Name: autofluorescence imaging to evaluate cellular metabolism
Uploaded: 2021-11-15T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Autofluorescence Imaging to Evaluate Cellular Metabolism at JoVE.com

Источники финансирования включают Институт профилактики рака и исследований Техаса (CPRIT RP200668) и Техасский университет A & M. Рисунок 1 был создан с помощью BioRender.com.

1. Покрытие клеток для визуализации
<ol><li>Аспирируйте среду из 80-90% сливающейся Т-75 колбы клеток MCF-7, промывайте клетки 10 мл стерильного фосфатно-буферного физиологического раствора (PBS) и добавляйте 2 мл 0,25% трипсина (1x), чтобы отделить клетки от дна колбы.</li>
	<li>Инкубировать колбу ...

Интенсивность автофлуоресценции и пожизненная визуализация широко использовались для оценки метаболизма в клетках21,55. FLIM имеет высокое разрешение и, следовательно, разрешает одиночные клетки, что важно для исследований рака, поскольку клеточная гетер?...

Метаболизм – это клеточный процесс производства энергии. Клеточный метаболизм охватывает несколько путей, включая гликолиз, окислительное фосфорилирование и глутаминолиз. Здоровые клетки используют эти метаболические пути для выработки энергии для пролиферации и функционирования, такой как производство цитокинов иммунными клетками. Многие заболевания, включая нарушения обмена веществ, рак и нейродегенерацию, характеризуются измененным клеточным метаболизмом1. Например, некоторые типы раковых клеток имеют повышенные скорости гликолиза, даже в присутствии кислорода, для генерации молекул для синтеза нуклеиновых кислот, белков и липидов2,3. Это явление, известное как эффект Варбурга, является отличительной чертой многих типов рака, включая рак молочной железы, рак легких и глиобластомы4. Из-за изменений клеточного метаболизма, связанных с прогрессированием рака, клеточный метаболизм может быть суррогатным биомаркером лекарственного ответа5,6. Кроме того, понимание эффективности лекарств на клеточном уровне имеет решающее значение, поскольку гетерогенность клеток может привести к различным реакциям на лекарства у людей7,8.
Технологии, которые идентифицируют и количественно оценивают изменения в клеточном метаболизме, необходимы для исследований рака и лекарственного ответа. Химические и белковые анализы используются для оценки метаболизма клеток или тканей, но им не хватает одноклеточного разрешения и пространственной информации. Анализы на основе считывателя метаболических пластин могут измерять рН и потребление кислорода в образце с течением времени и последующее метаболическое возмущение химическими веществами. pH может быть использован для расчета скорости внеклеточного подкисления (ECAR), что дает представление о гликолитической активности клеток9. Методы визуализации всего тела, включая 2-[фтор-18] фтор-D-глюкозо-позитронно-эмиссионную томографию (FDG PET) и магнитно-резонансную спектроскопию (MRS), являются неинвазивными методами визуализации, используемыми клинически для выявления рецидива опухоли и эффективности лекарств с помощью метаболических измерений10,11,12,13,14.
FDG-PET изображает поглощение тканями FDG, радиомаркированного аналога глюкозы. Повышенное поглощение ФДГ-ПЭТ опухолями относительно окружающих тканей обусловлено эффектом Варбурга12,13. MRS изображает общие ядра молекул, используемых для метаболизма, таких как 13C и 31P, и может получать динамическую информацию о том, как метаболизм изменяется в ответ на стимулы, такие как физические упражнения или еда14. Хотя ФДГ-ПЭТ и МРС могут использоваться клинически, этим технологиям не хватает пространственного разрешения для разрешения внутриопухолевой гетерогенности. Аналогичным образом, измерения потребления кислорода производятся на массовой популяции клеток. Автофлуоресцентная визуализация преодолевает препятствие пространственного разрешения этих технологий и обеспечивает неинвазивный метод количественной оценки клеточного метаболизма.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63282/63282fig01v2.jpg"> Рисунок 1: NADH и FAD в общих метаболических путях. NADH и FAD являются коферментами, используемыми в гликолизе, цикле Кребса и цепи переноса электронов. Автофлуоресцентная визуализация этих молекул предоставляет информацию о клеточном метаболизме. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63282/63282fig01largev2.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.</a>
Восстановленный никотинамид аденин (фосфат) динуклеотид (NAD(P)H) и окисленный флавинадениндинуклеотид (FAD) являются коферментами метаболических реакций, включая гликолиз, окислительное фосфорилирование и глутаминолиз (рисунок 1). Как NAD(P)H, так и FAD являются автофлуоресцентными и обеспечивают эндогенный контраст для флуоресцентной визуализации1,15. NADPH обладает свойствами, аналогичными свойствам NADH. Из-за этого NAD(P)H часто используется для представления комбинированного сигнала NADH и NADPH2,16.
Флуоресцентная визуализация времени жизни (FLIM) количественно определяет время жизни флуоресценции или время, в течение которого флуорофор находится в возбужденном состоянии. Время жизни флуоресценции реагирует на микроокружение флуорофоров и предоставляет информацию о клеточном метаболизме17. NAD(P)H и FAD могут существовать в клетках в связанных с белком или свободных конформациях, каждая из которых имеет различное время жизни. Свободный NAD(P)H имеет более короткий срок службы, чем связанный с белком NAD(P)H; и наоборот, свободный FAD имеет более длительный срок службы, чем связанный FAD18,19. Время жизни и вес компонентов в течение срока службы могут быть количественно определены на основе данных о распаде срока службы флуоресценции с помощью экв. (1)20:
I(t) = α 1e-t/τ1 + α 2e-t/τ2 + C (1)
Eq (1) представляет собой нормализованную интенсивность флуоресценции как функцию времени. Α 1 и α 2 в этом уравнении представляют пропорциональные компоненты короткого и длительного времени жизни (α 1+ α 2 = 1), соответственно, τ1 и τ2 представляют собой короткое и долгое время жизни соответственно, а C учитывает фоновое освещение7,20. Амплитудно-взвешенное время жизни, представленное здесь как τm, вычисляется с использованием Eq. (2).
τm= α 1τ1+ α 2τ2 (2)
Среднее время жизни может быть вычислено путем усреднения «t» по интенсивности распада флуорофора, что для двухэкспоненциального распада показано экв. (3)17,21.
τ*m= (α 1τ12+ α 2τ22)/ (α 1τ1+ α 2τ2) (3)
Изображение интенсивности флуоресценции может быть вычислено на основе изображения времени жизни путем интеграции распада времени жизни флуоресценции. Автофлуоресцентная визуализация является неразрушающим и безметочным методом, который может быть использован для характеристики метаболизма живых клеток с субклеточным разрешением. Оптический окислительно-восстановительный коэффициент обеспечивает оптическую аналоговую метрику химического окислительно-восстановительного состояния клетки и рассчитывается как отношение интенсивностей NAD(P)H и FAD. Хотя формула для расчета оптического окислительно-восстановительного соотношения не стандартизирована22,23,24,25, она определяется здесь как интенсивность FAD по комбинированным интенсивностям NAD(P)H и FAD. Это определение используется потому, что суммированная интенсивность в знаменателе нормализует метрику между 0 и 1, а ожидаемым результатом ингибирования цианида является снижение окислительно-восстановительного соотношения. Время жизни флуоресценции свободных NAD(P)H и FAD дает представление об изменениях в микроокружении метаболического растворителя, включая рН, температуру, близость к кислороду и осмолярность17.
Изменения в времени жизни флуоресценции связанных фракций NAD(P)H и FAD могут указывать на использование метаболического пути и субстрат-специфический метаболизм26. Массы компонентов могут быть интерпретированы для изменения свободной до связанной фракции коэнзимов18,19. В целом, эти количественные показатели времени аутофлуоресценции позволяют анализировать клеточный метаболизм, а аутофлуоресцентная визуализация была использована для идентификации новообразований из нормальных тканей27,28, характеризующих стволовые клетки29,30, оценивающих функцию иммунных клеток31,32,33,34,35, измеряющих неврологическую активность36, 37,38, и понимание эффективности лекарств при таких типах рака, как рак молочной железы и рак головы и шеи21,39,40,41,42. Автофлуоресцентная визуализация высокого разрешения может быть объединена с сегментацией изображения для одноклеточного анализа и количественной оценки гетерогенности интрапопуляции43,44,45,46,47.
NAD(P)H и FAD могут быть визуализированы на однофотонных или многофотонных флуоресцентных микроскопах, сконфигурированных для интенсивной или пожизненной визуализации. Для однофотонных микроскопов NAD(P)H и FAD обычно возбуждаются на длинах волн 375-405 нм и 488 нм соответственно из-за общих лазерных источников на этих длинах волн48. При двухфотонном флуоресцентном возбуждении NAD(P)H и FAD будут возбуждаться на длинах волн приблизительно от 700 до 750 нм и от 700 до 900 нм соответственно15,49. Как только флуорофоры возбуждаются, NAD(P)H и FAD испускают фотоны на длинах волн от ~410 нм до ~490 нм и ~510 нм до ~640 нм, соответственно15. Длины волн максимального излучения NAD(P)H и FAD составляют приблизительно 450 нм и 535 нм соответственно48.
Из-за их различных длин волн возбуждения и излучения флуоресценция двух метаболических коферментов может быть спектрально изолирована. Понимание спектральных характеристик NAD(P)H и FAD необходимо для проектирования и оптимизации протоколов автофлуоресцентной визуализации. Цианид является ингибитором комплекса IV цепи переноса электронов (ETC). Влияние цианида на клеточный метаболизм и интенсивность аутофлуоресценции и время жизни NAD(P)H и FAD в клетках хорошо охарактеризованы27,40. Таким образом, эксперимент с возмущением цианида является эффективным средством проверки протоколов визуализации NAD(P)H и FAD. Успешный эксперимент с цианидом дает уверенность в том, что протокол визуализации NAD(P)H и FAD может быть использован для оценки метаболизма неизвестных групп или возмущений.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>2-deoxy-d-glucose (2-DG)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>AC111980000; AC111980010; AC111980050; AC111980250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibiotic Antimicrobial (pen-strep)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15240096</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Samples</td>
			<td>American Type Culture Collection</td>
			<td>N/A</td>
			<td>MCF-7 cancer line</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CellProfiler</td>
			<td>Broad Institute</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Image analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical Tube</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89039-664</td>
			<td>15 mL conical tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>11965092</td>
			<td>Culture media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FAD dichroic mirror</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF495-Di03-25x36</td>
			<td>495 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FAD emission filter</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF01-550/88-25</td>
			<td>550/88 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FAD excitation filter</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF01-458/64-25</td>
			<td>458/64 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>16000036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Lifetime Microscope</td>
			<td>3i</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass bottom dish</td>
			<td>MatTek Corp</td>
			<td>P35G-1.0-14-C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiphoton Laser</td>
			<td>Coherent</td>
			<td>N/A</td>
			<td>2P Coherent Laser, Tunable 680 nm-1080 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NAD(P)H dichroic mirror</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF409-Di03-25x36</td>
			<td>409 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NAD(P)H emission filter</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF02-447/60-25</td>
			<td>447/60 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NAD(P)H excitation filter</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF01-357/44-25</td>
			<td>357/44 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>70011044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Cyanide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>380970</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SlideBooks 6</td>
			<td>3i</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Image acquisition software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPCImage</td>
			<td>Becker &#38; Hickl GmbH</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Fluorescence lifetime analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stage Top Incubator</td>
			<td>okoLab</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>Biosciences</td>
			<td>786-262</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Urea</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>U5128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>YG beads</td>
			<td>Polysciences</td>
			<td>19096-2</td>
			<td>Yg microspheres (20.0 &#181;m)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

autofluorescence imaging to evaluate cellular metabolism

Клеточный метаболизм — это процесс, посредством которого клетки вырабатывают энергию, и многие заболевания, включая рак, характеризуются аномальным метаболизмом. Восстановленный никотинамид аденин (фосфат) динуклеотид (NAD(P)H) и окисленный флавинадениндинуклеотид (FAD) являются коферментами метаболических реакций. NAD(P)H и FAD проявляют автофлуоресценцию и могут быть спектрально изолированы волнами возбуждения и излучения. Оба кофермента, NAD(P)H и FAD, могут существовать либо в свободной, либо в связанной с белком конфигурации, каждая из которых имеет различное время жизни флуоресценции - время, в течение которого флуорофор остается в возбужденном состоянии. Флуоресцентная визуализация времени жизни (FLIM) позволяет количественно оценить интенсивность флуоресценции и время жизни NAD(P)H и FAD для анализа клеточного метаболизма без меток. Микроскопы с интенсивностью флуоресценции и сроком службы могут быть оптимизированы для визуализации NAD(P)H и FAD путем выбора соответствующих длин волн возбуждения и излучения. Метаболические возмущения цианидом проверяют протоколы автофлуоресцентной визуализации для обнаружения метаболических изменений в клетках. В данной статье будет продемонстрирована методика автофлуоресцентной визуализации NAD(P)H и FAD для измерения клеточного метаболизма.

Эпителиальная клеточная линия рака молочной железы, MCF-7, культивировалась в DMEM, дополненном 10% фетальной бычьей сывороткой (FBS) и 1% пенициллин-стрептомицином. Для флуоресцентной визуализации клетки засевали с плотностью 4 × 105 клеток на 35-миллиметровую камеру визуализации со стекл?...

Watch this Scientific Journal Video about Autofluorescence Imaging to Evaluate Cellular Metabolism at JoVE.com

Autofluorescence Imaging to Evaluate Cellular Metabolism

Этот протокол описывает флуоресцентную визуализацию и анализ эндогенных метаболических коферментов, восстановленного динуклеотида никотинамидаденина (фосфата) (NAD(P)H) и окисленного флавинадениндинуклеотида (FAD). Автофлуоресцентная визуализация NAD(P)H и FAD обеспечивает безмечаночный, неразрушающий метод оценки клеточного метаболизма.

Автофлуоресцентная визуализация для оценки клеточного метаболизма

Cellular metabolism is the process by which cells generate energy, and many diseases, including cancer, are characterized by abnormal metabolism. Reduced ...

АДГ и ФАД являются эндогенными молекулами, которые проявляют автофлуоресценцию при различных длинах волн возбуждения и излучения. Из-за их использования в качестве коферментов метаболических реакций, автофлуоресцентная микроскопия может оценить клеточный метаболизм. Автофлуоресцентная визуализация NADH и FAD не требует экзогенных меток и является неразрушающим методом с субклеточным разрешением.Автофлуоресцентная микроскопия может быть использована на живых образцах и для изучения времени курса. Автофлуоресцентная визуализация может широко применяться к любым живым клеткам или тканям. Аутофлуоресцентная визуализация использовалась на нейронах, раковых клетках, опухолях, in-vivo, стволовых клетках и иммунных клетках.Продемонстрировать процедуру будет Лингхао Ху, аспирант лаборатории количественной оптической визуализации в Техасском университете A & M. Начните эксперимент с включения всех компонентов многофотонного флуоресцентного микроскопа, включая лазерный источник и детекторы. Перед размещением образца включите яркую полевую лампу и убедитесь, что свет попадает в окуляр.Затем выберите цель для визуализации клеток. Если не используется воздушный объектив, нанесите одну каплю соответствующей погружной среды поверх объектива. Поместите стеклянную тарелку на держатель для образцов на ступеньке микроскопа.Затем центрируйте образец с целью с помощью управления ступени X / Y Убедитесь, что образец закреплен и не будет двигаться во время визуализации. Как только это будет сделано, загляните в окуляр и переместите цель вверх, чтобы сосредоточиться на клетках. Если микроскоп находится в корпусе, закройте дверцу светового короба.Затем откройте программное обеспечение для получения изображений и перейдите на вкладку «Многофотонная визуализация», чтобы задать параметры многофотонной визуализации, как описано в рукописи. Отрегулируйте коэффициент усиления детектора до оптимального значения для флуоресцентной визуализации в течение всего срока службы или FILM. Затем измените время ожидания лазерного расхода на каждый пиксель образца на желаемое значение.Для динуклеотида никотинамидаденинфосфата, или NADPH, установите многофотонный лазер на 750 нанометров. Затем убедитесь, что управление мощностью для лазера установлено на нуле, чтобы ячейки не были повреждены при открытии затвора на лазере. Установите эмиссионный фильтр на расстоянии от 400 до 500 нанометров.Когда параметры заданы, начните съемку в режиме фокусировки или просмотра в реальном времени, чтобы оптимизировать параметры изображения. Медленно увеличивайте мощность лазера с трех до восьми милливатт, гарантируя, что клетки находятся в фокусе. После настройки запишите максимальную используемую мощность.Используйте записанную максимальную настройку мощности для визуализации на других сегментах чашки Петри. Соберите изображение NADPH-FILM со временем интеграции изображения 60 секунд и проверьте, что изображение имеет достаточное количество фотонов, таких как пик в 100 фотонов для пикселя цитоплазмы в пределах кривой распада времени флуоресценции. Если количество фотонов слишком мало, увеличьте мощность лазера или продолжительность получения изображения.Для визуализации флавинадениндинуклеотида, или FAD, установите многофотонный лазер на 890 нанометров и подождите, пока лазер зафиксирует режим на новой длине волны. Убедитесь, что управление мощностью лазера изначально установлено на нулевом уровне. Установите эмиссионный фильтр на частоту от 500 до 600 нанометров.Чтобы оптимизировать настройки изображения, начните съемку в режиме фокусировки или в режиме реального времени, увеличив мощность лазера до 5-10 милливатт и записав максимальную используемую мощность. Используйте ту же настройку питания для FAD-визуализации последующих полей зрения. Соберите изображение FAD-FILM со временем интеграции изображения 60 секунд и убедитесь, что изображение имеет достаточное количество фотонов в пределах кривой распада срока службы флуоресценции.Если количество фотонов слишком мало, увеличьте мощность лазера или продолжительность получения изображения и повторите изображение для дополнительных четырех-пяти полей зрения или FOV, при этом каждое изображение будет расположено на расстоянии двух FOV. Чтобы сделать 80-миллимолярный раствор цианида натрия, растворите 130,24 миллиграмма цианида натрия в 25 миллилитрах PBS. Из чашки для культивирования аспирируют 100 микролитров питательной среды заменить 100 микролитрами раствора цианида натрия для получения четырехмиллимолярной концентрации цианида в посуде.Поместите клетки в инкубатор на пять минут, чтобы клетки могли вступить в реакцию с раствором цианида. После воздействия цианида получите изображения NADPH и FAD клеток, как описано ранее. Исследование рассчитало параметры времени жизни флуоресценции, используя измеренную функцию отклика прибора, или IRF, из мочевины.Параметры были усреднены по пикселям цитоплазмы каждой клетки, используемой для сегментации. Отдельные клетки были идентифицированы и замаскированы для устранения фонового шума. Затем ядро было идентифицировано и спроецировано на клеточную маску.Кроме того, клетки были отфильтрованы для удаления маскированных областей, которые не соответствуют размеру типичных клеток. Многофотонная флуоресцентная пожизненная визуализация NADPH и FAD позволила визуализировать морфологию и метаболизм клеток до и после лечения цианидом. Было отмечено, что продолжительность жизни NADPH уменьшается при лечении цианидом, тогда как продолжительность жизни FAD увеличивается после обработки цианидом.Репрезентативный график коробки показал, что оптическое окислительно-восстановительное соотношение клеток MCF7 уменьшилось после обработки цианидом. Воздействие цианида уменьшало взвешенное по амплитуде время жизни NADPH клеток MCF7. Короткое и длительное время жизни уменьшилось для NADPH, но увеличилось для NADPH альфа-один.Для FAD амплитудно-взвешенное время жизни клеток MCF7 увеличилось после воздействия цианида. Как короткое, так и длительное время жизни увеличилось для FAD, но уменьшилось для FAD альфа-один. Важно иметь достаточно мощности лазера, идущего к образцам, но помните, что слишком большая мощность может привести к повреждению клеток.Поскольку автофлуоресцентная визуализация не повреждает клетки, последующие биохимические анализы могут быть использованы на тех же образцах.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

