使用细胞示踪剂注射研究大鼠囊侧壁模型中新内膜形成细胞的起源

通过使用直接的主动脉内细胞示踪剂应用，我们可以分析来自母动脉的内皮细胞在两个不同时间点的新intima形成中的作用。该技术的一大优点是直接，单点，解释性体内注射，这使得该模型成为一种强大且可重复的技术。手术前，将供体大鼠的动脉袋在0.1%十二烷基硫酸钠中在37摄氏度下孵育10小时，以获得去细胞化动脉瘤。

在手术前几天从捐赠动物那里收集这些袋子。首先，分析动物的行为并检查粘膜和膨胀，作为术前临床检查的一部分。记录每只动物的体重。

对于麻醉诱导，将所有大鼠放在提供氧气的干净盒子中，直到5至10分钟后失去意识。通过没有踏板退出反射来检查麻醉深度。将大鼠置于仰卧位，并用电动剃须刀剃除胸腹区域。

使用胶带将老鼠的爪子固定在由连接到自动调节直肠探头的加热垫覆盖的板上。将直肠探针插入大鼠的肛门，在加热垫的帮助下保持37摄氏度的所需温度。然后在连接到计算机系统的右后腿上安装传感器，用于检查术中的生命体征。

对于肛周美容护理，在眼睛上涂抹无菌眼科润滑剂，并用不透明的铝箔面罩覆盖它们，以防止手术灯干燥和损坏。用聚维酮碘消毒手术场，并以无菌方式覆盖手术场。在主动脉的近端和远端部分下放置带有紫色衬垫的微拭子，以便在动脉与腔静脉分离后立即更好地可视化动脉。

然后用白色纱布保护腹部。在手术当天，通过移液于一毫升PBS溶解两微升细胞示踪剂。将混合物转移到装有套管的一毫升注射器中。

关闭手术室的灯。使用显微镜，用微镊子在主动脉的中腹侧部分进行一点注射，并小心地注射一毫升肝素化的0.9%盐水溶液。小心地注射细胞示踪剂，并立即关闭手术显微镜。

再次用湿纱布保护腹部。让染料孵育至少15分钟。然后打开显微镜和手术室的灯。

使用微镊子和微剪刀进行纵向动脉切开术，使其长度平均为收获的动脉瘤的直径。在进行动脉切开术之前，将动脉瘤放在主动脉旁边，以确保正确的长度。使用不可吸收的10-0缝线，用8至10针缝合动脉瘤。

在最后一针之前，将线圈的堆积密度为一厘米。线圈或支架治疗都可以在此模型中进行。然后小心地取下临时夹子，从远端开始，用肝素盐水连续冲洗。

以分层方式闭合伤口。在手术结束时，用皮下注射逆转麻醉。让每只操作的动物在干净的笼子里恢复，直到完全清醒，并根据需要用加热灯加热。

对于盘管或支架治疗组之间的脱细胞化或重要动脉瘤，第7天和第21天的基线动脉瘤体积没有显着差异。与支架置入式动脉瘤相比，去细胞化动脉瘤的拉动FU体积显示盘绕的动脉瘤生长不显着。拉动FU体积在生命盘绕组中明显大于支架组。

在第7天FU时，支架或盘绕处理组新生血管中细胞示踪阳性细胞的数量在支架或盘绕处理组之间没有显着差异，但在第21天时支架大鼠显着较高 FU.No 在7天或21天时在生命动脉瘤缝合大鼠中观察到显着差异，FU.In 7天FU时去细胞化动脉瘤， 与线圈处理的组相比，支架处理的血栓中残留的细胞示踪阳性细胞明显更多。在 FU 七天时，在生命动脉瘤中未观察到这种差异。请记住，在注射细胞示踪剂之前，始终关闭手术室的灯，以防止褪色。另外，让染料孵育至少15分钟。