Optik Şeffaf indiyum kalay oksit Elektrotlar Desenlendirme Hücreler

Özet

Sigara kirlenme PEG silan tek tabaka, indirgeyici bir potansiyel uygulama cam üzerine ayrı ayrı adreslenebilir İTO elektrotlar desorbed oldu. Elektrokimyasal elektrot desen yakından karşılık gelen cep telefonu modelleri ile, hücre adezyon, mekansal olarak tanımlanan bir moda yer alması için izin İTO Mikroelektronlar PEG-silan tabaka sıyırma.

Özet

Hücre-yüzey etkileşimleri üzerinde tam mekansal ve zamansal kontrol egzersiz yeteneği çok hücreli yapıları, doğal dokuları in vitro taklit olarak görev montaj için önemli bir ön koşuldur. Bu çalışmada, fotolitografi ve cam yüzeylerde ıslak aşındırma teknikleri ayrı ayrı adreslenebilir indiyum kalay oksit (ITO) elektrotlar imal etmek için kullanılmıştır. İTO Mikroelektronlar içeren cam tabanlar poli (etilen glikol) (PEG), protein ve hücre rezistif silan ile modifiye edilmiştir. Redoks bir raportör molekül olarak potasyum ferrisiyanürle istihdam siklik voltametri PEG moleküllerinin elektrot yüzey yalıtım varlığı doğrulandı. Önemlisi, indirgeyici potansiyel uygulama tipik ferrisiyanür redoks zirvelerinden iletken elektrot yüzey görünümü ve rejenerasyon sonucunda desorpsiyon PEG tabakasının neden. Indirgeyici potansiyel uygulama da İTO elektrot özellikleri geçiş denk hücre hücre yapışkan olmayan yapıştırıcı. Elektrokimyasal elektrot desen yakından karşılık gelen cep telefonu modelleri ile, hücre adezyon, mekansal olarak tanımlanan bir moda yer alması için izin İTO Mikroelektronlar PEG-silan tabaka sıyırma. Çeşitli hücre tipleri Micropatterning bu yüzeylerde gösterildi. Gelecekte, bu yöntemle sağladığı biointerfacial özellikleri kontrol optik şeffaf bir substrat üzerinde kesin bir geometrik konfigürasyon, üç ya da daha fazla hücre tiplerinin montaj yoluyla hücresel mikroçevrelerde mühendisi sağlayacaktır.

Protokol

Bölüm I: elektrotlar Desenlendirme

1. Temizlik ve kurutulmuş ITO kaplı cam slaytlar olumlu fotorezist ile kaplandı
2. Yüzey, 100 ° C karşı solvent kaldırmak için fırında
3. Pişirme sonra, yüzey Canon Maske Aligner kullanarak photomask üzerinden ultraviyole ışığa maruz
4. Maruz kalan bölgelerde bir geliştirici çözümü çıkarıldı
5. Yüzey sabit kalan herhangi bir geliştirici çözüm kaldırmak için pişmiş
6. Fotorezist desenlendirme tarafından korunmaktadır İTO bölgelerde uzak bir asit asitlenmesi dağlanmıştır
7. Kalan fotorezist İTO elektrotlar formu aseton sonicating tarafından kaldırıldı

Bölüm II: Yüzey modifikasyonu

1. Modifiye elektrotlar, bir plazma odasında temizlenmeli ve toluende silan% 2 PEG ile değiştirilir. Kuluçka pişirme 2 saat, 2 saat süreyle yapılmaktadır.

Not: silan PEG doğru reaktif adezivdir önlemek için nitrojen ile dolu bir eldiven çanta Bu işlem gerçekleştirilir gibi.

Bölüm III: Elektrokimya

1. Çelik tel elektrot pedleri bağlıdırlar.
2. PEG silan modifiye elektrotlar elektrokimyasal deneyler gerçekleştirmek için bir elektrokimyasal hücreye yerleştirilir.
3. Birbirine bağlı bölgelerden silan PEG PBS içinde üç elektrot sistemi kullanılarak ayrılır.

Bölüm IV: Hücre desenlendirme

1. Fibroblastlar son zamanlarda elimden substratları ile inkübe edilir. Inkübasyon üzerine, bu hücrelerin PEG silan elimden bölgelerde eklemek; Bununla birlikte, hücrelerin yüzeyinde başka bir yerde bağlamak olmaz.
2. Desenli hücreleri taze medya inkübe ve bir mikroskop kullanılarak görüntülendi.

Tartışmalar

Bu video, indiyum kalay oksit elektrot optik şeffaf hücreli desenlendirme göstermiştir. İTO elektrotları kullanarak fotolitografi imalatı sonra, silan PEG-dirençli bir hücre tek tabaka ile modifiye edilmiştir. Bu tek tabaka, hücre-yapıştırıcı hücre-dirençli yüzey geçiş elektrokimya desorbed oldu. 3T3 fare fibroblastlar Desenlendirme kendi video görülmüştür. Ayrıca desenlendirme hepatositler, birincil hücreler ve aynı tekniği kullanarak stellat hücreler var. Buna ek olarak, birden fazla bireysel elektrotlar yap...

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
Indium Tin Oxide	Other	Delta Technologies	CB 40IN
PEG silane	Reagent	Gelest Inc.	SIM6492.66
Hydrochloric Acid	Reagent	Sigma-Aldrich	320331
Nitric Acid	Reagent	Sigma-Aldrich	258121
Ethanol	Reagent	Sigma-Aldrich	459836
Acetone	Reagent	Sigma-Aldrich	650501
Toluene	Reagent	Sigma-Aldrich	34866
Media	Reagent	Invitrogen
Collagen	Reagent	Sigma-Aldrich	C3867
3T3 murine Fibroblasts	Cell Line	ATCC