High-resolution Fiber-optic Microendoscopy for in situ Cellular Imaging

High-resolution Fiber-optic Microendoscopy for in situ Cellular Imaging

Высокое разрешение Волоконно-оптические Microendoscopy для На месте Сотовые изображений

Many biological and clinical studies require the longitudinal study and analysis of morphology and function with cellular level resolution.  ...

Analyzing Cellular Internalization of Nanoparticles and Bacteria by Multi-spectral Imaging Flow Cytometry

Анализируя сотовой Интернализация наночастиц и бактерий нескольких спектральных изображений проточной цитометрии

Nanoparticulate  systems have emerged as valuable tools in vaccine delivery through their  ability to efficiently deliver cargo, including proteins, to ...

Models and Methods to Evaluate Transport of Drug Delivery Systems Across Cellular Barriers

Модели и методы для оценки Перевозка системам по наркотикам Доставка по клеточные барьеры

Sub-micrometer carriers (nanocarriers; NCs) enhance efficacy of drugs by improving solubility, stability, circulation time, targeting, and release. ...

Using Cell-substrate Impedance and Live Cell Imaging to Measure Real-time Changes in Cellular Adhesion and De-adhesion Induced by Matrix Modification

Использование Cell-субстрата сопротивление и живых изображений сотовый измерить в реальном времени изменения в клеточной адгезии и Де адгезии, индуцированной Matrix модификации

Cell-matrix adhesion plays a key role in controlling cell morphology and signaling. Stimuli that disrupt cell-matrix adhesion (e.g., myeloperoxidase and ...

Initial Evaluation of Antibody-conjugates Modified with Viral-derived Peptides for Increasing Cellular Accumulation and Improving Tumor Targeting

Первоначальная оценка антител конъюгаты изменения с пептидами вирусный производные для повышения сотовой накопления и ориентации опухоли

Antibody-conjugates (ACs) modified with virus-derived peptides are a potentially powerful class of tumor cell delivery agents for molecular payloads used ...

Calorespirometry: A Powerful, Noninvasive Approach to Investigate Cellular Energy Metabolism

Calorespirometry: Мощный, неинвазивная подход к расследованию клеточной энергии метаболизма

Many cell lines used in basic biological and biomedical research maintain energy homeostasis through a combination of both aerobic and anaerobic ...

Intra-cardiac Side-Firing Light Catheter for Monitoring Cellular Metabolism using Transmural Absorbance Spectroscopy of Perfused Mammalian Hearts

Внутрисердечная боковая стрельба Световой катетер для мониторинга клеточного метаболизма с помощью трансмуральной абсорбции спектроскопии Перфизуд млекопитающих сердец

Absorbance spectroscopy of cardiac muscle provides non-destructive assessment of cytosolic and mitochondrial oxygenation via myoglobin and cytochrome ...

3D Analysis of Multi-cellular Responses to Chemoattractant Gradients

3D анализ Мультиклеточных реакций на Хемоаттрактантные градиенты

Various limitations of 2D cell culture systems have sparked interest in 3D cell culture and analysis platforms, which would better mimic the spatial and ...

Imaging Integrin Tension and Cellular Force at Submicron Resolution with an Integrative Tension Sensor

Интегрин напряженности и клеточных силы на субмикронном резолюции с датчиком интегративной напряженности

Molecular tension transmitted by integrin-ligand bonds is the fundamental mechanical signal in the integrin pathway that plays significant roles in many ...

Preparation of Tunable Extracellular Matrix Microenvironments to Evaluate Schwann Cell Phenotype Specification

Подготовка тунца внеклеточной матрицы микроэковранции для оценки Шванн клеток фенотип спецификации

Traumatic peripheral nervous system (PNS) injuries currently lack suitable treatments to regain full functional recovery. Schwann cells (SCs), as the ...