Name: rat burn model to study full-thickness cutaneous thermal burn and infection
Uploaded: 2022-08-23T14:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Rat Burn Model to Study Full-Thickness Cutaneous Thermal Burn and Infection at JoVE.com

Yazarlar, hayvanların sağlanması ve bakımı için Kuzey Carolina Üniversitesi Karşılaştırmalı Tıp Bölümü'ne teşekkür eder. Lauren Ralph ve Mia Evangelista'ya Patoloji Hizmetleri Çekirdeği'nde, doku kesitleme ve görüntüleme de dahil olmak üzere Histopatoloji / Dijital Patoloji ile ilgili uzman teknik yardım için teşekkür ederiz. Bu araştırma, Savunma Bakanlığı'ndan bir araştırma hibesi ile desteklenmiştir (Ödül numarası W81XWH-20-1-0500, GR ve TV).

Tüm prosedürler, Kuzey Carolina Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (IACUC) tarafından onaylandı ve belirlenen yönergelere uygun olarak yürütüldü. Deneyler için 7-9 haftalık erkek ve dişi Sprague Dawley sıçanları (250-300 g) kullanıldı. Tüm hayvanlar, yiyecek ve su ad libitumuna serbest erişim ile 12 saat: 12 saat açık-karanlık döngüsünde barındırıldı. Çalışmaya başlamadan önce her zaman kurumsal veterinerinizle birlikte analjezik bir plan hakkında ç...

<ol>
	<li>Peck, M., Molnar, J., Swart, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+global+plan+for+burn+prevention+and+care.">A global plan for burn prevention and care.</a> Bulletin of the World Health Organization. 87, 802-803 (2009).</li><li>American Burn Association. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Burn+incidence+and+treatment+in+the+United+States:+2011+fact+sheet.">Burn incidence and treatment in the United States: 2011 fact sheet.</a> Chicago: American Burn Association. , (2011).</li><li>Miller, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=National+burn+repository+2007+report:+a+synopsis+of+the+2007+call+for+data.">National burn repository 2007 report: a synopsis of the 2007 call for data.</a> Journal of Burn Care &amp; Research. 29 (6), 862-870 (2008).</li><li>Kruger, E., Kowal, S., Bilir, S. P., Han, E., Foster, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+patient+characteristics+and+number+of+procedures+as+well+as+length+of+stay+for+patients+surviving+severe+burn+injuries:+analysis+of+the+American+Burn+Association+National+Burn+Repository.">Relationship between patient characteristics and number of procedures as well as length of stay for patients surviving severe burn injuries: analysis of the American Burn Association National Burn Repository.</a> Journal of Burn Care &amp; Research. 41 (5), 1037-1044 (2020).</li><li>American Burn Association. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Burn+incidence+and+treatment+in+the+United+States:+2016.+Burn+Incidence+Fact+Sheet.">Burn incidence and treatment in the United States: 2016. Burn Incidence Fact Sheet.</a> Chicago: American Burn Association. , (2016).</li><li>Willis, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma+extracellular+vesicles+released+after+severe+burn+injury+modulate+macrophage+phenotype+and+function.">Plasma extracellular vesicles released after severe burn injury modulate macrophage phenotype and function.</a> Journal of Leukocyte Biology. 111 (1), 33-49 (2022).</li><li>Kartchner, L. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=One-hit+wonder:+late+after+burn+injury,+granulocytes+can+clear+one+bacterial+infection+but+cannot+control+a+subsequent+infection.">One-hit wonder: late after burn injury, granulocytes can clear one bacterial infection but cannot control a subsequent infection.</a> Burns. 45 (3), 627-640 (2019).</li><li>Abdullahi, A., Amini-Nik, S., Jeschke, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+in+burn+research.">Animal models in burn research.</a> Cellular and Molecular Life Sciences. 71 (17), 3241-3255 (2014).</li><li>Cai, E. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creation+of+consistent+burn+wounds:+a+rat+model.">Creation of consistent burn wounds: a rat model.</a> Archives of Plastic Surgery. 41 (4), 317 (2014).</li><li>Pessolato, A. G. T., dos Santos Martins, D., Ambr&#243;sio, C. E., Man&#231;anares, C. A. F., de Carvalho, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Propolis+and+amnion+reepithelialise+second-degree+burns+in+rats.">Propolis and amnion reepithelialise second-degree burns in rats.</a> Burns. 37 (7), 1192-1201 (2011).</li><li>Gurung, S., &#352;kalko-Basnet, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wound+healing+properties+of+Carica+papaya+latex:+in+vivo+evaluation+in+mice+burn+model.">Wound healing properties of Carica papaya latex: in vivo evaluation in mice burn model.</a> Journal of Ethnopharmacology. 121 (2), 338-341 (2009).</li><li>Eloy, R., Cornillac, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wound+healing+of+burns+in+rats+treated+with+a+new+amino+acid+copolymer+membrane.">Wound healing of burns in rats treated with a new amino acid copolymer membrane.</a> Burns. 18 (5), 405-411 (1992).</li><li>Upadhyay, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+and+healing+efficacy+of+Sea+buckthorn+(Hippophae+rhamnoides+L.)+seed+oil+on+burn+wounds+in+rats.">Safety and healing efficacy of Sea buckthorn (Hippophae rhamnoides L.) seed oil on burn wounds in rats.</a> Food and Chemical Toxicology. 47 (6), 1146-1153 (2009).</li><li>El-Kased, R. F., Amer, R. I., Attia, D., Elmazar, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Honey-based+hydrogel:+In+vitro+and+comparative+In+vivo+evaluation+for+burn+wound+healing.">Honey-based hydrogel: In vitro and comparative In vivo evaluation for burn wound healing.</a> Scientific Reports. 7 (1), 1-11 (2017).</li><li>Fan, G. -. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Severe+burn+injury+in+a+swine+model+for+clinical+dressing+assessment.">Severe burn injury in a swine model for clinical dressing assessment.</a> Journal of Visualized Experiments. (141), e57942 (2018).</li><li>Davenport, L., Dobson, G., Letson, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+model+for+standardising+and+treating+thermal+injury+in+the+rat.">A new model for standardising and treating thermal injury in the rat.</a> MethodsX. 6, 2021-2027 (2019).</li><li>Kaufman, T., Lusthaus, S., Sagher, U., Wexler, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deep+partial+skin+thickness+burns:+a+reproducible+animal+model+to+study+burn+wound+healing.">Deep partial skin thickness burns: a reproducible animal model to study burn wound healing.</a> Burns. 16 (1), 13-16 (1990).</li><li>Casal, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+supply+to+the+integument+of+the+abdomen+of+the+rat:+a+surgical+perspective.">Blood supply to the integument of the abdomen of the rat: a surgical perspective.</a> Plastic and Reconstructive Surgery Global Open. 5 (9), (2017).</li><li>Casal, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+model+of+free+tissue+transfer:+the+rat+epigastric+free+flap.">A model of free tissue transfer: the rat epigastric free flap.</a> Journal of Visualized Experiments. (119), e55281 (2017).</li><li>Naldaiz-Gastesi, N., Bahri, O. A., Lopez de Munain, A., McCullagh, K. J., Izeta, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+panniculus+carnosus+muscle:+an+evolutionary+enigma+at+the+intersection+of+distinct+research+fields.">The panniculus carnosus muscle: an evolutionary enigma at the intersection of distinct research fields.</a> Journal of Anatomy. 233 (3), 275-288 (2018).</li><li>Weber, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+trauma+in+rats:+similarities+to+humans+and+potential+pitfalls+to+consider.">Modeling trauma in rats: similarities to humans and potential pitfalls to consider.</a> Journal of Translational Medicine. 17 (1), 1-19 (2019).</li><li>Nguyen, J. Q. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+frequency+domain+imaging+of+burn+wounds+in+a+preclinical+model+of+graded+burn+severity.">Spatial frequency domain imaging of burn wounds in a preclinical model of graded burn severity.</a> Journal of Biomedical Optics. 18 (6), 066010 (2013).</li><li>Sobral, C., Gragnani, A., Morgan, J., Ferreira, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+proliferation+of+Pseudomonas+aeruginosa+by+KGF+in+an+experimental+burn+model+using+human+cultured+keratinocytes.">Inhibition of proliferation of Pseudomonas aeruginosa by KGF in an experimental burn model using human cultured keratinocytes.</a> Burns. 33 (5), 613-620 (2007).</li><li>Olivera, F., Bevilacqua, L., Anaruma, C., Boldrini Sde, C., Liberti, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+changes+in+distant+muscle+fibers+following+thermal+injury+i+n+Wistar+rats.">Morphological changes in distant muscle fibers following thermal injury i n Wistar rats.</a> Acta Cirurgica Brasileira. 25, 525-528 (2010).</li><li>Davies, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Physiological Responses to Burning Injury. , (1982).</li><li>Neely, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flagellin+treatment+prevents+increased+susceptibility+to+systemic+bacterial+infection+after+injury+by+inhibiting+anti-inflammatory+IL-10++IL-12-neutrophil+polarization.">Flagellin treatment prevents increased susceptibility to systemic bacterial infection after injury by inhibiting anti-inflammatory IL-10+ IL-12-neutrophil polarization.</a> PloS One. 9 (1), e85623 (2014).</li><li>Dunn, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+detection+of+blood+nitric+oxide+reveals+a+burn-dependent+decrease+of+nitric+oxide+in+response+to+Pseudomonas+aeruginosa+infection.">Direct detection of blood nitric oxide reveals a burn-dependent decrease of nitric oxide in response to Pseudomonas aeruginosa infection.</a> Burns. 42 (7), 1522-1527 (2016).</li><li>Gouma, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+procedure+for+estimation+of+total+body+surface+area+and+determination+of+a+new+value+of+Meeh's+constant+in+rats.">A simple procedure for estimation of total body surface area and determination of a new value of Meeh's constant in rats.</a> Laboratory Animals. 46 (1), 40-45 (2012).</li><li>Dawson, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+surface-area/body-weight+relationship+in+mice.">The surface-area/body-weight relationship in mice.</a> Australian Journal of Biological Sciences. 20 (3), 687-690 (1967).</li><li>Moins-Teisserenc, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Severe+altered+immune+status+after+burn+injury+is+associated+with+bacterial+infection+and+septic+shock.">Severe altered immune status after burn injury is associated with bacterial infection and septic shock.</a> Frontiers in Immunology. 12, 529 (2021).</li><li>Robins, E. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunosuppression+of+the+burned+patient.">Immunosuppression of the burned patient.</a> Critical Care Nursing Clinics. 1 (4), 767-774 (1989).</li></ol>

