Name: autofluorescence imaging to evaluate cellular metabolism
Uploaded: 2021-11-15T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Autofluorescence Imaging to Evaluate Cellular Metabolism at JoVE.com

As fontes de financiamento incluem o Instituto de Prevenção e Pesquisa do Câncer do Texas (CPRIT RP200668) e a Texas A&M University. A Figura 1 foi criada com BioRender.com.

1. Revestimento de células para imagem
<ol><li>Aspire o meio a partir de um frasco T-75 confluente de 80-90% de células MCF-7, enxágue as células com 10 mL de soro fisiológico estéril tamponado (PBS) e adicione 2 mL de 0,25% de trippsina (1x) para desprender as células do fundo do frasco.</li>
	<li>Incubar o frasco a 37 °C por ~4 min. Verifique as células sob o microscópio para confirmar o desprendimento.</li>
	<li>Adicione imediatamente 8 mL de meio de cultura para desativar a trippsina.</li...

A intensidade da autofluorescência e a imagem vitalícia têm sido amplamente utilizadas para avaliar o metabolismo nas células21,55. FLIM é de alta resolução e, portanto, resolve células únicas, o que é importante para estudos de câncer, pois a heterogeneidade celular contribui para a agressão tumoral e resistência a medicamentos7,39,41,44,45,46,58.</sup...

Metabolismo é o processo celular de produção de energia. O metabolismo celular abrange múltiplas vias, incluindo glicólise, fosforilação oxidativa e glutaminolise. Células saudáveis usam essas vias metabólicas para gerar energia para proliferação e função, como a produção de citocinas por células imunes. Muitas doenças, incluindo distúrbios metabólicos, câncer e neurodegeneração, são caracterizadas pelo metabolismo celular alterado1. Por exemplo, alguns tipos de células cancerígenas têm elevadas taxas de glicólise, mesmo na presença de oxigênio, para gerar moléculas para a síntese de ácidos nucleicos, proteínas e lipídios2,3. Este fenômeno, conhecido como efeito Warburg, é uma marca registrada de muitos tipos de câncer, incluindo câncer de mama, câncer de pulmão e glioblastomas4. Devido às alterações do metabolismo celular associadas à progressão do câncer, o metabolismo celular pode ser um biomarcador substituto para a resposta de drogas5,6. Além disso, entender a eficácia da droga a nível celular é crucial, pois a heterogeneidade celular pode levar a diferentes respostas medicamentosas em indivíduos7,8.
Tecnologias que identificam e quantificam mudanças no metabolismo celular são essenciais para estudos de câncer e resposta a medicamentos. Análises químicas e proteicas são usadas para avaliar o metabolismo de células ou tecidos, mas não possuem resolução unicelular e informações espaciais. Ensaios baseados em leitor de placas metabólicas podem medir o consumo de pH e oxigênio na amostra ao longo do tempo e a subsequente perturbação metabólica por produtos químicos. O pH pode ser usado para calcular a taxa de acidificação extracelular (ECAR), que fornece uma visão da atividade glicóltica das células9. Os métodos de imagem de todo o corpo, incluindo 2-[fluorine-18] tomografia fluoro-D-glicose e emissão de pósitrons (FDG PET) e espectroscopia de ressonância magnética (MRS), são modalidades de imagem não invasivas utilizadas clinicamente para identificar a recidiva do tumor e a eficácia da droga através de medições metabólicas10,11,12,13,14.
Imagens FDG-PET a absorção tecidual de FDG, um analógico de glicose radiolaterada. O aumento da absorção do FDG-PET por tumores relativos ao tecido circundante deve-se ao efeito Warburg12,13. Imagens mrs núcleos comuns de moléculas usadas para o metabolismo, como 13C e 31P, e podem obter informações dinâmicas sobre como o metabolismo muda em resposta a estímulos, como exercício ou comer14. Embora o FDG-PET e o MRS possam ser utilizados clinicamente, essas tecnologias carecem de resolução espacial para resolver a heterogeneidade intratumoral. Da mesma forma, as medidas de consumo de oxigênio são feitas em uma população em massa de células. A imagem de autofluorescência supera o obstáculo de resolução espacial dessas tecnologias e fornece um método não invasivo de quantificar o metabolismo celular.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63282/63282fig01v2.jpg"> Figura 1: NADH e FAD em vias metabólicas comuns. NADH e FAD são aconchegantes usados na glicólise, no ciclo de Krebs e na cadeia de transporte de elétrons. A imagem de autofluorescência dessas moléculas fornece informações sobre o metabolismo celular. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63282/63282fig01largev2.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
Adenina de nicotinamida reduzida (fosfato) dinucleotídeo (NAD(P)H) e dinucleotídeo de alcaina oxidada (FAD) são aconzyomas de reações metabólicas, incluindo glicólise, fosforilação oxidativa e glutaminolise (Figura 1). Tanto o NAD(P)H quanto o FAD são autofluorescentes e fornecem contraste endógeno para imagens de fluorescência1,15. O NADPH tem propriedades fluorescentes similares ao NADH. Por causa disso, o NAD(P)H é frequentemente usado para representar o sinal combinado de NADH e NADPH2,16.
A imagem de fluorescência ao longo da vida (FLIM) quantifica a vida útil da fluorescência ou o tempo para o qual um fluoróforo está no estado animado. As vidas de fluorescência são responsivas ao microambiente dos fluoroforos e fornecem informações sobre o metabolismo celular17. Nad(P)H e FAD podem existir dentro das células em conformações ligadas à proteína ou livres, cada uma das quais tem uma vida útil diferente. O NAD(P)H gratuito tem uma vida útil mais curta do que o NAD(P)H vinculado à proteína); por outro lado, a FAD livre tem uma vida útil mais longa do que o FAD18,19 vinculado. As vidas e os pesos dos componentes ao longo da vida podem ser quantificados a partir de dados de decaimento vitalício de fluorescência através de Eq. (1)20:
I(t) = α 1e-t/τ1 + α 2e-t/τ2 + C (1)
Eq (1) representa a intensidade de fluorescência normalizada em função do tempo. Os α 1 e α 2 nesta equação representam os componentes proporcionais de vida curta e longa (α 1+ α 2=1), respectivamente, τ1 e τ2 representam as vidas curtas e longas, respectivamente, e C é responsável pela luz de fundo7,20. A vida útil ponderada por amplitude, representada aqui como τm, é calculada utilizando-se de Eq. (2).
τm= α 1τ1+ α 2τ2 (2)
Uma vida média pode ser calculada pela média "t" sobre a decadência de intensidade do fluoróforo, que para uma decadência bi-exponencial é mostrado por Eq. (3)17,21.
τ*m= (α 1τ12+ α 2τ22)/ (α 1τ1+ α 2τ2) (3)
Uma imagem de intensidade de fluorescência pode ser computada a partir da imagem vitalícia integrando a decadência da fluorescência ao longo da vida. A imagem de autofluorescência é um método não destrutivo e livre de rótulos que pode ser usado para caracterizar o metabolismo das células vivas em uma resolução subcelular. A razão óptica redox fornece uma métrica analógica óptica do estado químico redox da célula e é calculada como a razão das intensidades NAD(P)H e FAD. Embora a fórmula para calcular a razão óptica redox não seja padronizada22,23,24,25, ela é definida aqui como a intensidade da FAD sobre as intensidades combinadas de NAD(P)H e FAD. Esta definição é usada porque a intensidade somada no denominador normaliza a métrica entre 0 e 1, e o resultado esperado da inibição de cianeto é uma diminuição na razão redox. As vidas de fluorescência do NAD(P)H e FAD gratuitos fornecem insights sobre mudanças no microambiente metabólico solvente, incluindo pH, temperatura, proximidade com oxigênio e osmolaridade17.
