that regulates dendrite branch stabilization.</a> Neuron. 79 (2), 266-280 (2013).</li><li>Shrestha, B. R., Grueber, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+morphogenesis:+worms+get+an+EFF+in+dendritic+arborization.">Neuronal morphogenesis: worms get an EFF in dendritic arborization.</a> Current Biology: CB. 20 (16), 673-675 (2010).</li><li>Rao, G. N., Kulkarni, S. S., Koushika, S. P., Rau, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+nanosecond+laser+axotomy:+cavitation+dynamics+and+vesicle+transport.">In vivo nanosecond laser axotomy: cavitation dynamics and vesicle transport.</a> Optics Express. 16 (13), 9884-9894 (2008).</li><li>Sure, G. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=UNC-16/JIP3+and+UNC-76/FEZ1+limit+the+density+of+mitochondria+in+C.+elegans+neurons+by+maintaining+the+balance+of+anterograde+and+retrograde+mitochondrial+transport.">UNC-16/JIP3 and UNC-76/FEZ1 limit the density of mitochondria in C. elegans neurons by maintaining the balance of anterograde and retrograde mitochondrial transport.</a> Scientific Reports. 8 (1), 8938 (2018).</li><li>Awasthi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulated+distribution+of+mitochondria+in+touch+receptor+neurons+of+C.+elegans+influences+touch+response.">Regulated distribution of mitochondria in touch receptor neurons of C. elegans influences touch response.</a> bioRxiv. , (2020).</li></ol>

I dette papiret er det beskrevet en protokoll for fremstilling og bruk av en enkel mikrofluidisk enhet for dyrking av C. elegans med konstant matforsyning og høyoppløselig avbildning av et enkelt dyr under utviklingen. Denne fabrikasjonsprosessen er enkel og kan gjøres i et ikke-sterilt miljø. Et støvfritt miljø er kritisk under fabrikasjonstrinn. Tilstedeværelsen av støvpartikler vil føre til feil kontakt mellom de to bindingsflatene, noe som resulterer i dårlig binding og lekkasje av enheten under h?...