Yanık yaralanmasının patofizyolojisini incelemek için çeşitli yanık modelleri sunulmuştur 8,12,16,17. Bu çalışmada, hastalarda enfekte bir yanık travmasını simüle etmek için tam kalınlıkta bir yanığı indüklemek için basit ve tekrarlanabilir bir protokol geliştirmek için bir sıçan modeli kullandık. İnsan koşullarını taklit etmek için hayvan modeli olarak sıçan?...

Yanık yaralanmaları travmanın en yıkıcı biçimleri arasındadır ve ölüm oranları özel yanık merkezlerinde bile %12'ye ulaşmaktadır 1,2,3. Son zamanlarda yayınlanan raporlara göre, Amerika Birleşik Devletleri'nde yılda ~ 486.000 yanık hastası tıbbi bakıma ihtiyaç duyuyor ve yaklaşık 3.500 ölüm 1,2,3,4,5,6. Yanık yaralanması, hastaların bağışıklık sistemi için büyük bir zorluk oluşturur ve iyileşmesi yavaş olan önemli bir açık yara oluşturur ve onları nozokomiyal, fırsatçı bakterilerle kutanöz, pulmoner ve sistemik kolonizasyona duyarlı hale getirir. Bakteriyel enfeksiyon ile birlikte immün disregülasyon yanık hastalarında artmış morbidite ve mortalite ile ilişkilidir7.
Bir hayvan yanığı ve enfeksiyon modeli, deri hasarı ve yanık travması ile ilişkili immün baskılanmayı takiben bakteriyel enfeksiyonların patogenezini incelemek için gereklidir. Bu tür modeller, yanık hastalarında bakteriyel enfeksiyonların tedavisi için yeni yöntemlerin tasarlanmasını ve değerlendirilmesini sağlar. Sıçanlar ve insanlar, daha önce belgelenen benzer cilt fizyolojik ve patolojik özelliklerini paylaşırlar8. Ek olarak, sıçanların boyutu daha küçüktür, bu da onları daha büyük hayvan modellerinden daha kolay, daha uygun fiyatlı ve tedarik edilmesi ve bakımı daha kolay hale getirir.
Bu özellikler, sıçanları yanıkları ve enfeksiyonları incelemek için ideal bir model hayvan yapar9. Ne yazık ki, yanık indüksiyonu tekniği tutarsızdır ve genellikle minimal olarak tanımlanmıştır 10,11,12,13,14. Mevcut protokol, klinik senaryoyu simüle eden ve bağışıklık baskılanmasını ve bakteriyel enfeksiyonu değerlendirmek için kullanılabilecek bir sıçan modelinde tutarlı bir tam kalınlıkta yanık hasarı oluşturmak için basit, uygun maliyetli ve tekrarlanabilir bir prosedür geliştirmek üzere tasarlanmıştır.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 mL syringe</td>
			<td>BD, USA</td>
			<td>309597</td>
			<td>Used to inject the analgesic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.7 mL Microtube</td>
			<td>Olympus, USA</td>
			<td>24-282</td>
			<td>Used to carry morphine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% NBF</td>
			<td>VWR, USA</td>
			<td>16004-115</td>
			<td>Used to fix the skin piece for staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30 mL syringe</td>
			<td>BD, USA</td>
			<td>302832</td>
			<td>Used to inject the lactate ringer solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% ethyl alcohol</td>
			<td>Fischer Scientific, USA</td>
			<td>BP28184</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aperio AT2 Digital Pathology&#160; Slide Scanner with ImageScope software</td>
			<td>Aperio, Technologies Inc., Vista, CA, USA</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Scanning of H &#38; E slides and analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cetrimide agar plates</td>
			<td>BD, USA</td>
			<td>285420</td>
			<td>Selective media plates for Pseudomonas aeruginosa growth</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Copper rods</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Used to induce the burn injury</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton tipped applicators</td>
			<td>OMEGA Surgical supply, USA</td>
			<td>4225-IMC</td>
			<td>Used to apply eye ointment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric shaver</td>
			<td>Oster, USA</td>
			<td>Golden A5</td>
			<td>Used to remove the dorsal side hairs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye lube</td>
			<td>Dechra, UK</td>
			<td>n/a</td>
			<td>The eye wetting agent to provide long lasting comfort and avoid eye dryness</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluff filled underpads</td>
			<td>Medline, USA</td>
			<td>MSC281225</td>
			<td>Used in the burn procedure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forcep</td>
			<td>F.S.T.</td>
			<td>11027-12</td>
			<td>Used to hold the skin piece</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze sponges</td>
			<td>Oasis, USA</td>
			<td>PK412</td>
			<td>Used to clean the applied nair cream from the dorsal side&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat-resistant gloves</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Used to hold the heated copper rods</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematology Analyzer</td>
			<td>IDEXX laboratories, USA</td>
			<td>ProCyte Dx</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Induction chamber</td>
			<td>Kent Scientific, USA</td>
			<td>vetFlo-0730</td>
			<td>Used to anesthesize the animals</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringe</td>
			<td>BD, USA</td>
			<td>329461</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Pivetal, USA</td>
			<td>NDC46066-755-04</td>
			<td>Used to anesthesized rats to induce a loss of consciousness</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane vaporiser</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lactated ringer&#39;s solution</td>
			<td>icumedical, USA</td>
			<td>NDC0990-7953-09</td>
			<td>Used to resuscitate the rats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-shaped spreader</td>
			<td>Fischer Scientific, USA</td>
			<td>14-665-230</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mannitol Agar</td>
			<td>BD, USA</td>
			<td>211407</td>
			<td>Selective media plates for Staphylococcus aureus growth</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Minicollect tubes (K2EDTA)</td>
			<td>greiner bio-one, USA</td>
			<td>450480</td>
			<td>Used to collect the blood</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Morphine</td>
			<td>Mallinckrodt, UK</td>
			<td>NDC0406-8003-30</td>
			<td>This analgesia was used to induce the inability to feel burn injury pain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Muller Hinton Broth</td>
			<td>BD, USA</td>
			<td>275730</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Muller Hinton II Agar</td>
			<td>BD, USA</td>
			<td>211438</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nair hair removal lotion</td>
			<td>Nair, USA</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Used to remove the residual hairs on dorsal side</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle 23 G</td>
			<td>BD, USA</td>
			<td>305193</td>
			<td>Used to inject the lactate ringer solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal saline</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectrophotometer</td>
			<td>ThermoScientific, USA</td>
			<td>Genesys 30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sprague-Dawley rats, male and female</td>
			<td>Charles River Labs</td>
			<td>n/a</td>
			<td>7-9 weeks old for burn induction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissor</td>
			<td>F.S.T.</td>
			<td>14501-14</td>
			<td>Used to cut the desired skin piece</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue collection tubes</td>
			<td>Globe Scientific</td>
			<td>220101236</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Homogenizer</td>
			<td>Kinematica, Inc, USA</td>
			<td>POLYTRON PT2100</td>
			<td>Used to homogenize the tissue samples</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bath</td>
			<td>Fischer Scientific, USA</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Used to induce the burn injury</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weighted heating pad</td>
			<td>Comfytemp, USA</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Used during the procedure to keep rat&#39;s body warm</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

rat burn model to study full-thickness cutaneous thermal burn and infection

Yanık indüksiyon metodolojileri sıçan modellerinde tutarsız bir şekilde tanımlanmıştır. Klinik senaryoyu temsil eden tek tip bir yanık yara modeli, tekrarlanabilir yanık araştırması yapmak için gereklidir. Mevcut protokol, sıçanlarda ~% 20 toplam vücut yüzey alanı (TBSA) tam kalınlıkta yanıklar oluşturmak için basit ve tekrarlanabilir bir yöntem tanımlamaktadır. Burada, yanık yaralanmasını indüklemek için sıçan derisi yüzeyine bir su banyosunda 97 ° C'de ısıtılan22.89 cm2 (5.4 cm çapında) bakır çubuk uygulanmıştır. Yüksek ısı iletkenliğine sahip bir bakır çubuk, tam kalınlıkta bir yanık oluşturmak için ısıyı cilt dokusunda daha derine dağıtabildi. Histoloji analizi, dermisin ve deri altı dokusunun tam kalınlık derecesine pıhtılaştırıcı hasar veren zayıflatılmış epidermisi gösterir. Ek olarak, bu model immün disregülasyon ve bakteriyel enfeksiyonlar gibi yanık yaralanmasını takiben hastanede yatan yanık hastalarında gözlenen klinik durumları temsil etmektedir. Model, hem Gram-pozitif hem de Gram-negatif bakteriler tarafından sistemik bakteriyel enfeksiyonu özetleyebilir. Sonuç olarak, bu yazıda, yanık yarası ve enfeksiyonlar için yeni topikal antibiyotik ilaçların geliştirilmesinde önemli yarar sağlayan, immün disregülasyon ve bakteriyel enfeksiyonlar da dahil olmak üzere klinik durumları taklit eden, öğrenmesi kolay ve sağlam bir sıçan yanığı modeli sunulmaktadır.

Burada sunulan protokol oldukça tekrarlanabilir ve sıçanlarda üçüncü derece, tam kalınlıkta yanık hasarı ile sonuçlanmıştır. Yanık indüksiyonundan sonra yanık yarası mumsu beyaz görünür (Şekil 2B). Yanık yaralanmasının rengi, 72 saatlik yanma sonrası boyunca beyazdan kahverengiye değişmiştir (Şekil 2B-E).
Histolojik analiz, tam kalınlıkta bir yanığı doğruladı (der...

Watch this Scientific Journal Video about Rat Burn Model to Study Full-Thickness Cutaneous Thermal Burn and Infection at JoVE.com

Rat Burn Model to Study Full-Thickness Cutaneous Thermal Burn and Infection

Yanık hasarı ve enfeksiyonunun klinik senaryosunu taklit eden bir model, yanık araştırmalarını ilerletmek için gereklidir. Mevcut protokol, insanlardakiyle karşılaştırılabilir basit ve tekrarlanabilir bir sıçan yanığı enfeksiyon modeli göstermektedir. Bu, yeni topikal antibiyotik tedavileri geliştirmek için yanık ve yanık sonrası enfeksiyonların incelenmesini kolaylaştırır.

Tam Kalınlıkta Kutanöz Termal Yanık ve Enfeksiyonu İncelemek için Sıçan Yanık Modeli

Burn induction methodologies are inconsistently described in rat models. A uniform burn wound model, which represents the clinical scenario, is necessary ...

Bu yanık yaralanması modeli, immün disregülasyon ve bakteriyel enfeksiyonlar gibi yanık yaralanmalarını takiben hastanede yatan yanık hastalarında gözlenen klinik durumları özetleyebilmektedir. Sıçanlarda yanığı indükleyen bu yöntemin öğrenilmesi kolaydır ve yanık yaraları ve enfeksiyonlar için yeni tropikal ilaçların geliştirilmesi ve değerlendirilmesi için kullanılabilir. Bu model, yanık bölgesinde bakteriyel enfeksiyonun ilerlemesinin yanı sıra yara iyileşmesini değerlendirmek için de kullanılabilir.Bu yanık indüksiyon yöntemi, yanık indüksiyonu için fare ve diğer hayvan modellerinde ve yanık yaralarının bakteriyel enfeksiyonunu incelemek için de kullanılabilir. Anestezi uygulanan sıçanı, yüzüstü pozisyonda bir ısıtma yastığı üzerinde hareket ettirerek yanık yaralanması için hazırlamaya başlayın. Pamuk uçlu bir aplikatör kullanarak, kornea kurumasını önlemek için her iki göze de göz yağlayıcısı uygulayın.Sıçanın sırt bölgesini, omuz bıçaklarından kuyruğun tabanına kadar geniş bir dikdörtgen içinde elektrikli bir kesme makinesi ile tıraş edin. Tuzlu suya batırılmış dokuyu kullanarak tıraş edilen bölgedeki gevşek tüyleri silin. Epilasyon losyonunu pamuk uçlu bir aplikatör kullanarak tıraş edilen bölgeye uygulayın.Üç dakika sonra, losyonu çıkarmak ve cilt tahrişini önlemek için bölgeyi iki kez ıslak gazlı bezle silin. İzofluranı kapatın ve sıçanı kurtarma kafesine yerleştirmeden önce burun konisini çıkarın. Yanık yaralanması deneyinin yapıldığı gün, su banyosu sıcaklığını 97 santigrat dereceye ayarlayın ve deneyden bir saat önce, su banyosuna 420 gram dört bakır çubuk yerleştirin.Sıçan tüm uzuvlarda ayak parmağını sıkıştırmaya tepki vermediğinde, onu eğilimli bir pozisyonda ısıtma yastığına yerleştirin ve ağrı yönetimi için intraperitoneal veya IP kökü yoluyla kilogram vücut ağırlığı başına 20 miligram morfin enjekte edin. Ardından, su banyosu sıcaklığını kontrol edin. Zamanlayıcıyı ayarlayın ve ısıya dayanıklı eldivenleri giyin.Su banyosundan ısıtılmış bir bakır çubuk alın ve yedi saniye boyunca dorsum alanına dokunun. Hemen sonraki üç yanığı, yanık bölgesi başına bir çubuk kullanarak birbiri ardına uygulayın ve yaklaşık% 20'lik bir toplam vücut yüzey alanı tam temas yanığı üretin. Yanıktan sonra, emzirilmiş Ringer çözeltisinin gram vücut ağırlığı başına 0.1 mililitreyi IP yolu ile enjekte ederek hayvanı yeniden canlandırın.İşiniz bittiğinde, izofluranı kapatın. Burun konisini çıkarın ve sıçanı ısı matının üzerine yerleştirin. Yanık ve enfeksiyon gününde, Pseudomonas aeruginosa veya Staphylococcus aureus kültürünü 5 dakika boyunca 4.000 kez g'de ayrı ayrı santrifüj edin.Pelet'i 600 nanometrede 0.1 optik yoğunluğa kadar salin kullanarak seyreltmeden önce peleti normal salinle yıkayın. Bakteriyel süspansiyonun 200 mikrolitresini 800 mikrolitre salin ile seyreltin ve 7. koloni oluşturan birimlere veya mililitre başına CFU'ya 2 x 10 istenen bakteriyel inokulumu elde edin. Yanıktan 15 dakika sonra, 29 gauge iğne kullanarak yanık alanının yakınındaki bakterilerin 50 mikrolitre seyreltilmiş inokülumunu deri altından enjekte edin.İyileşme için sıçanı ısıtma yastığına yerleştirin. 15 ila 20 dakika sonra, kurtarılan hayvanı temiz bir kafese aktarın. Yanık yaralanmasından hemen sonra cilt hasarını morfolojik olarak renk ve marj açısından değerlendirin.Ötanizasyondan sonra, yanık indüksiyonunun konakçı bağışıklık sistemi üzerindeki etkisini belirlemek için tam kan sayımlarını analiz edin. Ötanize edilmiş sıçanın dokusunu 10 mililitrelik bir toplama tüpünde toplayın. Bir doku homojenizatörü kullanarak numuneleri homojenize edin ve doku homojenatlarını normal salinde seri olarak seyreltin.Plaka 100 mikrolitre seyreltilmemiş homojenat ve her doku örneğinin tüm seyreltileri, setrimid agar plakaları üzerinde P.Aeruginosa ile enfekte sıçanlardan toplanır. Plakaları bir inkübatörde 37 santigrat derecede 16 ila 18 saat inkübe ettikten sonra, plakalardaki bakteri kolonilerini sayın. Mililitre başına CFU sayısını elde etmek için bunları seyreltme oranıyla çarpın ve CFU program dokusunu hesaplamak için dokunun ağırlığıyla normalleştirin.Bu yüksek oranda tekrarlanabilir protokol, sıçanlarda üçüncü derece tam kalınlıkta yanık yaralanmasına neden oldu. Yanık yaralanmasının rengi 24 saat içinde beyazdan kahverengiye, yanıktan 72 saat sonra değişti. Histolojik analizde, yanmış hayvanlardan alınan deri örnekleri, yanık sonrası yaralanmadan 24, 48 ve 72 saat sonra tüm katmanlarda yaralanma gösterirken, yanık olmayan cilt epidermis, dermis ve deri altı doku katmanlarının açık bir ayrımını göstermiştir.Yanmış deri örneklerinde epidermal tabakanın yıkımı ve deri altı yağ ve iskelet kası ile dermisin tam kalınlığında hasar gözlendi. Yanma sonrası 24 saat içinde, tam kalınlıkta bir yanık 2.61 milimetreden daha derindi. Bakteriyel klirens değerlendirmesinde, tüm yanık hasarlı sıçanlarda bakteriyel iyileşme gözlendi.P.aeruginosa PAO1 enfeksiyonu sırasında, yanmış sıçanın derisinden enfeksiyondan 24 saat sonra iyileşen bakteri sayısı, 6. CFU'ya 1'e 10'luk ilk inokulumdan daha azdı. Bununla birlikte, enfeksiyondan 48 ve 72 saat sonra artmıştır. S.aureus, ATC25923 enfeksiyonunda, ilk inokuluma kıyasla cildin tüm zaman noktalarında 2 log 10 artış gözlenmiştir, bu da S.aureus enfeksiyonunun oluşumunun dokulardaki aktif replikasyona bağlı olarak sonuçlandığını düşündürmektedir.Subkutan doku ve kaslar akciğer ve dalaktan daha yüksek bakteri yükü gösterdi. Veriler, yanmış sıçanların P.aeruginosa aşılamasından 24 saat sonra ve S.aureus aşılamasından 48 saat sonra sistemik bir enfeksiyon geliştirdiğini göstermiştir. Sıçan dorsumundaki tüyleri tamamen çıkarın ve protokolde belirtildiği gibi sıcaklığı koruyun ve indüksiyon süresini yakın.Artık saçlar ve bakır çubukların farklı sıcaklıkları yanığın kalitesini etkileyebilir. Sıçan yanığı modeli, yanık yarası enfeksiyonlarının tedavisinde yeni topikal terapötikleri değerlendirmek ve farklı yara örtülerini değerlendirmek için araştırılabilir.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Cutaneous Leishmaniasis in the Dorsal Skin of Hamsters: a Useful Model for the Screening of Antileishmanial Drugs

Hamsterlar ve Dorsal Skin Kutanöz Leishmaniasis: Antileishmanial Uyuşturucu Tarama için Faydalı Model

Traditionally, hamsters are experimentally inoculated in the snout or the footpad. However in these sites an ulcer not always occurs, measurement of ...