Alterações na vida de fluorescência das frações vinculadas de NAD(P)H e FAD podem indicar a utilização da via metabólica e o metabolismo específico do substrato26. Os pesos dos componentes podem ser interpretados para alterações na fração livre para a fração vinculada dos aconchegantes18,19. Ao todo, essas métricas quantitativas de vida de autofluorescência permitem a análise do metabolismo celular, e a imagem de autofluorescência tem sido utilizada para identificar neoplasias de tecidos normais27,28, caracterizando células-tronco29,30, avaliando a função das células imunes31,32,33,34,35, aferosa atividade neurológica36, 37,38, e entendendo a eficácia de medicamentos em tipos de câncer, como câncer de mama e câncer de cabeça e pescoço21,39,40,41,42. A imagem de autofluorescência de alta resolução pode ser combinada com segmentação de imagem para análise unicelular e quantificação da heterogeneidade intrapopulação43,44,45,46,47.
Os microscópios NAD(P)H e FAD podem ser imagens em microscópios de fluorescência de fofilas ou multifotofon configurados para intensidade ou imagens vitalícias. Para microscópios de fótons únicos, NAD(P)H e FAD são tipicamente animados em comprimentos de onda de 375-405 nm e 488 nm, respectivamente, devido a fontes de laser comuns nesses comprimentos de onda48. Na excitação da fluorescência de dois fótons, NAD(P)H e FAD irão excitar em comprimentos de onda de aproximadamente 700 a 750 nm e 700 a 900 nm, respectivamente15,49. Uma vez que os fluoroforos estão animados, NAD(P)H e FAD emitem fótons em comprimentos de onda entre ~410 nm a ~490 nm e ~510 nm a ~640 nm, respectivamente15. Os comprimentos de onda de emissão NAD(P)H e FAD maxima são de aproximadamente 450 nm e 535 nm, respectivamente48.
Devido à sua excitação e comprimentos de onda de emissão diferentes, a fluorescência das duas coenzimas metabólicas pode ser isolada espectralmente. É necessário compreender as características espectrais de NAD(P)H e FAD) para o projeto e otimização dos protocolos de imagem de autofluorescência. Cianeto é um inibidor complexo IV da cadeia de transporte de elétrons (ETC). Os efeitos do cianeto no metabolismo celular e nas intensidades de autofluorescência e vida útil de NAD(P)H e FAD dentro das células são bem caracterizados27,40. Portanto, um experimento de perturbação de cianeto é um meio eficaz de validar protocolos de imagem NAD(P)H e FAD. Um experimento de cianeto bem sucedido fornece confiança de que o protocolo de imagem NAD(P)H e FAD pode ser usado para avaliar o metabolismo de grupos desconhecidos ou perturbações.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>2-deoxy-d-glucose (2-DG)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>AC111980000; AC111980010; AC111980050; AC111980250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibiotic Antimicrobial (pen-strep)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15240096</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Samples</td>
			<td>American Type Culture Collection</td>
			<td>N/A</td>
			<td>MCF-7 cancer line</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CellProfiler</td>
			<td>Broad Institute</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Image analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical Tube</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89039-664</td>
			<td>15 mL conical tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>11965092</td>
			<td>Culture media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FAD dichroic mirror</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF495-Di03-25x36</td>
			<td>495 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FAD emission filter</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF01-550/88-25</td>
			<td>550/88 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FAD excitation filter</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF01-458/64-25</td>
			<td>458/64 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>16000036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Lifetime Microscope</td>
			<td>3i</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass bottom dish</td>
			<td>MatTek Corp</td>
			<td>P35G-1.0-14-C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiphoton Laser</td>
			<td>Coherent</td>
			<td>N/A</td>
			<td>2P Coherent Laser, Tunable 680 nm-1080 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NAD(P)H dichroic mirror</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF409-Di03-25x36</td>
			<td>409 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NAD(P)H emission filter</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF02-447/60-25</td>
			<td>447/60 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NAD(P)H excitation filter</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF01-357/44-25</td>
			<td>357/44 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>70011044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Cyanide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>380970</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SlideBooks 6</td>
			<td>3i</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Image acquisition software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPCImage</td>
			<td>Becker &#38; Hickl GmbH</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Fluorescence lifetime analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stage Top Incubator</td>
			<td>okoLab</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>Biosciences</td>
			<td>786-262</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Urea</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>U5128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>YG beads</td>
			<td>Polysciences</td>
			<td>19096-2</td>
			<td>Yg microspheres (20.0 &#181;m)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