Caenorhabditis elegans har vist seg å være en kraftig modellorganisme for å studere cellebiologi, aldring, utviklingsbiologi og nevrobiologi. Fordeler som gjennomsiktig kropp, kort livssyklus, enkelt vedlikehold, et definert antall celler, homologi med flere menneskelige gener og godt studert genetikk har ført til at C. elegans har blitt en populær modell både for grunnleggende biologiske funn og anvendt forskning 1,2. Å forstå cellens biologiske og utviklingsprosesser fra gjentatt langsiktig observasjon av individuelle dyr kan vise seg å være gunstig. Konvensjonelt er C. elegans bedøvet på agarputer og avbildet under mikroskopet. Bivirkninger av anestetika på dyrs helse begrenser bruken av bedøvede dyr for langsiktig og gjentatt intermitterende avbildning av samme dyr 3,4. Nylige fremskritt innen mikrofluidiske teknologier og deres tilpasning for bedøvelsesfri fangst av C. elegans med ubetydelige helsefarer muliggjør høyoppløselig avbildning av det samme dyret over kort og lang tid.
Mikrofluidiske chips er designet for C. elegans'5 høy gjennomstrømningsscreening 6,7,8, fangst og dispensering9, narkotikascreening 10,11, nevronstimulering med høyoppløselig bildebehandling 12 og høyoppløselig avbildning av dyret 12,13,14. Ultratynne mikrofluidiske ark for immobilisering på lysbilder er også utviklet15. Langsiktige studier av C. elegans har blitt utført ved hjelp av lavoppløselige bilder av dyr som vokser i flytende kultur for å observere vekst, kalsiumdynamikk, narkotikaeffekter på deres oppførsel16,17,18,19, deres levetid og aldring20. Langsiktige studier ved bruk av høyoppløselig mikroskopi har blitt utført for å vurdere synaptisk utvikling21, neuronal regenerering 22 og mitokondriell addisjon23. Langsiktig høyoppløselig bildebehandling og sporing av celleskjebne og differensiering er gjort i flerkanalsenheter24,25. Flere cellulære og subcellulære hendelser forekommer over tidsskalaene på flere timer og krever fangst av samme individ på forskjellige tidspunkter under utviklingen for å karakterisere alle mellomliggende trinn i prosessen for å forstå cellulær dynamikk in vivo. For å avbilde biologisk prosess som organogenese, nevronutvikling og cellemigrasjon, må dyret immobiliseres i samme retning på flere tidspunkter. Vi har tidligere publisert en protokoll for høyoppløselig avbildning av C. elegans i over 36 timer for å bestemme hvor mitokondrier tilsettes langs berøringsreseptorneuronene (TRN)23.
Dette papiret gir en protokoll for å etablere en mikrofluidikkbasert metodikk for gjentatt høyoppløselig bildebehandling. Denne enheten, med en enkelt strømningskanal, er best egnet for gjentatt avbildning av et enkelt dyr per enhet. For å forbedre gjennomstrømningen og avbildet mange dyr samtidig, kan flere enheter kobles til samme trykkledning, men med separate treveiskontakter som styrer et enkelt dyr i hver enhet. Designet er nyttig for studier som krever høyoppløselige time-lapse-bilder som postembryonale utviklingsprosesser, cellemigrasjon, organell transport, genuttrykksstudier, etc. Teknologien kan være begrensende for noen applikasjoner som levetid og aldringsstudier som krever parallell vekst og avbildning av mange senfasedyr. Polydimetylsiloksan (PDMS) elastomer ble brukt til fremstilling av denne enheten på grunn av biostabilitet26, biokompatibilitet 27,28, gasspermeablilitet 29,30 og justerbar elastisk modul 31. Denne tolagsinnretningen tillater vekst av dyr med kontinuerlig matforsyning i en mikrofluidisk kanal og fangst av individuelle C. elegans via PDMS-membrankompresjon ved bruk av nitrogengass. Denne enheten er en utvidelse av den tidligere publiserte enheten med fordelen av å dyrke og avbilde det samme dyret i mikrokanalen under en kontinuerlig matforsyning3. Det ekstra isolasjonsmembrannettverket og en 2 mm bred fangstmembran muliggjør effektiv immobilisering av utviklende dyr. Enheten har blitt brukt til å observere nevronutvikling, vulvalutvikling og dendritisk arborisering i sensoriske PVD-nevroner. Dyrene vokser uten negative helseeffekter i enheten og kan gjentatte ganger immobiliseres for å lette avbildning av subcellulære hendelser i samme dyr under utviklingen.
Hele protokollen er delt inn i fem deler. Del 1 beskriver enhetsfabrikasjon for vekst- og bildebrikken. Del 2 beskriver hvordan man setter opp et trykksystem for PDMS-membranavbøyningen for å immobilisere og isolere individuelle C. eleganer. Del 3 beskriver hvordan du synkroniserer C. elegans på en nematode vekstmedium (NGM) plate for enhetsavbildning. Del 4 beskriver hvordan du laster et enkelt dyr i enheten og vokser dyret inne i mikrofluidisk enhet i flere dager. Del 5 beskriver hvordan man immobiliserer et enkelt dyr på flere tidspunkter, tar bilder med høy oppløsning ved hjelp av forskjellige mål, og analyserer bildene ved hjelp av Fiji.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>18 G needles</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Bangalore, India</td>
			<td>Gauge 18</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-way stopcock</td>
			<td>Cole-Parmer</td>
			<td>WW-30600-02</td>
			<td>Masterflex fitting with luer lock</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CCD camera</td>
			<td>Andor Technology</td>
			<td>EMCCD C9100-13no</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Circuit board film</td>
			<td>Fine Line Imaging, Colorado, USA</td>
			<td></td>
			<td>The designs are printed with 65,024 dots per inch (DPI)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Convection Oven</td>
			<td>Meta-Lab Scientific Industries, India</td>
			<td>MSI-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslips</td>
			<td>Blue stat microscopic cover glass</td>
			<td></td>
			<td>22mm x 10Gms</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Hi media</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Harris uni-core puncher 1mm</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>Z708801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hexamethyldisilazane</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Bangalore, India</td>
			<td>440191</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hot plate</td>
			<td>&#160;IKA</td>
			<td>RCT B S 22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropanol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>26895</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KOH</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laser Scanning Microscope</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td>LSM 5 LIVE</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette tips</td>
			<td>Tarsons</td>
			<td></td>
			<td>0.5-10 &#181;L micropipette tips are used for food supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Negative Photoresist-1</td>
			<td>Microchem</td>
			<td>SU8-2025</td>
			<td>http://www.microchem.com/Prod-SU82000.htm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Negative Photoresist-2</td>
			<td>Microchem</td>
			<td>SU8-2050</td>
			<td>http://www.microchem.com/Prod-SU82000.htm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitrogen gas</td>
			<td>Local Supplier</td>
			<td>Commercial nitrogen gas</td>
			<td>Cylinder volume of 7 cubic meter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDMS (Curing solution)</td>
			<td>Dow Corning Corporation, MI, USA</td>
			<td>&#160;Sylgard curing solution</td>
			<td>curing agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri plates</td>
			<td>Praveen Scientific Corporation</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plasma cleaner</td>
			<td>Harrick Plasma, NY, USA</td>
			<td>&#160;PDC-32G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Razor and blades</td>
			<td>Lister surgical Blade</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon Elastomer (Base)</td>
			<td>Dow Corning Corporation, MI, USA</td>
			<td>Sylgard 184 base</td>
			<td>elastomer base</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon tubes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>Plastic tubes with the inner diameter 1.59 mm and the outer diameter 3.18 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon wafer</td>
			<td>University Wafer, MA, USA</td>
			<td>[100] orientation, 4-inch diameter</td>
			<td>Small pieces (2 mm &#215; 2 mm) were cut from 100 mm diameter wafer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spin Coater</td>
			<td>SPS-Europe B.V., The Netherlands</td>
			<td>SPIN 150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spinning Disk microscope</td>
			<td>Perkin Elmer ultra-view VOX system</td>
			<td>CSU-X1-A3 N</td>
			<td>The system was equipped with four (405/488/561/640 nm) lasers and controlled with the Volocity software package.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SU8 developer</td>
			<td>Microchem, MA, USA</td>
			<td>SU8 Developer</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trichloro (1H, 1H, 2H, 2H-perfluorooctyl) silane</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Bangalore, India</td>
			<td>448931</td>
			<td>Trichloro (1H, 1H, 2H, 2H-perfluorooctyl) silane vapor is toxic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UV lamp</td>
			<td>Oriel Instruments, Bangalore, India</td>
			<td></td>
			<td>200 Watt and collimated UV light source</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Volocity software</td>
			<td>Perkin-Elmer</td>
			<td></td>
			<td>Image analysis</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a simple microfluidic chip for long-term growth and imaging of caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans (C. elegans) har vist seg å være et verdifullt modellsystem for å studere utviklings- og cellebiologiske prosesser. Å forstå disse biologiske prosessene krever ofte langsiktig og gjentatt avbildning av det samme dyret. Lang gjenopprettingstid forbundet med konvensjonelle immobiliseringsmetoder gjort på agarputer har skadelige effekter på dyrehelsen, noe som gjør det upassende å gjentatte ganger avbilde det samme dyret over lange perioder. Dette papiret beskriver en mikrofluidisk chipdesign, fabrikasjonsmetode, on-chip C. elegans dyrkingsprotokoll og tre eksempler på langsiktig bildebehandling for å studere utviklingsprosesser hos individuelle dyr. Brikken, produsert med polydimetylsiloksan og bundet på et dekselglass, immobiliserer dyr på et glasssubstrat ved hjelp av en elastomer membran som avbøyes ved hjelp av nitrogengass. Fullstendig immobilisering av C. elegans muliggjør robust time-lapse-avbildning av cellulære og subcellulære hendelser på en bedøvelsesfri måte. En kanalgeometri med stort tverrsnitt gjør at dyret kan bevege seg fritt innenfor to delvis forseglede isolasjonsmembraner som tillater vekst i kanalen med kontinuerlig matforsyning. Ved hjelp av denne enkle brikken kan avbildning av utviklingsfenomener som nevronprosessvekst, vulvalutvikling og dendritisk arborisering i PVD-sensoriske nevroner, etter hvert som dyret vokser inne i kanalen, utføres. Den langsiktige vekst- og bildebrikken opererer med en enkelt trykkledning, ingen eksterne ventiler, billige fluidiske forbruksvarer, og benytter standard ormhåndteringsprotokoller som enkelt kan tilpasses av andre laboratorier ved hjelp av C. elegans.

Enhet karakterisering: Vekst- og bildebehandlingsenheten består av to PDMS-lag bundet sammen (figur 1) ved hjelp av irreversibel plasmabinding. Strømningslaget (mønster 1) som er 10 mm i lengde og 40 μm eller 80 μm i høyden gjør at vi kan dyrke dyret i flytende kultur (figur 1A). Fangstlaget (mønster 2) har en 2 mm bred membran (figur 1B) for immobilisering av dyret for høyoppløselig avbildning. Masken fo...

Watch this Scientific Journal Video about A Simple Microfluidic Chip for Long-Term Growth and Imaging of Caenorhabditis elegans at JoVE.com

A Simple Microfluidic Chip for Long-Term Growth and Imaging of Caenorhabditis elegans

Protokollen beskriver en enkel mikrofluidisk chipdesign og mikrofabrikasjonsmetodikk som brukes til å dyrke C. elegans i nærvær av kontinuerlig matforsyning i opptil 36 timer. Vekst- og bildebehandlingsenheten muliggjør også intermitterende langsiktig høyoppløselig avbildning av cellulære og subcellulære prosesser under utvikling i flere dager.

En enkel mikrofluidisk chip for langsiktig vekst og avbildning av Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans (C. elegans) have proved to be a valuable model system for studying developmental and cell biological processes. Understanding ...

Den største fordelen med denne teknikken er at dyret kan vokse fritt inne i enheten og kan fanges for høyoppløselig bildebehandling. Enheten kan gjenbrukes flere ganger. Mens du lager enheten, er renslighet den viktigste faktoren for å kunne fremstille støvfrie enheter for å unngå lekkasje under enhetens operasjoner.For å begynne å designe mønster en for strømningslaget og mønster to for kontrolllaget ved hjelp av rektangulære former i et tekstbehandlingsprogram og skrive ut fotomaskene ved hjelp av en laserplotter med en minimumsfunksjonsstørrelse på åtte mikrometer på polyesterbasert film. Skjær silisiumskiver i firkantede biter på 2,5 centimeter i høyde og bredde. Rengjør dem med 20% kaliumhydroksyd i ett minutt og skyll waferne i avionisert vann.Bruk én wafer for flyten og den andre for kontrolllaget. Tørk bitene med 14 P-S-I komprimert nitrogengass etterfulgt av dehydrering på en kokeplate ved 120 grader Celsius i fire timer. Etter avkjøling ta ett silisiumstykke, legg det på chucken til en spinnkoder og slå på vakuumet for å holde waferen på plass.Sett omtrent 20 mikroliter heksametyldisipol på silisiumstykket og belegg det med spinnkoderen ved 500 R-P-M i fem sekunder etterfulgt av 3000 R-P-M i 30 sekunder. For å få en jevn fotoresisttykkelse på omtrent 40 mikrometer som er spesifikk for strømningslaget, belegg silisiumskiven med omtrent 1,5 milliliter negativ fotoresist en ved hjelp av en spinnkoder ved 500 R-P-M i fem sekunder etterfulgt av 2000 R-P-M i 30 sekunder. Gjenta belegget av silisiumstykket med heksametyldisilane og negativ fotoresist en for den andre waferen for å oppnå en jevn fotoresisttykkelse på ca. 40 mikrometer som er spesifikk for kontrolllaget.Alternativt, for å øke tykkelsen på strømningslaget til ca. 80 mikrometer for eldre dyr, belegg silisiumskiver med ca. 1,5 milliliter negativ fotoresist to, ved bruk av spinnkoderen ved 500 R-P-M i fem sekunder etterfulgt av 2000 R-P-M i 30 sekunder. Stek begge de tidligere fotoresistbelagte silikonbitene på en kokeplate ved 65 grader Celsius i ett minutt etterfulgt av 95 grader Celsius i 10 minutter. Etter avkjøling legger du mykbakte silikonstykker på eksponeringstrinnet til U-V-belysningen med den fotoresistbelagte overflaten mot U-V-lampen.Utsett de to delene separat for U-V i 15 sekunder ved hjelp av en 200 watt lampe gjennom en fotomaske med mønstre en og to for å få henholdsvis flyt og kontrolllag. Stek de to eksponerte silikonbitene som tidligere beskrevet med belagte lag vendt oppover. Etter kjølestykker, utvikle mønstrene ved å suge silikonbitene i fotoresistutviklerløsningen i 20 minutter.Når mønsteret er synlig, skyll bitene med ren isopropylalkohol og tørk forsiktig med nitrogengass. Hold silikonbitene i en tørkemaskin med den belagte overflaten vendt opp. Utsett bitene for silandamp ved å helle 50 mikroliter ren T-C-P-F-O-S på et glassglass.Plasser lysbildet inne i en tørkemaskin og inkuber i to timer. Lag P-D-M-S i en plastkopp ved å blande elastomerbasen med herdemiddelet og rør hele tiden i tre minutter. Degas P-D-M-S blandes i en tørkemaskin i 30 minutter for å fjerne alle luftbobler.Legg kontrolllaget silisiumskiver i en petriskål og hell et fem millimeter tykt P-D-M-S-blandelag på silisiumbitene. Etter P-D-M-S helleprosess, gjenta avgassing av P-D-M-S-blandingen. Plasser silisiumskiven med strømningslag vendt mot spinnertrucken med et vakuumtrykk på 200 til 500 millitorr.Hell omtrent en milliliter P-D-M-S på silisiumskiven. Kod den med en spinnbelegger for å få et omtrent 80 mikrometer tykt lag. Stek de to silisiumskivene med spinnbelagte P-D-M-S og hell P-D-M-S-lag ved 50 grader Celsius i en varmluftskonveksjonsovn i seks timer.Etter avkjøling kutter stykkene det fem millimeter tykke P-D-M-S-laget fra silisiumstykket rundt kontrolllaget ved hjelp av et skarpt blad og skreller det av silisiumsubstratet. Punch to hull med omtrent en millimeter diameter ved hjelp av en Harris puncher ved reservoaret til P-D-M-S-blokken for å koble immobiliseringskanalen og isolasjonskanalinntakene til gassledningene for P-D-M-S membranavbøyninger. Plasser silikonstykket med det spinnbelagte P-D-M-S-laget på mønster en med P-D-M-S-belagt overflate vendt opp på et plastbrett.Hold den stansede P-D-M-S-blokken med mønster to på brettet med støpt side vendt opp. Hold plastbrettet inne i en plasmarenser og utsett de to P-D-M-S-overflatene for 18 watt luftplasma i to minutter ved å påføre lavt vakuum. Ta ut de to plasmabehandlede blokkene og bind blokkene forsiktig ved å trykke de plasmabehandlede overflatene av mønster en og to sammen.Stek de limte mønstrene ved 50 grader Celsius i to timer i en varmluftskonveksjonsovn. Etter å ha tatt den limte enheten ut av ovnen, kutt den ut av silisiumskive med mønster en og mønster to og slå hull i innløps- og utløpsreservoarene til strømningslaget ved hjelp av Harris puncher. Plasser den limte P-D-M-S-blokken med strømningslaget vendt opp på et plastbrett og hold et rent dekselglass på samme brett.Utsett blokkene i dekselglasset til 18 watt luftplasma i to minutter. Juster vakuumtrykket for å se et fiolett kammer. Plasser den plasmaeksponerte P-D-M-S-blokken på dekselglasset og stek den bundne strukturen i en ovn ved 50 grader Celsius i to timer.Oppbevar enheten i et rent kammer for fremtidige eksperimenter. Ta enheten, sett den på et stereomikroskop og fest slangene. Koble et microflex-rør til en komprimert nitrogengassledning og en treveiskontakt i den andre enden.Koble rør en og to av treveiskontaktene til fellen i henholdsvis isolerende membraner. Koble to microflex-rør til de to utløpsportene på treveis stoppekranen. Koble den andre enden av de to rørene til en åtte millimeter lang 18 gauge nål.Fyll strømningslaget med M-9 buffer ved hjelp av en mikropipette gjennom innløpsporten. Fyll begge rørene med avionisert vann gjennom enden som er koblet til nålen. Sett de to nålene inn i hullene som forbinder isolasjons- og fangstmembranen.Åpne nitrogengassregulatoren ved 14 P-S-I og vri treveisventilen fra rør en for å skyve vannet inn i enheten gjennom mikrofluidiske kanaler i kontrolllagene, nemlig felle- og isolasjonsmembranene. Slipp trykket ved hjelp av treveis stoppekranen, når kanalene er fylt med vann og primet. Fjern boblene ved å strømme flere medier gjennom flytkanalen.Figuren viser bilder av P-S-3-2-3-9, dyr som vokser inne i mikrofluidikkbrikken og immobiliseres hver åttende til 10. time for å ta fluorescensbilder. Variasjon i ekspresjonsmønster representerer et eksempel på tidsmessig genregulering der det samme genet uttrykkes i forskjellige celler i forskjellige utviklingsstadier. Avbildning av individuell W-D-I-S-5-1 genotype av caenorhabditis elegans viser menorah-lignende forgrenet dendritisk arkitektur i hver P-V-D-nevron som består av primære, sekundære tertiære og kvartære prosesser ved henholdsvis L-2, Sen L-2, L-3 og L-4 utviklingsstadier.Figuren her sammenligner P-V-D utvikling og enhet dyrket dyr, og de som vokser på N-G-M plater. Antallet S-P og Q-P på forskjellige stadier av ormutviklingen økte med alderen. Caenorhabditis elegans ble behandlet med et fall på tre millimolar levamisol for å forårsake tilstrekkelig lammelse som kreves for høyoppløselig avbildning.S-P-verdiene var ikke signifikant forskjellige når de ble målt fra lignende iscenesatte dyr dyrket på N-G-M-plater og avbildet ved hjelp av tre millimolar levamisol på en Agar-lysbilde. Videre øker avstanden mellom de to P-V-C-cellelegemene, en tilstede i halen, og den andre tilstede nær vulvaen, når de beveger seg fra hverandre i både dyr som vokser i enheten og de som vokser på N-G-M-plater. Figuren representerer det høyoppløselige bildet av berøringsreseptorneuroner fra dyr som vokser inne i mikrofluidisk enhet.Montasjen representerer hele P-L-M-R nevronprosessen ved suksessive tidspunkter som fremhever mitokondrier og nevronprosessen. Grafen representerer total nevronal prosesslengde som ble observert å øke med en skråning på 10,4 mikrometer i timen. Den mikrofabrikerte enheten bruker en tynn P-D-M-S-membran avbøyd i nærvær av høytrykks nitrogengass for å immobilisere og holde C-elegans på plass for høyoppløselig avbildning.Denne prosedyren kan muliggjøre longitudinelle studier av cellulære og subcellulære prosesser i C-elegans som trenger intermitterende observasjoner over lang tid.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

A Simple Microfluidic Chip for Long-Term Growth and Imaging of Caenorhabditis elegans

Fluorescence detection methods for microfluidic droplet platforms

Fluorescens deteksjon metoder for microfluidic dråpe plattformer

The development of microfluidic platforms for performing chemistry and biology has in large part been driven by a range of potential benefits that ...

Simple Microfluidic Devices for in vivo Imaging of C. elegans, Drosophila and Zebrafish

Simple Microfluidic Devices for in vivo Imaging of C. elegans, Drosophila and Zebrafish

Enkle Microfluidic enheter for<em&gt; In vivo</em&gt; Imaging av<em&gt; C. elegans</em&gt;,<em&gt; Drosophila</em&gt; Og Sebrafisk

Micro fabricated fluidic devices provide an accessible micro-environment for in vivo studies on small organisms. Simple fabrication processes are ...

Microfluidic-based Electrotaxis for On-demand Quantitative Analysis of Caenorhabditis elegans' Locomotion

Microfluidic-based Electrotaxis for On-demand Quantitative Analysis of Caenorhabditis elegans' Locomotion

Microfluidic-baserte Electrotaxis for On-demand Kvantitativ analyse av<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; &#39;Locomotion

The nematode Caenorhabditis elegans is a versatile model organism for biomedical research because of its conservation of disease-related genes and ...

Microfluidic Chip Fabrication and Method to Detect Influenza

Microfluidic Chip Fabrikasjon og metode for å oppdage Influensa

Fast  and effective diagnostics play an important role in controlling infectious  disease by enabling effective patient management and treatment. Here, we ...

A Microfluidic Chip for the Versatile Chemical Analysis of Single Cells

En Microfluidic Chip for Allsidig Kjemisk analyse av enkeltceller

We present a microfluidic device that enables the quantitative determination of intracellular biomolecules in multiple single cells in parallel. For this ...

Long-term Intravital Immunofluorescence Imaging of Tissue Matrix Components with Epifluorescence and Two-photon Microscopy

Langsiktig Intravital Immunfluorescens Imaging av Tissue Matrix Komponenter med epifluorescence og To-foton mikroskopi

Besides being a physical scaffold to maintain tissue morphology, the extracellular matrix (ECM) is actively involved in regulating cell and tissue ...

A Microfluidic Chip for ICPMS Sample Introduction

En mikrofluid Chip for ICPMS Sample Innledning

This protocol discusses the fabrication and usage of a disposable low cost microfluidic chip as sample introduction system for inductively coupled plasma ...

The Multi-organ Chip - A Microfluidic Platform for Long-term Multi-tissue Coculture

Multi-orgel Chip - En mikrofluid plattform for langsiktig Multi-vev coculture

The ever growing amount of new substances released onto the market and the limited predictability of current in vitro test systems has led to a high need ...

Electrotaxis Studies of Lung Cancer Cells using a Multichannel Dual-electric-field Microfluidic Chip

Electrotaxis Studier av lungekreft celler ved hjelp av en Multichannel Dual-elektrisk-felt microfluidic Chip

The behavior of directional cell migration under a direct current electric-field (dcEF) is referred to as electrotaxis. The significant role of ...

Long-term Live Imaging Device for Improved Experimental Manipulation of Zebrafish Larvae

Langsiktig Live bildeenheten forbedret eksperimentelle manipulering av sebrafisk larver

The zebrafish larva is an important model organism for both developmental biology and wound healing. Further, the zebrafish larva is a valuable system for ...