An In vitro Model to Study Immune Responses of Human Peripheral Blood Mononuclear Cells to Human Respiratory Syncytial Virus Infection

An In vitro Model to Study Immune Responses of Human Peripheral Blood Mononuclear Cells to Human Respiratory Syncytial Virus Infection

Human respiratory syncytial  virus (HRSV) infections present a broad spectrum of disease severity, ranging  from mild infections to life-threatening ...

Use of Galleria mellonella as a Model Organism to Study Legionella pneumophila Infection

Use of Galleria mellonella as a Model Organism to Study Legionella pneumophila Infection

Kullanımı<em&gt; Galleria mellonella</em&gt; Bir Model Organizma olarak Eğitim için<em&gt; Legionella pneumophila</em&gt; Enfeksiyon

Legionella pneumophila, the causative agent of a severe pneumonia named Legionnaires&#39; disease, is an important human pathogen that infects and ...

Humanized Mouse Model to Study Bacterial Infections Targeting the Microvasculature

Insanlaşmış Fare Modeli mikrovaskülatürde Hedefleme Bakteriyel Enfeksiyonlar Eğitim için

Neisseria meningitidis causes a severe, frequently fatal sepsis when it enters the human blood stream. Infection leads to extensive damage of the blood ...

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Neuropathogenic olmayan İnvaziv Modeli<em&gt; Escherichia coli</em&gt; Yenidoğan Sıçan Enfeksiyon

Investigation of the interactions between animal host and bacterial pathogen is only meaningful if the infection model employed replicates the principal ...

In Vivo Investigation of Antimicrobial Blue Light Therapy for Multidrug-resistant Acinetobacter baumannii Burn Infections Using Bioluminescence Imaging

In Vivo Investigation of Antimicrobial Blue Light Therapy for Multidrug-resistant Acinetobacter baumannii Burn Infections Using Bioluminescence Imaging

Çok ilaca dirençli için Antimikrobiyal Mavi Işık Tedavisinin Vivo İncelenmesinin Acinetobacter baumannii Biyoparlaklık ımaging&#39;i kullanarak Enfeksiyonlar Yanık

Burn infections continue to be an important cause of morbidity and mortality. The increasing emergence of multidrug-resistant (MDR) bacteria has led to ...

Murine Full-thickness Skin Transplantation

Mürin Tam kat Cilt Nakli

Murine full-thickness skin transplantation is a well-established in vivo model to study alloimmune response and graft rejection. Despite its limited ...

A Galleria mellonella Oral Administration Model to Study Commensal-Induced Innate Immune Responses

A Galleria mellonella Oral Administration Model to Study Commensal-Induced Innate Immune Responses

Bir Galleria mellonella Oral yönetim modeli için Study Commensal-Induced doğuştan gelen bağışıklık yanıtı

The investigation of the immunogenic potential of commensal bacteria on the host immune system is one essential component when studying intestinal ...

Use of the Invertebrate Galleria mellonella as an Infection Model to Study the Mycobacterium tuberculosis Complex

Use of the Invertebrate Galleria mellonella as an Infection Model to Study the Mycobacterium tuberculosis Complex

Mycobacterium tüberküloz kompleksinin incelenmesi Için bir enfeksiyon modeli olarak ınvertebrate Galleria mellonella kullanımı

Tuberculosis is the leading global cause of infectious disease mortality and roughly a quarter of the world&#8217;s population is believed to be infected ...

Mouse Footpad Inoculation Model to Study Viral-Induced Neuroinflammatory Responses

Viral Kaynaklı Nöroinflamatuar Yanıtları İncelemek Için Fare Ayak Takımı Aşılama Modeli

This protocol describes a footpad inoculation model used to study the initiation and development of neuroinflammatory responses during alphaherpesvirus ...