autofluorescence imaging to evaluate cellular metabolism

O metabolismo celular é o processo pelo qual as células geram energia, e muitas doenças, incluindo o câncer, são caracterizadas pelo metabolismo anormal. Adenina de nicotinamida reduzida (fosfato) dinucleotídeo (NAD(P)H) e dinucleotídeo de adenina oxidada (FAD) são aconsetos de reações metabólicas. Nad(P)H e FAD exibem autofluorescência e podem ser isolados espectralmente por comprimentos de onda de excitação e emissão. Ambos os aconzymes, NAD(P)H e FAD, podem existir em uma configuração livre ou ligada à proteína, cada uma das quais tem uma fluorescência distinta ao longo da vida - o tempo para o qual o fluorohore permanece no estado animado. A imagem vitalícia da fluorescência (FLIM) permite quantificação da intensidade da fluorescência e das vidas de NAD(P)H e FAD para análise livre de rótulos do metabolismo celular. A intensidade da fluorescência e os microscópios de vida podem ser otimizados para a imagem NAD(P)H e FAD, selecionando os comprimentos de onda de excitação e emissão apropriados. Perturbações metabólicas por cianeto verificam protocolos de imagem de autofluorescência para detectar alterações metabólicas dentro das células. Este artigo demonstrará a técnica de imagem de autofluorescência de NAD(P)H e FAD para medir o metabolismo celular.

A linha de células cancerígenas de mama epitelial, MCF-7, foi cultivada em DMEM suplementada com 10% de soro bovino fetal (FBS) e 1% penicilina-estreptomicina. Para a imagem de fluorescência, as células foram semeadas a uma densidade de 4 × 105 células por 35 mm de imagem de fundo de vidro 48 h antes da imagem. As células foram imagens antes e depois do tratamento com cianeto usando os protocolos acima indicados. O objetivo do experimento cianeto é confirmar o isolamento espectral da fluorescência NAD...

Watch this Scientific Journal Video about Autofluorescence Imaging to Evaluate Cellular Metabolism at JoVE.com

Autofluorescence Imaging to Evaluate Cellular Metabolism

Este protocolo descreve imagens de fluorescência e análise das aconzyomas metabólicas endógenas, dinucleotídeos de nicotinamida reduzida (fosfato) dinucleotídeos (NAD(P)H) e dinucleotídeo de adenina de flavina oxidada (FAD). A imagem de autofluorescência de NAD(P)H e FAD fornece um método sem rótulos e não destrutivo para avaliar o metabolismo celular.

Imagem de autofluorescência para avaliar o metabolismo celular

Cellular metabolism is the process by which cells generate energy, and many diseases, including cancer, are characterized by abnormal metabolism. Reduced ...

Adh e FAD são moléculas endógenas que exibem autofluorescência em diferentes comprimentos de onda de excitação e emissão. Devido ao seu uso como co-enzimas de reações metabólicas, a microscopia de autofluorescência pode avaliar o metabolismo celular. A imagem de autofluorescência de NADH e FAD não requer rótulos exógenos e é um método não destrutivo com resolução subcelular.A microscopia de autofluorescência pode ser usada em amostras vivas e para estudos de curso de tempo. Imagens autofluorescentes podem ser amplamente aplicadas a qualquer célula viva ou tecido. Imagens autofluorescentes têm sido usadas em neurônios, células cancerosas, tumor, in-vivo, células-tronco e células imunes.Demonstrando o procedimento estará Linghao Hu, estudante de pós-graduação do Laboratório de Imagem Óptica Quantitativa da Universidade Texas A&M. Inicie o experimento ligando todos os componentes do microscópio de vida de fluorescência multifótons, incluindo a fonte de laser e os detectores. Antes da colocação da amostra, ligue a lâmpada de campo brilhante e certifique-se de que a luz entre na ocular.Então, escolha um objetivo para a imagem celular. Se não usar um objetivo de ar, aplique uma gota do meio de imersão apropriado em cima do objetivo. Coloque o prato de fundo de vidro sobre o suporte de amostra no estágio do microscópio.Em seguida, centralizar a amostra com o objetivo usando o controle de estágio X/Y Certifique-se de que a amostra está presa e não se moverá durante a imagem. Uma vez feito, olhe para a ocular e mova o objetivo para cima para se concentrar nas células. Se o microscópio estiver dentro de um gabinete, feche a porta da caixa de luz.Em seguida, abra o software de aquisição de imagens e clique na guia Imagens multifótons para definir os parâmetros de imagem de vários fótons conforme descrito no manuscrito. Ajuste o ganho do detector para o valor ideal para a imagem de vida da fluorescência, ou FILM. Em seguida, altere o tempo de moradia do laser gasto em cada pixel do espécime para o valor desejado.Para nicotinamida adenina dinucleotídeo fosfato, ou NADPH, coloque o laser multifóton para 750 nanômetros. Em seguida, confirme que o controle de energia do laser é definido em zero para que as células não sejam danificadas ao abrir o obturador no laser. Defina um filtro de emissão entre 400 e 500 nanômetros.Quando os parâmetros estiverem definidos, comece a fotografar de forma focalizada ou visualização ao vivo para otimizar as configurações da imagem. Aumente lentamente a potência do laser de três a oito miliwatts, garantindo que as células estejam em foco. Uma vez ajustado, regise a potência máxima utilizada.Use a configuração de potência máxima registrada para a imagem em outros segmentos da placa de Petri. Colete uma imagem NADPH-FILM com um tempo de integração de imagem de 60 segundos e verifique se a imagem tem um número suficiente de fótons, como um pico de 100 fótons para um pixel de citoplasma dentro da curva de decaimento de vida fluorescência. Se o número de fótons for muito baixo, aumente a potência do laser ou a duração da aquisição de imagens.Para o dinucleotídeo de adenina flavin, ou FAD, imagem, ajuste o laser multifótons para 890 nanômetros e espere que o laser bloqueie o novo comprimento de onda. Certifique-se de que o controle de energia do laser seja definido em zero inicialmente. Defina um filtro de emissão entre 500 e 600 nanômetros.Para otimizar as configurações de imagem, comece a fotografar de forma focalizada ou ao vivo, aumentando a potência do laser para 5 a 10 miliwatts e registrando a potência máxima utilizada. Use a mesma configuração de energia para a imagem FAD de campos de exibição subsequentes. Colete a imagem FAD-FILM com um tempo de integração de imagem de 60 segundos e verifique se a imagem tem fótons suficientes dentro da curva de decadência de vida fluorescência.Se o número de fótons for muito baixo, aumente a potência ou duração do laser da aquisição de imagens e repita a imagem para um adicional de quatro a cinco campos de exibição, ou FOVs, com cada imagem espaçada a dois FOVs de distância. Para fazer uma solução de cianeto de sódio de 80 milimil, dissolva 130,24 miligramas de cianeto de sódio em 25 mililitros de PBS. Do prato de cultura, aspire 100 microliters de cultura média para substituir por 100 microliters de solução de cianeto de sódio para obter uma concentração de quatro milimiliar de cianeto no prato.Coloque as células em uma incubadora por cinco minutos para permitir que as células reajam com a solução de cianeto. Após a exposição ao cianeto, adquira imagens NADPH e FAD das células como descrito anteriormente. O estudo calculou os parâmetros de vida da fluorescência utilizando a função de resposta do instrumento medido, ou IRF, a partir da ureia.Os parâmetros foram mediados entre os pixels do citoplasma de cada célula utilizada para segmentação. Células individuais foram identificadas e mascaradas para eliminar o ruído de fundo. Em seguida, o núcleo foi identificado e projetado na máscara celular.Além disso, as células foram filtradas para remover as áreas mascaradas que não se encaixam no tamanho das células típicas. A imagem de fluorescência multifotal de NADPH e FAD permitiu a visualização da morfologia celular e metabolismo antes e depois do tratamento de cianeto. Observou-se que a vida útil do NADPH diminui com o tratamento de cianeto, enquanto a vida da FAD aumenta após o tratamento de cianeto.O enredo da caixa representativa indicou que a razão óptica redox das células MCF7 diminuiu após o tratamento de cianeto. A exposição ao cianeto diminuiu a vida útil de NADPH ponderada por amplitude das células MCF7. As curtas e longas vidas diminuíram para o NADPH, mas aumentaram para o ALFA 1 da NADPH.Para a FAD, a vida útil ponderada de amplitude das células MCF7 aumentou após a exposição ao cianeto. Tanto as curtas quanto longas vidas aumentaram para a FAD, mas diminuíram para fad alfa um. É importante ter energia laser suficiente indo para as amostras, mas lembre-se, muita energia pode causar danos às células.Como a imagem de autofluorescência não é prejudicial às células, ensaios bioquímicos subsequentes podem ser usados nas mesmas amostras.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

High-resolution Fiber-optic Microendoscopy for in situ Cellular Imaging

High-resolution Fiber-optic Microendoscopy for in situ Cellular Imaging

De alta resolução de fibra óptica para Microendoscopy In situ Celular imagem

Many biological and clinical studies require the longitudinal study and analysis of morphology and function with cellular level resolution.  ...

Bioengenharia

Analyzing Cellular Internalization of Nanoparticles and Bacteria by Multi-spectral Imaging Flow Cytometry

Analisando internalização celular de nanopartículas e bactérias multi-espectral por Citometria de Fluxo Imagem

Nanoparticulate  systems have emerged as valuable tools in vaccine delivery through their  ability to efficiently deliver cargo, including proteins, to ...

Models and Methods to Evaluate Transport of Drug Delivery Systems Across Cellular Barriers

Modelos e Métodos para avaliar Transporte de Drug Delivery Systems através das barreiras celulares

Sub-micrometer carriers (nanocarriers; NCs) enhance efficacy of drugs by improving solubility, stability, circulation time, targeting, and release. ...

Using Cell-substrate Impedance and Live Cell Imaging to Measure Real-time Changes in Cellular Adhesion and De-adhesion Induced by Matrix Modification

Usando impedância Cell-substrato e imagens de células vivas para medir as mudanças em tempo real no celular Adesão e De-adesão Induzidas por Matrix Modificação

Cell-matrix adhesion plays a key role in controlling cell morphology and signaling. Stimuli that disrupt cell-matrix adhesion (e.g., myeloperoxidase and ...

Initial Evaluation of Antibody-conjugates Modified with Viral-derived Peptides for Increasing Cellular Accumulation and Improving Tumor Targeting

Avaliação inicial do anticorpo cojugado modificado com peptídeos virais-derivado para aumentar a acumulação celular e melhorando o direcionamento do Tumor

Antibody-conjugates (ACs) modified with virus-derived peptides are a potentially powerful class of tumor cell delivery agents for molecular payloads used ...

Calorespirometry: A Powerful, Noninvasive Approach to Investigate Cellular Energy Metabolism

Calorespirometry: Uma abordagem poderosa, não-invasiva para investigar o metabolismo energético celular

Many cell lines used in basic biological and biomedical research maintain energy homeostasis through a combination of both aerobic and anaerobic ...

Intra-cardiac Side-Firing Light Catheter for Monitoring Cellular Metabolism using Transmural Absorbance Spectroscopy of Perfused Mammalian Hearts

Cateter de luz de queima lateral intra-cardíaco para monitoramento do metabolismo celular usando espectroscopia de absorvência transmural de corações de mamíferos perfused

Absorbance spectroscopy of cardiac muscle provides non-destructive assessment of cytosolic and mitochondrial oxygenation via myoglobin and cytochrome ...

3D Analysis of Multi-cellular Responses to Chemoattractant Gradients

Análise 3D de respostas multicelulares a gradientes Quimioatrativos

Various limitations of 2D cell culture systems have sparked interest in 3D cell culture and analysis platforms, which would better mimic the spatial and ...

Imaging Integrin Tension and Cellular Force at Submicron Resolution with an Integrative Tension Sensor

Imagem latente integrina tensão e força celular com resolução de Submicron com um Sensor de tensão Integrativa

Molecular tension transmitted by integrin-ligand bonds is the fundamental mechanical signal in the integrin pathway that plays significant roles in many ...

Preparation of Tunable Extracellular Matrix Microenvironments to Evaluate Schwann Cell Phenotype Specification

Preparação de Microambientes de Matriz Extracelular Incapaz para avaliar especificação de fenótipo celular schwann

Traumatic peripheral nervous system (PNS) injuries currently lack suitable treatments to regain full functional recovery. Schwann cells (SCs), as the ...