Tidigare var den huvudsakliga metoden för att undersöka effekten av kemikalier på arteriell kontraktilitet genom ex vivo trådmyografi i organbad. Betydelsen av denna teknik är att effekterna av kemikalier och genmanipulation på ett kärls segment in vivo kan undersökas. Den största fördelen med denna teknik är att kronisk exponering och långtidsutvärdering av läkemedels effekt på arteriell kontraktilitet och blodflöde kan genomföras.
Detta är inte möjligt i isolerade kärl i orgelbad. För att börja exteriorisera fostret, se till att det finns ett tillräckligt djup av anestesi hos tackan. Utför ett 10 centimeter standardsnitt av laparotomi med ett skalpellblad nummer 20 över den linjära alba från naveln till den kraniala delen av juvret.
Gör sedan ett litet snitt genom mittlinjen av kroppsväggen under hudsnittet och öppna bukhålan med Metzenbaum-sax. Exteriorisera livmodern som innehåller fostret genom bukväggen, samtidigt som du placerar sterila kirurgiska handdukar under mellan moderns buk och livmodern. Palpera sedan livmodern för att bestämma fostrets position och svansens inledningar.
Gör ett 10 centimeter långt snitt genom livmoderväggen med en stor krökning över huvudets rygg och undvik synliga blodkärl och moderkakor. Fäst sedan livmodern och modershinnorna med fyra Babcock-klämmor och dra i Babcock-klämmorna i de fyra motsatta hörnen för att göra fostrets huvud synligt. Exteriorisera den kraniala halvan av fostret genom detta snitt och täck huvudet med en steril latexhandske fylld med varm steril koksaltlösning vid en temperatur på 37 grader Celsius för att förhindra att andningen initieras.
För att utföra instrumentering av halspulsåderns perivaskulära kateter, med fostrets hals exponerad, gör ett tre till 3,5 centimeter långt snett hudsnitt längs den främre kanten av sternocleidomastoideus- eller SCM-muskeln på ena sidan av halsen i den mellersta regionen. Separera sedan fascian med en myggpincett. Dela platysma och dissekera längs den mediala gränsen av SCM-muskeln från dess sena överlägset och till nivån av omohyoidmuskeln inferior.
Dra tillbaka skinnet med Babcock-klämmor. Utför en trubbig dissektion för att frigöra halspulsådern från den omgivande vävnaden och halspulsådern. Ta sedan en tre millimeters flödessond från den sterila förpackningen, skruva loss stödplattan och skjut upp den för att exponera L-fästet.
Använd en pincett och stäng flödessondens fäste genom att försiktigt skjuta stödplattan till ett stängt läge. Fäst sedan flödessondens fäste genom att dra åt stödskruven på flödessonden. Placera en förspolad perivaskulär kateter nära halspulsådern proximalt om flödessonden med en 3.0 icke-absorberbar silkessutur.
Fäst de proximala och distala längderna av det perivaskulära systemet och flödessonden till den närliggande interstitiella vävnaden. Använd en kontinuerlig söm och stäng snittstället och fostrets hud med en 3.0 icke-absorberbar sutur. Fäst katetrarna på huden genom att linda suturen runt katetern tre gånger.
När du har tagit bort handsken placerar du tillbaka fostrets huvud i livmodern. För att utföra kateterisering av fostrets extremiteter, exteriorisera fostrets bakben, håll benet och vrid det i sidled för att visualisera insidan av låret. Efter att ha rengjort området med steril gasbinda, gör ett två centimeter långt snitt och exponera lårbensartären.
Placera och fäst flödessonden som tidigare visats för halspulsådern och stäng snittet. Gör sedan ett två centimeter långt snitt längs den mediala aspekten av skenbenet, cirka 0,5 centimeter distalt om knäet. Exponera den tjockväggiga bakre skenbensartären och den tunnväggiga venen saphena.
För att sätta in polyvinylkatetrar, med hjälp av en standardskärningsteknik, frigör kärlet av intresse med trubbig dissektion. Ligera sedan den distala delen av kärlet med en 3,0 silkessutur och utan nål, med en fyrkantig knut med tre kast. Placera ett andra silkesfritt band vid den proximala aspekten av kärlet, men lämna ligaturen oknuten.
Använd en Castroviejo-sax och gör ett litet tvärgående snitt i kärlet två millimeter proximalt om den distala ligaturen. Begränsa blodflödet i kärlet genom att försiktigt dra upp den proximala obundna suturen. Fyll sedan katetern med steril hepariniserad koksaltlösning.
För in den avfasade änden av katetern och för in spetsen 20 centimeter i fostrets kärl. Håll katetern på plats med en pincett medan en assistent knyter den proximala silkesfria bindsuturen för att fästa kärlet vid katetern. Vrid kärlet helt runt den införda katetern med hjälp av fyrkantiga knutar två millimeter från införingsstället med tre kast.
Knyt sedan den distala ligaturen proximalt till det proximala bandet och fäst kärlet vid katetern. Stäng hudsnittet med en 3.0 icke-absorberbar sutur, med ett kontinuerligt mönster. Se till att suturerna är knutna runt katetrarna för att undvika att begränsa blodflödet om de dras.
Placera en förspolad kateter i livmodern och fäst den på fostret med en sutur med en 3.0 icke-absorberbar sutur. Placera tillbaka fostret i livmodern. Suturera fosterhinnorna med 3.0 icke-resorberbara suturer med ett kontinuerligt låsningsmönster och stäng sedan livmoderns muskelskikt med en 3.0 icke-absorberbar sutur.
Sätt in en 18 tums kirurgisk stav i rostfritt stål subkutant längs bukväggen upp till den parakostala regionen. Fäst katetrarna på den distala änden av operationsstaven, låt en assistent mata katetrarna och flödessondkabeln genom det parakostala utgångsstället genom att trycka staven helt genom den parakostala öppningen. Fäst sedan alla katetrar och flödessondkablar vid det parakostala snittstället.
När du har placerat den vattentäta tejpen syr du fast katetrarna på tackans hud. Sy fast en nätpåse av plast på tackans utsida över katetrarna och sond för att förvara katetrarna. Använd ett 1.0 monofilament syntetiskt absorberbart suturmaterial, fäst linea alba med ett kontinuerligt mönster och fäst hudlagret med kirurgiska häftklamrar.
För att mäta blodflödet, fäst flödessonderna som sätts in i fostret med den perivaskulära flödesmodulen till PowerLab och en ansluten dator. Fäst artär- och fostervattenkatetrarna på bryggförstärkaren som är ansluten till en analog till digital omvandlare. Administrera en 1 milliliter bolus av 10 mikromolar fenylefrin till fostret intravenöst och mät karotis- och lårbensflödet i 15 minuter.
Vänta sedan i 30 minuter eller tills blodflödet återgår till baslinjen. Tillsätt sedan en milliliter 10 mikromolar fenylefrin i den perivaskulära katetern och mät blodflödet i 15 minuter. Skölj ur fenylefrinet genom att administrera fem milliliter varm koksaltlösning genom den perivaskulära katetern.
Vänta sedan i 30 minuter eller tills blodflödet återgår till baslinjen. Denna studie undersökte de lokala effekterna av blodflödesmanipulation hos foster och får som var för tidigt födda och för tidigt födda. Vid administrering av en milliliter 10 mikromolar fenylefrin, en alfa-1 AR-agonist, i det perivaskulära utrymmet i halspulsådern, observerades en signifikant minskning av blodflödet i halspulsådern hos både foster och det för tidigt födda fostret utan någon effekt på det systemiska blodtrycket.
Omvänt orsakade intravenös administrering av fenylefrin en signifikant ökning av det systemiska blodflödet hos både foster och för tidigt födda foster utan att påverka blodflödet i halspulsådern. Resultaten visade att prematura foster inte svarar på fenylefrinmedierad blodflödesreglering i halspulsådern, men att svaret är moget hos foster som är nära gången. Noterbart är att intravenös administrering av fenylefrin ökade blodflödet i halspulsådern endast hos prematura foster, utan signifikant effekt hos foster i närtid.
Intravenös administrering av fenylefrin höjde dock det systemiska blodtrycket hos både prematura och kortgångna foster. Resultaten visar också att den perivaskulära installationen av fenylefrin inte påverkade det systemiska blodtrycket. Största försiktighet måste iakttas när man utför en trubbig dissektion för att identifiera kärl och hacka dem för att föra in den avfasade änden av katetern.
Hacket ska vara litet och undvik att skära hela kärlet. Denna metod kan mäta kärlens kontraktilitet och blodflöde i alla kärl. Det kan också användas för att leverera kemikalier och vektorer nära närheten av det organ eller den vävnad som ska riktas.
Denna teknik kan användas för att bestämma förändringarna i hjärnans blodflödesautoreglering i livmodern hos ett växande foster och rikta in sig på vilken gen som helst för att uppreglera eller tysta transkriptionen.
