JoVE Logo

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Protocol
  • Discussion
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

وكان غير المستوعبة للقاذورات المونولاير PEG سيلاني من أقطاب ITO عنونة فردية على الزجاج بواسطة تطبيق التخفيض المحتملة. الكهروكيميائية تجريد الربط بين طبقة من سيلاني microelectrodes ITO يسمح للالتصاق الخلايا لتأخذ مكان بطريقة محددة مكانيا ، مع الأنماط الخلوية المقابلة بشكل وثيق لأنماط الكهربائي.

Abstract

القدرة على ممارسة تحكم دقيق المكانية والزمانية على سطح الخلية التفاعلات شرطا مسبقا هاما لتجميع متعددة الخلايا يبني بوصفه يحاكي في المختبر من أنسجة الأم. في هذه الدراسة ، تم استخدام تقنيات الحفر والطباعة الحجرية التصويرية الرطب الى افتعال عنونة فردية الإنديوم أكسيد القصدير (ITO) الأقطاب الكهربائية على ركائز الزجاج. تم تعديل ركائز زجاجية تحتوي microelectrodes ITO مع بولي (جلايكول الإثيلين) (PEG) سيلاني لجعلها خلية البروتين ومقاوم. تم التحقق من وجود جزيئات PEG عازلة على سطح القطب بواسطة voltammetry دوري فيري سيانيد البوتاسيوم يعمل كناقل مراسل الأكسدة. الأهم ، وتطبيق التخفيض المحتملة الناجمة الامتزاز طبقة الربط ، مما أدى إلى تجديد سطح القطب موصل ومظهر من قمم نموذجية الأكسدة فيري سيانيد. تطبيق التخفيض المحتمل أيضا أن يقابل التحول من خصائص القطب ITO من خلية غير لاصقة لاصقة الخلية. الكهروكيميائية تجريد الربط بين طبقة من سيلاني microelectrodes ITO يسمح للالتصاق الخلايا لتأخذ مكان بطريقة محددة مكانيا ، مع الأنماط الخلوية المقابلة بشكل وثيق لأنماط الكهربائي. وقد تجلى Micropatterning من أنواع الخلايا على عدة ركائز هذه. في المستقبل ، فإن السيطرة على خصائص biointerfacial التي يوفرها هذا الأسلوب يسمح للمهندس microenvironments الخلوية من خلال تجميع أنواع الخلايا ثلاثة أو أكثر في التكوين الهندسي الدقيق على ركيزة شفافة بصريا.

Protocol

الجزء الأول : الزخرفه من الأقطاب

  1. وقد تم طلاء وتنظيف شرائح المجففة ITO الزجاج المطلي مع مقاومة للضوء إيجابي
  2. وكان يخبز على السطح عند 100 درجة مئوية لإزالة المذيبات من مقاومة
  3. بعد الخبز ، وكان يتعرض للأشعة فوق البنفسجية السطحية من خلال استخدام قناع الضوئية الرئيسية كانون أليجنر
  4. أزيلت في المناطق التي تعرضت الى حل المطور
  5. وكان من الصعب خبز السطح لإزالة أي حل المطور المتبقية
  6. وكان محفورا في المناطق ITO لا تحميها الزخرفة مقاوم الضوء بعيدا في حامض ضوئي
  7. تمت إزالة ما تبقى من مقاومة للضوء sonicating في الأسيتون لتشكيل أقطاب ITO

الجزء الثاني : تعديل السطح

  1. يتم تنظيفها أقطاب تعديل في غرفة البلازما والربط مع تعديل 2 ٪ سيلاني في التولوين. ويتم من الحضانة لمدة 2 ساعة ، يليه 2 ساعة من الخبز.

ملاحظة : تتم هذه العملية في حقيبة مليئة النيتروجين القفازات لتجنب وجود الرطوبة ، والربط سيلاني هو رد الفعل تجاهها.

الجزء الثالث : الكيمياء الكهربائية

  1. وترد أسلاك الصلب إلى منصات الكهربائي.
  2. يتم وضع الأقطاب سيلاني PEG تعديل في خلية الكهروكيميائية لتنفيذ تجارب كهربائية.
  3. وجردت PEG سيلاني من مناطق مترابطة باستخدام نظام الكهربائي في ثلاثة PBS.

الجزء الرابع : الخلية الزخرفة

  1. يتم تحضين الليفية مع ركائز جردت مؤخرا. على الحضانة ، وهذه الخلايا نعلق على المناطق سيلاني PEG تجريد ، ولكن الخلايا لا ربط أي مكان آخر على سطح الأرض.
  2. يتم تحضين خلايا منقوشة في وسائل الإعلام الجديدة وتصور باستخدام المجهر.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

في هذا الفيديو ، لقد أثبتنا في الزخرفة على الخلية شفافة بصريا أقطاب الإنديوم أكسيد القصدير. بعد افتعال الأقطاب ITO باستخدام ضوئيه ، تم تعديلها مع أحادي الطبقة من الخلايا مقاوم PEG سيلاني. وكان هذا المستوعبة المونولاير الكهربائية باستخدام تبديل سطح مقاوم من خلية إلى خلية لاصقة. وقد...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Indium Tin OxideOtherDelta TechnologiesCB 40IN
PEG silaneReagentGelest Inc.SIM6492.66
Hydrochloric AcidReagentSigma-Aldrich320331
Nitric AcidReagentSigma-Aldrich258121
EthanolReagentSigma-Aldrich459836
AcetoneReagentSigma-Aldrich650501
TolueneReagentSigma-Aldrich34866
MediaReagentInvitrogen
CollagenReagentSigma-AldrichC3867
3T3 murine FibroblastsCell LineATCC

References

  1. Lee, J. Y., Jones, C., Zern, M. A., Revzin, A. Analysis of Local Tissue-Specific Gene Expression in Cellular Micropatterns. Analytical Chemistry. 78, 8305-8312 (2006).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

7

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved